趙琴 胡利清 黃明星 陳興 余崇芬
全自動(dòng)尿沉渣分析儀具有操作規(guī)范化、檢測(cè)的自動(dòng)化、速度快、重復(fù)性好、一次可以檢測(cè)多個(gè)參數(shù)等優(yōu)點(diǎn)。但由于尿液成分的多樣性、復(fù)雜性以及儀器本身檢測(cè)的局限性,常導(dǎo)致某些檢測(cè)項(xiàng)目存在一定程度的結(jié)果誤判,尤其是孕婦尿液分析中常出現(xiàn)假陽(yáng)性、假陰性結(jié)果,比正常人群假陽(yáng)性率要高。如果不予以及時(shí)發(fā)現(xiàn)和糾正將會(huì)誤導(dǎo)臨床對(duì)疾病的診斷和治療,目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)UF-500i尿液分析儀的影響因數(shù)研究的報(bào)道很多,但是在孕婦這個(gè)人群中的影響因數(shù)研究尚未有過(guò)報(bào)道!因此,我們將UF500i尿沉渣分析儀在正常人與孕婦人群中檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析,同份標(biāo)本再與顯微鏡鏡檢法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比觀察,統(tǒng)計(jì)儀器的誤判率,分析UF-500i在孕婦人群中檢測(cè)結(jié)果的影響因素,提出結(jié)果誤判的解決對(duì)策,對(duì)保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性具有重要價(jià)值。
1.1 材料 UF-500i型尿沉渣分析儀及其配套質(zhì)控物,以及鞘液、染液、稀釋試劑均購(gòu)自日本Sysmex公司;泰利特500尿液分析儀及配套尿十聯(lián)干化學(xué)試紙條購(gòu)于西門(mén)子醫(yī)療診斷設(shè)備有限公司,其質(zhì)控品由BIO-RAD公司提供;Olympus顯微鏡。
1.2 標(biāo)本來(lái)源隨機(jī)收集珠海市婦幼保健院門(mén)診和住院孕婦中段尿標(biāo)本100份為實(shí)驗(yàn)組,正常人的中段尿100份為對(duì)照組。
1.3 實(shí)驗(yàn)方法 用一次性塑料杯隨機(jī)收取孕婦中段尿,充分混勻后分為2管,第一管用于干化學(xué)分析,第二管用UF-500i尿沉渣分析儀自動(dòng)吸樣,做尿沉渣分析,剩余尿液離心后取沉渣進(jìn)行顯微鏡檢。
1.4 質(zhì)控 在進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè)前,用UF-500i尿沉渣分析儀原裝質(zhì)控品做室內(nèi)質(zhì)控,結(jié)果在控后再檢測(cè)標(biāo)本。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)結(jié)果均用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用χ2檢驗(yàn)的Mann-Whitney檢驗(yàn)進(jìn)行比較,P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 UF-500i結(jié)果 以RBC:0~27/UL;WBC:0~36/UL;管型:0~3/UL,上皮細(xì)胞:0~40/UL,結(jié)晶0~10/UL,酵母樣細(xì)胞:0~10/UL,細(xì)菌:0~8000/UL為標(biāo)準(zhǔn),超過(guò)此范圍為陽(yáng)性。鏡檢結(jié)果以RBC:0~3/HP,WBC:0~5/HP,管型:0~1/全片為標(biāo)準(zhǔn),超過(guò)此范圍為陽(yáng)性。對(duì)照組兩種方法檢測(cè)結(jié)果,見(jiàn)表1。
2.2 孕婦組兩種方法檢測(cè)結(jié)果,見(jiàn)表2。
2.3 孕婦的各參數(shù)假陽(yáng)性率與正常對(duì)照組各參數(shù)假陽(yáng)性率的比較見(jiàn)表3。
表1 對(duì)照組兩種方法檢測(cè)結(jié)果分析
表2 孕婦組兩種方法檢測(cè)結(jié)果分析
表3 孕婦與正常人對(duì)照組的各陽(yáng)性率分析(例,%)
3.1 證實(shí)孕婦尿液分析中存在假陽(yáng)性率且高于正常人群組。通過(guò)上述數(shù)據(jù)的研究和調(diào)查發(fā)現(xiàn)UF500i尿沉渣分析儀在孕婦尿液分析中的假陽(yáng)性率高于正常人群組的陽(yáng)性率,由于妊娠期受雌激素、孕激素的影響,特別是孕酮的影響,輸尿管、腎盂、腎平滑肌易擴(kuò)張,其蠕動(dòng)力減弱,尿液易潴留等原因,導(dǎo)致一些參數(shù)的假陽(yáng)性率增高,因此在孕婦人群組的尿液分析中出現(xiàn)干化學(xué)與UF500i尿沉渣分析儀不相符時(shí)應(yīng)引起我們檢驗(yàn)人員的高度重視和進(jìn)行顯微鏡方法復(fù)查,在孕婦人群組中如果出現(xiàn)誤診和漏診,誤導(dǎo)臨床對(duì)疾病的診斷和治療將給母嬰帶來(lái)非常大的危害!
3.2 導(dǎo)致假陽(yáng)性率的UF-500i原理分析。UF-500i尿沉渣分析儀是利用流式細(xì)胞技術(shù)和電阻抗技術(shù)根據(jù)尿液中各類(lèi)有形成分產(chǎn)生前向散射光脈沖和熒光脈沖的強(qiáng)度,持續(xù)時(shí)間及電阻抗的大小來(lái)區(qū)分的,有些成分之間染色性、形態(tài)、大小等方面有相似之處,因此UF-500i還不能?chē)?yán)格區(qū)分各類(lèi)成分。
3.2.1 紅細(xì)胞的檢測(cè) 干化學(xué)法測(cè)定RBC既可測(cè)定完整的RBC,又可測(cè)定游離血紅蛋白,具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)也可干擾測(cè)定產(chǎn)生假陽(yáng)性,肌紅蛋白,菌尿可干擾測(cè)定結(jié)果,產(chǎn)生假陽(yáng)性。UF-500i檢測(cè)RBC呈陽(yáng)性而常規(guī)鏡檢陰性者,其原因可能是:①結(jié)晶如草酸鈣結(jié)晶等造成的假陽(yáng)性數(shù)量最多,特別是尿液放置時(shí)間過(guò)久后,草酸鈣結(jié)晶會(huì)呈啞鈴型,其形態(tài)與RBC形態(tài)很相似。UF-500i尿沉渣分析儀是通過(guò)在稀釋液中加入螯合劑然后加溫處理,此方法可消除尿液標(biāo)本中的無(wú)定形結(jié)晶如磷酸鹽、尿酸鹽[1]等。但通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),部分無(wú)定形結(jié)晶仍可導(dǎo)致假陽(yáng)性的產(chǎn)生,說(shuō)明該儀器處理方法并不能完全消除所有尿液樣本中無(wú)定形結(jié)晶對(duì)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的干擾。另外,冬季室內(nèi)外氣溫偏低也有影響。②UF-500i將脫落的霉菌孢子、細(xì)菌團(tuán)塊、脂肪球,特別大小和紅細(xì)胞相仿的東西計(jì)數(shù)為RBC。在實(shí)際操作中如應(yīng)用干化學(xué)法篩選結(jié)合UF-500i對(duì)RBC精確計(jì)數(shù),對(duì)菌尿標(biāo)本結(jié)合顯微鏡檢排除假陽(yáng)性,即可提高RBC檢測(cè)的靈敏度和特異性。
3.2.2 白細(xì)胞的檢測(cè) 在白細(xì)胞檢測(cè)中造成假陽(yáng)性率的原因主要是UF-500i將小圓上皮細(xì)胞計(jì)數(shù)為白細(xì)胞而孕婦的上皮細(xì)胞又比較多,還有腎小管上皮細(xì)胞、裸核EC、鹽類(lèi)結(jié)晶的析出,精子、滴蟲(chóng)等均可造成WBC假性增高。由于白細(xì)胞與腎小管上皮細(xì)胞的大小、核物質(zhì)含量相似,儀器進(jìn)行分析時(shí)難以將其區(qū)分,因此會(huì)影響白細(xì)胞的檢測(cè)。干化學(xué)陰性而鏡檢為陽(yáng)性是由于干化學(xué)法測(cè)定白細(xì)胞是通過(guò)試紙帶上的吲哚酚酯與粒細(xì)胞漿內(nèi)的二酯酶作用后產(chǎn)生顏色變化而測(cè)定,淋巴細(xì)胞漿內(nèi)無(wú)此成分,干化學(xué)法無(wú)法檢測(cè)淋巴細(xì)胞。故干化學(xué)法為陰性鏡檢為陽(yáng)性,因此對(duì)白細(xì)胞的檢測(cè)應(yīng)以顯微鏡為準(zhǔn)[2]。
3.2.3 管型的檢測(cè) UF-500i檢測(cè)管型的假陽(yáng)性率是由于把尿中黏液絲,有形雜質(zhì)包裹的上皮細(xì)胞、類(lèi)管型物質(zhì)誤認(rèn)為管型造成假陽(yáng)性。顯微鏡法受取樣量,鏡檢液體厚度,鏡檢視野數(shù)及其他人為因素影響。因此建議用UF-500i較高的靈敏度進(jìn)行過(guò)篩,對(duì)陽(yáng)性標(biāo)本用顯微鏡進(jìn)一步確診。
3.2.4 結(jié)晶的檢測(cè) UF-500i對(duì)于結(jié)晶的檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)可能由于雜質(zhì)的存在而誤判為結(jié)晶;其假陰性見(jiàn)于少量的小圓形草酸鈣結(jié)晶被分類(lèi)到紅細(xì)胞成分中。
綜上所述,盡管UF-500i尿液分析儀能快速、準(zhǔn)確地測(cè)定尿中的多項(xiàng)參數(shù),但因尿中有形成分種類(lèi)較多,形態(tài)差異,儀器自身原理的局限性,標(biāo)本的采集、處理等因素均影響尿中有形成分的測(cè)定。UF-500i尿沉渣分析儀優(yōu)點(diǎn)是,具有操作規(guī)范化、檢測(cè)的自動(dòng)化、速度快、重復(fù)性好、一次可以檢測(cè)多個(gè)參數(shù)等優(yōu)點(diǎn),一定程度上可以取代顯微鏡觀察,人工還能對(duì)結(jié)果進(jìn)行審核修飾從而提高結(jié)果的準(zhǔn)確性。但仍不能完全替代人工鏡檢,除了有些結(jié)晶和霉菌容易被誤認(rèn)為紅細(xì)胞以外,像腫瘤細(xì)胞、胱氨酸和酪氨酸結(jié)晶、脂肪滴或藥物結(jié)晶以及各類(lèi)管型的分型等還是需要依靠人工鏡檢[3-5]。特別當(dāng)它們結(jié)果不相符時(shí),應(yīng)該以鏡檢法結(jié)果為準(zhǔn),用鏡檢法結(jié)果修正尿有形成分定量分析結(jié)果(修正方法 1個(gè)/μl=0.18個(gè)/高倍視野)[6-7]。所以,應(yīng)將沉渣法結(jié)果、化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果、鏡檢法結(jié)果、散點(diǎn)圖及直方圖并結(jié)合臨床一起分析,綜合報(bào)告,總之,UF-500i型全自動(dòng)尿沉渣法分析儀的性能有待于進(jìn)一步提高,但是還不能完全代替顯微鏡鏡檢。利用化學(xué)法與沉渣法進(jìn)行篩選,再聯(lián)合鏡檢法檢測(cè)是目前尿常規(guī)檢測(cè)的最好方法。
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