瀘西縣豬、牛、羊布魯氏菌病的血清學(xué)調(diào)查

龔桂英，趙國慶

(1.瀘西縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南 瀘西 652400; 2.瀘西縣畜牧技術(shù)推廣站，云南 瀘西 652400)

布魯氏菌病(簡(jiǎn)稱布病)是由布魯氏菌引起的人、畜共患的慢性傳染病，臨床癥狀以生殖器官和胎膜發(fā)炎引起流產(chǎn)、不育和各種組織局部病癥為主要特征。人也可感染該病，表現(xiàn)為長期發(fā)熱、多汗、關(guān)節(jié)痛、神經(jīng)痛及肝、脾腫大等癥狀。該病嚴(yán)重?fù)p害人和動(dòng)物的健康，我國將其列為二類動(dòng)物疫病。病原為革蘭氏陰性短小桿菌，致病機(jī)理是菌體死亡或裂解后釋放內(nèi)毒素對(duì)機(jī)體產(chǎn)生毒害作用，在臨床上以豬、牛、羊三種家畜最易感。近年來，由于各地引種檢疫不嚴(yán)、經(jīng)費(fèi)不足、陽性畜未徹底撲殺等原因，部分地方牲畜布氏桿菌病的流行呈上升趨勢(shì)，不僅嚴(yán)重影響?zhàn)B殖業(yè)的健康發(fā)展，而且給人類的健康帶來嚴(yán)重威脅。為了全面掌握瀘西縣布氏桿菌病疫情動(dòng)態(tài)，采取積極的防制措施，控制疫情的發(fā)生和蔓延，對(duì)全縣范圍內(nèi)8個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的散養(yǎng)戶及規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的豬、牛、羊血清進(jìn)行布病血清病原學(xué)的監(jiān)測(cè)，摸清瀘西縣豬、牛、羊布魯氏菌病的感染情況，為該病的防制提供科學(xué)依據(jù)。具體檢測(cè)情況如下。

1 材料與方法

1.1 被檢血清

2008—2011年，4年來共隨機(jī)抽檢豬血清 700份，分別采自8個(gè)鄉(xiāng)(鎮(zhèn))的126戶散養(yǎng)戶及3個(gè)規(guī)模場(chǎng);牛血清350份，分別采自8個(gè)鄉(xiāng)(鎮(zhèn))的153戶散養(yǎng)戶及1個(gè)規(guī)模場(chǎng);羊血清776份，分別采自8個(gè)鄉(xiāng)(鎮(zhèn))的97戶散養(yǎng)戶及2個(gè)規(guī)模場(chǎng)。

1.2 診斷液

布病虎紅平板凝集抗原、布病試管凝集抗原及標(biāo)準(zhǔn)陰性血清、陽性血清均由中國疾病預(yù)防控制中心傳染病所生產(chǎn)，由紅河州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提供。

1.3 方法

1.3.1 布病虎紅平板凝集試驗(yàn)(初篩)

按照血清學(xué)布病虎紅平板凝集試驗(yàn)進(jìn)行操作，并記錄檢測(cè)結(jié)果。判斷標(biāo)準(zhǔn):反應(yīng)結(jié)果出現(xiàn)大的凝集片或小的顆粒狀物，液體完全透明，記為“#”，即100%凝集;有明顯的凝集塊，液體幾乎透明，記為“+++”，即75%凝集;有可見的凝集塊，液體半透明，記為“++”，即50%凝集;液體混濁，僅可見少數(shù)顆粒狀物，記為“+”，即25%凝集;液體均勻混濁，無凝集物，記為“－”為陰性反應(yīng)。在陰陽對(duì)照成立(陽性血清“#”，陰性血清“－”，生理鹽水“－”)的前提下，以出現(xiàn)“++”，即50%以上凝集判為陽性。

1.3.2 布病試管凝集試驗(yàn)(復(fù)核)

陽性樣品的判定:先通過布病虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)(初篩)為陽性者，再以試管凝集試驗(yàn)復(fù)核為準(zhǔn)。試管凝集反應(yīng)按農(nóng)業(yè)部GB/18646—2002《動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)》進(jìn)行操作，并記錄檢測(cè)結(jié)果。判斷標(biāo)準(zhǔn):“#”試管中100%菌體被凝集，液體完全透明，管底有極明顯的傘狀沉淀物，振蕩時(shí)破散成大絮片和小絮片狀;“ +++”沉淀情況與“#”相同，但液體略混濁，約75%菌體被凝集;“ ++”液體不甚透明，管底有少量傘狀沉淀，振蕩時(shí)，成小絮片或大絮片狀，約50%菌體被凝集;“+”液體不透明，有不明顯的傘狀沉淀物，約25%的菌體凝集;“–”液體不透明，有少量菌體沉淀于管底呈一小圓點(diǎn)，為陰性反應(yīng)(－)。結(jié)果判定(要和陰性、陽性對(duì)照管對(duì)照判定):羊、豬血清稀釋度1∶50出現(xiàn)“++”或“++”以上凝集現(xiàn)象時(shí)判為陽性(+);牛血清稀釋度1∶100出現(xiàn)“++”或“++”以上凝集現(xiàn)象時(shí)判為陽性(+)。注意:0.5%石炭酸生理鹽水用于豬、牛血清試驗(yàn);0.5%石炭酸，10%鹽水用于山羊、綿羊血清試驗(yàn)。

2 監(jiān)測(cè)結(jié)果

2008年9月隨機(jī)抽檢豬血清100份、牛血清50份、羊血清100份，布病監(jiān)測(cè)均為陰性(－)，2009年4月、9月及2010年4月、9月4次抽檢情況同上。在2010年12月7日永寧鄉(xiāng)某養(yǎng)殖戶羊群中出現(xiàn)母羊流產(chǎn)、跛行等癥狀，經(jīng)初診為疑似布病，遂對(duì)該羊群76只全部采血，并進(jìn)行布病血清學(xué)檢測(cè)后，確診為4只母羊、2只小羊及1只種公羊(外地引來的種公羊)為陽性，種公羊菌體凝集度高達(dá)100%。2011年4月、9月同樣隨機(jī)抽檢豬血清100份、牛血清50份、羊血清100份均為陰性(－)。具體抽檢監(jiān)測(cè)情況見表1、表2、表3。

表1 豬血清學(xué)布病檢測(cè)結(jié)果

表2 牛血清學(xué)布病檢測(cè)結(jié)果

表3 羊血清學(xué)布病檢測(cè)結(jié)果

3 結(jié)果分析

家畜布魯氏菌病血清學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，瀘西縣豬、牛布魯氏菌病到目前為止未檢出陽性，但近兩年來有羊布魯氏菌病感染，望引起有關(guān)部門重視，特別是應(yīng)加強(qiáng)對(duì)永寧鄉(xiāng)及周邊村寨家畜布病的檢測(cè)。據(jù)調(diào)查了解，2010年12月在永寧鄉(xiāng)發(fā)生的這一起羊群感染布病事件，原因是該養(yǎng)羊戶戶主半年前從外地引進(jìn)1只種公羊時(shí)，未經(jīng)嚴(yán)格隔離檢疫就直接混入自家羊群而引發(fā)的(之后不久戶主在相關(guān)部門的建議下將該羊群全部淘汰)。本例羊群感染布病中有公羊、母羊和小羊，說明布病即可水平傳播，也可垂直傳播，帶菌種公羊是導(dǎo)致本病發(fā)生的重要原因。由此可見，在引進(jìn)種畜時(shí)，對(duì)動(dòng)物嚴(yán)格執(zhí)行檢疫顯得尤為重要，同時(shí)也說明瀘西縣在畜牧業(yè)養(yǎng)殖中存在的一些問題，活畜交易市場(chǎng)的管理和檢疫工作、養(yǎng)殖戶的自我防范意識(shí)有待進(jìn)一步加強(qiáng)和完善。

4 建議

(1)在非疫區(qū)應(yīng)當(dāng)著重體現(xiàn)“預(yù)防為主”的原則，堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，確需從外地引進(jìn)種畜時(shí)，一定要先進(jìn)行隔離30～45 d(羊30 d，豬、牛45 d)，經(jīng)檢疫確認(rèn)健康無菌者方可引進(jìn)。非疫區(qū)的縣應(yīng)重點(diǎn)監(jiān)測(cè)種畜、奶牛、奶山羊，未發(fā)病畜群也應(yīng)定期檢疫，每年至少進(jìn)行1次，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)陽性者必須撲殺，作無害化處理。

(2)在疫區(qū)更需進(jìn)行嚴(yán)格檢疫，對(duì)陽性畜一般不予治療，直接淘汰，培養(yǎng)建立健康畜群，同時(shí)做好消毒滅源工作。在疫區(qū)進(jìn)入市場(chǎng)交易的家畜均應(yīng)進(jìn)行布病檢疫，杜絕傳染源的輸出和輸入，避免非疫區(qū)受染。定期對(duì)家畜進(jìn)行免疫接種，豬用豬布魯氏菌S2株，牛用牛布魯氏菌19號(hào)疫苗，羊用羊型5號(hào)(M5)弱毒活菌苗。密切接觸牲畜及其產(chǎn)品的工作人員應(yīng)注意個(gè)人防護(hù)，在處理可疑病畜及流產(chǎn)物時(shí)，一定要戴口罩、眼鏡和手套，穿防護(hù)服，皮膚有傷者盡量避免接觸家畜，以免感染本病。