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    不同來源的精子行ICSI妊娠結(jié)局分析

    2012-10-12 10:27:52汪李虎易艷紅楊少芬張曦倩黃郁強黃志承
    關(guān)鍵詞:受精率梗阻性睪丸

    汪李虎,易艷紅,楊少芬,張曦倩,黃郁強,黃志承

    (廣東省婦幼保健院,廣東 廣州 510010)

    單純男方因素大約占不孕不育的1/3,包括精子數(shù)量和質(zhì)量異常、無精子癥、射精障礙以及性功能障礙等。過去,對于重度少弱畸精子癥和無精子癥患者,供精是過去唯一的治療方案。隨著ICSI的出現(xiàn),使用丈夫的精液精子、睪丸精子和附睪精子生育自己后代已成為可能。精液重度少弱畸精子癥(OATS)和梗阻性無精子癥(OA)患者行ICSI的受精率和臨床妊娠率已得到認(rèn)可[1]。多報道NOA患者的受精率和妊娠率都不受影響[2]。本文采用睪丸精子抽吸術(shù)(TESA)獲取OA和NOA患者的睪丸精子,探討精液精子與不同病因的睪丸精子尤其NOA患者睪丸精子行ICSI的受精率和妊娠結(jié)局的差異。

    1 材料與方法

    1.1 研究對象

    選擇2007至2010年在本院就診的934對夫婦行ICSI,因只有部分夫妻進行兩個或多個周期或冷凍周期,為了結(jié)果的準(zhǔn)確性,本文只統(tǒng)計每隊夫婦的第一個促排周期,分為3組:精液精子組:用重度少弱畸精子癥患者精液精子ICSI 619對夫婦;OA睪丸精子組:用OA患者的睪丸精子268 ICSI對夫婦;NOA睪丸精子組:用NOA患者的睪丸精子ICS I47對夫婦。根據(jù)臨床現(xiàn)病史、既往史、睪丸體積和質(zhì)地、性激素、超聲波等檢查,確定是OA還是NOA。觀察兩組男女雙方年齡、Gn平均用量、平均獲卵數(shù)、正常受精卵子數(shù)、種植率和臨床妊娠率等指標(biāo)。

    1.2 方法

    1.2.1 睪丸精子抽吸和ICSI 常規(guī)消毒,固定好待穿刺的睪丸,將固定在穿刺架的穿刺針刺入睪丸,取2~3個不同方位,采用Shulman等報道的睪丸精子抽吸術(shù)獲取睪網(wǎng)液和少許曲細(xì)精管[3],注入HBE培養(yǎng)液,混勻備用。取微量混懸液置于高倍顯微鏡下觀察精子,盡量選擇活動精子,無活動精子則選擇形態(tài)正常的成熟精子,取卵后4~6 h行ICSI。

    1.2.2 超促排卵方案 采用本院常規(guī)的超促排GnRha/FSH長方案,B超和血清E2水平監(jiān)測卵泡發(fā)育,于注射HCG 35~36 h后,經(jīng)陰道取卵。

    1.2.3 受精、卵裂觀察和妊娠結(jié)局 ICSI后18~20 h后觀察受精情況,2PN受精卵培養(yǎng)至第3日,根據(jù)細(xì)胞數(shù)目和無核碎片量評估胚胎,優(yōu)質(zhì)胚胎為5~8細(xì)胞、碎片少于20%。挑選正常受精后發(fā)育的胚胎行宮腔內(nèi)胚胎移植,14 d后查血清β-HCG以判斷是否妊娠,移植后4周B超檢查,有宮內(nèi)孕囊、胚芽及胎心搏動者為臨床妊娠。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

    使用SPSS 15.0統(tǒng)計軟件進行分析,均數(shù)的比較采用t檢驗,率的比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 一般情況比較

    從2007年1月至2010年12月我院共進行了934對夫婦行ICSI,3組男方或者女方入組年齡沒有顯著性差異。

    2.2 促排和受精比較

    3組行ICSI,Gn平均用量相當(dāng),所獲得的平均獲卵數(shù)和平均加精卵子數(shù)無差異。精液精子組與OA睪丸精子組之間正常受精卵子數(shù)相當(dāng),但NOA睪丸精子組的正常受精卵子數(shù)均明顯低于前兩組(6.36±3.31vs8.80±6.35,6.36±3.31 vs9.17±5.51,P均<0.05)。

    2.3 妊娠結(jié)局

    在兩組平均移植胚胎數(shù)相當(dāng)?shù)那闆r下,精液精子組與OA睪丸精子組之間種植率無明顯差異。但NOA睪丸精子組的種植率均低于前兩組。精液精子組、OA睪丸精子組妊娠率無明顯差異,NOA睪丸精子組的臨床妊娠率均低于精液精子組、OA睪丸精子組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。

    3 討論

    外科手術(shù)獲得的睪丸精子包括OA和NOA患者以及精液精子行ICSI的結(jié)局有無差異。利用睪丸精子行ICSI的受精率和臨床妊娠率,國外文獻報道不盡一致[2]。我們的研究結(jié)果顯示:采用梗阻性無精子癥患者的睪丸精子行ICSI與精液精子行ICSI的受精率、種植率和臨床妊娠率均相似;非梗阻性無精子癥患者用睪丸精子行ICSI的受精率、種植率和臨床妊娠率均顯著低于OATS的精液精子和梗阻性無精子癥患者的睪丸精子,與國外近期報道一致[4]。作者認(rèn)為梗阻性無精子癥患者的睪丸精子已完成減數(shù)分裂,成為已攜帶父源行遺傳物質(zhì)的單倍體和受精卵形成紡錘體所必需的父源性中心粒,因而,梗阻性無精子癥患者睪丸精子已具備卵子受精以及進一步發(fā)育的能力。本文的結(jié)果佐證了以上觀點。TESA結(jié)合ICSI可以治療梗阻性無精子癥、輸精管缺如、死精子癥、不射精癥和陰莖勃起功能障礙等最嚴(yán)重男性因素的不育癥,有較高的受精率和臨床妊娠率,是首選的一種輔助生殖技術(shù)[5]。

    國外資料顯示,非梗阻性無精子癥患者的精子具有更高的染色體異常[6,7]。特異性生精功能障礙的無精子癥患者發(fā)現(xiàn)染色體異常的占7%[8]。用非梗阻性無精子癥患者的睪丸精子行ICSI后發(fā)育的胚胎也具有更多的嵌合型染色體異常[9]。而這種染色體異??梢园l(fā)育至囊胚并能著床,但不能產(chǎn)生活胎[10]。作者認(rèn)為用非梗阻性無精子癥患者的睪丸精子行ICSI前務(wù)必要向患者夫婦說明其流產(chǎn)率較高。

    關(guān)于ICSI如何選擇睪丸精子,Ramos等采用計算機細(xì)胞核測量圖像分析系統(tǒng)來確定ICSI精子選擇標(biāo)準(zhǔn),認(rèn)為僅僅從OA病人標(biāo)本選擇濃縮細(xì)胞核精子是不夠的[11]。我們首選形態(tài)正常的活動精子,如沒有發(fā)現(xiàn)活動精子,可以選擇大小正常、形態(tài)正常尤其頭部正常的不動精子。

    表1 不同來源的精子行ICSI結(jié)果比較()

    表1 不同來源的精子行ICSI結(jié)果比較()

    注:(1)與(2)相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義用*表示;(1)與(3)相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義用★表示;(2)與(3)相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義用▲表示。

    項目 精液精子(1) OA睪丸精子(2) NOA睪丸精子(3)男方獲精年齡(歲) 34.25±5.37 33.45±6.37 33.94±7.40女方取卵年齡(歲) 30.72±4.33 29.73±4.29 30.02±4.16促排周期數(shù) 619 268 47 Gn平均總量(單位) 1 829.11±645.17 1 827.72±702.10 1 802.08±625.89平均獲卵數(shù) 14.38±7.80 14.15±7.46 14.09±9.40平均加精卵子數(shù) 12.47±7.41 12.01±6.61 11.77±7.70平均正常受精卵子數(shù) 8.80±6.35 9.17±5.51 6.36±3.31★▲移植周期數(shù) 569 237 42平均移植胚胎數(shù) 2.31±0.59 2.19±0.50 2.21±0.57種植率(%) 28.01(368/1314) 25.05(130/519) 17.20(16/93)★▲臨床妊娠率(%)44.99(256/569)47.26(112/237)28.76(16/42)★▲

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