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    bcl-2表達(dá)與腮腺黏液表皮樣癌病理組織學(xué)分級(jí)臨床分期的相關(guān)性研究

    2012-11-09 08:01:32南欣榮趙志剛
    中國(guó)醫(yī)藥指南 2012年17期
    關(guān)鍵詞:樣癌腮腺表皮

    安 琦 南欣榮 趙志剛

    (山西醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)系,山西 太原 030001)

    黏液表皮樣癌(mucoepidermoid carcinoma ,MEC)是最常見的涎腺惡性腫瘤之一,約占惡性腫瘤的30%,發(fā)病部位多發(fā)于腮腺[1]。腫瘤可侵犯面神經(jīng),出現(xiàn)面癱,術(shù)后可復(fù)發(fā)。由于MEC發(fā)生部位不同,其分化程度、惡性程度、轉(zhuǎn)移、治療方法等方面也不同。近年來(lái)大量研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡抑制在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)移過(guò)程中有重要意義,受到學(xué)者的廣泛關(guān)注。

    bcl-2基因即B細(xì)胞淋巴瘤/白血病基因2(B-cell ymphoma/leukemia-2)于1984年首次在濾泡型B淋巴瘤中發(fā)現(xiàn)。在腫瘤的發(fā)生過(guò)程中,bcl-2通過(guò)抑制細(xì)胞凋亡,延長(zhǎng)細(xì)胞生存的時(shí)間,增加了細(xì)胞染色體畸變和病毒感染的概率,最終導(dǎo)致了細(xì)胞惡變和腫瘤的形成。有研究表明,大多人類腫瘤中都有bcl-2的高表達(dá)。還有學(xué)者認(rèn)為bcl-2的高表達(dá),不是某一種腫瘤的特征,而是腫瘤細(xì)胞的一種增生狀態(tài)的表現(xiàn),并且認(rèn)為bcl-2高表達(dá)是腫瘤進(jìn)展和預(yù)后差的標(biāo)志。本課題采用免疫組織化學(xué)法S-P測(cè)定人腮腺黏液表皮樣癌組織中bcl-2在不同的臨床分期、組織學(xué)分級(jí)中的表達(dá),探討bcl-2異常表達(dá)與腮腺黏液表皮樣癌臨床分期、組織學(xué)分級(jí)的關(guān)系,可能為腮腺黏液表皮樣癌的早期診斷及預(yù)后提供一定價(jià)值。

    1 材料與方法

    1.1 標(biāo)本來(lái)源

    取自山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院病理科2005至2010年存檔的45例腮腺黏液表皮樣癌蠟塊,其中男性24例,女性21例,年齡29~52歲,平均40.4歲。入院前患者沒有進(jìn)行過(guò)其他相關(guān)治療,全部進(jìn)行原發(fā)灶和頸淋巴結(jié)清掃手術(shù),常規(guī)病理活檢診斷,每例標(biāo)本都經(jīng)過(guò)兩位經(jīng)驗(yàn)豐富的病理科醫(yī)師雙盲法閱片,并且取得的結(jié)果一致。HE染色切片根據(jù)WHO(2005)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行腫瘤的組織學(xué)分級(jí)。TNM分期根據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟(2002)的分類方法進(jìn)行。

    1.2 試劑

    bcl-2兔抗人多克隆抗體,PV-6000-G,DAB顯色試劑盒(中國(guó)中杉金橋公司);PBS緩沖液(pH=7.2~7.4,0.01mol/L)(福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司)。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    應(yīng)用免疫組織化學(xué)Envision PV-6000 Power Vision TM二步法染色,詳細(xì)步驟按S2P試劑盒說(shuō)明操作。

    1.4 結(jié)果判斷及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    bcl-2陽(yáng)性反應(yīng)為細(xì)胞質(zhì)和/或細(xì)胞膜染成黃色。根據(jù)著色強(qiáng)度分為四級(jí):深棕色(+++),棕色(++),淡黃色(+),未著色(-)。計(jì)算著色強(qiáng)度及著色細(xì)胞數(shù)在切片中的百分比:病變細(xì)胞未著色和著色細(xì)胞≤30%定為陰性表達(dá),>30%為陽(yáng)性表達(dá)。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    用χ2檢驗(yàn)、確切概率法及相關(guān)分析對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。P<0.05,認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Kappa=1表示一致,Kappa=0表示不一致(SPSS17.0)。

    2 結(jié) 果

    2.1 bcl-2在正常腮腺組織和MEC的表達(dá)

    正常腮腺組織中0%(0/40)(圖1);腮腺黏液表皮樣癌中66.7%(30/45)bcl-2呈陽(yáng)性表達(dá)(圖2)。結(jié)果顯示:bcl-2在MEC中的表達(dá)顯著高于正常腮腺組織(P<0.05)(表1)。

    圖1 正常腮腺組織中bcl-2陰性表達(dá)(SP×400)

    圖2 腮腺黏液表皮樣癌中bcl-2陽(yáng)性表達(dá)(SP×400)

    表1 bcl-2在正常腮腺組織和MEC的表達(dá)

    2.2 bcl-2表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系

    結(jié)果顯示bcl-2表達(dá)差異與患者的性別、年齡無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);而與腫瘤的分化程度、大小及臨床分期之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

    表2 45例腮腺黏液表皮樣癌臨床病理特征與bcl-2表達(dá)的關(guān)系(例)病例 bcl-2

    3 討 論

    3.1 bcl-2基因的基本概況及作用機(jī)制

    bcl-2基因?qū)儆谝活愋碌陌┗蚣易宄蓡T,可通過(guò)抑制不同類型細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡,延長(zhǎng)細(xì)胞活力而發(fā)揮作用,是許多因子作用的共同分子基礎(chǔ)。它是傳遞靶點(diǎn),可導(dǎo)致細(xì)胞周期的停止或調(diào)亡,還可使有有絲分裂缺陷的細(xì)胞發(fā)生凋亡障礙[2],其過(guò)表達(dá)已被證實(shí)存在于多種腫瘤中,其陽(yáng)性高表達(dá)與腫瘤分化程度呈正相關(guān)。其表達(dá)產(chǎn)物有抑制細(xì)胞凋亡而導(dǎo)致腫瘤產(chǎn)生的功能[3]。研究發(fā)現(xiàn)bcl-2基因在各種細(xì)胞的激活和發(fā)育過(guò)程中表達(dá),而在成熟的或走向凋亡的細(xì)胞中不表達(dá)或低表達(dá)。

    關(guān)于bcl-2的生物學(xué)作用,目前研究揭示,bcl-2調(diào)控細(xì)胞凋亡的途徑有兩條:即細(xì)胞內(nèi)抗氧化作用和抑制鈣離子跨膜運(yùn)動(dòng)??梢詮腍ock-enbery及Can等的研究中看出端倪。

    3.2 bcl-2基因在腮腺黏液表皮樣癌中的表達(dá)

    關(guān)于bcl-2在腫瘤中的表達(dá)情況,報(bào)道不盡一致。有資料表明,在前列腺中bcl-2的表達(dá)多見于腫瘤細(xì)胞分化差、惡性程度高的病例中;而在甲狀腺癌、乳腺癌中,bcl-2的表達(dá)多見于腫瘤細(xì)胞分化好而惡性程度較低的病例。本研究針對(duì)bcl-2在腮腺黏液表皮樣癌中的表達(dá),發(fā)現(xiàn)bcl-2在正常腮腺組織的陽(yáng)性表達(dá)率0%。bcl-2在正常腮腺組織中有表達(dá)的具體機(jī)理目前還不是很明確,因此我們推斷:bcl-2在維持正常組織的結(jié)構(gòu)和功能方面具有一定的作用。bcl-2在在正常腮腺組織中的陽(yáng)性表達(dá)率遠(yuǎn)低于黏液表皮樣癌組織,正常腮腺腺體組與黏液表皮樣癌組之間差異顯著(P<0.05)。提示大多數(shù)黏液表皮樣癌組織中存在bcl-2過(guò)度表達(dá)。由此可見,bcl-2主要在表皮樣細(xì)胞中表達(dá),其次是中間細(xì)胞,黏液細(xì)胞僅在低分化癌中有少量表達(dá)。說(shuō)明表皮樣細(xì)胞和中間細(xì)胞是分泌bcl-2的主要細(xì)胞,分化成熟的黏液細(xì)胞很少或不分泌bcl-2,表皮樣細(xì)胞和中間細(xì)胞發(fā)生浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的可能性較大,這也可以解釋為什么低分化黏液表皮樣癌易發(fā)生浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。

    3.3 bcl-2基因表達(dá)與腮腺黏液表皮樣癌臨床病理特征之間的關(guān)系

    從本研究結(jié)果中我們看出:bcl-2表達(dá)差異與患者的性別、年齡之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;中分化和高分化組的癌組織中表達(dá)率低于低分化,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,T1+T2組中表達(dá)率低于T3+T4癌組織,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,Ⅰ~Ⅱ期的陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于Ⅲ-Ⅳ期,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這與賈林等在胰腺癌的研究結(jié)果相符[4]。由此可見,腫瘤病理級(jí)別越高,腫瘤細(xì)胞的基因會(huì)有更高的突變率,包括致癌基因的激活和抑癌基因的失活,因此由基因改變引起的bcl-2表達(dá)增強(qiáng)亦會(huì)更加明顯。

    基因的表達(dá)及聯(lián)合檢測(cè)在腫瘤早期診斷和預(yù)后判斷中的作用是近年來(lái)研究的熱點(diǎn),從凋亡基因這個(gè)方面對(duì)基因表達(dá)進(jìn)行分析,探討其在腫瘤產(chǎn)生中的生物學(xué)意義,能更好的對(duì)黏液表皮樣癌治療方案進(jìn)行選擇以及預(yù)后評(píng)估。因腫瘤的產(chǎn)生可受多因素影響,所以bcl-2在腫瘤中的相互關(guān)系及作用機(jī)理,是否還協(xié)同其他因子的共同作用等,還需要進(jìn)一步研究。

    [1]吳運(yùn)堂,趙燕平,趙福運(yùn),等.口腔頜面部惡性腫瘤肝轉(zhuǎn)移(70例報(bào)告分析)[J].中華口腔醫(yī)學(xué)雜志,1989,37(24):130-133.

    [2]Can RZ,Sommer A.Human basic FGF gene encodes four polypeptides:Three inimat translation from nonAUG codens[J].Proc Natl Acad Sci USA,1989,86(11):3978.

    [3]Kishi H,Igawa M,Kikuno N,et al.Expression of the Survivin gene inprostate cancer:correlation with clinicopathological characteristi cs,proliferalive activity and apoptosis[J].J Uro1,2004,171(5):1855-1860.

    [4]Suzuki A,Ito T,Kawano H,et al.Survivin initiates procaspase329/p21 complex formation as a result of interaction with CdK4 to resist Fas-mediated cell death[J].Oncogene,2000,19 (10):1346-1353.

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