生津藥和通絡(luò)藥對(duì)干燥綜合征大鼠免疫球蛋白影響的初步研究

王 丹 趙 浩

（1 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽(yáng)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，上海 200437；2 上海光華中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，上海 200052）

干燥綜合征（Sj?gren’s syndrome，SS）是一種常見(jiàn)的自身免疫性疾病，臨床主要表現(xiàn)為口干眼干，造成患者進(jìn)食困難、欲哭無(wú)淚等情況，生活質(zhì)量大為下降。目前西醫(yī)對(duì)該病早期缺乏行之有效的治療辦法，對(duì)中晚期患者常使用激素和免疫抑制劑治療，而這些藥物所帶來(lái)的副反應(yīng)，又限制了臨床廣泛而長(zhǎng)期的應(yīng)用。

中醫(yī)根據(jù)SS臨床表現(xiàn)，將其歸屬于“燥證”、“燥痹”、“燥毒”等范疇[1,2]。確立了養(yǎng)陰生津、活血化瘀、清熱解毒等治療方法。從臨床觀察看[3]，上述方法均可有效的改善患者的口干眼干等臨床癥狀。本實(shí)驗(yàn)采用養(yǎng)陰生津法、活血通絡(luò)法治療干燥綜合征模型鼠，通過(guò)觀察大鼠IgA、IgG、IgM的變化，初步探討?zhàn)B陰生津法、活血通絡(luò)法對(duì)干燥綜合征大鼠免疫球蛋白的影響，并比較兩種治療方法的差別。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選用SD大鼠，2周齡，（100±10）g，雌性，清潔級(jí)，購(gòu)自上海中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。

1.2 藥物與試劑

養(yǎng)陰生津中藥（玄參、生地、麥冬等）、活血通絡(luò)中藥（當(dāng)歸、丹參、莪術(shù)等）均按人與動(dòng)物用藥量體表面積計(jì)算法換算大鼠用藥量，由上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽(yáng)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院藥劑科制劑室制作分裝）。吸附無(wú)細(xì)胞百日咳、白喉、破傷風(fēng)聯(lián)合疫苗，由上海生物研究所提供，批號(hào)：20090516-6；血清特異性抗體ELISA試劑盒（由上海玖梧實(shí)業(yè)有限公司提供）；弗氏完全佐劑、PBS緩沖液（由上海醫(yī)藥工業(yè)研究院提供）。

1.3 動(dòng)物模型

參照文獻(xiàn)[4]，選用同種大鼠在超凈工作臺(tái)上解剖頸部，取出頜下腺，切碎，放入PBS緩沖液中，勻漿，再放入離心機(jī)，離心15min后，取上清液，用分光光度儀測(cè)定蛋白抗原含量。將蛋白與弗氏完全佐劑乳化，得到終濃度為0.75mg/ml的蛋白抗原。A、B、C、D組后腳掌皮下注射0.1mL乳化抗原，并于第1、7天在A、B、C、D各組大鼠腹腔注射稀釋后的百白破疫苗0.2mL，加強(qiáng)免疫。E組為正常對(duì)照，不做處理。

1.4 分組及給藥

將大鼠分為5組，每組10只，分別為養(yǎng)陰生津組（A）、活血通絡(luò)組（B）、強(qiáng)的松組（C）、生理鹽水組（D）及正常對(duì)照組（E）。A～D組經(jīng)造模后，每日分別灌服養(yǎng)陰生津中藥、活血通絡(luò)中藥、強(qiáng)的松、生理鹽水，共給藥四周。E組為正常對(duì)照組，不做處理。

表1 給藥后各組大鼠的免疫球蛋白變化

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)采用±s表示，各組間比較采用方差分析，以P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

1.6 檢測(cè)指標(biāo)

酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)IgA、IgG、IgM。

2 結(jié) 果

2.1 動(dòng)物模型鑒定

取頜下腺進(jìn)行HE染色，提示灶性淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。見(jiàn)圖1。

圖1

2.2 各組免疫球蛋白變化情況

造模后大鼠的IgA、IgG、IgM水平均高于正常對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。藥物干預(yù)后，養(yǎng)陰生津法和活血通絡(luò)法均可降低模型鼠IgM水平（P＜0.05），效果優(yōu)于強(qiáng)的松組（P＜0.05），但兩組中藥對(duì)比無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；養(yǎng)陰生津法和活血通絡(luò)法可降低IgA、IgG水平（P＜0.05），但與強(qiáng)的松組比較無(wú)差異（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

3 討 論

干燥綜合征臨床多表現(xiàn)為口干、眼干、鼻腔干等癥狀，常見(jiàn)舌質(zhì)紅絳、舌面干燥、苔少舌裂，乃“陰虛水涸”之征。中醫(yī)尚無(wú)完全對(duì)應(yīng)的病證，大多數(shù)醫(yī)家根據(jù)《內(nèi)經(jīng)》提出“諸澀枯涸，皆屬于燥”，將其歸屬“燥證”范疇，并根據(jù)肺脾腎與水液代謝關(guān)系，創(chuàng)立清燥救肺湯、沙參麥冬湯、增液湯等養(yǎng)陰增液的名方。多數(shù)醫(yī)家認(rèn)為，干燥綜合征以陰虛為本，燥熱為標(biāo)，日久津傷氣耗，津血虧乏，脈道失充，則血行滯澀；氣為血帥，氣虛血滯則瘀血內(nèi)停。由此，因燥致瘀、因瘀致燥，形成惡性循環(huán)，導(dǎo)致本病纏綿難愈?，F(xiàn)代研究現(xiàn)實(shí)，本病存在微循環(huán)障礙以及不同程度的血液濃、粘、凝、聚改變，并且已認(rèn)識(shí)到血瘀證具有血液流變學(xué)、微循環(huán)、血流動(dòng)力學(xué)、血管活性因子等多方面的異常[5]。

干燥綜合征的大多數(shù)患者均可出現(xiàn)免疫球蛋白增高，以往的研究表明[6]免疫球蛋白升高的患者其紫癜、腎小管酸中毒的發(fā)生率增高，高免疫球蛋白是觸發(fā)白細(xì)胞破碎性血管炎的重要因素之一。因此，對(duì)于干燥綜合征患者，降低異常的免疫球蛋白，可以減少內(nèi)臟累及，控制病情進(jìn)展。本研究采用佐劑誘導(dǎo)型SS大鼠模型[4]，造模后大鼠頜下腺HE染色顯示有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平均顯著高于正常對(duì)照組，提示造模在唾液腺及血清免疫學(xué)方面均產(chǎn)生了類似人類的SS改變。養(yǎng)陰生津方是根據(jù)中醫(yī)“燥者濡之、潤(rùn)之”的原則制定的方藥，以增液湯為基礎(chǔ)進(jìn)行加味；而活血通絡(luò)方是根據(jù)中醫(yī)久病必瘀、久病入絡(luò)的病因病機(jī)而制定的。研究結(jié)果顯示，養(yǎng)陰生津中藥和活血通絡(luò)中藥均可降低模型大鼠的免疫球蛋白水平，與強(qiáng)的松功效相當(dāng)，這為養(yǎng)陰生津法和活血通絡(luò)法治療干燥綜合征提供了實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。而相對(duì)于西藥而言，中藥具有良好的安全性和價(jià)格低廉等優(yōu)勢(shì)，可長(zhǎng)期而廣泛應(yīng)用。按照中醫(yī)“治未病”理論，在干燥綜合征的早期就應(yīng)該干預(yù)治療，防止疾病進(jìn)一步進(jìn)展，但目前畏于西藥的副反應(yīng)，多數(shù)西醫(yī)主張有明確內(nèi)臟累及的時(shí)候再進(jìn)行用藥，這不符合《內(nèi)經(jīng)》“不治已病治未病，不治已亂治未亂”的理念?！鹅`樞?逆順》篇中謂：“上工刺其未生者也；其次，刺其未盛者也，……上工治未病，不治已病，此之謂也”，也是強(qiáng)調(diào)在疾病發(fā)作之先，把握時(shí)機(jī)，予以治療，從而達(dá)到“治未病”的目的。因此，在干燥綜合征的中早期，可以積極的使用中藥進(jìn)行治療，來(lái)控制病情進(jìn)展。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還顯示，兩組中藥在降低免疫球蛋白表達(dá)方面并無(wú)顯著性差異，從現(xiàn)代藥理學(xué)角度[7]，無(wú)論是以養(yǎng)陰生津?yàn)橹鞯纳?、麥冬，還是以活血通絡(luò)為主的當(dāng)歸、丹參，均具有雙向免疫調(diào)節(jié)作用，提示我們?cè)谂R床即使是同一種疾病，也不可拘泥于一法。根據(jù)燥證的疾病進(jìn)展特點(diǎn)，可以在不同階段分別采用養(yǎng)陰生津法或活血通絡(luò)法。

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