扁擔(dān)桿正丁醇提取物的抗炎鎮(zhèn)痛作用

楊春光，高 松，歐陽檐秀

（大連大學(xué) 醫(yī)學(xué)院, 遼寧 大連 116622）

扁擔(dān)桿（Grewia biloba G. Don）主要分布于江西、湖南、浙江和廣東等省[1]。中國《中藥大辭典》中記載其全株和枝葉能去風(fēng)除濕、理氣消痞[2]。在中國南方部分地區(qū)，扁擔(dān)桿屬植物被作為民間草藥使用，用來治療皮膚膿胞瘡等細菌感染。在非洲和亞洲一些國家地區(qū)，部分扁擔(dān)桿屬植物被作為民間草藥使用，具有抗菌消炎作用[3,4]?，F(xiàn)代藥理實驗表明，扁擔(dān)桿提取液具有抗菌、抗瘧疾等作用[5,6]，但對其抗炎鎮(zhèn)痛作用的研究較少。本文以小鼠為研究對象，觀察扁擔(dān)桿正丁醇提取物的抗炎鎮(zhèn)痛作用。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

扁擔(dān)桿藥材（大連大學(xué)醫(yī)學(xué)院中藥教研室高松鑒定）；正丁醇（上海禾豐藥業(yè)有限公司）；鹽酸曲馬多（武漢華美華科技有限公司）；地塞米松磷酸鈉注射液（江蘇長青農(nóng)化股份有限公司）；Heidolph LABOROTA-4000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（國華電子有限公司）；電子分析天平 BP211D（Startorius）；YLS-6B智能熱板儀（淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司）

1.2 藥材的提取與分離

將扁擔(dān)桿干燥枝100 g，用75%乙醇在室溫下浸泡12 h后加熱回流提取3次，濾過，合并濾液，減壓濃縮得浸膏約 10 g，將其混懸于水中，用正丁醇少量多次提取至有機相沒有顏色，減壓濃縮并干燥得浸膏粉。把浸膏粉用生理鹽水配成1 g/mL（生藥），一共100 mL。在分別取25 mL、12.5 mL、5 mL稀釋至100 mL容量瓶中，分別得高濃度(25%)、中濃度(12.5%)、低濃度(5%)藥液。

1.3 動物分組

挑選痛域在5～30 s的雌性小鼠50只（由大連大學(xué)實驗動物中心提供），體重 20±2 g，隨機分 5組，分別為高濃度給藥組、中濃度給藥組、低濃度給藥組、正常對照組、陽性對照組各 10只。給藥組小鼠每10g體重分別灌胃高，中，低濃度藥液的容積是0.2 mL；正常對照組灌胃同體積生理鹽水，以上各組連續(xù)給藥3 d，每天1次；陽性對照組小鼠每 10 g體重腹腔注射酸曲馬多0.15 mg，實驗前給藥1次。

1.4 熱板法測定小鼠痛域值

在末次給藥前和給藥后15 min、30 min、60 min使用55±0.5 ℃熱板分別測各組小鼠第一次舔后足時間，跳躍1次（含）以上者剔除，痛閾超過60 s者按60 s計。計算痛閾提高百分率，痛閾提高百分率=（給藥后痛閾值—給藥前痛閾值）／給藥前痛閾值×100%。

1.5 對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

選小鼠30只，隨機分3組，即對照組、地塞米松組和高濃度給藥組。對照組和高濃度給藥組分別灌胃給予生理鹽水和高濃度扁擔(dān)桿正丁醇提取物，小鼠每10g體重給藥體積0.2 mL，連續(xù)給藥3 d，每天1次。地塞米松組實驗前小鼠每10 g體重腹腔注射藥液0.1 mL。末次給藥30 min后于小鼠右耳兩面均勻涂二甲苯 20 μL，30 min后處死小鼠，將小鼠兩耳齊根剪下，用直徑6 mm的打孔器將小鼠雙耳相同部位打孔，分別稱重。左右耳片重量差值為腫脹度，計算腫脹抑制率，腫脹抑制率=（生理鹽水組平均腫脹度——給藥組平均腫脹度）／生理鹽水組平均腫脹度×100%。

1.6 統(tǒng)計分析

所有數(shù)據(jù)以±s表示，采用 SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析和t檢驗，P＜ 0.05認為有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 對熱板法所致小鼠疼痛的影響

高濃度組和曲馬多組小鼠痛域提高百分率在給藥后30 min和60 min有明顯增加（表1）。高濃度組和曲馬多組小鼠痛域提高值與對照組比有顯著性差異（表2）。

表1 各組痛閾提高百分率

表2 給藥后各組痛閾提高值

2.2 對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

實驗結(jié)果顯示，扁擔(dān)桿正丁醇提取物高濃度組對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有較好的抑制作用（表3）。

表3 扁擔(dān)桿正丁醇提取物對小鼠耳廓腫脹的影響

3 討論

多個中藥古籍中都記載扁擔(dān)桿具有祛風(fēng)除濕的功效。目前研究發(fā)現(xiàn)，扁擔(dān)桿提取液具有抗菌、抗瘧疾、抗腫瘤等作用，但對扁擔(dān)桿抗炎鎮(zhèn)痛的有關(guān)活性成分研究少見報道。熱板法是最常用的鎮(zhèn)痛實驗?zāi)Ｐ?，二甲苯致小鼠耳廓腫脹實驗是抗炎藥物篩選常用的非特異炎癥模型。炎癥是具有血管系統(tǒng)的活體組織對局部損傷所發(fā)生的一種以防御為主的組織反應(yīng)，其基本病理變化為局部組織、細胞的變質(zhì)、滲出和增生三種變化。在一般的炎癥過程中，早期以變質(zhì)和滲出為主，局部癥狀有紅、腫、熱、痛和功能障礙[7]。本研究采用熱板法和二甲苯致小鼠耳廓腫脹實驗來觀察扁擔(dān)桿正丁醇提取物的鎮(zhèn)痛抗炎作用。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，高濃度的扁擔(dān)桿正丁醇提取物能提高小鼠痛域值，而且對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用。正丁醇為親脂型溶劑，可以提取中藥成分中極性較大的部分，包括游離生物堿、苷元、揮發(fā)油等，扁擔(dān)桿正丁醇提取物中哪種成分發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛作用還需要進一步探討。

[1]中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會. 中國植物志:第一分冊 [M]. 北京: 科學(xué)出版社. 1989: 89.

[2]GRIERSON D S, AFOLAYAN A J. Antibacterial activity of some indigenous plants used for the treatment of wounds in the Eastern Cape, South Africa[J]. J Ethnopharmaco, 1999, 66(1): 103-106.

[3]ZAIDI M A, CROW S A Jr. Biologically active traditional medicinal herbs from Balochistan, Pakistan[J]. J Ethnopharmaco, 2005, 96(1): 331-334.

[4]江蘇新醫(yī)學(xué)院. 中藥大辭典[M]. 上海: 科技出版社,1986: 1747.

[5]劉建群, 吳繼梅, 何志恒, 等. 扁擔(dān)桿提取物體外抑菌活性研究[J]. 時珍國醫(yī)國藥, 2008, 19 (6):1351-1352.

[6]謝集, 孫鐵民. 扁擔(dān)桿屬植物中的抗瘧疾化合物[J].國外醫(yī)藥·植物藥分冊, 2007, 22(4): 171.

[7]曲曉梅, 金鐘太, 尚艷華, 等. 甘草水煎液抗炎作用的實驗研究[J]. 實用藥物與臨床, 2005, 8(5): 14-16.