蒿甲醚膠囊的制備及其含量研究

鐘 飛，鮑光明，黨明珠

（1.荊州理工職業(yè)學(xué)院 化學(xué)工程系，湖北 荊州 434000；2.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物科技學(xué)院，江西 南昌 330045；3.沙市第一中學(xué)，湖北 荊州 434000）

蒿甲醚是由中國科學(xué)院上海藥物研究所與昆明制藥廠合作研制成功的抗瘧藥，該藥是世衛(wèi)組織推薦的抗瘧藥物[1].目前，該藥的注射劑、膠丸劑、膠囊劑、片劑型等多種劑型已在國內(nèi)上市[2-5].蒿甲醚膠囊上市多年，但是并沒有關(guān)于蒿甲醚膠囊處方的的報(bào)道，本文摸索出一套工藝簡單，成本低廉，溶出度好的蒿甲醚膠囊處方，并對制劑進(jìn)行了質(zhì)量考察.

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Waters 2695高效液相色譜儀（北京京科瑞達(dá)科技有限公司）；Varian Cary 100 Conc紫外-可見分光光度計(jì)（美國Varian公司）；831KF水分測定儀（上海萬捷科技有限公司）；PB-20型酸度計(jì)（北京曼科科技有限公司）.

1.2 試劑

蒿甲醚原料藥來源于海南中和多肽藥物研發(fā)有限公司（批號：021101、021102、021103），蒿甲醚對照品來源于中國藥品生物制品檢定所（批號：0271-9701），蒿甲醚被仿品來源于昆明制藥集團(tuán)股份有限公司（批號：02076202），糖粉、潤滑劑、淀粉、十二烷基硫酸鈉來源于上海昌為醫(yī)藥輔料技術(shù)有限公司.

2 處方與制備

蒿甲醚是水難溶性藥物，結(jié)合輔料的性質(zhì)及成本因素的考慮，將蒿甲醚膠囊的處方確定為：稀釋劑（填充劑）：糖粉、淀粉；潤滑劑：聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉.

2.1 處方的篩選

2.1.1 填充劑及其用量的選擇

選擇淀粉和糖粉為填充劑，是因?yàn)榈矸酆吞欠鄢杀镜汀⑿再|(zhì)穩(wěn)定，與多數(shù)藥物不反應(yīng)，并且淀粉是良好的稀釋劑和崩解劑，能使疏水性藥物很快地崩解[6].結(jié)合已上市產(chǎn)品，設(shè)定蒿甲醚的規(guī)格為40 mg，則原料藥含量為40 mg，通常情況下，輔料的用量是主藥的5倍，所以選擇填充劑用量為200 mg；潤滑劑的量一般約為主料的1/20，所以潤滑劑的用量確定為2 mg，因此設(shè)計(jì)每粒膠囊裝量為242 mg左右，設(shè)計(jì)以下四個(gè)處方方案（見表1），按照相同的制備工藝填充膠囊，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果（見表2）選擇填充劑最佳配比和用量.

表1 填充劑用量的篩選四個(gè)處方方案Tab.1 Four prescriptions approach of filler content

表2 篩選填充劑用量的檢驗(yàn)結(jié)果Tab.2 The screening results of filler content

試驗(yàn)結(jié)果表明：在處方4中，當(dāng)膠囊中淀粉和糖粉用量的比例為6.5∶1時(shí)，膠囊的裝量差異、崩解度和溶出度都比較好.處方1中淀粉為唯一的稀釋劑時(shí)，膠囊的溶出度反而降低.處方2只用糖粉做填充劑，膠囊的裝量差異不符合要求；處方3淀粉與糖粉的用量比例為1∶1時(shí)，膠囊的崩解度和溶出度都沒有處方4好.根據(jù)以上試驗(yàn)結(jié)果，確定處方中填充劑：淀粉為173.3 g，糖粉為26.7 g.

2.1.2 潤滑劑及其用量的選擇

從表2的試驗(yàn)結(jié)果可以看出，處方4雖然比處方1、處方2和處方3要好，但溶出度依然不是很好.因?yàn)檩锛酌阉幬锏氖杷?，需要選擇促進(jìn)蒿甲醚藥物溶出和崩解的水溶性潤滑劑，所以我們對處方進(jìn)行了相應(yīng)的調(diào)整，分別選十二烷基硫酸鈉、滑石粉、PEG作潤滑劑，試驗(yàn)結(jié)果見表3.

表3 潤滑劑選擇及其膠囊檢驗(yàn)結(jié)果Tab.3 Selection of lubricants and the capsule determination result

結(jié)果表明：處方2用滑石粉作潤滑劑，裝量差異很大；處方3用PEG作潤滑劑，溶出度不及處方1好；處方1用十二烷基硫酸鈉作潤滑劑，由于十二烷基硫酸鈉水溶性好，其加入可以增加藥粉的流動性，并且還能改善蒿甲醚藥物的疏水性，有利于蒿甲醚膠囊的崩解和溶出，所以選擇用十二烷基硫酸鈉作蒿甲醚藥物的潤滑劑.

2.1.3 主藥與輔料相互作用的試驗(yàn)

按處方量確定的比例分別取糖粉、淀粉、十二烷基硫酸鈉和蒿甲醚，參照中國藥典蒿甲醚膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[7]，結(jié)合文獻(xiàn)[8]的方法測定蒿甲醚膠囊含量，同時(shí)進(jìn)行空白對照試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果見表4.

表4 主藥與輔料相互作用試驗(yàn)Tab.4 Interaction test between principal agent and supplements

2.2 工藝篩選

2.2.1 填充膠囊環(huán)境濕度和溫度的確定

蒿甲醚原料藥的高濕試驗(yàn)顯示，蒿甲醚在高濕情況下性狀、含量及吸濕性均無明顯變化.而且蒿甲醚膠囊所需的輔料：淀粉、糖粉、十二烷基硫酸鈉的吸濕性也較小，可滿足濕度和溫度的要求.所以膠囊劑填充生產(chǎn)環(huán)境的相對濕度應(yīng)控制在45～60%左右，溫度為18～26℃.

在以上確定的處方和工藝條件下，我們小試生產(chǎn)三批樣品，試驗(yàn)結(jié)果表明，在濕度為45～60%環(huán)境下裝膠囊，其中間體（混合干粉）的流動性、水分和含量；半成品的裝量差異、溶出度、含量均符合要求，結(jié)果見表5.

表5 環(huán)境濕度考察試驗(yàn)Tab.5 Review experiment of ambient humidity

因此，處方（每粒計(jì)）確定為：40 mg蒿甲醚，173.3 mg淀粉，26.7 mg糖粉，2.0 mgPEG為最佳配方的蒿甲醚膠囊.

2.3 制備

采用上述處方，根據(jù)文獻(xiàn)[8]工藝制備蒿甲醚膠囊3批（批號：021101、021102、021103）.

3 質(zhì)量考察

3.1 性狀

完整硬膠囊，內(nèi)容物均為白色粉末.

3.2 鑒別

3.2.1 顯色反應(yīng)

取本品內(nèi)容物適量（約相當(dāng)于蒿甲醚80 mg），加無水乙醇10 mL溶解，濾過，取濾液，加碘化鉀0.1 g.振搖（熱水加熱），溶液均顯淡黃色.

取本品內(nèi)容物適量（約相當(dāng)于蒿甲醚80 mg），加無水乙醇10 mL溶解，濾過，取濾液數(shù)滴點(diǎn)于白瓷板上，加1%香草醛硫酸溶液1滴顯桃紅色.

3.2.2 薄層鑒別

取本品、被仿品內(nèi)容物和蒿甲醚對照品適量，各加氯仿制成每1 mL中含蒿甲醚10 mg的溶液，吸取上述溶液各5 μL.點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯－乙酸乙酯（9∶1）為展開劑，展開后，取出，晾干后，在碘蒸氣中顯色.試驗(yàn)結(jié)果表明，三批樣品和被仿品溶液所顯主斑點(diǎn)的位置與顏色與對照品溶液的主斑點(diǎn)相同.

3.3 檢查

參照中華人民共和國藥典2005年版標(biāo)準(zhǔn)：蒿甲醚膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[9].

3.3.1 裝量差異

取本品20粒，分別精密稱定重量后，傾出內(nèi)容物（不得損失囊殼），用小刷或其他適宜用具把膠囊殼拭凈，再分別精密稱定膠囊殼重量，求出每粒內(nèi)容物的裝量與平均裝量.試驗(yàn)結(jié)果見表6.

表6 裝量差異試驗(yàn)結(jié)果Tab.6 Test results of the gross deviation

試驗(yàn)結(jié)果可以看出，三批樣品的裝量差異均控制在±10%之間，符合中華人民共和國藥典膠囊劑的裝量要求.

3.3.2 溶出度

取樣品及被仿品各六粒，按照溶出度測定法（中華人民共和國藥典2000年版二部附錄X C第二法）分別測定對照品溶液與供試品的溶出度.按照分光光度法（中華人民共和國藥典2000年版二部附錄ⅣA），在254 nm的波長處分別測定對照品溶液與供試品的吸收度，并計(jì)算出每粒的溶出量.

表7 溶出度試驗(yàn)結(jié)果Tab.7 Test results of dissolution

試驗(yàn)結(jié)果表明，三批樣品及被仿品的溶出度均大于標(biāo)示量的65%.

3.3.3 微生物限度

取本品和被仿品各10 g，依法檢查微生物限度（中國藥典2000年版二部附錄Ⅷ）.

3.3.3.1 細(xì)菌與霉菌的檢查

儀器與實(shí)驗(yàn)用品：玻璃器皿：量筒、三角瓶、移液管（1mL、10 mL）、培養(yǎng)皿均用牛皮紙包扎嚴(yán)密，160℃干烤2小時(shí)滅菌；生化培養(yǎng)箱、酒精燈.

（1）配制培養(yǎng)基，細(xì)菌培養(yǎng)一般采用商品干燥培養(yǎng)基，臨用時(shí)按照使用說明書進(jìn)行配制.細(xì)菌使用肉湯瓊脂；霉菌使用虎紅瓊脂.121℃20 min高壓滅菌備用.

（2）配制稀釋液：0.9%氯化鈉溶液121℃20 min高壓滅菌備用.并按照中華人民共和國藥典2000年版二部附錄Ⅷ的微生物限度檢查法的操作進(jìn)行檢查.

3.3.3.2 大腸桿菌的檢查

培養(yǎng)基：膽鹽乳糖培養(yǎng)基（市售品）按說明書配制.配制完成后分裝于錐形瓶中，密閉，牛皮紙裹緊，121℃、20 min高壓滅菌，備用；大腸桿菌對照液：取大腸桿菌的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物用白金耳接種至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基內(nèi)，培養(yǎng)18～24小時(shí)，稀釋至1∶106，對照菌的加入量為50～100個(gè)；150 mL三角燒瓶、10 ml量筒、1ml移液管均需150℃干烤2小時(shí)滅菌；生化培養(yǎng)箱、顯微鏡.

操作法：（1）試驗(yàn)前無菌室用紫外燈照射1 h以上.

（2）取膽鹽乳糖培養(yǎng)管3份，每份各100 mL，2份分別加入10 mL工藝用水樣品，其中1份加入對照菌液作陽性對照，第3份作空白對照，培養(yǎng)18～24 h，空白對照應(yīng)無菌生長.另外2份培養(yǎng)物劃線接種于曙紅亞甲藍(lán)瓊脂平板或麥康凱瓊脂平板，培養(yǎng)18～24 h.根據(jù)陽性對照的平板呈陽性菌落時(shí)，供試品的平板無菌落生長來作為未檢出大腸桿菌的依據(jù).

3.3.3.3 微生物限度檢測結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果見表8.

表8 微生物限度試驗(yàn)結(jié)果Tab.8 Test results of animalcule limit inspection

結(jié)果表明，三批樣品和被仿品的微生物限度均符合要求.

3.3.4 溶液的澄清度與顏色

取本品5瓶，分別用10 mL水溶解，依法（中國藥典2005年版二部附錄IX B）測定.試驗(yàn)結(jié)果表明，本品溶液為澄清無色.

4 結(jié)論

十二烷基硫酸鈉水溶性好，可以增加藥粉的流動性，改善蒿甲醚藥物的疏水性，有利于蒿甲醚膠囊的崩解和溶出.但十二烷基硫酸鈉溶于水后會有少許泡沫，所以在處方中用量不宜過多.

本處方制成的蒿甲醚膠囊工藝較簡單，質(zhì)量要求符合其國家標(biāo)準(zhǔn)，適合工業(yè)化生產(chǎn).

[1]陳亮維,王存志,吳慶偉.蒿甲醚的晶體結(jié)構(gòu)分析[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜質(zhì),2000,31(10)：450-452.

[2]王子幼,陳祖芬.高效液相色譜法測定蒿甲醚膠囊的含量[J].藥物分析雜志,2000,20(3)：178-189.

[3]張志榮,胡海燕,洪諍,等.蒿甲醚緩釋片在狗體內(nèi)的藥代動力學(xué)[J].華西藥學(xué)雜志,2000,15(5)：335-37.

[4]劉志根,王凱元.蒿甲醚治療惡性瘧疾的療效觀[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,1997,7(8)：58-59.

[5]周琳,張小松.HPLC測定蒿甲醚膠丸的含量[J].華西藥學(xué)雜志,2005,20(4)：341-343.

[6]劉郁,全紅梅,劉連新.中藥分散片及工藝研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2005,16(6)：538-540.

[7]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：第二部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2000：954.

[8]鮑光明,蔣曉慧,田敏卿,等.蒿甲醚膠囊的制備[J].海南師范大學(xué)學(xué)報(bào),自然科學(xué)版：2007,20(1)：60-62.

[9]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：第二部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2005：800.