• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    北京地區(qū)發(fā)現(xiàn)番茄斑萎病毒

    2012-09-28 01:44:20吳青君徐寶云王少麗張友軍
    植物保護(hù) 2012年6期
    關(guān)鍵詞:西花薊馬紙條

    李 飛, 吳青君, 徐寶云, 謝 文, 王少麗, 張友軍

    (中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所,北京 100081)

    西花薊馬[Frankliniella occidentalis (Pergande)]是世界性的、園藝作物上最重要的害蟲之一[1],2003年在我國首次發(fā)現(xiàn)并迅速上升為保護(hù)地蔬菜和花卉上的主要害蟲之一[2]。西花薊馬除可以直接取食造成危害外,還能夠傳播多種植物病毒,西花薊馬是番茄斑點(diǎn)萎蔫病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)最有效的傳播媒介,其傳播病毒病造成的危害損失遠(yuǎn)大于其本身的危害。番茄斑萎病毒屬于布尼亞病毒科(Bunyaviridae)番茄斑萎病毒屬(Tospovirus),于1915年由Brittlebank首次在澳大

    利亞發(fā)現(xiàn),現(xiàn)已在世界上多個(gè)國家和地區(qū)廣泛分布,侵染煙草、大豆、番茄、花生、辣椒、萵苣、菊花等作物及多種雜草等900多種植物,是全世界10種危害性最大的植物病毒之一[3],在我國被列為進(jìn)境植物檢疫的危險(xiǎn)性有害生物。雖然我國早在1984年就從花生上分離到 TSWV[4],在四川曬煙上也發(fā)現(xiàn)TSWV的危害[5],但其后的10多年來并未廣泛流行,因此未有進(jìn)一步的研究。近年來,在西花薊馬發(fā)生重災(zāi)區(qū)的云南,不斷在花卉和煙草上檢測(cè)到番茄斑萎病毒屬病毒,并呈迅速蔓延之勢(shì),對(duì)云南的煙草和花卉產(chǎn)業(yè)已構(gòu)成巨大威脅[6-7]。

    2012年5 月,筆者在田間調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)西花薊馬為害嚴(yán)重的辣椒上出現(xiàn)枯斑、黃色環(huán)狀紋等疑似番茄斑萎病毒病的癥狀,作者對(duì)海淀區(qū)疑似植物樣品和西花薊馬發(fā)生嚴(yán)重的昌平地區(qū)的植物樣品進(jìn)行了鑒定,并測(cè)定了植物上發(fā)生的西花薊馬是否攜帶番茄斑萎病毒。

    1 材料與方法

    1.1 樣品采集

    辣椒葉片采于海淀區(qū)的2個(gè)日光溫室和1個(gè)連棟玻璃溫室內(nèi),葉片表現(xiàn)褪綠環(huán)斑、壞死斑、同心環(huán)癥狀,采回實(shí)驗(yàn)室立即鑒定。茄子樣品采于昌平的日光溫室,葉片表現(xiàn)黃綠不均,成斑駁狀,上面有薊馬幼蟲及為害狀。分別從兩種作物上采集50頭左右薊馬,首先鑒定是否為西花薊馬,然后檢測(cè)是否帶毒。

    1.2 主要試劑

    Trizol總RNA提取試劑盒,天根生化科技(北京)有限公司;TaKaRa RT-PCR試劑盒,寶生物工程(大連)有限公司;2×Taq 10Master Mix,北京奧賽博科技發(fā)展有限公司;蛋白酶K,天根生化科技(北京)有限公司;樹脂,Sigma公司;TSWV快速檢測(cè)試紙條,安德珍生物技術(shù)(北京)有限公司。

    1.3 薊馬種類的鑒定

    薊馬基因組DNA的提取參照White等的方法并稍加改進(jìn)[8]。將單頭西花薊馬置于滴有3μL蛋白酶K parafilm膜上,以200μL PCR管底部作為勻漿器充分研磨,勻漿液移入200μL PCR管,然后加入20μL的樹脂,混勻之后置于37℃恒溫水浴1 h,每隔15min振蕩1次,然后金屬浴96℃10min,于-20℃保存?zhèn)溆谩N骰ㄋE馬的鑒定參照孟祥欽SCAR分子檢測(cè)技術(shù)[9],上游引物堿基序列為:5′-GAAACTACTATTGTTTGTGAGCTG-3′,下游引物 堿 基 序 列 為:5′-AAGAAACTAAC-GTGAAGGATACTC-3′。

    1.4 TSWV快速試紙條檢測(cè)

    取一片3cm×4cm帶有疑似癥狀的葉片,將葉片放入提取液瓶中,蓋緊蓋子用力搖動(dòng)20s,直到液體變?yōu)榘稻G色。然后用滴管將液體滴2滴到試紙條的點(diǎn)樣孔中,大約30s后可以看到試紙條的窗口區(qū)變?yōu)樗{(lán)色,等到對(duì)照C線顯現(xiàn)后,即可查看結(jié)果。如果T線顯現(xiàn),說明該樣品為陽性,T線的顏色比較深說明帶毒量比較高,顏色淺說明帶毒量少,如果沒有T線,說明該樣品為陰性。

    1.5 RT-PCR檢測(cè)

    參考天根的Trizol總RNA提取試劑盒說明書提取葉片及西花薊馬的總RNA,樣品于-80℃保存?zhèn)溆?。然后按照TaKaRa RT-PCR試劑盒說明書進(jìn)行cDNA的合成,-20℃保存樣品。采用Vaira等[10]設(shè)計(jì)的引物:NF302:5′-GGGTCAGGCTTGTTGAGGAAAC-3′ 和 NR575:5′-TTCCCTAAGGCTTCCCTGGTG-3′。PCR 反應(yīng)體系為 20μL:cDNA 1μL、上游引物1μL、下游引物1μL、2×Taq10Master Mix 10μL、ddH2O 7μL,PCR程序?yàn)?4℃預(yù)變性2min;40個(gè)循環(huán):94℃30s、60℃30s、72℃30s;最后72℃延伸5min[11]。擴(kuò)增后的產(chǎn)物用1.5%凝膠電泳檢測(cè),預(yù)測(cè)條帶為273bp。

    將PCR產(chǎn)物交由北京六合華大基因科技股份有限公司(BGI)測(cè)序,將獲得的序列通過BLAST進(jìn)行比對(duì)分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 薊馬種類的鑒定

    以薊馬的DNA為模板,以2條SCAR引物:FOMF/FOMR分別進(jìn)行擴(kuò)增。電泳檢測(cè)結(jié)果顯示,能擴(kuò)增出一條西花薊馬特有的條帶,得到320bp左右的目的片段(圖1),表明上述植物上發(fā)生的薊馬種類為西花薊馬。

    圖1 薊馬種類鑒定結(jié)果電泳圖

    2.2 TSWV試紙條檢測(cè)結(jié)果

    用滴管將葉片提取液滴2滴到試紙條的點(diǎn)樣孔中,約30s后可以看到試紙條的窗口區(qū)變?yōu)樗{(lán)色,大約2min后對(duì)照C線顯現(xiàn),具有褪綠環(huán)斑的葉片均顯示T線(圖2a),表明該葉片均帶有番茄斑萎病毒。而癥狀輕的葉片,T線不明顯(圖2b),需進(jìn)一步驗(yàn)證。

    2.3 RT-PCR檢測(cè)結(jié)果

    采用引物NF302/NR575對(duì)番茄斑萎病毒屬病毒N基因序列進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增,表現(xiàn)褪綠環(huán)紋癥狀的辣椒葉片樣品、癥狀不明顯的辣椒和茄子樣品以及同時(shí)采集的西花薊馬均可獲得273bp左右的目的條帶(圖3、圖4),與預(yù)期結(jié)果一致,表明采集的辣椒、茄子樣品可能被番茄斑萎病毒侵染,西花薊馬可能攜帶番茄斑萎病毒。

    圖2 TSWV試紙條檢測(cè)

    2.4 獲得目的片段的序列比對(duì)

    將測(cè)得的目的基因片段進(jìn)行序列測(cè)定,通過BLAST比對(duì)發(fā)現(xiàn)所擴(kuò)增的273bp與番茄斑萎病毒屬病毒的N基因序列有98%的相似性,進(jìn)一步證明上述植物樣品的確受番茄斑萎病毒屬病毒侵染,而且薊馬體內(nèi)也攜帶番茄斑萎病毒屬病毒。

    3 討論

    通過采用番茄斑萎病毒的快速試紙條檢測(cè),以及進(jìn)一步的RT-PCR和序列測(cè)定證實(shí),在北京局部地區(qū)的辣椒和茄子上已發(fā)生番茄斑萎病毒病,這兩種作物上同時(shí)發(fā)生的薊馬種類主要為西花薊馬,并且攜帶該病毒。由薊馬傳播的番茄斑萎病毒位列世界10大重要病毒病的第2位[3],曾對(duì)西班牙東南部的溫室番茄、辣椒和花卉造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)到50%[12],在美國夏威夷、巴西、意大利和南非,番茄斑萎病毒病在20世紀(jì)80-90年代的某些年份流行導(dǎo)致番茄、萵苣等作物近乎絕產(chǎn)[13]。眾所周知,西花薊馬目前已遍布我國北京、云南、山東、貴州、新疆等地[14],對(duì)各地的蔬菜和花卉作物造成嚴(yán)重危害。世界各國的事實(shí)表明,伴隨西花薊馬在世界范圍內(nèi)的廣泛傳播與擴(kuò)散,常導(dǎo)致番茄斑萎病毒病的發(fā)生與流行。如果由西花薊馬傳播的番茄斑萎病毒病大面積發(fā)生,加上種苗調(diào)運(yùn)的遠(yuǎn)距離傳播,將對(duì)我國農(nóng)作物特別是經(jīng)濟(jì)價(jià)值高的蔬菜和花卉作物生產(chǎn)造成毀滅性的災(zāi)害。為此,建議有關(guān)部門立即采取相應(yīng)的預(yù)防與管理措施,首先查明番茄斑萎病毒病在我國的分布現(xiàn)狀,同時(shí)開展相應(yīng)的控制技術(shù)研究,防止其擴(kuò)散蔓延。

    [1] Kirk W D J,Terry L I.The spread of the western flower thrips Frankliniella occidentalis(Pergande)[J].Agricultural and Forest Entomology,2003,5:301-310.

    [2] 張友軍,吳青君,徐寶云,等.危險(xiǎn)性外來入侵生物—西花薊馬在北京發(fā)生危害[J].植物保護(hù),2003,29(4):58-59.

    [3] Scholthof K B G,Adkins S,Czosnek H,et al.Top 10plant viruses in molecular plant pathology[J].Molecular Plant Pathology,2011,12(9):938-954.

    [4] 許永澤,張宗義,陳金香.番茄斑萎病毒(TSWV)廣州分離物生物學(xué)特性研究 [J].植物病理學(xué)報(bào),1988,19(4):198.

    [5] 姚革.四川曬煙上發(fā)現(xiàn)番茄斑萎病毒(TSWV)[J].中國煙草,1992(4):2-4.

    [6] Dong J H,Cheng X F,Yin Y Y,et al.Characterization of Tomato zonate spot virus,a new tospovirus in China[J].Archives of Virology,2008,153(5):855-864.

    [7] 程曉非,董家紅,方琦,等.從云南蝴蝶蘭上檢測(cè)到番茄斑點(diǎn)萎蔫病毒屬病毒[J].植物病理學(xué)報(bào),2008,38(1):312-314.

    [8] White J A,Kelly S E,Perlmanand S J,et al.Cytoplasmic incompatibility in the parasitic wasp Encarsia inaron:disentangling the roles of Cardiniumand Wolbachia symbionts[J].Heredity,2009,102:483-489.

    [9] 孟祥欽,閔亮,萬方浩,等.西花薊馬的SCAR分子檢測(cè)技術(shù)[J].昆蟲學(xué)報(bào),2010,53(3):323-330.

    [10] Vaira A M,Semeria L,Crespi S,et al..Resistance to tospo viruses in Nicotiana benthamianatransformed with the N gene of Tomato spotted wilt virus:correlation between transgene expression and protection in primary transformants[J].Molecular Plant-Microbe Interactions,1995,8(1):66-73.

    [11] Mason G,Roggero P,Tavella L.Detection of Tomato spotted wilt virus in its vector Frankliniella occidentalis by reverse transcription-polymerase chain reaction[J].Journal of Virological Methods,2003,109:69-73.

    [12] Espinosa P J,Bielza P,Contreras J,et al.Insecticide resistance in field populations of Frankliniella occidentalis(Pergande)in Murcia(South-east Spain)[J].Pest Management Science,2002,58:967-971.

    [13] Cho J J,Mitchell W C,Mau R F L,et al.Epidemiology of Tomato spotted wilt virus disease on crisp lettuce in Hawaii[J].Plant Disease,1987,71:505-508.

    [14] 呂要斌,張治軍,吳青君,等.外來入侵害蟲西花薊馬防控技術(shù)研究與示范[J].應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào),2011,48(3):488-496.

    猜你喜歡
    西花薊馬紙條
    草莓間作誘集植物的篩選及其對(duì)西花薊馬的誘集效果
    四季豆葉揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)對(duì)西花薊馬趨向行為的影響
    不同溫度下雙尾新小綏螨對(duì)西花薊馬的捕食功能反應(yīng)
    兩張紙條兒(上)
    紙條大偵探
    臨汾:抓緊防治玉米薊馬
    五張紙條
    小讀者(2020年4期)2020-06-16 03:33:32
    入侵種西花薊馬與其它昆蟲的種間競爭
    辣椒薊馬防治技術(shù)
    神秘的紙條
    国产精品久久久久久人妻精品电影 | 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产精品99久久99久久久不卡| av线在线观看网站| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 尾随美女入室| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产精品国产av在线观看| 国产欧美日韩一区二区三 | 亚洲国产精品一区二区三区在线| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲欧美清纯卡通| 999久久久国产精品视频| 国产精品二区激情视频| 成人黄色视频免费在线看| 在线观看国产h片| 午夜激情av网站| 国产在线观看jvid| 亚洲av日韩在线播放| 99热网站在线观看| 女性被躁到高潮视频| 午夜福利视频在线观看免费| 男女之事视频高清在线观看 | 999精品在线视频| 国产午夜精品一二区理论片| 久久精品成人免费网站| 中文字幕最新亚洲高清| 丰满饥渴人妻一区二区三| 日韩精品免费视频一区二区三区| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 五月天丁香电影| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 大话2 男鬼变身卡| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 热99国产精品久久久久久7| av天堂在线播放| 五月开心婷婷网| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 日日爽夜夜爽网站| 另类精品久久| 大香蕉久久网| 极品人妻少妇av视频| 中文字幕高清在线视频| 涩涩av久久男人的天堂| 51午夜福利影视在线观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 中文字幕色久视频| 国产精品三级大全| 欧美另类一区| 国产亚洲欧美精品永久| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 日韩中文字幕视频在线看片| 精品欧美一区二区三区在线| 黄片播放在线免费| 精品高清国产在线一区| 久久久精品94久久精品| 日本av免费视频播放| 男女免费视频国产| 国产欧美亚洲国产| h视频一区二区三区| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产视频一区二区在线看| 高清欧美精品videossex| 久久久久久久精品精品| 男女高潮啪啪啪动态图| 极品人妻少妇av视频| 国产一区二区三区av在线| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 一区二区日韩欧美中文字幕| 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 国产深夜福利视频在线观看| 99久久99久久久精品蜜桃| 国产精品一区二区在线不卡| 精品一区在线观看国产| 母亲3免费完整高清在线观看| 成年美女黄网站色视频大全免费| 久久久久精品人妻al黑| 日韩视频在线欧美| 精品人妻一区二区三区麻豆| videos熟女内射| 国产精品久久久久久精品古装| 国产精品免费视频内射| 免费日韩欧美在线观看| 好男人视频免费观看在线| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 美女扒开内裤让男人捅视频| 欧美日韩视频精品一区| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 久久青草综合色| 精品国产国语对白av| 中文字幕高清在线视频| 国产片特级美女逼逼视频| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 黄色 视频免费看| 国产黄色视频一区二区在线观看| 色播在线永久视频| av国产久精品久网站免费入址| 一本综合久久免费| 男男h啪啪无遮挡| 美女福利国产在线| 咕卡用的链子| 美女福利国产在线| 久久精品国产综合久久久| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产老妇伦熟女老妇高清| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 99国产精品99久久久久| 精品福利观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲欧美色中文字幕在线| 1024香蕉在线观看| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 深夜精品福利| 久久久久精品人妻al黑| 久久鲁丝午夜福利片| 国产成人精品在线电影| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 亚洲一区中文字幕在线| 国产精品熟女久久久久浪| 色婷婷久久久亚洲欧美| 五月天丁香电影| 国产精品一区二区精品视频观看| 99国产精品一区二区三区| av不卡在线播放| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 99久久99久久久精品蜜桃| 久久 成人 亚洲| 久久 成人 亚洲| 99久久综合免费| 亚洲欧美清纯卡通| 91精品国产国语对白视频| 国精品久久久久久国模美| 国产99久久九九免费精品| 国产成人精品久久二区二区免费| 真人做人爱边吃奶动态| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 黄频高清免费视频| 男女之事视频高清在线观看 | 精品久久久久久电影网| 最新在线观看一区二区三区 | 精品熟女少妇八av免费久了| 69精品国产乱码久久久| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲天堂av无毛| av福利片在线| 欧美黄色淫秽网站| 男女国产视频网站| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 日日爽夜夜爽网站| 丰满少妇做爰视频| 婷婷色综合www| 一级黄色大片毛片| 丝袜在线中文字幕| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 丝袜喷水一区| 日韩精品免费视频一区二区三区| 一区二区日韩欧美中文字幕| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 午夜日韩欧美国产| 97人妻天天添夜夜摸| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 日韩中文字幕视频在线看片| 久久久久视频综合| √禁漫天堂资源中文www| 交换朋友夫妻互换小说| av网站免费在线观看视频| 青草久久国产| e午夜精品久久久久久久| 一级毛片电影观看| 亚洲精品国产一区二区精华液| svipshipincom国产片| 大码成人一级视频| 黑人猛操日本美女一级片| 久久影院123| 国产精品偷伦视频观看了| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 免费在线观看日本一区| 久久综合国产亚洲精品| 美女国产高潮福利片在线看| 高清不卡的av网站| 大片免费播放器 马上看| 超碰成人久久| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 日本av免费视频播放| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 性少妇av在线| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 婷婷色麻豆天堂久久| 精品福利永久在线观看| 久久精品成人免费网站| 国产精品一国产av| 18禁黄网站禁片午夜丰满| xxx大片免费视频| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 脱女人内裤的视频| 啦啦啦在线免费观看视频4| 高清不卡的av网站| 五月天丁香电影| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产一级毛片在线| 91成人精品电影| kizo精华| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产精品二区激情视频| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 欧美日韩亚洲高清精品| av在线老鸭窝| 亚洲成人国产一区在线观看 | av在线播放精品| 老司机深夜福利视频在线观看 | 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 亚洲精品国产av成人精品| 高清欧美精品videossex| 99久久99久久久精品蜜桃| 老司机深夜福利视频在线观看 | 91九色精品人成在线观看| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲三区欧美一区| 久久欧美精品欧美久久欧美| 18禁国产床啪视频网站| 国产精品九九99| 两性夫妻黄色片| 一个人免费在线观看的高清视频| 淫秽高清视频在线观看| 制服丝袜大香蕉在线| 中亚洲国语对白在线视频| 女警被强在线播放| 一本大道久久a久久精品| 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 久久久国产欧美日韩av| 欧美黄色片欧美黄色片| 亚洲av成人av| 亚洲av熟女| 国产国语露脸激情在线看| av片东京热男人的天堂| 欧美中文综合在线视频| 亚洲av成人一区二区三| 不卡一级毛片| 国产精品国产高清国产av| 不卡一级毛片| 一级a爱片免费观看的视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 淫妇啪啪啪对白视频| www日本在线高清视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 美女免费视频网站| 男女之事视频高清在线观看| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲avbb在线观看| 美国免费a级毛片| 国产免费男女视频| 麻豆成人av在线观看| 久久精品人妻少妇| 免费电影在线观看免费观看| 久久久久久久精品吃奶| 国产单亲对白刺激| 波多野结衣巨乳人妻| 久久香蕉精品热| 国产真人三级小视频在线观看| 天堂动漫精品| 亚洲精品色激情综合| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 一级作爱视频免费观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 日韩大尺度精品在线看网址| 欧美激情久久久久久爽电影| 欧美又色又爽又黄视频| 久久香蕉国产精品| 日韩中文字幕欧美一区二区| 日韩欧美在线二视频| 香蕉久久夜色| 大型黄色视频在线免费观看| 日本 av在线| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲成av人片免费观看| 婷婷丁香在线五月| 最新美女视频免费是黄的| 色婷婷久久久亚洲欧美| 免费看a级黄色片| 国产精品爽爽va在线观看网站 | 免费看十八禁软件| 黄频高清免费视频| 亚洲人成电影免费在线| 成人18禁在线播放| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| www.自偷自拍.com| 亚洲男人天堂网一区| 男女视频在线观看网站免费 | 在线观看日韩欧美| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产乱人伦免费视频| 免费看a级黄色片| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 两性夫妻黄色片| 欧美大码av| 女性被躁到高潮视频| 国产又爽黄色视频| 99国产精品一区二区蜜桃av| 黑人欧美特级aaaaaa片| 在线av久久热| 99国产精品一区二区三区| 国产成人系列免费观看| 91av网站免费观看| 国产久久久一区二区三区| 亚洲精品中文字幕在线视频| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲av熟女| 欧美国产日韩亚洲一区| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲男人天堂网一区| 成年人黄色毛片网站| 成人18禁在线播放| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产精品av久久久久免费| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 最好的美女福利视频网| 国产精品av久久久久免费| 日韩有码中文字幕| 一区二区三区高清视频在线| 91老司机精品| 国产精品98久久久久久宅男小说| 美女午夜性视频免费| 老鸭窝网址在线观看| 午夜福利成人在线免费观看| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 午夜福利在线观看吧| 级片在线观看| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 日韩精品免费视频一区二区三区| 亚洲成人久久爱视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 色尼玛亚洲综合影院| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 久久精品国产清高在天天线| 亚洲av熟女| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 麻豆久久精品国产亚洲av| 亚洲av电影在线进入| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲午夜理论影院| www.999成人在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| 欧美日韩乱码在线| 国产v大片淫在线免费观看| 搞女人的毛片| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 久久久久久人人人人人| 国产精品,欧美在线| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | xxx96com| 大型黄色视频在线免费观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 欧美中文综合在线视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲中文av在线| 99久久综合精品五月天人人| 青草久久国产| 亚洲av中文字字幕乱码综合 | 一个人观看的视频www高清免费观看 | 亚洲av成人av| 午夜免费激情av| 国产精品一区二区免费欧美| 亚洲五月色婷婷综合| 国产成年人精品一区二区| 无人区码免费观看不卡| 搞女人的毛片| 久久狼人影院| 中亚洲国语对白在线视频| 国产精品永久免费网站| 久久香蕉精品热| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产亚洲av嫩草精品影院| 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲 欧美一区二区三区| 真人做人爱边吃奶动态| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 叶爱在线成人免费视频播放| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产精品亚洲一级av第二区| 久久精品国产清高在天天线| 一进一出抽搐动态| 超碰成人久久| 亚洲真实伦在线观看| 老鸭窝网址在线观看| 怎么达到女性高潮| 亚洲国产精品999在线| 日韩大码丰满熟妇| 淫妇啪啪啪对白视频| 午夜免费成人在线视频| 国产成人精品无人区| 日本一本二区三区精品| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲人成77777在线视频| 日韩欧美在线二视频| 身体一侧抽搐| 特大巨黑吊av在线直播 | 欧美最黄视频在线播放免费| 国产乱人伦免费视频| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 大香蕉久久成人网| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲美女黄片视频| 一级片免费观看大全| 久久午夜综合久久蜜桃| 999精品在线视频| 免费观看人在逋| xxx96com| 国产欧美日韩一区二区三| 欧美成人性av电影在线观看| 欧美一级a爱片免费观看看 | 国产精品98久久久久久宅男小说| 欧美黑人欧美精品刺激| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲激情在线av| 精品无人区乱码1区二区| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲成国产人片在线观看| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 国产精品一区二区三区四区久久 | 国内精品久久久久精免费| 人人妻人人澡人人看| 久久久精品欧美日韩精品| 国产麻豆成人av免费视频| 日本熟妇午夜| 一二三四社区在线视频社区8| 十分钟在线观看高清视频www| 午夜两性在线视频| av在线天堂中文字幕| 天堂影院成人在线观看| 国产男靠女视频免费网站| 一本久久中文字幕| 久久久久免费精品人妻一区二区 | 夜夜爽天天搞| 免费在线观看亚洲国产| 亚洲三区欧美一区| 色播亚洲综合网| 国产免费男女视频| 久久久久久大精品| 国产精品一区二区免费欧美| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 十八禁人妻一区二区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 18美女黄网站色大片免费观看| 国产成人精品久久二区二区免费| 丰满的人妻完整版| 99热6这里只有精品| 日韩中文字幕欧美一区二区| 日本免费a在线| 特大巨黑吊av在线直播 | 一个人免费在线观看的高清视频| 99热这里只有精品一区 | 亚洲激情在线av| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 色哟哟哟哟哟哟| 国产精品 国内视频| 色老头精品视频在线观看| 制服丝袜大香蕉在线| 久9热在线精品视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 此物有八面人人有两片| 桃红色精品国产亚洲av| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 色哟哟哟哟哟哟| 一个人免费在线观看的高清视频| 中文字幕最新亚洲高清| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产成人av激情在线播放| 白带黄色成豆腐渣| 国产精品日韩av在线免费观看| 看黄色毛片网站| 国产主播在线观看一区二区| 日韩有码中文字幕| 欧美乱色亚洲激情| 波多野结衣高清作品| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 少妇粗大呻吟视频| 免费人成视频x8x8入口观看| 又黄又粗又硬又大视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产单亲对白刺激| av天堂在线播放| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美性长视频在线观看| 长腿黑丝高跟| 成熟少妇高潮喷水视频| 神马国产精品三级电影在线观看 | 99久久久亚洲精品蜜臀av| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 黄片播放在线免费| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 亚洲七黄色美女视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲免费av在线视频| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 亚洲成av人片免费观看| 曰老女人黄片| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 日本一本二区三区精品| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 免费人成视频x8x8入口观看| 黑人操中国人逼视频| 国产精品一区二区三区四区久久 | 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲激情在线av| 校园春色视频在线观看| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 亚洲免费av在线视频| 亚洲精品中文字幕在线视频| 18美女黄网站色大片免费观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 久久香蕉国产精品| 在线播放国产精品三级| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 无人区码免费观看不卡| 久久精品91蜜桃| 亚洲国产欧美一区二区综合| 神马国产精品三级电影在线观看 | 19禁男女啪啪无遮挡网站| 中文字幕最新亚洲高清| av在线播放免费不卡| 美女 人体艺术 gogo| 国产一区二区三区视频了| 中国美女看黄片| 亚洲国产精品合色在线| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 看片在线看免费视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲第一电影网av| av在线播放免费不卡| 久久久国产成人精品二区| 好男人电影高清在线观看| 一本一本综合久久| 亚洲一区中文字幕在线| 亚洲九九香蕉| 人人妻人人看人人澡| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲精品国产一区二区精华液| 色在线成人网| 亚洲人成电影免费在线| 老司机靠b影院| 麻豆国产av国片精品| 一边摸一边做爽爽视频免费| www.www免费av| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲 欧美一区二区三区| 深夜精品福利| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲男人天堂网一区| 中文字幕久久专区| 久久久久久久午夜电影| 一本综合久久免费| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产免费男女视频| 精品免费久久久久久久清纯| 欧美精品啪啪一区二区三区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 99国产精品一区二区三区| 满18在线观看网站| 一二三四在线观看免费中文在| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 午夜激情av网站| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 18禁国产床啪视频网站| 一本精品99久久精品77| 在线免费观看的www视频| 极品教师在线免费播放| 亚洲av中文字字幕乱码综合 | 免费在线观看日本一区| 女性生殖器流出的白浆| 成人精品一区二区免费| 日韩视频一区二区在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频| 91av网站免费观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲第一av免费看| 欧美乱妇无乱码| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产极品粉嫩免费观看在线| 日韩欧美国产一区二区入口| 精品一区二区三区四区五区乱码| 亚洲 国产 在线| 国内精品久久久久久久电影| 99国产极品粉嫩在线观看|