• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    酶法純化ω-6和ω-3多不飽和脂肪酸研究進(jìn)展

    2012-10-25 02:08:48臧佳辰薛文通
    食品工業(yè)科技 2012年21期
    關(guān)鍵詞:烯酸亞油酸酶法

    臧佳辰,薛文通

    (中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品營(yíng)養(yǎng)與科學(xué)工程學(xué)院,北京 100083)

    酶法純化ω-6和ω-3多不飽和脂肪酸研究進(jìn)展

    臧佳辰,薛文通*

    (中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品營(yíng)養(yǎng)與科學(xué)工程學(xué)院,北京 100083)

    多不飽和脂肪酸(PUFAs)具有重要的生理學(xué)活性,尤其是ω-6和ω-3系列與人體健康密切相關(guān)。因此,如何提取PUFAs非常重要,也是油脂領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。利用酶法分離純化PUFAs是一種環(huán)保、高效、具有廣泛應(yīng)用前景的方法。本文綜述了酶法純化ω-6和ω-3PUFAs的最新研究進(jìn)展,并著重闡述了酶法催化水解、酶法選擇性富集以及其它幾種能和酶法有效結(jié)合、共同分離純化PUFAs的物理化學(xué)方法,同時(shí)通過論述亞油酸、亞麻酸、花生四烯酸等PUFAs的純化進(jìn)展證明了酶法在該領(lǐng)域內(nèi)具有很大發(fā)展前景。

    ω-6多不飽和脂肪酸,ω-3多不飽和脂肪酸,酶法催化水解,酶法選擇性富集

    多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)是指含有兩個(gè)或者兩個(gè)以上雙鍵結(jié)構(gòu)的脂肪酸,根據(jù)第一個(gè)不飽和鍵位置不同,PUFAs可分為ω-3、ω-6、ω-7、ω-9等系列[1]。這是一種具有獨(dú)特生理活性的物質(zhì),對(duì)人體的生理功能至關(guān)重要,尤其是ω-3和ω-6系列,它們?cè)隗w內(nèi)的平衡對(duì)于穩(wěn)定細(xì)胞膜功能、調(diào)控基因表達(dá)、維持細(xì)胞因子和脂蛋白平衡、減肥、抗心血管病、促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、抗炎、抗癌等方面發(fā)揮著重要作用,因此,其生理學(xué)活性已成為營(yíng)養(yǎng)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。ω-6系列的花生四烯酸(AA)、亞油酸(LA)、γ-亞麻酸(GLA),ω-3系列的α-亞麻酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳五烯酸(DPA)、二十二碳六烯酸(DHA)等由于在體內(nèi)不能合成轉(zhuǎn)化發(fā)揮其獨(dú)特的生理功能而被添加于嬰兒奶粉、營(yíng)養(yǎng)品以及藥物成分之中[2]。隨著PUFAs在食品、醫(yī)藥、化工、飼料等多個(gè)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用,如何將其分離純化變得非常重要。目前,用于從油脂中分離純化PUFAs的方法主要包括:色譜法、蒸餾法、溶劑提取法、低溫結(jié)晶法、超臨界萃取法以及尿素包合法等[3]。本文所要重點(diǎn)闡述的酶法是一種新型、高效、綠色的方法,此方法突出的特點(diǎn)在于:反應(yīng)可以在溫和的條件下進(jìn)行,從而能夠減少由于異構(gòu)化、氧化、聚合等副反應(yīng)的發(fā)生而造成的PUFAs失活,而且可以避免使用一些有機(jī)溶劑,這樣不僅更環(huán)保,也降低了相應(yīng)的食品安全問題的風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)還有效地提高了提取的收率[4]。近年來,隨著生物技術(shù)水平的提高,相應(yīng)的酶制劑也實(shí)現(xiàn)了大規(guī)模的生產(chǎn),尤其是固定化酶的廣泛推廣,使酶可以反復(fù)利用從而降低了成本,也打消了人們之前對(duì)于酶法成本過高的憂慮。所以,出于多種原因考慮,將酶法運(yùn)用于PUFAs的分離純化,已成為了該領(lǐng)域的新方向。

    1 酶法純化PUFAs方法概述

    脂肪酶對(duì)油脂的作用可以分為選擇性作用和非選擇性作用。

    1.1 非選擇性作用

    脂肪酶的非選擇性反應(yīng)主要用于水解油脂制取游離脂肪酸,與傳統(tǒng)的堿試劑皂化法相比,酶法具有耗能少、產(chǎn)物色澤好、質(zhì)量高、水解率高等優(yōu)點(diǎn),特別是對(duì)于一些含有不飽和鍵較多、易氧化和產(chǎn)生副反應(yīng)的油脂水解更為適宜[4]。60年代初,山田等研制的圓柱形假絲酵母脂肪酶制劑是世界上微生物脂肪酶中生產(chǎn)量最大、應(yīng)用工作最多、水解油脂快而且徹底的品種之一[5]。這種酶也成功的運(yùn)用于豆油、花生油、橄欖油等。國(guó)外也早有先例將酶法分解油脂運(yùn)用于大規(guī)模的生產(chǎn)之中,如日本尼崎油脂公司于八十年代就完成了酶法生產(chǎn)脂肪酸中試,并大量投產(chǎn)脂肪酸。三號(hào)油脂公司也將酶法批量生產(chǎn)脂肪酸用于制造肥皂粉,使生產(chǎn)成本下降一半以上,而我國(guó)在這方面還有待提高。

    1.2 選擇性作用

    特異性的脂肪酶可以通過選擇性作用,將PUFAs富集在甘油酯上,這種富集了PUFAs的甘油酯在消化道中的水解速率比利用物理或化學(xué)方法富集得到相應(yīng)的甲酯或乙酯快而更容易被人們接受和信賴[6]。依據(jù)作用原理的不同,又可以分為選擇性水解法、選擇性酯化法和選擇性酯交換法。

    1.2.1 選擇性水解 脂肪酶種類繁多,功能各有差異,可能具有位置選擇性或者?;x擇性。圖1以AA和LA為例展示了PUFAs因結(jié)構(gòu)的高度卷曲使甘油酯分子上不飽和脂肪酸中靠近酯鍵的最末端甲基對(duì)脂肪酶的進(jìn)攻形成了空間位阻,使得脂肪酶難以接觸到PUFAs與甘油形成的酯鍵。Bottino等人[7]最早證明了脂肪酶的選擇性與魚油中不飽和脂肪酸對(duì)脂肪酶的“抵抗機(jī)制”有關(guān)。之后,這種機(jī)制也多次被驗(yàn)證和應(yīng)用[8-11]。Sulainman Al-Zuhair等[12]還探究了酶法水解棕櫚油的動(dòng)力學(xué),為進(jìn)一步優(yōu)化水解條件提供了依據(jù)。

    圖1 AA和ALA高度彎曲的空間結(jié)構(gòu)Fig.1 The highly binding space structure of AA and ALA

    1.2.2 選擇性酯化 脂肪酶的選擇性酯化建立在游離脂肪酸的基礎(chǔ)之上,依據(jù)其選擇特異性,脂肪酶催化游離脂肪酸中的多不飽和脂肪酸、飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸按照一定順序與醇反應(yīng)生成酯,再經(jīng)過分離即可獲得純度較高的PUFAs甘油酯或游離PUFAs。Robles Medina等[13]通過脂肪酶Novozym435富集魚油以及微藻類中的油脂,使魚肝油中的酯化率達(dá)到93.5%,包括25.7%的EPA和44.7%的DPA。將同樣的方法應(yīng)用于微藻類油脂,酯化率達(dá)到了96.5%,而且其中不含單甘酯,雙甘酯量極少。Carla Tecelao等[14]還通過選擇性酯化的方法將PUFAs富集到人奶脂上,對(duì)嬰幼兒的營(yíng)養(yǎng)供給提出了新的啟示,可見酶法純化脂肪酸的相關(guān)技術(shù)也可以應(yīng)用在功能食品研發(fā)的廣泛領(lǐng)域上。

    工業(yè)化選擇性酯化純化PUFAs工藝主要要求體系具有以下條件:具有高度脂肪酸轉(zhuǎn)移性;酶反應(yīng)體系具有高酯化度;分離過程對(duì)游離脂肪酸破壞性較低。其基本工藝流程如圖2[15]。

    圖2 選擇性酯化PUFA工藝流程Fig.2 The flow of elective esterification of PUFAs

    1.2.3 選擇性酯交換 脂肪酶選擇性酯交換法是通過脂肪酶使甘油酯與游離的PUFAs、醇或另一酯發(fā)生的?;粨Q反應(yīng),從而使PUFAs較多的富集在甘油酯中。Shahidi等人[3]曾系統(tǒng)闡述了通過脂肪酶酯交換法富集ω-3PUFAs的方法[16]。

    但在具體富集PUFAs的應(yīng)用中,僅用一種酶催化一步反應(yīng)難以將PUFAs富集到所需要的產(chǎn)量。而水解、酯化和酯交換反應(yīng)結(jié)合在一起使用,往往能達(dá)到更好的富集效果。Shimada等[16]通過Lipase-AK來水解金槍魚油,水解程度達(dá)到79%,大部分DHA富集在游離脂肪酸中,然后通過Rhizopus delemar脂肪酶對(duì)混合物與月桂醇進(jìn)行選擇性酯化,得到游離脂肪酸中DHA含量較高的游離脂肪酸、脂肪酸乙酯或者脂肪酸甘油酯,再將游離脂肪酸提取出來,同樣條件下進(jìn)行二次酯化,最終使DHA含量達(dá)到91%。

    2 酶法純化ω-6 PUFAs的研究進(jìn)展

    2.1 亞油酸(LA)及共軛亞油酸(CLA)

    亞油酸是γ-亞麻酸、花生四烯酸、腎上腺酸、二十二碳五烯酸等對(duì)人體具有重要生理意義的多不飽和脂肪酸的合成原料,人體如果缺乏亞油酸就不能合成這些多不飽和脂肪酸。共軛亞油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)是亞油酸的同分異構(gòu)體,是一系列在碳9、11或10、12位具有雙鍵的亞油酸的位置和幾何異構(gòu)體,是普遍存在于人和動(dòng)物體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[17]。由于物理結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)較為相似,傳統(tǒng)的分離方法很難將不同的共軛亞油酸,如c9,t11-CLA和t10,c12-CLA進(jìn)行分離。Gerald等[18]發(fā)現(xiàn)采用選擇性的脂肪酶對(duì)共軛亞油酸進(jìn)行酯化可以有效地解決這個(gè)問題。他們利用Geotrichum candidum脂肪酶對(duì)c9,t11-CLA的酯化速度遠(yuǎn)高于t10,c12-CLA這一特點(diǎn),反應(yīng)得到含91%c9,t11-CLA的酯化產(chǎn)物和含82%t10,c12-CLA的游離脂肪酸產(chǎn)物,從而對(duì)兩種PUFAs進(jìn)行了分離純化。實(shí)驗(yàn)還采用了一種非選擇性的脂肪酶即固定化Rhizomucor miehei脂肪酶同時(shí)將兩種共軛亞油酸通過酯交換反應(yīng)富集到棕櫚油中,使棕櫚油中的共軛亞油酸含量達(dá)到30%,而殘留的游離共軛亞油酸含量?jī)H不到2%。

    2.2 γ-亞麻酸(GLA)

    琉璃苣油中含有豐富的ω-6 PUFAs,其中GLA這種只在母乳才能找到的必需脂肪酸高達(dá)25%~30%,也是天然植物油中含 GLA濃度最高的。Patricia等對(duì)比了包括天然脂肪酶和商業(yè)脂肪酶在內(nèi)的不同脂肪酶富集琉璃苣油中GLA的數(shù)據(jù)。其中天然Geotrichum candidum脂肪酶具有較高水解率,可以獲得88.2%的游離脂肪酸,雖然這種酶的酶活力比其他脂肪酶較低,但對(duì)GLA確有較好的富集能力,在適當(dāng)提高酶用量后,能將琉璃苣油中的GLA含量由22.1%提高到41.7%。同時(shí)他們利用電腦輔助程序?qū)Ψ磻?yīng)動(dòng)力參數(shù)進(jìn)行了分析優(yōu)化,為大規(guī)模批次生產(chǎn)和連續(xù)式富集GLA建立了反應(yīng)模型[19]。

    2.3 花生四烯酸(AA)

    花生四烯酸作為一種必需脂肪酸對(duì)嬰幼兒的生長(zhǎng)尤其是腦部發(fā)育發(fā)揮著重要的作用,所以常被添加到嬰幼兒奶粉中。傳統(tǒng)的花生四烯酸來源:動(dòng)物肝臟、魚油、蛋黃等食物中AA的含量非常少,難以滿足需求。所以近年來,人們?cè)絹碓蕉嗟牟捎梦⑸锱囵B(yǎng)的方式獲取富含花生四烯酸的油脂[20]。Shimada等[21]通過酶法富集Mortierella單細(xì)胞油脂中的花生四烯酸,首先通過Pseudomonas脂肪酶對(duì)油脂進(jìn)行水解,水解率達(dá)到90%,第二步在Candida脂肪酶的作用下,將游離的花生四烯酸選擇性酯化在月桂醇上,酯化率達(dá)到55%,為了進(jìn)一步提高AA含量,實(shí)驗(yàn)通過Candida脂肪酶的二次酯化,最終將AA含量從最初的25%提高到了75%。

    3 酶法純化ω-3 PUFAs的研究進(jìn)展

    中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)在2000年提出的人體內(nèi)最佳的ω-6:ω-3PUFAs比值為4∶1~6∶1。而傳統(tǒng)的飲食成分,尤其是西方飲食中,ω-6PUFAs的比例往往遠(yuǎn)高于ω-3PUFAs,這種失衡會(huì)嚴(yán)重影響人體的生理功能,導(dǎo)致心腦血管、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等疾病[22]。ω-3PUFAs為人體必需脂肪酸,同時(shí)人體缺乏將ω-6PUFAs轉(zhuǎn)化為ω-3PUFAs的必需酶,所以如何富集純化 ω-3PUFAs以提高人體攝入量更加受到關(guān)注。

    3.1 α-亞麻酸(ALA)

    紫蘇子油、亞麻油等植物油中α-亞麻酸的含量達(dá)到50%以上。魏決等利用脂肪酶水解紫蘇子油,并使用尿素包合法提取了游離脂肪酸中的ɑ-亞麻酸,避免了傳統(tǒng)方法中由于酸、堿及溫度造成的ɑ-亞麻酸的變性,并通過對(duì)各項(xiàng)條件的優(yōu)化,使水解率提高到90.02%[23]。Vacek等[24]對(duì)比了不同脂肪酶對(duì)黑加侖油中的ALA和GLA進(jìn)行富集的效果,實(shí)驗(yàn)證明,Pseudomonas cepacia脂肪酶具有最高的水解率,另外,Pseudomonas cepacia固定化脂肪酶、Mucor miehei脂肪酶以及Pseudomonas fluorescens脂肪酶對(duì)兩種PUFAs具有特異性水解能力,為大規(guī)模酶法純化ALA提供了理論基礎(chǔ)。

    3.2 二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)

    EPA和DHA作為ω-3PUFAs系列中最重要的兩種脂肪酸,在預(yù)防癌癥、肥胖、神經(jīng)性疾病等多個(gè)方面發(fā)揮著重要的作用。EPA和DHA主要來源于海洋單細(xì)胞藻類和魚油中,從這些來源中提取這兩種多不飽和脂肪酸也有較長(zhǎng)的歷史[25-26]。研究證明,機(jī)體攝入富集EPA和DHA的濃縮產(chǎn)物會(huì)由于飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸含量減少而比食用原始的海藻油或者魚油更加有效。而采用酶法處理更溫和,從而得到高質(zhì)量的EPA、DHA富集產(chǎn)物。

    Tomoko等[27]分別采用四種脂肪酶來富集沙丁魚油中的EPA和DHA,實(shí)驗(yàn)證明,Candida Rugosa脂肪酶在短時(shí)間內(nèi)將產(chǎn)物中的EPA含量從13.62%提高到了 33.74%,DHA含量從 13.62%提高到了29.94%,效果顯著。而其它脂肪酶不能明顯的富集ω-3PUFAs,或者反應(yīng)速度太低,所以在采用酶法純化PUFAs時(shí),對(duì)脂肪酶的篩選主要考慮酶的專一性和反應(yīng)效率。Derya等[28]也通過脂肪酶Candida rugosa對(duì)鮭魚油中的EPA和DHA進(jìn)行了富集,使兩種ω-3PUFAs總含量從原來的16.36%提高到了38.71%,實(shí)驗(yàn)將游離脂肪酸去除之后,對(duì)甘油酯進(jìn)行了二次水解,所得產(chǎn)物中二者的總含量達(dá)到了50.58%。

    4 與酶法有效結(jié)合的其它方法

    PUFAs的分離純化在脂肪酶作用的基礎(chǔ)上,借助一些其他手段,分離效率可以得到進(jìn)一步提高。比如,LeGoffic等[29]將短途蒸餾法結(jié)合在對(duì)不同PUFAs的分離之中,有效地將魚油中的DHA和EPA分成各自含量較高的兩部分。但短途蒸餾可能會(huì)造成高溫,容易導(dǎo)致PUFAs的氧化,可以采用分子蒸餾法在較低的溫度下進(jìn)行。近年來,很多研究利用超臨界CO2綠色、無毒、易從產(chǎn)物中抽離的特點(diǎn)將其作為酶法分離制備的介質(zhì),取得了良好的效果。如Lin等[30]通過脂肪酶Lipozyme IM-60對(duì)魚油中的PUFAs在超臨界CO2條件下進(jìn)行酶促酯交換反應(yīng),發(fā)現(xiàn)酯交換率比傳統(tǒng)溶劑法提高了40%。同時(shí),通過高效液相色譜、氣相色譜、薄層色譜等對(duì)脂肪酸或甘油酯成分進(jìn)行分離鑒定,也是PUFAs的分離提取必不可少的步驟??梢姡绻麑⒚阜ㄅc各種適宜的物理化學(xué)方法相結(jié)合,可以進(jìn)一步提高PUFAs的分離純化水平。

    5 固定化酶技術(shù)在純化多不飽和脂肪酸方面的應(yīng)用

    近年來,生物工程的發(fā)展以及酶技術(shù)的進(jìn)步為脂肪酶以及油脂行業(yè)帶來了新的氣息。歐洲在酯酶基因克隆和工程菌構(gòu)建方面研究較早,多種酵母、真菌和細(xì)菌等微生物的酯酶基因已經(jīng)相繼被克隆,來源于假絲酵母、根霉和假單胞菌的酯酶均已用于PUFAs的富集實(shí)驗(yàn)。Suen等[31]利用DNA混排技術(shù)將Candida antarctica脂肪酶活性提高了20倍。薛靜等[32]還探究了產(chǎn)酶菌株的篩選,對(duì)影響菌株產(chǎn)酶的因素進(jìn)行了研究,經(jīng)過條件優(yōu)化,使酶活力提高了1.83倍。在此基礎(chǔ)上,酶的固定化技術(shù)進(jìn)一步用于脂肪酶的活性保持,即通過將脂肪酶限定于空間某一區(qū)域內(nèi),能夠提高酶的穩(wěn)定性并可回收重復(fù)利用,便于連續(xù)化生產(chǎn)。在酶法富集PUFAs方面,采用固定化酶處理也越來越多,如嚴(yán)金勇等采用固定化地絲菌脂肪酶來富集魚油中的DHA和EPA,發(fā)現(xiàn)該酶使用五次之后仍能保持最初80%的水解率[33]。固定化酶的發(fā)展使酶在PUFAs的純化中實(shí)現(xiàn)了既高效又低廉。

    6 總結(jié)與展望

    綜上所述,酶法應(yīng)用于PUFAs的分離提取具有以下優(yōu)勢(shì):一、脂肪酶催化反應(yīng)在溫和的條件下進(jìn)行,從而防止了PUFAs的失活、異構(gòu)化、氧化、環(huán)化等不良反應(yīng);二、通過酶替代有機(jī)溶劑,不僅使產(chǎn)品更加綠色、安全,避免了環(huán)境污染問題,也防止了可能引發(fā)爆炸等危險(xiǎn)的可能性;三、酶法既可以有效的和其它分離純化的物理化學(xué)方法相結(jié)合,也可以作為物理化學(xué)方法的前處理過程,用途廣泛,顯著提高提取率;四、生物技術(shù)和發(fā)酵工程的發(fā)展,也帶動(dòng)了酶產(chǎn)業(yè)的快速提高,菌種篩選、酶的修飾、固定化酶技術(shù)等都有效提高了酶的活性,并為實(shí)現(xiàn)酶法工業(yè)化提供了依據(jù),這些都是酶法制備多不飽和脂肪酸的優(yōu)勢(shì)所在。在未來的發(fā)展中,開發(fā)催化效率更高、選擇性更強(qiáng),以及穩(wěn)定性更持久的脂肪酶以更好的適應(yīng)工業(yè)化的需求是酶法制備ω-6和ω-3多不飽和脂肪酸的趨勢(shì),總的來說,這一領(lǐng)域具有廣闊的發(fā)展前景。

    [1]馬立紅,王曉梅.多不飽和脂肪酸藥理作用研究[J].吉林中醫(yī)藥,2006,26(12):69-70.

    [2]孫翔宇,高貴田,段愛莉,等.多不飽和脂肪酸的研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技,2012,33(7):381-386.

    [3]ShahidiF,WanasundaraUN.Omega-3 fattyacid concentrates:nutritional aspects and production technologies[J].Trends in Food Science&Technology,1998(9):230-240.

    [4]Shimada Y,Sugihara A.Review:enzymatic purification of polyunsaturated fatty acids[J].Journal of Bioscience and Bioengineering,2001,91(6):529-538.

    [5]常志成.酶催化油脂水解技術(shù)新進(jìn)展及發(fā)展趨勢(shì)[J].表面活性劑工業(yè),2002(3):5-10.

    [6]Yang LY,kuksis A,Myher JJ.Hydrolysis of menhaden and rapeseed oil and their fatty acid methyl and ethyl esters in the rats[J].Biochemistry and Cell Biology,1989,67(4-5):192-204.

    [7]Bottino NR,Vandenburg GA.Resistance of certain long-chain polyunsaturated fatty acids of marine oils to pancreatic lipase hydrolysis[J].Lipid,1967,2(6):489-493.

    [8] Tanaka Y,Hirano J,F(xiàn)unada T.Concentration of docosahexanoic acid in glyceride by hydrolysis of fish oil with Candida cylindracea lipase[J].Journal of the American Oil Chemists’Society,1992,69(12):1210-1214.

    [9]Shimada Y,Maruyana K,Nakamura M.Selective hydrolysis of polyunsaturated fatty acid containing oil with geotrichum candidum lipase[J].Journal of the American Oil Chemists’Society,1995,72(12):1577-1581.

    [10]Hosokama M,Takahashi K,Miyazaki N,et al.Application of water mimics on preparation of eicosapentaenoicand and docosahexaenoic acids containing glycerolipids[J].Journal of the American Oil Chemists’Society,1995,72(4):421-425.

    [11]Shishikura A,F(xiàn)ujimoto K,Suzuki T,et al.Improved lipasecatalyzed incorporation of long-chain fatty acids into mediumchain triglycerides assisted by superecritical carbon dioxide extraction[J].Journal of the American Oil Chemists’Society,1994,71:961.

    [12]Zuhair SA,Hasan M,Ramachandran KB.Kinetics of the enzymatic hydrolysisofpalm oilby lipase[J].Process Biochemistry,2003,38(8):1155-1163.

    [13]Medina R,Cerdan L,Gimenez G.Lipase-catalyzed esterification of glycerol and polyunsaturated fatty acids from fish and microalgae oils[J].Journal of Biotechnologhy,1999,35: 379-391.

    [14]Tecelao C,Silva J,Dubreucq E.Production of human milk fat substitutes enriched in omega-3 polyunsaturated fatty acids using immobilized commercail lipases and Candida parapsilosis lipase/ acyltransferase[J].Journal of Molecular Catalysis B:Enzymatic,2010,65(1-4):122-127.

    [15]劉元法,王興國(guó).酶反應(yīng)技術(shù)在功能性油脂分離和純化中的應(yīng)用[J].中國(guó)油脂,2003,28(12):82-85.

    [16]Shimada Y,Maruyama K,Sugihara A,et al.Purification of docosahexaenoic acid from tuna oil by a two step enzymatic method:hydrolysis and selective esterification[J].Journal of the American Oil Chemists’Society,1997,74(11):1441.

    [17]黃耀威,潘力.共軛亞油酸生物合成的研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技,2007,28(7):236-239.

    [18]Gerald P,McNeill,Rawlins C,et al.Enzymatic enrichment of conjugated linoleic acid isomers and incorporation into triglycerides[J].Journal of the American Oil Chemists’s Society,1999,76(11):1265-1268.

    [19]Patricia B,F(xiàn)regolente L,Rivera EC,et al.A CAPE approach to gamma-Linolenic acid production via lipase-catalyzed enzymatic hydrolysis[J].Computer Aided Chemical Engineering,2007,24:941-946.

    [20]Zeng Y,Ji XJ,Chang SM,et al.Improving arachidonic acid accumulation in Mortierella alpina through B-group vitamin addition[J].Chemistry and Biosystems Engineering,2012,35 (5):683-688.

    [21]Shimada Y,Sugihara A,Minamigawa Y,et al.Enzymatic enrichment of arachidonic acid from mortierella single-cell oil[J].Journal of the American Oil Chemists’Society,1998,75 (2):1213-1217.

    [22]張洪濤,單雷,畢玉平.n-6和n-3多不飽和脂肪酸在人和動(dòng)物體內(nèi)的功能關(guān)系[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué),2006(2): 115-119.

    [23]魏決,羅雯,陳玲.酶法從紫蘇子油中制取ɑ-亞麻酸工藝研究[J].食品科學(xué),2005,26(1):117-119.

    [24]Vacek M,Zarevúcka M,Wimmer Z,et al.Lipase-mediated hydrolysis ofblackcurrantoil[J].Enzyme and Microbial Technology,2000,27(7):531-536.

    [25]Gorj?o R,Azevedo-Martins AK,Rodrigues HG,et al.Comparative effects of DHA and EPA on cell function[J].Pharmacology&Therapeutics,2009,122(1):56-64.

    [26]Huertas EL.Health effects of oleic acid and long chain omega-3 fatty acids(EPA and DHA)enriched milks.A review of intervention studies[J].Pharmacological Research,2010,61(3): 200-207.

    [27]Okada T,Morrissey MT.Production of n-3 polyunsaturated fatty acid concentrate from sardine oil by lipase-catalyzed hydrolysis[J].Food Chemistry,2007,103:1411-1419.

    [28]Kahveci D,Xu XB.Repeated hydrolysis process is effecttive for enrichment of omega 3 polyunsaturated fatty acids in salmon oil by Candida rugosa lipase[J],F(xiàn)ood Chemistry,2011,129(4): 1552-1558.

    [29]LeGoffic F,Nguyen A,Khayat-Frydman C.Concentration and purification of polyunsaturated fatty acid esters by distillation enzymatic transesterification doupling[p].WO 00/73254,2000.

    [30]Lin TJ,Chen SW,Chang AC.Enrichment of n-3 PUFA contents on triglycerides of fish oil by lipase-catalyzed transesterification under supercritical conditions[J].Biochemical Engineering Journal,2006,29(1-2):27-34.

    [31]Suen WC,Zhang NY,Xiao L,et al.Improved activity and thermostability of Candida antarctica lipase B by DNA family shuffling[J].Protein Engineering Design&Selection,2004,17 (2):133-140.

    [32]薛靜,陶樹興,田澤英,等.脂肪酶產(chǎn)生菌的篩選、產(chǎn)酶條件及酶特性研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(15): 8826-8840.

    [33]Yan JY,Liu SX,Hu J,et al.Enzymatic enrichment of polyunsaturated fatty acids using novellipase preparations modified by combination of immobilization and fish oil treatment[J].Bioresource Technologhy,2011,102(14):7154-7158.

    Research progress in purification of ω-6/ω-3 polyunsaturated fatty acids by enzyme

    ZANG Jia-chen,XUE Wen-tong*
    (College of Food Science&Nutritional Engineering,China Agriculture University,Beijing 100083,China)

    The importance of polyunsaturated fatty acids(PUFAs),especially ω-6/ω-3 series,is scientifically recognized in human nutrition and disease prevention.With the emphasis on nutrition on the rise,how to purify PUFAs has already been a hot topic in various areas.Some physical or chemical methods are popular nowadays.However,research is ongoing to obtain the more natural and efficient ways with biological methods like enzymatic purification.This artide presented a review of the advances regarding the purification of ω-6/ω-3 PUFAs with enzymatic ways including enzymatic hydrolysis,selective enrichment,and some other methods with high expectation which could be connected with enzymatic method efficiently.The process of purification of AA,LA,GLA,DHA,EPA had been emphasized.Enzymatic method was a promising way for the purification of PUFAs.And in that sense,this review was expected to be of interest.

    ω-6PUFAs;ω-3PUFAs;enzymatic hydrolysis;selective enrichment

    TS201.1

    A

    1002-0306(2012)21-0365-05

    2012-05-14 *通訊聯(lián)系人

    臧佳辰(1988-),女,碩士研究生,研究方向:糧食、油脂及植物蛋白工程。

    國(guó)家自然科學(xué)基金(31171672)。

    猜你喜歡
    烯酸亞油酸酶法
    NH3和NaCl對(duì)共軛亞油酸囊泡化的影響
    α-生育酚琥珀酸酯的酶法合成研究進(jìn)展
    酶法制備大豆多肽及在醬油發(fā)酵中的應(yīng)用
    冷凍丙酮法提取山核桃油中的亞油酸和亞麻酸
    食品界(2016年4期)2016-02-27 07:37:06
    模擬移動(dòng)床色譜分離純化花生四烯酸甲酯
    Sn-2二十二碳六烯酸甘油單酯的酶法合成
    二十二碳六烯酸治療非酒精性脂肪性肝病患者療效觀察
    超聲場(chǎng)中亞油酸共軛反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)
    酶法降解白及粗多糖
    中成藥(2014年11期)2014-02-28 22:29:50
    花生四烯酸和二磷酸腺革濃度對(duì)血小板聚集的影響
    国产片内射在线| 国内揄拍国产精品人妻在线| 九九热线精品视视频播放| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 国产v大片淫在线免费观看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 日韩精品免费视频一区二区三区| 欧美zozozo另类| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 操出白浆在线播放| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 一级黄色大片毛片| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产精品av久久久久免费| 国产麻豆成人av免费视频| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲国产高清在线一区二区三| 久久这里只有精品中国| 免费看十八禁软件| 黄色a级毛片大全视频| 又紧又爽又黄一区二区| 国产av一区二区精品久久| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 精品一区二区三区四区五区乱码| 中文资源天堂在线| 午夜福利18| 国产一区二区三区在线臀色熟女| e午夜精品久久久久久久| 精品高清国产在线一区| 久久久久亚洲av毛片大全| 麻豆国产97在线/欧美 | 欧美三级亚洲精品| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 一本久久中文字幕| 日韩大尺度精品在线看网址| 久久久久久九九精品二区国产 | 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 亚洲全国av大片| 长腿黑丝高跟| 午夜老司机福利片| 搡老熟女国产l中国老女人| 又粗又爽又猛毛片免费看| 床上黄色一级片| 久久香蕉激情| 91在线观看av| 在线观看一区二区三区| 久久精品成人免费网站| 亚洲国产精品久久男人天堂| 全区人妻精品视频| 国产精品九九99| 欧美色视频一区免费| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 在线观看www视频免费| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 日韩av在线大香蕉| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲人与动物交配视频| 欧美高清成人免费视频www| 18禁观看日本| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 免费看日本二区| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | av超薄肉色丝袜交足视频| 老司机靠b影院| 俺也久久电影网| 99热6这里只有精品| 久久人妻av系列| 国产黄片美女视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国产av一区二区精品久久| 久久久久久久午夜电影| 欧美在线一区亚洲| 国产成人aa在线观看| 99热这里只有精品一区 | av在线播放免费不卡| 国产高清有码在线观看视频 | 波多野结衣高清无吗| 90打野战视频偷拍视频| 热99re8久久精品国产| 看黄色毛片网站| av天堂在线播放| 99国产综合亚洲精品| 首页视频小说图片口味搜索| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 美女免费视频网站| 国产成人精品久久二区二区91| 欧美另类亚洲清纯唯美| 小说图片视频综合网站| 国产精品九九99| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 最近最新中文字幕大全电影3| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲18禁久久av| 日韩有码中文字幕| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 美女午夜性视频免费| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产成人av激情在线播放| 日韩免费av在线播放| 90打野战视频偷拍视频| 欧美国产日韩亚洲一区| 18禁观看日本| а√天堂www在线а√下载| 欧美极品一区二区三区四区| 在线a可以看的网站| 亚洲成人国产一区在线观看| 久久久久性生活片| 黄色成人免费大全| 亚洲中文av在线| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 欧美精品啪啪一区二区三区| 午夜免费观看网址| 两人在一起打扑克的视频| 99国产精品一区二区三区| av欧美777| 国产成人影院久久av| 一本精品99久久精品77| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产亚洲精品久久久久5区| 色av中文字幕| 国产视频一区二区在线看| 亚洲精品粉嫩美女一区| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 中文字幕熟女人妻在线| 正在播放国产对白刺激| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产亚洲精品久久久久5区| 国产成人啪精品午夜网站| 熟女电影av网| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 妹子高潮喷水视频| 国产伦人伦偷精品视频| 久久久久久久久免费视频了| 丁香欧美五月| 男插女下体视频免费在线播放| 成人欧美大片| 日本 av在线| 黄片大片在线免费观看| 国产成+人综合+亚洲专区| 男女下面进入的视频免费午夜| 成人手机av| 中文字幕高清在线视频| 色综合亚洲欧美另类图片| 欧美成狂野欧美在线观看| netflix在线观看网站| avwww免费| 男插女下体视频免费在线播放| 男男h啪啪无遮挡| 丁香欧美五月| 一进一出抽搐动态| 国产精品免费视频内射| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲男人的天堂狠狠| 亚洲精品中文字幕在线视频| а√天堂www在线а√下载| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 成人三级黄色视频| 在线观看日韩欧美| 黄色成人免费大全| 亚洲人成77777在线视频| 午夜福利成人在线免费观看| 老熟妇仑乱视频hdxx| а√天堂www在线а√下载| 久久久久久久久免费视频了| 午夜福利欧美成人| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲色图av天堂| 国产精品一区二区三区四区久久| 老司机福利观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 久久久久久国产a免费观看| 性欧美人与动物交配| 在线观看免费视频日本深夜| 俄罗斯特黄特色一大片| 最近最新中文字幕大全电影3| 久久欧美精品欧美久久欧美| 这个男人来自地球电影免费观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 日韩欧美三级三区| 久久久久国产一级毛片高清牌| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 九九热线精品视视频播放| 成年免费大片在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 天堂av国产一区二区熟女人妻 | 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产精品综合久久久久久久免费| 十八禁网站免费在线| 国产成人精品久久二区二区91| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 一级毛片高清免费大全| 免费av毛片视频| 手机成人av网站| 欧美黑人精品巨大| 首页视频小说图片口味搜索| 18禁观看日本| 毛片女人毛片| 一二三四在线观看免费中文在| 国产三级黄色录像| 久久人妻av系列| 无遮挡黄片免费观看| 桃红色精品国产亚洲av| 精品福利观看| 精品国产乱码久久久久久男人| 最近最新中文字幕大全电影3| 2021天堂中文幕一二区在线观| 日韩大码丰满熟妇| 欧美激情久久久久久爽电影| 黄色视频不卡| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 久久亚洲精品不卡| 成年女人毛片免费观看观看9| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 91av网站免费观看| 麻豆一二三区av精品| 国产高清激情床上av| bbb黄色大片| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 草草在线视频免费看| 无人区码免费观看不卡| 欧美不卡视频在线免费观看 | 国产久久久一区二区三区| 欧美精品啪啪一区二区三区| 久久99热这里只有精品18| 久久性视频一级片| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产精品久久久人人做人人爽| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 老司机靠b影院| 男女视频在线观看网站免费 | 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲欧美日韩东京热| 国产av不卡久久| √禁漫天堂资源中文www| 国产精品影院久久| 麻豆成人午夜福利视频| av免费在线观看网站| a级毛片a级免费在线| xxx96com| 久久天堂一区二区三区四区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲男人的天堂狠狠| 午夜免费成人在线视频| 99精品久久久久人妻精品| 欧美精品亚洲一区二区| 精品免费久久久久久久清纯| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 一本综合久久免费| 久久久久久久午夜电影| 成人一区二区视频在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 最近最新中文字幕大全电影3| 五月伊人婷婷丁香| 成年免费大片在线观看| 日本五十路高清| 给我免费播放毛片高清在线观看| 黑人操中国人逼视频| 窝窝影院91人妻| 夜夜夜夜夜久久久久| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 日韩大码丰满熟妇| 国产精品乱码一区二三区的特点| 免费观看人在逋| 成人精品一区二区免费| 国产精品一及| 亚洲成人久久爱视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 嫁个100分男人电影在线观看| 成人一区二区视频在线观看| www日本黄色视频网| 后天国语完整版免费观看| 可以在线观看毛片的网站| 午夜福利欧美成人| 1024手机看黄色片| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 久久香蕉国产精品| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 中出人妻视频一区二区| 又紧又爽又黄一区二区| av有码第一页| 老司机福利观看| 久久久久久九九精品二区国产 | 18禁观看日本| 操出白浆在线播放| 日本免费一区二区三区高清不卡| 好男人在线观看高清免费视频| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 精品久久久久久久末码| 激情在线观看视频在线高清| 69av精品久久久久久| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲国产欧美人成| 99国产精品99久久久久| 深夜精品福利| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产精品一及| 两个人看的免费小视频| 欧美黑人欧美精品刺激| 欧美久久黑人一区二区| 亚洲,欧美精品.| 日韩欧美在线二视频| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产成人av教育| 久久久久久人人人人人| 99精品久久久久人妻精品| 不卡一级毛片| 毛片女人毛片| 久久婷婷成人综合色麻豆| av超薄肉色丝袜交足视频| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 欧美日韩乱码在线| 亚洲最大成人中文| 国产高清有码在线观看视频 | 天堂动漫精品| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 啦啦啦韩国在线观看视频| 久久精品91蜜桃| 亚洲国产欧美人成| 91麻豆av在线| 全区人妻精品视频| 亚洲av成人av| www国产在线视频色| 麻豆成人av在线观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 久久草成人影院| 一二三四在线观看免费中文在| 免费高清视频大片| 国产av又大| 一级毛片高清免费大全| 亚洲自拍偷在线| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 高清在线国产一区| 国产爱豆传媒在线观看 | 中文在线观看免费www的网站 | 麻豆国产av国片精品| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 在线观看日韩欧美| www.自偷自拍.com| 久久这里只有精品19| 又粗又爽又猛毛片免费看| 一进一出抽搐动态| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产91精品成人一区二区三区| 天堂影院成人在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 国产99久久九九免费精品| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲精品av麻豆狂野| av有码第一页| 国产熟女xx| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 怎么达到女性高潮| 美女午夜性视频免费| 欧美成狂野欧美在线观看| 欧美乱码精品一区二区三区| 日韩精品免费视频一区二区三区| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产亚洲精品一区二区www| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲男人的天堂狠狠| 亚洲乱码一区二区免费版| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲中文日韩欧美视频| 天天一区二区日本电影三级| 宅男免费午夜| 欧美极品一区二区三区四区| 18禁观看日本| 男人的好看免费观看在线视频 | 宅男免费午夜| 精品久久久久久成人av| 欧美av亚洲av综合av国产av| av福利片在线| 熟女电影av网| 性色av乱码一区二区三区2| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 午夜影院日韩av| tocl精华| 国产精品亚洲一级av第二区| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 成人精品一区二区免费| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 国产激情久久老熟女| 亚洲美女黄片视频| 欧美色欧美亚洲另类二区| 12—13女人毛片做爰片一| 又大又爽又粗| 手机成人av网站| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲中文日韩欧美视频| 哪里可以看免费的av片| 日韩大尺度精品在线看网址| 亚洲av美国av| 亚洲男人的天堂狠狠| 午夜福利高清视频| 这个男人来自地球电影免费观看| 日本熟妇午夜| 听说在线观看完整版免费高清| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产精品久久久人人做人人爽| 精品久久久久久成人av| 美女大奶头视频| 国产视频内射| 国产精品影院久久| tocl精华| 国产亚洲av高清不卡| 久久精品91无色码中文字幕| 国产精品乱码一区二三区的特点| 90打野战视频偷拍视频| 中文字幕久久专区| 宅男免费午夜| 色尼玛亚洲综合影院| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 国产97色在线日韩免费| 日韩免费av在线播放| 午夜福利在线观看吧| 日韩国内少妇激情av| 国产一区二区在线av高清观看| 一本精品99久久精品77| 99久久精品热视频| 中出人妻视频一区二区| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 在线观看日韩欧美| 国产亚洲av高清不卡| 免费人成视频x8x8入口观看| 好男人在线观看高清免费视频| 岛国在线观看网站| 听说在线观看完整版免费高清| 日日爽夜夜爽网站| 18禁国产床啪视频网站| 99久久综合精品五月天人人| av中文乱码字幕在线| 国产真实乱freesex| 婷婷精品国产亚洲av| 岛国在线免费视频观看| 欧美日本视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 久久人妻av系列| 国产免费av片在线观看野外av| 成人三级做爰电影| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 真人一进一出gif抽搐免费| 我的老师免费观看完整版| 久久精品91无色码中文字幕| 国语自产精品视频在线第100页| 成人午夜高清在线视频| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 一夜夜www| 国产精品亚洲美女久久久| 99在线人妻在线中文字幕| 成人一区二区视频在线观看| 黄色视频不卡| 波多野结衣巨乳人妻| av有码第一页| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲av成人av| 高潮久久久久久久久久久不卡| www.999成人在线观看| 午夜福利成人在线免费观看| av在线播放免费不卡| 人妻久久中文字幕网| 欧美在线黄色| 欧美另类亚洲清纯唯美| 日本 av在线| 国产激情久久老熟女| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产三级中文精品| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 久久精品人妻少妇| 国产成人av教育| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲成av人片免费观看| 国产午夜福利久久久久久| 中亚洲国语对白在线视频| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 中文字幕熟女人妻在线| 欧美日本视频| 久久中文字幕人妻熟女| 欧美日韩国产亚洲二区| 俄罗斯特黄特色一大片| 搡老熟女国产l中国老女人| av在线天堂中文字幕| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 中文字幕熟女人妻在线| 黑人操中国人逼视频| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲成av人片在线播放无| 黄色视频,在线免费观看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 国产亚洲av高清不卡| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 欧美一区二区精品小视频在线| 成人三级做爰电影| 久久精品影院6| 亚洲最大成人中文| 国产熟女午夜一区二区三区| 美女午夜性视频免费| 看免费av毛片| 日韩av在线大香蕉| 久久久久久人人人人人| 国产成人啪精品午夜网站| 久久精品综合一区二区三区| 免费无遮挡裸体视频| 一级作爱视频免费观看| 一区福利在线观看| 精品高清国产在线一区| 免费看十八禁软件| 成人国产一区最新在线观看| bbb黄色大片| 男人舔奶头视频| 在线视频色国产色| av福利片在线| 欧美三级亚洲精品| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 成人国产综合亚洲| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲性夜色夜夜综合| 欧美高清成人免费视频www| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 脱女人内裤的视频| 亚洲av美国av| 中文字幕最新亚洲高清| 黄色女人牲交| 久久久久精品国产欧美久久久| 丰满的人妻完整版| 精品久久久久久久久久久久久| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产激情久久老熟女| 国产主播在线观看一区二区| 午夜成年电影在线免费观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 人妻久久中文字幕网| 五月伊人婷婷丁香| 床上黄色一级片| 国产97色在线日韩免费| 欧美一区二区精品小视频在线| 中亚洲国语对白在线视频| 欧美精品啪啪一区二区三区| а√天堂www在线а√下载| 小说图片视频综合网站| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美最黄视频在线播放免费| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲真实伦在线观看| 在线播放国产精品三级| 国产精品九九99| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 真人一进一出gif抽搐免费| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 欧美久久黑人一区二区| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 午夜两性在线视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产成年人精品一区二区| 国产成+人综合+亚洲专区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲国产精品999在线| 九色国产91popny在线| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 久久香蕉精品热| 国产亚洲欧美98| 丰满人妻一区二区三区视频av | 久久香蕉国产精品| 亚洲av五月六月丁香网| 久久久国产成人免费| 国产一区在线观看成人免费| 国产99久久九九免费精品| 69av精品久久久久久| 日韩免费av在线播放| 日韩欧美在线二视频| 九九热线精品视视频播放| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| bbb黄色大片| 99久久精品热视频| 亚洲午夜理论影院| 俺也久久电影网| 亚洲成人精品中文字幕电影| 精品久久久久久久久久免费视频| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲国产高清在线一区二区三| e午夜精品久久久久久久| 日韩欧美三级三区|