菟仙海蚣膠囊治療少精、弱精癥的臨床與實(shí)驗(yàn)研究

徐瑛瑛 馬紅 張銀川 張春霞 劉喜平

菟仙海蚣膠囊治療少精、弱精癥的臨床與實(shí)驗(yàn)研究

徐瑛瑛 馬紅 張銀川 張春霞 劉喜平

目的觀(guān)察菟仙海蚣膠囊治療少精、弱精癥的療效并探討其作用機(jī)理。方法170例患者隨機(jī)分為兩組，治療組口服菟仙海蚣膠囊，對(duì)照組口服五子衍宗丸治療。觀(guān)察兩組療效，并通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀(guān)察菟仙海蚣膠囊對(duì)該模型大鼠睪丸及附睪指數(shù)、精子數(shù)量等指標(biāo)的影響。結(jié)果治療組療程療效優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.01)。實(shí)驗(yàn)表明菟仙海蚣膠囊各劑量組均可提高模型大鼠附睪指數(shù)(P＜0.01或P＜0.05)、增加精子數(shù)量和精子活率(P＜0.01或P＜0.05)、升高血清中的FSH及LH含量(P＜0.05)。結(jié)論菟仙海蚣膠囊療效明顯，其作用機(jī)理可能與提高附睪指數(shù)、促進(jìn)FSH、LH及TS的分泌有關(guān)。

不育;男性;少精子癥;菟仙海蚣膠囊

筆者于2009年1月至2011年3月對(duì)應(yīng)用菟仙海蚣膠囊的110例少精、弱精患者進(jìn)行了臨床觀(guān)察，同時(shí)對(duì)菟仙海蚣膠囊進(jìn)行了動(dòng)物試驗(yàn)研究，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本組170例均為我院門(mén)診患者，所有病例的診斷均參照《WHO人類(lèi)精液及精子-宮頸精液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊(cè)》［1］(4版)制定的精液數(shù)量參考值。納入與排除標(biāo)準(zhǔn)為，凡年齡在23～40歲，結(jié)婚同居2年以上，性生活正常，夫妻雙方未采取任何避孕措施，女方正常，男方精子檢查符合診斷標(biāo)準(zhǔn)，無(wú)嚴(yán)重軀體性疾病和其他生殖系統(tǒng)器質(zhì)性病變及感染性疾病者納入觀(guān)察對(duì)象;未按規(guī)定用藥、無(wú)法判斷療效或資料不全，影響療效或安全性者，均不納入標(biāo)準(zhǔn)。將臨床確診的170例患者采用數(shù)字表法隨機(jī)分為2組。治療組110例，年齡23～40歲，平均(30.0±20.0)歲，病程2～10年，平均(5.0±1.4)年。少精癥12例，少精弱精癥79例;弱精癥19例。對(duì)照組60例，年齡23～40歲，平均(29.0±1.80)歲;病程2～9年，平均(4.0±1.40)年;少精癥6例，少精弱精癥44例，弱精癥10例。2組年齡、病程、精液常規(guī)及合并癥等經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 治療組口服菟仙海蚣膠囊(由菟絲子 、仙靈脾、海馬、蜈蚣等組成，定西市婦幼保健院制劑，專(zhuān)利號(hào)201010125047，每粒 0.25 g，每克含生藥 3.14 g)。4 粒/次，3次/d，溫開(kāi)水送服;對(duì)照組口服五子衍宗丸(北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠(chǎng)，國(guó)藥準(zhǔn)字Z11020188):10粒/次，3次/d。療程均為3個(gè)月。

1.3 注意事項(xiàng) ①治療期間停止其他任何藥物，囑患者禁煙酒、忌高溫作業(yè)及熱水泡浴，并囑患者配偶幫助患者減輕壓力、增強(qiáng)信心。②肝腎功能不全者禁用，有過(guò)敏體質(zhì)或?qū)︳~(yú)蝦有過(guò)敏者慎用。

1.4 檢測(cè)方法 受檢者禁欲4～7 d后到本院取精室，以手淫體外排精方式采集精液于專(zhuān)用干燥消毒杯內(nèi)，置于25～37℃水浴箱內(nèi)，一小時(shí)內(nèi)液化后，由檢驗(yàn)科采用WLJY-9000型偉力彩色精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)檢查，l周后復(fù)查1次，取兩次精液分析結(jié)果的平均值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件包，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)Ridit分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，顯著性檢驗(yàn)t檢驗(yàn)。

1.6 結(jié)果

1.6.1 療效標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)WHO《不育夫婦標(biāo)準(zhǔn)檢查與診斷手冊(cè)》［2］并參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》［3］中有關(guān)療效標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)定。臨床治愈:少精癥治療后精子密度≥20×109/L，弱精癥精子活動(dòng)力a級(jí)加b級(jí)≥50%或a級(jí)≥25%，成活率1 h≥60%;或治療后女方懷孕。顯效:少精癥治療后精子密度提升≥50%，弱精癥精子活動(dòng)力a級(jí)加b級(jí)提升≥25%或a級(jí)提升≥12.5%，成活率1 h提升≥50%，但未達(dá)到正常指標(biāo)。有效:少精癥治療后精子密度提升≥15%，弱精癥治療后精子活力a加b級(jí)或a級(jí)提升≥5%，成活率1 h提升≥15%;無(wú)效:治療后精子密度、成活率＜15%及精子活力提升＜5%或無(wú)變化。

1.6.2 兩組療效比較 治療組110例，臨床治愈56例（50.90%），顯效33例(30.00%)，有效13例(11.81%)，無(wú)效8例(7.27%)，臨床治愈率50.90%，總效率92.73%;對(duì)照組60例，臨床治愈13例（21.67%），顯效17例(28.33%)，有效10例(16.67%)，無(wú)效 20例(33.33%)，臨床治愈率21.67%，總效率66.67%。2組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，提示治療組療效優(yōu)與對(duì)照組。

2 實(shí)驗(yàn)研究

2.1 材料與方法

2.1.1 動(dòng)物 SD大鼠，SPF級(jí)，雄性，體重280～320 g，由甘肅中醫(yī)學(xué)院科研實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施使用證SYXK(甘)2004～0006，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)SCXK(甘)2004～0006，發(fā)證單位甘肅省科技廳;動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，食固體SPF級(jí)飼料，由北京市科奧協(xié)力飼料有限公司提供，合格證號(hào):京動(dòng)許字(2000)第015號(hào)。

3 討論

菟仙海蚣膠囊中菟絲子具有補(bǔ)腎養(yǎng)肝，益精固澀的作用，為君藥，仙靈脾補(bǔ)腎壯陽(yáng)，仙茅補(bǔ)腎陽(yáng)并能助脾胃運(yùn)化，增進(jìn)食欲，二藥為臣藥?，F(xiàn)代研究表明［5］，補(bǔ)腎壯陽(yáng)藥有類(lèi)激素樣作用，含鋅量最高，能促進(jìn)睪丸發(fā)育，興奮性機(jī)能，促進(jìn)精液分泌和精子質(zhì)量，對(duì)改善睪丸曲細(xì)精管及間質(zhì)細(xì)胞的損害均有一定效果。海馬，具有補(bǔ)腎壯陽(yáng)，散結(jié)消腫，調(diào)和氣血的功能，為佐藥;蜈蚣，熄風(fēng)止痙，解毒散結(jié)，通絡(luò)止痛，為使藥。全方配伍具有滋肝補(bǔ)腎，益精壯陽(yáng)，活血通絡(luò)，疏通精道，健脾暖胃之效，使精出有源、精行通暢。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，菟仙海蚣膠囊大劑量能夠明顯增加生精障礙模型大鼠的精子活率和精子數(shù)量數(shù)，與模型組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且中、小劑量也能明顯升高該模型的精子活率。

從本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果得知:模型組大鼠的FSH、LH、TS均較空白對(duì)照組為低，表明在本實(shí)驗(yàn)中腺嘌呤能夠抑制以上激素的分泌或合成，其中菟仙海蚣膠囊大劑量能夠明顯升高該模型大鼠血清中的FSH及LH含量，在促進(jìn)生精、提高精液質(zhì)量等方面顯示出良好的療效。

［1］世界衛(wèi)生組織．WHO人類(lèi)精液及精子-宮頸粘液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊(cè).第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2001:5．

［2］世界衛(wèi)生組織.不育夫婦標(biāo)準(zhǔn)檢查與診斷手冊(cè).北京:科學(xué)出版社，1994:19．

［3］中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則第1輯，1993:192．

［4］楊阿民，李曰慶，李海松，等.補(bǔ)腎生精丸對(duì)腺嘌呤所致生精細(xì)胞損傷模型大鼠的干預(yù)作用.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)(中醫(yī)臨床版)，2006，13(3):1-3．

［5］王琦.中醫(yī)生殖醫(yī)學(xué)的歷史現(xiàn)狀與展望.中國(guó)性科學(xué)，2005，14(4):3-7．

743000 甘肅省定西市婦幼保健院(徐瑛瑛 張銀川張春霞);定西市安定區(qū)疾控中心(馬紅);甘肅中醫(yī)學(xué)院(劉喜平)

2.1.2 藥品、試劑與儀器 菟仙海蚣膠囊由菟絲子、淫羊藿、海馬等五味藥物按一定比例組成，(定西市婦幼保健院制劑，專(zhuān)利號(hào)201010125047.2)，0.25 g/粒，每克含生藥 3.14 g，實(shí)驗(yàn)時(shí)用生理鹽水配成相應(yīng)濃度的溶液。五子衍宗丸(北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠(chǎng)，國(guó)藥準(zhǔn)字Z11020188);羧甲基纖維素鈉(河北省文安縣盛源纖維素廠(chǎng)，批號(hào)20090227);腺嘌呤(洛陽(yáng)德勝化工有限公司，批號(hào)20080911);促卵泡激素FSH、促黃體生成素LH、睪酮T放免試劑盒(北京福瑞生物工程公司，批號(hào):20090612)。儀器:偉力精子檢測(cè)系統(tǒng)(WL-9000型，北京偉力新世紀(jì)科技發(fā)展有限公司);全自動(dòng)生化分析儀(ALCYON300美國(guó)雅培);全封閉組織脫水機(jī)(Tissue-Tek?VIPTM5Jr，日本櫻花);顯微鏡(BH-2，日本OLYMPUS);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(R-200，瑞士BUCHI);電子天平(BL150，北京Sartorius)。

2.1.3 動(dòng)物分組與給藥方法 參考文獻(xiàn)［4］的方法，3個(gè)月齡SD雄性大鼠，280～320 g，72只，自由進(jìn)食飲水，適應(yīng)3～4 d后，將其隨機(jī)分為6組，即空白組、模型組、五子衍宗丸對(duì)照組，大劑量組、中劑量組和小劑量組，每組12只，分籠飼養(yǎng)，每籠6只。空白對(duì)照組每天灌胃0.5%羧甲基纖維素鈉10 μl/g;模型對(duì)照組灌胃0.5%羧甲基纖維素鈉5 μl/g，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混懸溶液(250 μg/g)5 μl/g;五子衍宗丸組灌胃0.5%羧甲基纖維素鈉5 μl/g，40 min后灌胃24%的五子衍宗丸溶液5 μl/g;菟仙海蚣膠囊大劑量組每天灌胃中藥浸膏5.4 g生藥/kg，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混懸溶液(250 μg/g)5 μl/g;中劑量組每天灌胃中藥浸膏2.7 g生藥/kg，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混懸溶液(250 mg/kg)5 μl/g;小劑量組每天灌胃中藥浸膏1.35 g生藥/kg，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混懸溶液(250 μg/g)5 μl/g。1次/d，實(shí)驗(yàn)總持續(xù)時(shí)間均為40d，實(shí)驗(yàn)期間每7 d稱(chēng)體質(zhì)量1次，調(diào)整給藥量，每天每100 g體質(zhì)量大鼠的給藥總量為1 ml。

2.1.4 檢測(cè)指標(biāo) ①各組大鼠睪丸、附睪指數(shù)及精子數(shù)量、精子活率的變。②對(duì)生精細(xì)胞損傷模型大鼠生殖內(nèi)分泌激素FSH、LH及T的影響。

2.2 結(jié)果

2.2.1 各組大鼠睪丸、附睪指數(shù)及精子數(shù)量、精子活率的變化結(jié)果見(jiàn)表1。模型組睪丸指數(shù)與空白組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)，附睪指數(shù)較空白組明顯降低(P＜0.01)，精子活率和精子數(shù)量均明顯降低(P＜0.01);菟仙海蚣膠囊各劑量組及陽(yáng)性對(duì)照組睪丸指數(shù)無(wú)明顯變化、但可提高附睪指數(shù)(P＜0.01或P＜0.05)、各劑量組均可增加精子數(shù)量和精子活率(P＜0.01或P＜0.05)。

2.2.2 模型大鼠生殖內(nèi)分泌激素的影響 結(jié)果見(jiàn)表2。模型組大鼠的FSH、LH、TS均較空白對(duì)照組為低(P＜0.01)，表明在本實(shí)驗(yàn)中腺嘌呤能夠抑制以上激素的分泌或合成，其中菟仙海蚣膠囊大劑量能夠明顯升高該模型大鼠血清中的FSH及LH含量(P＜0.05)。

表1 各組大鼠睪丸、附睪指數(shù)及精子數(shù)量、精子活率的變化(x ± s，n=12)

注:與空白組比較▲P＜0.05，▲▲P＜0.01，與模型組比較※P＜0.05，※※P＜0.01

組別 劑量(g/kg) 睪丸指數(shù)(g/kg) 附睪指數(shù)(g/kg) 精子數(shù)量(109L) 精子活率(%)正常對(duì)照組0.65±0.036 0.28±0.022 20.59±1.77 92.9±2.9模型對(duì)照組 0.25 0.62±0.038 0.20±0.021▲▲12.65±1.53▲▲72.7±6.5▲▲五子衍宗組 1.20 0.61±0.025 0.25±0.027※13.80±1.90 78.6±5.7※菟仙海蚣大 5.40 0.63±0.028 0.29±0.019※※19.63±1.83※※90.0±6.8※※菟仙海蚣中 2.70 0.63±0.041 0.27±0.032※※16.89±2.11※※89.7±5.3※※菟仙海蚣小 1.35 0.62±0.027 0.26±0.028※15.73±2.23※78.4±6.1-※

表2 菟仙海蚣膠囊對(duì)模型大鼠生精細(xì)胞損傷模型大鼠內(nèi)分泌激素的影響(±s)

注:與空白組比較▲P＜0.05，▲▲P＜0.01，與模型組比較※P＜0.05，※※P＜0.01

組別 劑量(g/kg) 例數(shù) TS(nmol/L) LH(mIU/L) FSH(mIU/L)12 9.43±1.44 1.15±0.19 1.52±0.12模型組 0.25 11 7.66±1.55▲▲0.73±0.13▲▲1.04±0.13▲▲五子衍宗丸組 1.2 12 8.78±1.39※0.83±0.16※1.36±10.21※※大劑量組 5.4 12 9.03±1.16※0.87±0.14※1.05±0.20中劑量組 2.7 12 7.05±0.88 0.74±0.13 1.05±0.13小劑量組空白組-1.35 12 7.12±0.92 0.75±0.21 1.04±0.11