海南甜瓜蔓枯病病原菌的有性階段鑒定

張學(xué)軍 王登明 伊鴻平 *

（1新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈密瓜研究中心，新疆烏魯木齊 830052；2海南省甜瓜西瓜遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南三亞 572014）

甜瓜蔓枯病又叫黑斑病、黑腐病，是甜瓜上重要的土傳病害，可造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失（Frantz & Jahn，2004；Joseph et al.，2009）。甜瓜蔓枯病還可侵染西瓜、籽瓜和黃瓜等瓜類作物，造成不同程度的減產(chǎn)（陳熙 等，1989；戴富明 等，2003）。1891年Fautrey和Roumegtuere首先在黃瓜上發(fā)現(xiàn)蔓枯病，其后Potebnia和Sterens（陳秀蓉 等，1993）也進(jìn)行了相關(guān)研究，之后美國、瑞典、前蘇聯(lián)、日本等相繼發(fā)現(xiàn)了瓜類蔓枯病，不同程度地為害西瓜、甜瓜、黃瓜等葫蘆科作物。在我國，遼寧、黑龍江、陜西、廣西、吉林、新疆、上海、江蘇、甘肅等省市均有甜瓜蔓枯病的報(bào)道（陳秀蓉 等，1993；李偉 等，2008；胡鳳云，2012），但系統(tǒng)研究比較少，在對(duì)瓜類蔓枯病多年的研究工作中，從各地采集到的這一類病害的標(biāo)本多見其無性階段，包括小型和大型孢子的分生孢子器的報(bào)道。1949年裘維蕃先生在美國對(duì)瓜類蔓枯病有性階段甜瓜球腔菌的形態(tài)和變異作了深入的研究，國內(nèi)有關(guān)有性階段的正式報(bào)道是新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)賈菊生等（2003）報(bào)道了新疆溫室黃瓜蔓枯病的有性階段，鑒定為甜瓜球腔菌Mycosphaerella melonis（Pass. ）Chiu et J . C.Walk.，并詳細(xì)描述了該菌的形態(tài)特征。

2008年12月筆者在新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技示范園（三亞）大棚采集甜瓜葉部病害標(biāo)本，初步診斷為甜瓜蔓枯病，但與此前甜瓜蔓枯病病癥略有不同，鏡檢中，發(fā)現(xiàn)著生在甜瓜病體上的小黑點(diǎn)是蔓枯病病原菌的有性階段假囊殼。甜瓜蔓枯病有性階段在海南屬首次記錄。

1 甜瓜蔓枯病癥狀

甜瓜蔓枯病發(fā)病部位位于葉柄與葉片連接處，呈黑褐色，病部軟化，病斑上大量散生小黑點(diǎn)，沒有分泌琥珀色膠狀物。從癥狀上看，屬急性病型，在甜瓜莖上有系統(tǒng)發(fā)展的侵染現(xiàn)象，只是由下向上擴(kuò)展時(shí)往往并非是呈整體式的，有時(shí)可見到由一方局部的側(cè)面向莖的上面發(fā)展，其長(zhǎng)度可達(dá)5 cm左右。鏡檢發(fā)現(xiàn)，甜瓜莖部的小黑點(diǎn)為甜瓜蔓枯病病原菌的有性階段假囊殼，在病組織上同時(shí)發(fā)現(xiàn)無性階段分生孢子器，屬于有性階段與無性階段共存。

2 病原菌的形態(tài)特征

病原菌的假囊殼（圖1-A）為球形，具不明顯短頸，假囊殼絕大部分突起于表皮，散生、單生，黑色，直徑98.3～129.2 μm，孔口（圖1-A）圓形，直徑可達(dá)28～56 μm，未發(fā)現(xiàn)有兩個(gè)假囊殼連生的現(xiàn)象。假囊殼內(nèi)無側(cè)絲，子囊著生在假囊殼底部，束狀生，圓筒形或棍棒形，以直型為主，多數(shù)兩側(cè)稍屈曲，子囊基部處明顯地向下漸變細(xì)，末端銳或鈍圓，無色透明，子囊大?。?6.0～96.4）μm×（6.8～10.7）μm（圖1-B）。子囊內(nèi)有8個(gè)子囊孢子，呈單行或雙行排列，1分隔，隔膜處明顯縊縮，橢球形，近基部向下變細(xì)，末端呈楔形，無色，子囊孢子大?。?.80～14.28）μm×（3.2～6.4）μm，未見有3細(xì)胞的子囊孢子（圖1-C）。該菌的形態(tài)、大小與裘維蕃等描述的甜瓜球腔菌一致，甜瓜球腔菌與小雙胞腔菌是同種異名，故按照現(xiàn)在國際慣例將本菌鑒定為小雙胞腔菌Didymella bryoniae（Auersw.） Rehm.。

3 討論

賈菊生等（2003）初步報(bào)道過黃瓜上的蔓枯病具有有性生殖的產(chǎn)孢功能，但在厚皮甜瓜上該菌是否也同樣具備有性階段的產(chǎn)孢功能，從數(shù)年來系統(tǒng)的專題研究結(jié)果看，從南疆的喀什、庫爾勒，東疆的哈密與吐魯番、鄯善、托克遜，北疆的伊寧、博樂、溫泉、精河、奎屯與瑪納斯等地采集到的瓜類病株上，都沒有報(bào)道過假囊殼菌態(tài)的存在。有關(guān)甜瓜蔓枯病有性階段假囊殼僅陳秀蓉和魏勇良（1997）報(bào)道過，甘肅蘭州地區(qū)多在7月上中旬采收白蘭瓜，此時(shí)正值高溫季節(jié)，且植株已接近衰枯，病株上可觀察到分生孢子器和子囊座，而河西地區(qū)的安西、民勤等地多在8月下旬采收，植株體內(nèi)營養(yǎng)狀況雖可滿足，但氣溫偏低，所以僅形成分生孢子器而不形成子囊座。陳秀蓉和魏勇良（1997）認(rèn)為在氣溫偏低，接近枯死的病株上僅產(chǎn)生分生孢子器，在氣溫偏高，接近枯死的病株上除產(chǎn)生分生孢子器外，還形成子囊座，即瓜類蔓枯病子實(shí)體的形成與植株的營養(yǎng)狀態(tài)有關(guān)。

海南是天然溫室，對(duì)于病原菌來說沒有越冬經(jīng)歷，2009年12月底至2010年1月初，筆者在三亞發(fā)現(xiàn)甜瓜蔓枯病的有性階段，12月海南溫度范圍在18～29 ℃之間，相對(duì)濕度在55%～95%之間，且發(fā)病的植株沒有衰枯，生長(zhǎng)正常，可見甜瓜蔓枯病有性階段的形成與植株?duì)I養(yǎng)狀態(tài)無關(guān)，與陳秀蓉和魏勇良（1997）的報(bào)道有所不同。甜瓜蔓枯病的有性階段在海南的發(fā)現(xiàn)充實(shí)了該病在自然侵染循環(huán)中的生活史，對(duì)病害發(fā)生的侵染循環(huán)研究，具有理論上的和生產(chǎn)實(shí)踐上的重要意義。但是，是什么條件促使其在海南產(chǎn)生有性階段值得進(jìn)一步深入研究。

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