Eph-ephrin雙向信號(hào)功能的研究進(jìn)展*

常志泳， 趙建寧， 包倪榮

產(chǎn)生促紅細(xì)胞生成素的肝細(xì)胞(erythropoietinproducing hepatocyte，Eph)受體是眾多的細(xì)胞表面型酪氨酸蛋白激體酶受體中的一種，是酪氨酸蛋白激酶受體家族中的最大成員。其配體主要表達(dá)于細(xì)胞表面，被命名為ephrin。Eph受體及其配體ephrin統(tǒng)稱為Eph家族蛋白。Eph受體屬跨膜蛋白，存在胞外配體結(jié)合區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)。Eph胞內(nèi)近細(xì)胞膜區(qū)域相對(duì)保守，包含1個(gè)具有酪氨酸殘基的高度保守的近膜區(qū)結(jié)構(gòu)域，緊接1個(gè)具酪氨酸激酶活性的結(jié)構(gòu)域、SAM(sterile alpha motif)結(jié)構(gòu)域和C端的PDZ結(jié)合序列。Eph的胞外結(jié)構(gòu)包含1個(gè)球形的配體結(jié)合域(ligand binding domain，LBD)、1個(gè)臨近的半胱氨酸富集區(qū)(cysteine-rich domain，CRD)以及2個(gè)Ⅲ型纖維連接蛋白重復(fù)區(qū)。其中CRD在Eph-ephrin信號(hào)復(fù)合體的形成過(guò)程中起到關(guān)鍵作用［1］。所有ephrin均包含1個(gè)保守的胞外受體結(jié)合區(qū)。除此之外，ephrinA通過(guò)一個(gè)糖基磷脂酰肌醇 (glycosylphosphatidylinositol，GPI)錨定于細(xì)胞膜上;ephrinB的結(jié)構(gòu)包括跨膜區(qū)和胞質(zhì)區(qū)，其中胞質(zhì)區(qū)包含一小段高度保守的區(qū)域以及羧基端PDZ結(jié)構(gòu)域的結(jié)合基序，這一PDZ結(jié)構(gòu)域結(jié)合基序?qū)τ诩?xì)胞定位及逆向信號(hào)起到重要作用。

Eph家族蛋白的功能依賴于Eph受體與ephrin之間的相互作用。在人體，有9種EphA受體(E-phA1～A8以及 EphA10)可與 5種 ephrinA配體(ephrinA1～A5)相結(jié)合，同時(shí)有5種 EphB受體(EphB1～B4以及EphB6)與3種ephrinB配體(ephrinB1～B3)結(jié)合。而EphA4既可以與ephrinA結(jié)合又可以與多種ephrinB結(jié)合，ephrinA5除了結(jié)合E-phA外還可結(jié)合EphB2。

Eph通過(guò)與表達(dá)其配體ephrin的鄰近細(xì)胞相互接觸發(fā)揮雙向信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能，Eph-ephrin雙向信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的一個(gè)特點(diǎn)在于產(chǎn)生的雙向信號(hào)既作用于表達(dá)Eph的細(xì)胞(正向信號(hào))又作用于表達(dá)ephrin的細(xì)胞(逆向信號(hào))，且正反向信號(hào)均可通過(guò)酪氨酸磷酸化依賴或非依賴轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)。

對(duì)于Eph受體和ephrin來(lái)說(shuō)，雖然雙向信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是其最具特征性的作用方式，當(dāng)它們同樣可以獨(dú)立地與細(xì)胞表面的其它信號(hào)系統(tǒng)相互作用。比如最近有研究顯示多種表皮生長(zhǎng)因子受體家族可以通過(guò)EphA2促進(jìn)細(xì)胞遷移及增殖，而這一過(guò)程可能沒(méi)有ephrin的參與［2］。而越來(lái)越多研究表明Eph/ephrin與多種細(xì)胞表面受體、黏附分子、細(xì)胞表面通道以及細(xì)胞表面蛋白之間存在錯(cuò)綜復(fù)雜的聯(lián)系，這也是Eph/ephrin信號(hào)通路可以誘導(dǎo)錯(cuò)綜復(fù)雜的生理反應(yīng)的部分原因。

Eph受體和ephrin激活復(fù)雜的雙向信號(hào)網(wǎng)絡(luò)過(guò)程中，包含一些起相反作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。這或許可以解釋為什么細(xì)胞成分的差異可以改變Ephephrin相互作用的結(jié)果。因此，Eph-ephrin的量的變化不僅影響信號(hào)強(qiáng)度，而且可以調(diào)節(jié)下游不同的信號(hào)通路從而引發(fā)不同的結(jié)果。比如Eph可以觸發(fā)細(xì)胞黏附及細(xì)胞分離兩種相反的結(jié)果，這可能與細(xì)胞類型的不同及參與信號(hào)反應(yīng)的ephrin濃度不同有關(guān)。這一信號(hào)通路的另一獨(dú)特之處在于不但可以依賴于不同細(xì)胞直接相互接觸觸發(fā)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，而且可以由同一細(xì)胞表面的Eph受體與ephrin配體相互作用而觸發(fā)信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)。這意味著存在一種信號(hào)沉默機(jī)制，雖然目前其具體機(jī)制尚不清楚。

可見(jiàn)Eph-ephrin雙向信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)是復(fù)雜的，同時(shí)其功能也是多方面的。Eph受體及ephrin在胚胎發(fā)育以及成體器官的病理生理過(guò)程中發(fā)揮重要作用，不僅調(diào)節(jié)細(xì)胞形態(tài)、黏附與分離，而且參與心血管發(fā)生發(fā)展、軸突導(dǎo)向、骨代謝、腫瘤發(fā)生發(fā)展、免疫調(diào)節(jié)以及內(nèi)分泌等過(guò)程。

1 Eph-ephrin在細(xì)胞黏附與分離中的作用

Eph-ephrin發(fā)揮多種復(fù)雜功能的重要基礎(chǔ)在于其可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞間的黏附、去黏附及細(xì)胞的回縮來(lái)控制細(xì)胞定向運(yùn)動(dòng)及排列。細(xì)胞與細(xì)胞以及細(xì)胞與基質(zhì)之間的黏附在組織形態(tài)維持及發(fā)展過(guò)程中起到關(guān)鍵作用，在胚胎發(fā)育過(guò)程中，不同組織分割與分化是發(fā)育的核心，Eph-ephrin的表達(dá)有著嚴(yán)格的空間及時(shí)間模式，它們參與中胚層的形成、原腸胚形成、器官發(fā)生和組織的塑形。

細(xì)胞的分選與定位涉及到細(xì)胞之間的黏附與分離，Eph/ephrin介導(dǎo)的細(xì)胞定位是細(xì)胞接觸依賴式的。細(xì)胞的定位不但由Eph-ephrin的濃度梯度以及Eph與ephrin總體相互作用決定，同時(shí)由Eph-ephrin信號(hào)系統(tǒng)與其它信號(hào)系統(tǒng)的相互作用所決定。其中一系列信號(hào)通路被證實(shí)在細(xì)胞分離和邊界維持的過(guò)程中起到至關(guān)重要的作用。Poliakov等［3］證實(shí) Eph信號(hào)調(diào)節(jié)細(xì)胞排斥的作用可以被人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體 1(fibroblast growth factor receptor 1，F(xiàn)GER1)的活化所拮抗。在EphB2陽(yáng)性細(xì)胞FGFR1的激活可以抑制細(xì)胞分離、排斥及崩解。在缺少活化FGFR1的情況下，EphB2激活絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)通路，而該信號(hào)通路通過(guò)正反饋環(huán)再促進(jìn)EphB2的激活。但是FGFR1的激活可以抑制該正反饋，從而抑制細(xì)胞的排斥。

EphB2/ephrinB1調(diào)節(jié)細(xì)胞分選過(guò)程，發(fā)現(xiàn)多種蛋白，其中多數(shù)參與骨架、細(xì)胞吞噬、細(xì)胞黏附與分離，以及細(xì)胞極性調(diào)節(jié)。除了調(diào)節(jié)細(xì)胞定位與分選，細(xì)胞在間質(zhì)與上皮以及內(nèi)皮與間質(zhì)之間的遷移過(guò)程中Eph-ephrin信號(hào)通路同樣發(fā)揮重要作用。而這種遷移機(jī)制是胚胎體節(jié)以及心血管發(fā)育所涉及到的細(xì)胞識(shí)別及邊界定位過(guò)程中細(xì)胞間相互交流的關(guān)鍵機(jī)制［4］。

雖然Eph受體與ephrin配體相結(jié)合最初調(diào)節(jié)的是細(xì)胞黏附，但是 Eph-ephrin相互作用可以引起Eph-ephrin復(fù)合體的溶解及內(nèi)吞作用，從而促使Eph細(xì)胞與ephrin細(xì)胞的分離。Eph與ephrin這種互補(bǔ)性的表達(dá)可能通過(guò)這種雙向排斥作用限制邊界處不同細(xì)胞群的混雜。Eph-ephrin促進(jìn)細(xì)胞分離的另一種潛在機(jī)制是:通過(guò)鈣黏蛋白E調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附。EphB的激活可以調(diào)節(jié)鈣黏蛋白E的亞細(xì)胞定位。Eph-ephrin的相互作用可以減少鈣黏蛋白介導(dǎo)的黏附。已有研究顯示EphB可與人解離素和金屬蛋白酶蛋白10(a disintegrin and metalloproteinase protein 10，ADAM10)相互結(jié)合作用，EphB與ephrin配體結(jié)合并激活后，Ephrin蛋白可被ADAM10裂解。而鈣黏蛋白是ADAM10的裂解底物。因此Eph與ephrin的結(jié)合可以觸發(fā)其接觸部位的鈣黏蛋白E的裂解和脫落，形成不同的黏附力，造成細(xì)胞分離，促進(jìn)體外細(xì)胞的分離［5］。Eph-ephrin減少細(xì)胞黏附的另一個(gè)機(jī)制可能是通過(guò)抑制連接蛋白的功能實(shí)現(xiàn)。

因此，可以假設(shè)，Eph-ephrin信號(hào)在特定區(qū)域通過(guò)增加細(xì)胞黏附，并在邊界處減少細(xì)胞黏附，從而限制細(xì)胞的混雜。這在爪蟾原腸胚外胚層與中胚層邊界形成過(guò)程得到了充分體現(xiàn)［6］。

可見(jiàn)，Eph-ephrin的相互作用可以通過(guò)多個(gè)方面調(diào)節(jié)細(xì)胞的黏附與分離，充分研究其機(jī)制，將成為研究其它生理病理功能的重要基礎(chǔ)。

2 Eph-ephrin在血管發(fā)生中的作用

血管發(fā)生在胚胎早期即已開(kāi)始，一些血管系統(tǒng)，比如說(shuō)背主動(dòng)脈以及卵黃囊的原始血管叢，均通過(guò)血管發(fā)生而形成。隨后，卵黃囊脈管系統(tǒng)重建形成有層次的血管床，包括動(dòng)脈、靜脈以及毛細(xì)血管，這種血管的重建以及毛細(xì)血管的形成均通過(guò)原有血管系統(tǒng)以出芽形式完成，而這種出芽方式在后來(lái)的胚胎發(fā)育及成體新生血管的再生以及病理性新生血管形成中占主導(dǎo)地位。大量研究已證實(shí)Eph-ephrin在胚胎血管發(fā)生及成體新血管形成過(guò)程起到關(guān)鍵作用。其中 EphB及 ephrinB，特別是 EphB4與 ephrinB2之間的相互作用在胚胎心血管系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中起到核心作用。EphrinB2主要表達(dá)于胚胎動(dòng)脈，而EphB4主要表達(dá)于靜脈。兩種血管邊界的雙向信號(hào)阻止動(dòng)靜脈血管內(nèi)皮的混雜。EphrinB2或其胞外結(jié)構(gòu)，以及EphB4的缺失，在胚胎初始毛細(xì)血管叢的重建方面表現(xiàn)為類似的缺陷，胚胎大血管的形成受到抑制并造成胚胎的死亡。

曾經(jīng)以為背主動(dòng)、靜脈血管是由成血管細(xì)胞發(fā)展而來(lái)，目前來(lái)看，這種觀點(diǎn)正受到極大的挑戰(zhàn)。斑馬魚(yú)胚胎實(shí)驗(yàn)表明，成血管細(xì)胞在初始階段形成單一的軸性血管，稱為共用前體血管，最后分化形成背主動(dòng)脈和主靜脈。而這一過(guò)程同樣依賴于EphB4與ephrinB2之間的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)［7］。EphB4的正向信號(hào)在上述主動(dòng)、靜脈的形成中起直接作用，而ephrinB2的逆向信號(hào)在隨后的心血管發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮作用，比如心臟瓣膜的形成，血管內(nèi)皮細(xì)胞的出芽及血管分支形成［8］。

與此對(duì)應(yīng)的是，A型Eph及ephrin在心血管系統(tǒng)發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用了解相對(duì)較少，其中有報(bào)道EphA3在胚胎大血管及心臟瓣膜中表達(dá)，他們之間相互的作用，在細(xì)胞的定向遷移以及心內(nèi)膜墊的形成過(guò)程中，起到關(guān)鍵作用［9］。

同樣作為調(diào)節(jié)血管形成的信號(hào)通路，Eph/ephrin與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR)之間的相互作用自然引起了關(guān)注，在血管發(fā)生過(guò)程中，ephrinB2調(diào)節(jié)VEGFR的內(nèi)陷并影響VEGFR的作用，從而影響血管出芽。在VEGFR誘導(dǎo)的血管形成中，ephrinB2表達(dá)的變化可以引起嚴(yán)重的血管缺陷。更值得關(guān)注的是，ephrinB2似乎可以直接激活VEGFR2，即使在血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 A(vascular endothelial growth factor A，VEGF-A)缺失的情況下同樣如此［10］。

3 Eph-ephrin信號(hào)在神經(jīng)系統(tǒng)中的作用

Eph-ephrin對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)多個(gè)方面的發(fā)展是必不可少的。其在引導(dǎo)軸突至正確的目標(biāo)并建立突觸過(guò)程中起到重要作用［11］。在過(guò)去幾年間，在研究Eph介導(dǎo)的軸突導(dǎo)向過(guò)程中，一系列Ras/Rho調(diào)節(jié)蛋白被證實(shí)參與其中，其中包括幾種Rho GTPase鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)了一種Rac1的 GTP 酶激活蛋白——α2-chimaerin，α2-chimaerin突變小鼠同EphA4基因敲除小鼠一樣，在皮層及脊髓運(yùn)動(dòng)電路形成方面存在缺陷，進(jìn)一步證實(shí)了α2-chimaerin在EphA4介導(dǎo)的軸突導(dǎo)向中起到關(guān)鍵作用。神經(jīng)系統(tǒng)缺乏調(diào)節(jié)蛋白Nck1及Nck2的小鼠存在同樣缺陷，提示作為一種連接EphA4與α2-chimaerin的分子，Nck調(diào)節(jié)蛋白可能在這個(gè)信號(hào)通路中發(fā)揮作用［12］。

除在軸突導(dǎo)向方面的作用外，Eph-ephrin在突觸發(fā)生及突觸成熟過(guò)程中同樣起到重要作用。對(duì)海馬及皮層神經(jīng)細(xì)胞的體內(nèi)與體外實(shí)驗(yàn)提示EphB受體與ephrinB調(diào)節(jié)興奮性突觸前后膜的聚集和成熟過(guò)程的多個(gè)環(huán)節(jié)。比如樹(shù)突棘的成熟過(guò)程需要EphB介導(dǎo)的正向信號(hào)及ephrinB介導(dǎo)的逆向信號(hào)［13］。同時(shí)EphA4的激活可以觸發(fā)樹(shù)突棘的退縮。跨突觸的EphB-ephrinB信號(hào)可以調(diào)節(jié)突觸前神經(jīng)末梢的結(jié)構(gòu)可塑性［14］。有研究基因突變小鼠已經(jīng)證實(shí)Eph系統(tǒng)可以調(diào)節(jié)海馬神經(jīng)連接的可塑性，而海馬神經(jīng)突觸的數(shù)量及大小對(duì)于學(xué)習(xí)機(jī)記憶功能具有重要作用。通過(guò)對(duì)海馬的神經(jīng)電生理檢測(cè)，已經(jīng)證實(shí)Eph在活動(dòng)依賴的突觸可塑性模式中發(fā)揮作用。EphA能夠影響到突觸可塑性和腦的高級(jí)功能。EphB也可以通過(guò)N-甲基-D-天門冬氨酸(N-methyl-D-aspartate，NMDA)受體激活途徑和非NMDA受體激活途徑參與突觸可塑性及記憶形成過(guò)程［15］。干預(yù)Eph家族蛋白可以影響記憶相關(guān)行為。比如逆轉(zhuǎn)EphB2的缺乏可以改善阿爾茨海默病(Alzheimer disease，AD)小鼠的認(rèn)知功能［16］。長(zhǎng)期藥品依賴往往伴隨著特定區(qū)域神經(jīng)通路的改變，Eph/ephrin可能參與其中［17］。

不但在神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)生發(fā)展中起重要作用，Eph/ephrin同時(shí)參與到神經(jīng)系統(tǒng)損傷的過(guò)程中。部分Eph/ephrin有助于損傷神經(jīng)纖維正確修復(fù)，但同時(shí)可通過(guò)反向信號(hào)抑制突觸的再生。中樞神經(jīng)系統(tǒng)EphA受體表達(dá)的增加抑制了軸突再生并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡［18］;且ephrinA作為神經(jīng)生長(zhǎng)抑制因子持續(xù)高表達(dá)于梗死灶周圍組織，可能在成年動(dòng)物腦缺血性卒中發(fā)生的急性期及遠(yuǎn)期中樞神經(jīng)系統(tǒng)的再生及神經(jīng)功能的恢復(fù)起到了阻礙作用［19］。同時(shí)EphB受體和ephrinB配體在損傷脊髓中表達(dá)升高，參與軸突再生和神經(jīng)傳導(dǎo)功能的調(diào)節(jié)。而且通過(guò)特殊方法干擾Eph-ephrin界面可以增強(qiáng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的再生，有助于神經(jīng)的恢復(fù)?？梢?jiàn)雖然Eph-ephrin信號(hào)系統(tǒng)在神經(jīng)系統(tǒng)的作用紛繁復(fù)雜，有待深入研究。

4 Eph-ephrin信號(hào)在骨代謝平衡及相關(guān)疾病中的作用

骨代謝是一個(gè)成骨與破骨相互協(xié)調(diào)的動(dòng)態(tài)過(guò)程。而這一過(guò)程是通過(guò)破骨細(xì)胞與成骨細(xì)胞之間相互的動(dòng)態(tài)聯(lián)系實(shí)現(xiàn)的。Eph-ephrin在其中起到重要作用。在骨骼發(fā)育中，EphB/ephrinB信號(hào)通路發(fā)育缺陷可以導(dǎo)致骨骼畸形。EphrinB1基因突變小鼠可以引起罕見(jiàn)的X-連鎖顱面疾病Craniofrontonasal綜合癥。提示Eph-ephrin在骨骼發(fā)育中起到重要作用。

Zhao等［20］通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)破骨前體細(xì)胞及成熟破骨細(xì)胞表達(dá)ephrinB2，而成骨前體細(xì)胞表達(dá)EphB4及多種ephrinB。破骨前體細(xì)胞表達(dá)的ephrinB2與成骨細(xì)胞表達(dá)的EphB4存在雙向信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用，在抑制破骨細(xì)胞形成的同時(shí)促進(jìn)成骨細(xì)胞的分化。并且通過(guò)功能獲得及功能缺失實(shí)驗(yàn)，他們證明2種細(xì)胞間的EphB4/ephrinB2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)具有雙向調(diào)控作用。成骨細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子可以激活破骨前體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄因子c-Fos及NFATc1，從而促進(jìn)破骨細(xì)胞的分化，并促進(jìn)破骨細(xì)胞ephrinB2的表達(dá)。而ephrinB2與成骨細(xì)胞表面表達(dá)的EphB4結(jié)合產(chǎn)生反向信號(hào)，通過(guò)ephrinB2 C端YKV基序與胞內(nèi)含PDZ結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)相互作用，向下游轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)，抑制破骨細(xì)胞c-Fos及NFATc1，從而抑制破骨細(xì)胞的分化。從而形成一個(gè)負(fù)反饋。同時(shí)經(jīng)EphB4的正向信號(hào)促進(jìn)成骨細(xì)胞的分化，從而在破骨細(xì)胞骨吸收的部位形成骨沉積。同時(shí)成骨細(xì)胞EphB4過(guò)表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)為骨量的增加，進(jìn)一步證實(shí)了其實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

同時(shí)成骨細(xì)胞表達(dá)的ephrinB2在促進(jìn)成骨細(xì)胞分化及骨形成方面同樣存在作用。甲狀旁腺激素(parathyroid hormone，PTH)及甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(parathyroid hormone-related protein，PTHrP)可以促進(jìn)成骨細(xì)胞ephrinB2的表達(dá)，然后通過(guò)細(xì)胞接觸依賴的自分泌或者旁分泌方式促進(jìn)成骨細(xì)胞的分化及骨形成。［21］

Eph-ephrin不但在正常的骨重建中發(fā)揮重要作用，在一些骨骼疾病的病理過(guò)程同樣起到重要作用。通過(guò)免疫組化等方法檢測(cè)原發(fā)性及復(fù)發(fā)性骨巨細(xì)胞瘤，發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)性骨巨細(xì)胞瘤EphA1表達(dá)明顯降低，提示EphA1參與骨巨細(xì)胞瘤的發(fā)展。同時(shí)EphA2可能是乳腺癌骨轉(zhuǎn)移的過(guò)程中骨破壞的潛在調(diào)節(jié)者［22］。這一系列研究都提示，通過(guò)對(duì)EphB信號(hào)系統(tǒng)的靶向作用可以預(yù)防或者治療骨重塑相關(guān)疾病，比如骨質(zhì)疏松癥和骨骼硬化癥。由于成骨細(xì)胞在表達(dá)EphB受體的同時(shí)也表達(dá)ephrinB配體，所以進(jìn)一步闡明雙向信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)及其下游特異性分子顯得十分必要。

5 Eph-ephrin信號(hào)在腫瘤及其它方面中的作用

Eph-ephrin還在腫瘤等其它方面起到重要作用。在多種惡性腫瘤中，均可檢測(cè)到Eph/ephrin的表達(dá)異常。且不同的表達(dá)水平可能與腫瘤的分期及分化程度相關(guān)［23］。同時(shí)，ephrin及Eph在促進(jìn)和抑制腫瘤生長(zhǎng)過(guò)程同樣扮演重要角色［24］。Eph-ephrin可以通過(guò)腫瘤細(xì)胞間及腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)的黏附控制腫瘤細(xì)胞的遷移。這可以通過(guò)Eph-ephrin復(fù)合物的內(nèi)吞或者ephrin的分解來(lái)實(shí)現(xiàn)。抑制腫瘤血管形成作為治療腫瘤的一種方法已應(yīng)用于臨床多年。Abengozar等［25］通過(guò)體外與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，通過(guò)高度選擇性抗體阻斷ephrinB2，可以顯著抑制由VEGF誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移以及脈管系統(tǒng)的形成，促進(jìn)細(xì)胞的異常運(yùn)動(dòng)及肌動(dòng)蛋白的異常改變，并可顯著抑制小鼠血管和淋巴管形成，抑制腫瘤的生長(zhǎng)。

免疫器官及細(xì)胞表達(dá)多種Eph受體及ephrin，提示Eph-ephrin具有調(diào)節(jié)免疫的作用。EphA4基因敲除小鼠在淋巴細(xì)胞成熟方面存在缺陷，其外周T細(xì)胞較野生型嚴(yán)重減少 。同時(shí)EphB2及EphB3基因敲除小鼠表現(xiàn)為胸腺結(jié)構(gòu)紊亂及淋巴細(xì)胞的減少［26］。

最近有研究通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)及小鼠模型證明調(diào)節(jié)胰島素分泌的胰島β細(xì)胞間的交流是通過(guò)Eph受體及其配體ephrin實(shí)現(xiàn)的［27］。通過(guò)骨癌性疼痛模型證實(shí)，Eph/ephrin可通過(guò)調(diào)節(jié)脊髓炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，維持機(jī)械性疼痛。這提示Eph/ephrin的信號(hào)可作為一個(gè)治療骨癌性疼痛的潛在靶點(diǎn)［28］。

最近研究提示EphA2的激活在動(dòng)脈粥樣硬化的形成過(guò)程中促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，從而促進(jìn)斑塊的形成［29］。同時(shí)EphrinA3在脂多糖誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖中的表達(dá)增高，其表達(dá)增加可能與炎癥因子有關(guān)［30］。這都提示Eph與炎癥因子之間存在密切聯(lián)系。

6 展望

除了上述的功能之外，Eph受體及ephrin還被證實(shí)存在其它多種重要生理及病理作用，比如炎癥、腸代謝等方面都有相關(guān)報(bào)道。相信未來(lái)會(huì)有越來(lái)越多的發(fā)現(xiàn)。正因?yàn)槿绱?，Eph家族蛋白正引起越來(lái)越多的關(guān)注。顯然，Eph受體及ephrin可以通過(guò)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制達(dá)到不同的效果。且他們的下游通路通常與其它信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相互交叉。

因此需要明確特殊生理病理過(guò)程中特異性的Eph受體或者ephrin的詳細(xì)表達(dá)情況，以及其下游通路及激活途徑，可以為相關(guān)疾病的防治尋找潛在的靶點(diǎn)，從而可以為向臨床治療方法的轉(zhuǎn)化打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。在此過(guò)程中，各種轉(zhuǎn)基因動(dòng)物提供了良好的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，并且各種特異性抗體應(yīng)用會(huì)對(duì)研究起到極大的推動(dòng)作用，同時(shí)系統(tǒng)生物學(xué)分析對(duì)潛在治療靶點(diǎn)的選擇也會(huì)大有幫助。

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