冠心病患者血清SAA、IL-6、TNF-α和hs-CRP檢測及臨床意義探討

張珺 李慧明 葉素惠

冠心病(CHD)是一種慢性炎癥性疾病，在血管內(nèi)皮細(xì)胞接觸到損傷性物質(zhì)時(shí)，炎性細(xì)胞會(huì)發(fā)生浸潤。血清淀粉樣蛋白A(SAA)是一種敏感的急性時(shí)相蛋白(acute phase proteins，APP)，是由一簇基因編碼的一組多形性蛋白，能誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞黏附、浸潤、免疫趨化等［1］。白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等就作為炎癥反應(yīng)的介質(zhì)出現(xiàn)，可能同時(shí)也起免疫反應(yīng)介質(zhì)的作用。C-反應(yīng)蛋白(CRP)是反映機(jī)體非特異性炎癥反應(yīng)的敏感標(biāo)志物。為此，我們檢測CHD患者血清SAA、IL-6、TNF-α和hs-CRP水平，并探討在CHD發(fā)生與發(fā)展的相關(guān)作用，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取診斷符合冠心病診斷符合1979年WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)及我國2001年急性心肌梗死診斷治療指南［2］，且經(jīng)冠脈造影檢查確診的CDH住院病例77例。其中急性心肌梗死(AMI)組22例，男16例，女6例;年齡43～75歲，平均(61.2±8.5)歲，前間壁心肌梗死6例，前壁4例，心內(nèi)膜下5例，廣泛前壁+下壁3例，廣泛前壁4例。不穩(wěn)定性心絞痛(UA)25例，男17例，女8例;年齡42～70歲，平均(57.1±7.6)歲;穩(wěn)定性心絞痛(SA)30例，男20例，女10例;年齡45～72歲，平均(59.2±8.3)歲。根據(jù)冠脈造影結(jié)果又分為單支病變30支、雙支病變26支和三支病變21支3組。對照組30例，男18例，女12例;年齡40～65歲，平均(55.4±7.6)歲，經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影除外CHD。以上患者均排除并發(fā)心肌炎、心肌病、心內(nèi)膜炎、風(fēng)濕性心臟病、結(jié)締組織病、腫瘤、肝硬化及急慢性感染，并在近1個(gè)月未服用抗炎藥及阿司匹林等非甾體類藥物。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 于入院后4～24 h內(nèi)采集肘靜脈血4 ml，置于未加抗凝劑的潔凈玻璃管內(nèi)，在37℃水浴箱中水浴20～30 min，2～3 h內(nèi) 3000 r/min離心 10 min，取上清液，置于-20℃冰箱待測。

1.2.2 冠狀動(dòng)脈造影及結(jié)果評判 采用Judkins法多體位投照進(jìn)行選擇性冠狀動(dòng)脈造影，結(jié)果由經(jīng)驗(yàn)豐富的心導(dǎo)管醫(yī)師判定。以冠狀動(dòng)脈主要分支，50%狹窄作為冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.3 血清SAA、IL-6和TNF-α和hs-CRP的測定 酶聯(lián)免疫吸附法(EKIS)檢測SAA、IL-6和TNF-α水平。采用散射免疫比濁法測定超敏CRP(hs-CRP)。試劑由深圳市惠安生物科技有限公司提供，操作按說明書，在美國Molecular Devices型酶標(biāo)儀上測吸光度(A450)，作標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算結(jié)果。全部檢測由專人按照操作規(guī)程統(tǒng)一操作。

2 結(jié)果

2.1 各組血清 SAA、IL-6、TNF-α和 hs-CRP水平的變化CHD患者血清SAA、IL-6、TNF-α和 hs-CRP水平明顯高于正常對照組(P＜0.01))，其中以AMI增高最為明顯，UA次之，SA再次(P＜0.01，表1)。

2.2 血清SAA、IL-6、TNF-α和hs-CRP水平與冠脈病變數(shù)的關(guān)系 單支病變組最低，而三支病變組最高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜ 0.01，見表2)。

表1 各組血清SAA、IL-6、TNF-α和hs-CRP水平變化(±s)

表1 各組血清SAA、IL-6、TNF-α和hs-CRP水平變化(±s)

注:與正常對照相比，1)P＜0.01;與SA組相比，2)P＜0.01;與UA組相比，3)P＜0.01

組別 例數(shù) SAA(mg/L) IL-6(ng/L) TNF-α(ng/L) hs-CRP(mg/L)AMI 22 11.39±3.131)2)3) 21.51± 4.101)2)3) 2.28.0±0.381)2)3) 12.23±3.581)2)3)UA 25 7.86±2.561)2) 16.84±3.531)2) 1.85±0.351)2) 5.03±2.251)2)SA 30 4.23±2.731) 10.14±3.451) 0.76±0.311) 2.73±1.751)對照組30 1.66±2.12 4.62±2.67 0.47±0.29 0.78±0.45

表2 血清SAA、IL-6、TNF-α和hs-CRP水平與冠脈病變數(shù)的關(guān)系(±s)

表2 血清SAA、IL-6、TNF-α和hs-CRP水平與冠脈病變數(shù)的關(guān)系(±s)

注:單支病變相比，1)P＜0.01;與雙支病變相比，2)P＜0.01

組別 例數(shù) SAA(mg/L) IL-6(ng/L) TNF-α(ng/L) hs-CRP(mg/L)單支病變 30 4.32±2.56 11.51±3.20) 0.79.0±0.38 2.54±3.36)雙支病變 26 7.86±2.381) 15.28±3.131) 1.78±0.321) 4.93±2.321)三支病變 21 11.23±2.711)2) 20.63±4.121)2) 2.19±0.311)2) 12.12±2.451)2)

2.3 血清SAA與IL-6、TNF-α和hs-CRP水平的相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)分析，SAA與IL-6、TNF-α和hs-CRP水平顯著相關(guān)(r=0.67，0.69，0.78，P ＜0.01)。

3 討論

病理學(xué)研究證實(shí)在粥樣硬化斑塊區(qū)的脂質(zhì)核心及破裂斑塊的“肩區(qū)”均有大量炎癥細(xì)胞的浸潤，提示炎癥反應(yīng)在CHD的發(fā)生發(fā)展過程起主要作用。廣泛的循環(huán)炎癥標(biāo)志物可用于預(yù)測心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)。

IL-6是炎癥反應(yīng)的一個(gè)中樞性調(diào)節(jié)者，在CHD的血管損傷和急性心肌缺血中起重要作用。在炎癥過程中大量的炎性細(xì)胞浸潤和激活，引起強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答過程，致使單核巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞等被激活，從而產(chǎn)生大量的IL-6，而大量的IL-6可誘導(dǎo)肝細(xì)胞產(chǎn)生大量的SAA［2］。IL-6可促進(jìn)心肌細(xì)胞表達(dá)粘附分子，增強(qiáng)白細(xì)胞和心肌細(xì)胞的黏附作用，加重心肌細(xì)胞的損傷。TNF-α由巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞等產(chǎn)生，為炎癥和免疫反應(yīng)的重要遞質(zhì)，可作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)致血管損傷和血栓形成，促進(jìn)心肌細(xì)胞凋亡引起心臟功能損害，促進(jìn)平滑肌細(xì)胞增生、游走和內(nèi)皮細(xì)胞活化，最終導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化形成和斑塊不穩(wěn)定［3］，具有促進(jìn)動(dòng)脈硬化(AS)形成的作用。本文結(jié)果顯示CHD患者血清IL-6、TNF-α水平明顯增高，尤其以AMI和UAP升高更為明顯(P＜0.01)。這可能是血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷后，活化單核巨噬細(xì)及淋巴細(xì)胞浸潤引起IL-6、TNF-α大量釋放的結(jié)果。CHD的病理變化主要是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化，CHD組血清IL-6、TNF-α水平明顯高于對照組(P＜0.05)，且與病情輕重相關(guān)，提示 IL-6、TNF-α可能參與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊由靜止?fàn)顟B(tài)向活動(dòng)狀態(tài)轉(zhuǎn)化繼而斑塊破裂的過程，可能參與了CHD發(fā)病的始動(dòng)因素AS的形成并影響其病情發(fā)展過程。

CRP是肝臟合成的一種球蛋白，也是機(jī)體受到損傷或發(fā)生各種急慢性炎癥后的一種敏感反應(yīng)蛋白，CRP在正常情況下以微量形式存在于健康人血清中，當(dāng)炎癥反應(yīng)引起內(nèi)皮損傷時(shí)，CRP在IL-6調(diào)節(jié)下由肝細(xì)胞合成，它通過激活補(bǔ)體系統(tǒng)引起脂質(zhì)沉積，此時(shí)CRP會(huì)明顯升高。hs-CRP作為血管炎癥反應(yīng)的更敏感的指標(biāo)，是全身炎癥反應(yīng)的非特異性標(biāo)志物［4］。本文結(jié)果顯示，CHD患者血清hs-CRP水平明顯高于對照組(P＜0.01)，而CHD隨病情的加重血清Hs-CRP水平進(jìn)一步增高(AMⅠ組＞UA組＞SA組)，且與冠脈病變支數(shù)有關(guān)(P＜0.01)。提示血清CRP與冠脈事件的炎癥活動(dòng)程度密切相關(guān)，血清hs-CRP測定可作為判斷CHD程度的指標(biāo)［5］。

SAA是一種急性期蛋白，在感染、炎癥、組織損傷時(shí)，SAA的合成明顯增加，因其半衰期穩(wěn)定，血中濃度主要由合成速度決定，而肝功能正常時(shí)，其合成主要決定于細(xì)胞因子的水平。SAA能取代apoA-I與高密度脂蛋白結(jié)合，影響了高密度脂蛋白的逆膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)［6］;SAA對單核巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞有趨化作用，能使炎癥細(xì)胞募集到炎癥部位;SAA能誘導(dǎo)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)的產(chǎn)生，MMPs能降解斑塊的膠原蛋白，促使斑塊由穩(wěn)定向不穩(wěn)定轉(zhuǎn)變。

Johnson等［7］對705名可疑心肌缺血行冠脈血管造影術(shù)結(jié)果顯示SAA可促進(jìn)AS斑塊失去穩(wěn)定性，SAA水平與未來的心血管事件之間有明顯關(guān)聯(lián)，是CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。Morrow等［8］研究發(fā)現(xiàn)，血清SAA水平升高與急性冠脈綜合征(ACS)、UA和非Q波型心肌梗死患者的近期死亡率明顯上升相關(guān)。本文結(jié)果顯示，CHD患者血清SAA水平明顯高于對照組(P＜0.01)，而CHD隨病情的加重血清SAA水平進(jìn)一步增高(AMⅠ組＞UA組＞SA組)(P＜0.01)，且在冠脈單支病變、雙支病變、三支病變者逐漸增高(P＜0.01)，提示SAA參與了CHD的發(fā)生發(fā)展，并與冠脈事件的炎癥活動(dòng)程度密切相關(guān)。局部或全身的炎癥反應(yīng)在動(dòng)脈粥樣硬化及其并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用，SAA和hs-CRP一樣，均為主要的急性時(shí)相蛋白，SAA與SAA與IL-6、TNF-α、hs-CRP顯著相關(guān)(P ＜0.01)，也提示 SAA 可能是敏感的炎癥指標(biāo)［9，10］。

總之，CHD患者在排除感染、損傷等引起增高的因素后，血清SAA、IL-6、TNF-α和hs-CRP水平明顯增高提示體內(nèi)炎癥活躍，可加強(qiáng)抗炎及相關(guān)治療，以預(yù)防CHD急性冠脈事件的發(fā)生。

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