• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    IVF-ET反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜HOXA-10基因的表達(dá)

    2012-09-18 12:42:40楊海燕倪吳花滕依麗孟綠荷
    醫(yī)學(xué)研究雜志 2012年10期
    關(guān)鍵詞:月經(jīng)期蛻膜輸卵管

    楊海燕 倪吳花 滕依麗 孟綠荷

    IVF-ET反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜HOXA-10基因的表達(dá)

    楊海燕 倪吳花 滕依麗 孟綠荷

    目的研究同源框基因-10(HOXA-10)在人子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá),并探討其與體外受精-胚胎移植(IVFET)反復(fù)種植失敗的相關(guān)性。方法以40例IVF-ET治療反復(fù)種植失敗的患者為研究對(duì)象,以40例正常婦女及5例早孕人流患者作為對(duì)照,獲取患者各時(shí)期子宮內(nèi)膜及蛻膜組織,采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)HOXA-10蛋白在各時(shí)期子宮內(nèi)膜及蛻膜上的定位和表達(dá),采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法和蛋白印跡法(Western blotting)測(cè)定HOXA-10 mRNA在各時(shí)期子宮內(nèi)膜及蛻膜上的表達(dá)及其蛋白水平。結(jié)果HOXA-10蛋白定位于子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞,其mRNA和蛋白在各期子宮內(nèi)膜及蛻膜組織中均有表達(dá)。在對(duì)照組中以分泌中期、晚期及蛻膜中的表達(dá)最強(qiáng),明顯高于月經(jīng)期和增殖期(P<0.05);而在反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜中的表達(dá)水平基本一致,無(wú)明顯分泌中、晚期峰,并且分泌中、晚期的表達(dá)要顯著低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論HOXA-10基因在分泌中、晚期子宮內(nèi)膜及早孕蛻膜組織中的高表達(dá)與胚胎種植及妊娠維持密切相關(guān);其表達(dá)下降可能是導(dǎo)致IVF-ET反復(fù)種植失敗的重要原因之一。

    HOXA-10子宮內(nèi)膜體外受精-胚胎移植種植

    體外受精-胚胎移植(IVF-ET)技術(shù)發(fā)展至今,促排卵刺激方案及實(shí)驗(yàn)室技術(shù)得到了長(zhǎng)足的進(jìn)步,使移植胚胎的質(zhì)量有了明顯提高,但種植率及最終的妊娠率仍然不是很理想,臨床上有很大一部分患者還存在反復(fù)種植失敗的問(wèn)題。目前認(rèn)為種植失敗中2/3是由子宮內(nèi)膜容受性異常引起的。研究表明,同源框基因-10(HOXA-10)屬于多基因家族的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)基因,是子宮內(nèi)膜容受性建立和胚胎種植成功的必需調(diào)節(jié)因子,本研究首次通過(guò)檢測(cè)HOXA-10基因在IVF-ET反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜組織的表達(dá)以探討其與反復(fù)種植失敗的相關(guān)性。

    材料與方法

    1.研究對(duì)象:選取2009年3月~2010年8月在筆者醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心行體外受精-胚胎移植(IVF-ET)或單精子卵泡漿內(nèi)注射(ICSI)治療,3次以上新鮮周期胚胎移植(均為D2或D3胚胎,每次移植至少有1個(gè)優(yōu)質(zhì)胚胎)均失敗的40例患者為研究對(duì)象;以同期因男性因素在本中心行ICSI治療,至少有1次妊娠史的40例正常婦女及在筆者醫(yī)院行人工流產(chǎn)的正常孕早期5例患者作為對(duì)照。研究組患者年齡30.7± 3.1歲,不育年限3.4±2.0年,對(duì)照組患者年齡30.9±3.0歲,不育年限3.0±1.7年,蛻膜取自孕45~60天患者。所有患者基礎(chǔ)內(nèi)分泌正常,月經(jīng)周期正常(21~35天),既往無(wú)卵巢手術(shù)史,3個(gè)月內(nèi)無(wú)激素治療及宮腔操作史,無(wú)合并子宮內(nèi)膜異位癥、輸卵管積水、生殖器畸形、子宮肌瘤、子宮腺肌瘤或多囊卵巢綜合征及其他系統(tǒng)疾病,曾行宮腔鏡檢查或子宮輸卵管碘油造影,排除異常宮腔,B超監(jiān)測(cè)過(guò)程中未提示內(nèi)膜異常,移植日內(nèi)膜厚度均在7mm以上。所有患者均簽署知情同意書(shū),并獲得本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

    2.方法:(1)標(biāo)本的收集與處理:結(jié)合80例患者臨床表現(xiàn)及定期的超聲檢查(必要時(shí)結(jié)合血液相關(guān)指標(biāo)測(cè)定)確定子宮內(nèi)膜時(shí)期并獲取各時(shí)期子宮內(nèi)膜組織共80份(80例患者各時(shí)期單點(diǎn)取材),同時(shí)獲取在本院行人工流產(chǎn)的正常孕早期5例患者的蛻膜組織5份。其中研究組中包括月經(jīng)期,增生早、中、晚期各5份,分泌早、中、晚期各5、10、5份;對(duì)照組中包括月經(jīng)期,增生早、中、晚期各5份,分泌早、中、晚期各5、10、5份,蛻膜5份。所有子宮內(nèi)膜組織均由專(zhuān)人獲取,取自子宮底部,4%多聚甲醛固定,梯度乙醇脫水,二甲苯透明后石蠟包埋備用。(2)免疫組織化學(xué)檢測(cè):常規(guī)HE染色鏡檢,根據(jù)WHO標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行組織學(xué)分期。采用鏈霉菌抗生物素蛋白-生物素復(fù)合物染色法(SABC法)檢測(cè)子宮內(nèi)膜HOXA-10蛋白的表達(dá),操作方法按SABC試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。石蠟切片厚5μm,組織切片常規(guī)脫蠟、消化、封閉,滴加一抗(單克隆小鼠抗人HOXA-10)(武漢博士德生物工程有限公司),稀釋濃度為1∶75,4℃孵育過(guò)夜,加入二抗,3-3'-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色(武漢博士德生物工程有限公司),蘇木素復(fù)染、脫水、透明、中性樹(shù)膠封片。以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為空白對(duì)照。每份標(biāo)本觀察5張切片,每張切片觀察5個(gè)視野,采用美國(guó)MediaCybernetics公司計(jì)算機(jī)圖像信號(hào)采集與分析系統(tǒng)(image-pro plus6.0圖像分析軟件)測(cè)定陽(yáng)性部位的平均吸光度(MOD)值。(3)RT-PCR檢測(cè):TRIzol試劑(BioFlux公司)提取子宮內(nèi)膜組織中總RNA后,以O(shè)ligo(dT)18進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄(Fermentas公司),PCR擴(kuò)增引物(引物由上海生工合成)。HOXA-10引物序列上游為5'-CTTACATTGCCTGACTAA-3',下游為5'-ACAACTTCACAAGATAGG-3'(基因編號(hào):NM018951),擴(kuò)增產(chǎn)物180bp。同時(shí)以β-actin作為內(nèi)參照,其引物序列上游為5'-CCTGAGGCTTTTCCAGCC-3',下游為5'-TAGAGGTCTTTACGGATGTCAACGT-3'。PCR循環(huán)條件為:94℃預(yù)變性5min,94℃變性40 s,55℃退火40 s,72℃延伸50 s,40個(gè)循環(huán);72℃再延伸10min。產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳后,讀膠儀讀取擴(kuò)增條帶的光密度值并進(jìn)行分析、照相,以HOXA-10和β-actin的比值表示HOXA-10 mRNA的相對(duì)表達(dá)水平。(4)Western blotting檢測(cè):從凍存組織中用細(xì)胞裂解液提取總蛋白,采用Bradford比色法測(cè)定蛋白質(zhì)含量。每個(gè)樣本取總蛋白75μg。標(biāo)本經(jīng)8%十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PA GE)分離蛋白質(zhì)后,濕式法電轉(zhuǎn)膜至硝酸纖維素膜,加一抗稀釋液(羊抗人HOXA-10多克隆抗體濃度為1∶150,羊抗人β-actin單克隆抗體濃度為1∶500,Santa Cruz,美國(guó))4℃孵育過(guò)夜,然后與辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗羊二抗(1∶2000稀釋?zhuān)琒anta Cruz,美國(guó))在室溫下孵育2h,TBS-T洗膜10min(3次,ECL顯色(Pierce,美國(guó)),Koda-X線膠片顯影。采用GDS-8000型全自動(dòng)凝膠成像分析系統(tǒng)(UVP,英國(guó))測(cè)定條帶積分光密度值(IOD)來(lái)表示HOXA-10蛋白的表達(dá)水平,并分析結(jié)果。

    3.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,所得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差±s)表示,各時(shí)期內(nèi)膜MOD值比較采用單因素方差分析,反復(fù)種植失敗患者和對(duì)照組間MOD值比較采用成組資料t檢驗(yàn),P<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異有顯著性。

    結(jié)果

    1.兩組患者各時(shí)期子宮內(nèi)膜HOXA-10的免疫組化檢測(cè):免疫組化結(jié)果顯示HOXA-10蛋白在子宮內(nèi)膜腔上皮、腺上皮、血管上皮和間質(zhì)細(xì)胞都有表達(dá)。對(duì)照組中各期子宮內(nèi)膜及蛻膜組織中均有表達(dá),其中分泌中、晚期及蛻膜中的表達(dá)要明顯高于月經(jīng)期,增殖期和分泌早期(P<0.05);研究組中各時(shí)期子宮內(nèi)膜上也均有HOXA-10蛋白的表達(dá),但各時(shí)期間比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)。對(duì)兩組間分泌中期和晚期的表達(dá)進(jìn)行比較則發(fā)現(xiàn),研究組HOXA-10的表達(dá)強(qiáng)度要顯著低于對(duì)照組(P<0.05,表1、圖1~圖3)。

    表1 兩組患者各月經(jīng)周期內(nèi)膜及蛻膜中HOXA-10的表達(dá)(MOD±s)

    表1 兩組患者各月經(jīng)周期內(nèi)膜及蛻膜中HOXA-10的表達(dá)(MOD±s)

    與月經(jīng)期、增生期及分泌早期相比,△P<0.05;與月經(jīng)期、增生期及分泌各期相比,▲P<0.05;與研究組相比,*P<0.05

    組別月經(jīng)期增殖期分泌期早中晚早中晚蛻膜對(duì)照組0.17±1.14×10-20.15±8.94×10-30.16±1.00×10-20.16±7.07×10-30.16±8.37×10-30.32±1.62×10-2△*0.33±2.59×10-2△*0.36±1.87×10-2▲研究組0.16±1.14×10-20.16±1.00×10-20.16±8.94×10-30.16±7.07×10-30.16±1.17×10-20.17±1.30×10-20.17±1.30×10-2

    2.兩組患者各時(shí)期子宮內(nèi)膜HOXA-10mRNA的RT-PCR檢測(cè):兩組在180bp處均出現(xiàn)了特異性的HOXA-10基因條帶。電泳帶光密度掃描結(jié)果顯示,HOXA-10mRNA在各期子宮內(nèi)膜組織及蛻膜組織中均有表達(dá)。對(duì)照組中分泌中、晚期和蛻膜組織中表達(dá)最強(qiáng),與其余各期相比差異有顯著性(P< 0.05),而研究組中各時(shí)期子宮內(nèi)膜上的表達(dá)強(qiáng)度無(wú)顯著性變化(P>0.05),而且分泌中、晚期的表達(dá)要明顯弱于對(duì)照組(P<0.05)(表2、圖4)。

    表2 兩組患者各月經(jīng)周期內(nèi)膜及蛻膜中HOXA-10mRNA的相對(duì)表達(dá)水平(x±s)

    圖4 對(duì)照組子宮內(nèi)膜組織及蛻膜中HOXA-10mRNA的表達(dá)

    3.兩組患者各時(shí)期子宮內(nèi)膜HOXA-10蛋白的Western blotting檢測(cè):Western blotting分析結(jié)果顯示,在40kDa的位置上出現(xiàn)了HOXA-10蛋白的雜交帶。其在對(duì)照組中的表達(dá)量從月經(jīng)期、增生期到分泌期和蛻膜組織逐漸增加,其中分泌中、晚期和蛻膜組織中表達(dá)量最高,與其余各期相比差異有顯著性(P<0.05);而其在研究組各時(shí)期子宮內(nèi)膜上的表達(dá)量則無(wú)顯著性變化(P>0.05),其中分泌中、晚期的表達(dá)量要顯著低于對(duì)照組(P<0.05) (表3、圖5)。

    表3 兩組患者各月經(jīng)周期內(nèi)膜及蛻膜中HOXA-10蛋白的表達(dá)(IOD,x±s)

    討論

    在著床過(guò)程中,囊胚的滋養(yǎng)細(xì)胞必須達(dá)到具有浸潤(rùn)狀態(tài),子宮內(nèi)膜也要同時(shí)發(fā)育到接受狀態(tài)才能啟動(dòng)著床。在IVF-ET中妊娠率低的原因之一即是著床失敗,所以著床是生殖中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。胚胎著床過(guò)程受胚胎和母體器官一系列的調(diào)控,其中子宮內(nèi)膜對(duì)胚胎容受性的建立是其中最關(guān)鍵的因素。而文獻(xiàn)報(bào)道,組織學(xué)正常的子宮內(nèi)膜,并不代表其功能正?;蚍磻?yīng)其容受性[1,2]。目前對(duì)子宮內(nèi)膜容受性的探究已進(jìn)行到了基因?qū)W的層次,其中HOXA-10是極其重要且被研究最多的一個(gè)基因。

    圖5 對(duì)照組子宮內(nèi)膜組織及蛻膜中HOXA-10蛋白的表達(dá)

    1.HOXA-10在正常子宮內(nèi)膜組織的表達(dá): HOXA基因通過(guò)和DNA結(jié)合,激活或抑制目標(biāo)基因,調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育,決定細(xì)胞的定向分化和增殖。HOXA-10是該家族的重要成員,參與子宮內(nèi)膜正常形態(tài)的維持、內(nèi)膜的增殖與分化、容受性的建立、胚胎的定位和黏附,胞飲突的形成、蛻膜化和血管通透性的增加等[3,4]。其mRNA在人類(lèi)子宮內(nèi)膜上皮和基質(zhì)中均有表達(dá),而且隨月經(jīng)周期呈現(xiàn)周期性變化,在分泌中、晚期的表達(dá)明顯高于增生期及分泌早期,峰值出現(xiàn)與子宮內(nèi)膜接受窗口及血清孕酮值升高一致[5]。正常人類(lèi)輸卵管僅表達(dá)微量HOXA-10 mRNA,然而輸卵管妊娠時(shí)其表達(dá)在輸卵管妊娠的著床部位顯著增加,水平接近正常妊娠時(shí)的內(nèi)膜水平,表明其與著床密切相關(guān)[6]。周建生等[7]發(fā)現(xiàn),早孕小鼠子宮內(nèi)膜HOXA-10 mRNA的表達(dá)大于非妊娠的子宮內(nèi)膜,且隨著妊娠天數(shù)的增加呈逐漸上升趨勢(shì),與子宮內(nèi)膜的容受性變化一致。同時(shí)發(fā)現(xiàn)其表達(dá)從孕5天開(kāi)始下降,孕7天時(shí)接近未孕水平,與胚胎著床時(shí)子宮內(nèi)膜的蛻膜化過(guò)程完全一致。他們還發(fā)現(xiàn),用HOXA-10DNA質(zhì)粒/脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染孕2天小鼠子宮角后,小鼠的胚胎著床數(shù)明顯增加;相反,用HOXA-10反義寡脫氧核糖核酸/脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染后,著床數(shù)明顯下降,因而認(rèn)為其可能參與調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞的周期性增殖與分化,最終使子宮內(nèi)膜進(jìn)入容受狀態(tài),并在蛻膜化過(guò)程中起重要作用。李雪梅等[8]通過(guò)研究證實(shí)雌、孕激素顯著提高高分化子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞中HOXA-10基因的表達(dá),推測(cè)HOXA-10基因增加是子宮內(nèi)膜容受性增強(qiáng)的重要表現(xiàn)。

    動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,母體喪失表達(dá)HOXA-10將導(dǎo)致生育能力下降,HOXA-10基因缺陷小鼠的子宮體積縮小,管徑變細(xì)、內(nèi)膜變薄,腺體數(shù)量顯著減少,部分內(nèi)膜變異為輸卵管黏膜;HOXA-10點(diǎn)突變的小鼠不能著床而導(dǎo)致不孕,而把這些不孕小鼠的受精卵移植到有正常HOXA-10表達(dá)的野生鼠體內(nèi)則能夠著床并妊娠;不明原因不孕患者HOXA-10基因mRNA在月經(jīng)周期不同時(shí)期子宮內(nèi)膜腺體和間質(zhì)中表達(dá)基本一致,無(wú)明顯的分泌中、晚期峰,在腺體和間質(zhì)的表達(dá)均低于正常生育婦女,均進(jìn)一步說(shuō)明了HOXA-10在子宮內(nèi)膜發(fā)生和發(fā)育過(guò)程中起著重要的調(diào)控中的作用[9]。

    本研究獲取正常婦女各時(shí)期的子宮內(nèi)膜及蛻膜組織進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)HOXA-10在月經(jīng)期、增殖期及分泌期子宮內(nèi)膜上均有表達(dá),但分泌中期、晚期表達(dá)明顯增加,蛻膜中表達(dá)最強(qiáng),與既往研究結(jié)果相一致,進(jìn)一步肯定了其在評(píng)價(jià)著床期子宮內(nèi)膜容受性方面的特異性。

    2.HOXA-10與IVF-ET反復(fù)種植失敗的相關(guān)性:Cermik等[10]發(fā)現(xiàn),因著床失敗而導(dǎo)致的不孕(多囊卵巢綜合征,子宮內(nèi)膜異位癥及輸卵管積水)的患者子宮內(nèi)膜中均存在的HOXA-10表達(dá)缺陷。輸卵管積水的濃度越高,HOXA-10 mRNA表達(dá)越少,切除輸卵管后,子宮內(nèi)膜HOXA-10 mRNA表達(dá)明顯升高[11,12]。7.23%的子宮內(nèi)膜異位癥患者有HOXA-10基因的突變,其在子宮腔上皮、腺上皮和內(nèi)皮的表達(dá)正常,但在基質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)明顯下降,在分泌中期子宮內(nèi)膜的表達(dá)水平遠(yuǎn)低于正常生育婦女,在黃體期的表達(dá)并不增加[13,14]。子宮肌瘤尤其是黏膜下子宮肌瘤也會(huì)影響HOXA-10基因在子宮內(nèi)膜的表達(dá),從而擾亂種植窗口期[15]。但到目前為止尚未見(jiàn)其在IVF-ET反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜中變化的報(bào)道。本研究首次對(duì)這部分患者的子宮內(nèi)膜進(jìn)行相關(guān)研究,因考慮到上述常見(jiàn)不孕因素對(duì)結(jié)果的影響,所有患者排除了子宮內(nèi)膜異位癥、輸卵管積水、生殖器畸形、子宮肌瘤、子宮腺肌瘤或多囊卵巢綜合征等。結(jié)果發(fā)現(xiàn),HOXA-10在反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜中的表達(dá)周期性變化不明顯,表達(dá)水平基本一致,無(wú)明顯分泌中晚期峰,而且在種植窗期的表達(dá)要明顯弱于對(duì)照組,認(rèn)為是降低子宮內(nèi)膜容受性,使胚胎與子宮內(nèi)膜黏附下降,致使胚胎種植受阻的原因之一。

    綜上所述,HOXA-10在人類(lèi)子宮內(nèi)膜組織上的表達(dá)呈周期特征性,參與了子宮內(nèi)膜容受性的建立。而在IVF-ET反復(fù)種植失敗患者中,其在種植窗期內(nèi)膜上的表達(dá)存在缺陷,從而影響了子宮內(nèi)膜容受性,導(dǎo)致種植失敗,成為這些患者不孕的內(nèi)在機(jī)制。

    1Palomino WA,F(xiàn)uentes A,Gonzalez RR,et al.Differential expression of endometrial integrins and progesterone receptor during the window of implantation in normo-ovulatory women treated with clomiphene citrate[J].Fertil Steril,2005,83(3):587-593

    2Bulletti C,F(xiàn)lamigni C,de Ziegler D.Implantation markers and endometriosis[J].Reprod Biomed Online,2005,11(4):464-468

    3Daftary GS,Taylor HS.Pleiotropic effects of Hoxa10 on the functional development of peri-implantation endometrium[J].Mol Reprod DEV,2004,67(1):8-14

    4Taylor HS.Transcriptional regulation of implantation by HOX gene[J].Rev Endocr Metab Disord,2002,3(2):127-132

    5Kim JJ,F(xiàn)azleabas AT.Uterine receptivity and implantation:The regulation and action of insulin2 like growth factor binding protein-1(IGFBP-10,HOXA10 and forkhead transcription factor-1(FOXO-1) in the baboon endometrium[J].Reprod Biol Endocrinol,2004,2 (6):34-40

    6Salih SM,Taylor HS.HOXA10 gene expression in human fallopian tube and ectopic pregnancy[J].Am J Obstet Gynecol,2004,190 (5):1404-1406

    7周建生,賈詠存,楊戎,等.HOXAa-10基因在小鼠胚胎著床過(guò)程中的作用[J].解剖學(xué)報(bào),2008,39(2):248-251

    8劉雪梅,朱桂金,鐘剛.雌、孕激素及肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子對(duì)Ishikawa細(xì)胞HOXA10基因表達(dá)的調(diào)節(jié)[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志,2007,16 (1):39-43

    9李紅,陳士嶺,邢福琪,HOXA10基因在子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)與不孕的關(guān)系[J].中華婦產(chǎn)科雜志,2002,37(1):30-32

    10Cermik D,Selam B,Taylor HS.Regulation of HOXA10expression by testosterone in vitro and in the endometrium of patients with polycystic ovary syndrome[J].J Clin Endocrinol Metab,2003,23(1):571-579

    11Strandell A,Lindhard A.Hydrosalpinx fluid diminishes endometrial cell HoxA10 expression[J].Fertil Steril,2002,78(3):577-580

    12Daftary GS,Kayisli U,Seli E,et al.Salpingectomy increases periimplantation endometrial HOXA10 expression in women with hydrosalpinx[J].Fertil Steril,2007,87(2):367-372

    13Wei QX,St.Clair JB,F(xiàn)u T,et al.Reduced expression of biomarkers associated with the implantation window in women with endometriosis[J].Fertil Steril,2009,91(5):1686-1691

    14Wu Y,Strawn E,Basir Z,et al.Promoter hypermethylation of progesterone receptor isoform B(PR-B)in endometriosis[J].Epigenetics,2006,1(2):106-111

    15Home AW,Critchley HO.The effect of uterine fibroids on embryo implantion[J].Semin Reprod Med,2007,25(6):483-489

    (收稿:2011-10-10)

    (修回:2012-02-28)

    Expression of HOXA-10 in the Endometria of Patients with Recurrent Implantation Failure in IVF-ET.

    Yang Haiyan,Ni Wuhua,Teng Yili,Meng Lvhe.Department of Reproductive Medicine,The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College,Zhejiang 325000,China

    ObjectiveTo investigate the expression of HOXA-10 in the endometria of patients with recurrent implantation failure in in vitro fertilization and embryo transfer(IVF-ET)and explore its correlation with recurrent implantation failure.Methods40 patients with recurrent implantation failure in IVF-ET treatment were analyzed as study group,and other 40 normal women and 5 normal pregnant patients as control group.The samples of endometrium throughout the menstrual cycle and deciduas were obtained in patients.Expression of HOXA-10 mRNA and protein was evaluated by using RT-PCR and Western blotting,and the location of HOXA-10 protein was evaluated by immunohistochemistry in all samples.ResultsHOXA-10 protein was located in both glandular epithelial cells and stromal cells of endometrium,and mRNA and protein was expressed in endometrium throughout the menstrual cycle.The levels of expression were obviously increased in mid,later secretory phase and was highest in deciduas in control group(P<0.05).But in study group,the levels of expression remained roughly constant and the expression in mid-and late-secretory phase was lower than that of control group(P<0.05).ConclusionThe higher expression of HOXA-10 protein in mid-,late-secretory endometria and deciduas is associated with implantation,decidualization and pregnancy.It,s defective expression may be one of the reason that cause implantation failure.

    HOXA-10;Endometrium;IVF-ET;Implantation

    猜你喜歡
    月經(jīng)期蛻膜輸卵管
    補(bǔ)腎活血方對(duì)不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者蛻膜與外周血中IL-21、IL-27的影響
    蛻膜化缺陷在子癇前期發(fā)病機(jī)制中的研究進(jìn)展
    輸卵管造影疼不疼
    原來(lái)是輸卵管積水惹的禍
    妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥蛻膜組織T細(xì)胞和B細(xì)胞失調(diào)與病情程度的關(guān)系
    肝臟(2020年12期)2021-01-11 10:44:30
    經(jīng)期喝酒的三大危害
    伴侶(2019年5期)2019-05-27 02:55:16
    輸卵管造影疼不疼
    原來(lái)是輸卵管積水惹的禍
    女性經(jīng)期怎么吃都不會(huì)胖?
    女性經(jīng)期怎么吃都不會(huì)胖?
    亚洲国产欧美人成| 一区二区三区四区激情视频 | 免费无遮挡裸体视频| 国产午夜福利久久久久久| 国产精品国产高清国产av| 亚洲国产精品成人综合色| 国产一区亚洲一区在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 看非洲黑人一级黄片| 国产伦一二天堂av在线观看| 干丝袜人妻中文字幕| 国产人妻一区二区三区在| 国产精品嫩草影院av在线观看| 精品人妻熟女av久视频| 美女高潮的动态| 精品久久久久久久久久免费视频| 99久国产av精品| 99热这里只有精品一区| 欧美最黄视频在线播放免费| 日韩国内少妇激情av| 亚洲国产高清在线一区二区三| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产高清激情床上av| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 我要搜黄色片| 国模一区二区三区四区视频| 搡老妇女老女人老熟妇| 性插视频无遮挡在线免费观看| av视频在线观看入口| 一级毛片我不卡| 99热这里只有是精品在线观看| 国产精品永久免费网站| 99久久成人亚洲精品观看| 亚洲在线观看片| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 一级黄色大片毛片| 国内精品一区二区在线观看| 免费av观看视频| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| www.av在线官网国产| 亚洲欧美精品自产自拍| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产精品,欧美在线| 免费搜索国产男女视频| 一级av片app| 国产精品.久久久| 12—13女人毛片做爰片一| 五月玫瑰六月丁香| 久99久视频精品免费| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产精品三级大全| 国产片特级美女逼逼视频| 国内精品久久久久精免费| 天堂中文最新版在线下载 | 午夜福利视频1000在线观看| 久久久国产成人精品二区| 青春草视频在线免费观看| 成年女人看的毛片在线观看| 精品久久久久久久久av| 麻豆成人午夜福利视频| a级一级毛片免费在线观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 日本三级黄在线观看| 国产美女午夜福利| 国产精品蜜桃在线观看 | 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 婷婷六月久久综合丁香| 色播亚洲综合网| 中文字幕免费在线视频6| 国产成人freesex在线| 亚洲精品日韩av片在线观看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 久久这里有精品视频免费| 日韩人妻高清精品专区| 中国国产av一级| 一级黄片播放器| 中文资源天堂在线| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 美女国产视频在线观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美极品一区二区三区四区| 51国产日韩欧美| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产探花在线观看一区二区| 黄色一级大片看看| 久久热精品热| 国产精品人妻久久久影院| 长腿黑丝高跟| 亚洲在久久综合| 国产伦在线观看视频一区| 熟女电影av网| 中文字幕av成人在线电影| 亚洲自拍偷在线| 97超视频在线观看视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 久久这里只有精品中国| 色哟哟·www| 中国美女看黄片| 国产亚洲欧美98| 99热这里只有是精品50| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲国产欧美人成| 国产日本99.免费观看| 少妇的逼水好多| 欧美又色又爽又黄视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产精品久久电影中文字幕| 色哟哟哟哟哟哟| 丰满乱子伦码专区| 男人狂女人下面高潮的视频| 熟女电影av网| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 午夜福利成人在线免费观看| 国产熟女欧美一区二区| 天堂√8在线中文| 一级黄片播放器| 国产成人freesex在线| 最好的美女福利视频网| 人人妻人人澡欧美一区二区| 欧美丝袜亚洲另类| 干丝袜人妻中文字幕| 国产探花极品一区二区| 美女国产视频在线观看| 国内精品宾馆在线| 麻豆一二三区av精品| 久久99精品国语久久久| 色播亚洲综合网| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 色哟哟哟哟哟哟| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 国产精品国产高清国产av| av免费在线看不卡| 欧美xxxx性猛交bbbb| 欧美+日韩+精品| 热99在线观看视频| 久久久色成人| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产精品久久久久久久久免| 在线a可以看的网站| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 久久精品国产亚洲网站| 成人综合一区亚洲| 人人妻人人看人人澡| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 免费av不卡在线播放| 成人三级黄色视频| 97在线视频观看| 男女视频在线观看网站免费| 久久久久性生活片| 亚洲人成网站高清观看| 久久久久久久久久久免费av| 日本免费一区二区三区高清不卡| 日韩中字成人| 国产精品久久视频播放| 国产大屁股一区二区在线视频| 成年女人看的毛片在线观看| 97超视频在线观看视频| 日韩欧美精品免费久久| 日本黄色片子视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 欧美日韩综合久久久久久| 2022亚洲国产成人精品| 亚洲精品日韩av片在线观看| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲国产精品成人综合色| 欧美另类亚洲清纯唯美| 白带黄色成豆腐渣| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产精品无大码| 免费av毛片视频| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产精品久久久久久av不卡| 成人毛片60女人毛片免费| 看免费成人av毛片| 哪个播放器可以免费观看大片| 黑人高潮一二区| 久久午夜福利片| 久久草成人影院| 搞女人的毛片| 婷婷色综合大香蕉| 欧美zozozo另类| 99热这里只有是精品在线观看| 伦精品一区二区三区| 亚洲乱码一区二区免费版| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 99久久人妻综合| 不卡视频在线观看欧美| 国产老妇女一区| av在线蜜桃| 欧美性感艳星| 人妻系列 视频| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 我的老师免费观看完整版| 日本五十路高清| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产视频内射| 久久99热6这里只有精品| 日本三级黄在线观看| 可以在线观看毛片的网站| 黄色配什么色好看| 亚洲欧美精品自产自拍| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲自偷自拍三级| av在线播放精品| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 看片在线看免费视频| 国产伦在线观看视频一区| 天堂中文最新版在线下载 | 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产老妇女一区| av在线观看视频网站免费| 少妇被粗大猛烈的视频| 精品一区二区免费观看| 最近中文字幕高清免费大全6| 亚洲精品久久国产高清桃花| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲第一电影网av| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 黄色配什么色好看| 国产成人精品久久久久久| 久久99蜜桃精品久久| 国产精品av视频在线免费观看| 国产av不卡久久| 一夜夜www| 精品人妻熟女av久视频| 99热这里只有精品一区| 啦啦啦韩国在线观看视频| 黄色配什么色好看| 人体艺术视频欧美日本| 久久精品国产自在天天线| 久久久精品欧美日韩精品| 99在线视频只有这里精品首页| 三级毛片av免费| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 高清日韩中文字幕在线| 国产精品爽爽va在线观看网站| 天天躁日日操中文字幕| av女优亚洲男人天堂| 欧美丝袜亚洲另类| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 午夜免费男女啪啪视频观看| av天堂中文字幕网| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产一区二区在线观看日韩| 一边亲一边摸免费视频| av视频在线观看入口| 欧美色视频一区免费| 国产精品久久电影中文字幕| 国产精品人妻久久久久久| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 日韩高清综合在线| 51国产日韩欧美| 亚洲天堂国产精品一区在线| 麻豆成人av视频| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产不卡一卡二| a级毛片免费高清观看在线播放| 欧美在线一区亚洲| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲四区av| 成人二区视频| 成人综合一区亚洲| 波野结衣二区三区在线| 国产乱人视频| 爱豆传媒免费全集在线观看| 一区二区三区四区激情视频 | 夫妻性生交免费视频一级片| 此物有八面人人有两片| 国产成人精品婷婷| 嫩草影院入口| 免费看日本二区| 精品国内亚洲2022精品成人| 国语自产精品视频在线第100页| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 我要看日韩黄色一级片| 午夜福利视频1000在线观看| 国产91av在线免费观看| 伦理电影大哥的女人| 伦理电影大哥的女人| 国产精品福利在线免费观看| 床上黄色一级片| 一本久久中文字幕| 99久国产av精品| 尾随美女入室| 22中文网久久字幕| 日韩欧美三级三区| 国产精品久久视频播放| 成人二区视频| 国产伦在线观看视频一区| 中文亚洲av片在线观看爽| avwww免费| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 99久国产av精品| 国产亚洲精品av在线| 寂寞人妻少妇视频99o| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲国产精品成人综合色| 久久久久性生活片| av专区在线播放| 亚洲国产精品合色在线| 精品人妻视频免费看| 麻豆国产97在线/欧美| 亚洲国产色片| 免费观看精品视频网站| 亚洲一区二区三区色噜噜| 免费av毛片视频| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 嘟嘟电影网在线观看| 欧美日本视频| 亚洲精品自拍成人| 综合色av麻豆| 能在线免费观看的黄片| 国内精品久久久久精免费| 成年女人看的毛片在线观看| 99热网站在线观看| 欧美在线一区亚洲| 欧美成人免费av一区二区三区| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产欧美日韩精品一区二区| 麻豆久久精品国产亚洲av| 亚洲真实伦在线观看| 欧美一区二区国产精品久久精品| 99久久精品国产国产毛片| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 成人亚洲欧美一区二区av| 成人国产麻豆网| or卡值多少钱| a级毛色黄片| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 综合色av麻豆| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 国产v大片淫在线免费观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 又粗又爽又猛毛片免费看| 91久久精品国产一区二区三区| 久久韩国三级中文字幕| 美女高潮的动态| 波多野结衣巨乳人妻| 国产精品久久久久久久电影| 亚州av有码| 可以在线观看的亚洲视频| 黄色欧美视频在线观看| 国产老妇女一区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 毛片女人毛片| 高清毛片免费看| 黄色配什么色好看| 美女大奶头视频| 欧美zozozo另类| 亚洲第一电影网av| 欧美日韩综合久久久久久| 91麻豆精品激情在线观看国产| 一本久久中文字幕| 亚洲人成网站高清观看| 国产免费一级a男人的天堂| 国产成人精品婷婷| 久久久国产成人免费| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 22中文网久久字幕| 变态另类丝袜制服| 三级毛片av免费| 看黄色毛片网站| 蜜臀久久99精品久久宅男| 乱人视频在线观看| 成人性生交大片免费视频hd| 赤兔流量卡办理| av天堂在线播放| 我要搜黄色片| 老司机福利观看| 黄色日韩在线| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国内精品宾馆在线| 中文字幕免费在线视频6| h日本视频在线播放| 午夜a级毛片| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 一本久久精品| 国产在线男女| 男人舔奶头视频| 日本免费a在线| 亚洲av不卡在线观看| 夫妻性生交免费视频一级片| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 天天躁日日操中文字幕| 国产成人aa在线观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 午夜福利在线观看吧| 国产日韩欧美在线精品| 插逼视频在线观看| 国国产精品蜜臀av免费| 久久精品久久久久久久性| 少妇熟女欧美另类| 午夜精品一区二区三区免费看| 男人舔奶头视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲第一区二区三区不卡| 男女边吃奶边做爰视频| 婷婷色av中文字幕| 国产高清不卡午夜福利| 长腿黑丝高跟| 免费看日本二区| 久久精品91蜜桃| 欧美性猛交黑人性爽| 中出人妻视频一区二区| 国产老妇女一区| 精品久久国产蜜桃| 国产v大片淫在线免费观看| 全区人妻精品视频| 嫩草影院精品99| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| av.在线天堂| 日本免费a在线| 国产综合懂色| 国产一区二区三区av在线 | 亚洲色图av天堂| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 三级经典国产精品| 九色成人免费人妻av| 一级av片app| 亚洲电影在线观看av| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 欧美极品一区二区三区四区| 精品熟女少妇av免费看| 免费大片18禁| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产精品一区二区性色av| 亚洲av第一区精品v没综合| 国内精品久久久久精免费| 美女大奶头视频| 一区二区三区四区激情视频 | 婷婷六月久久综合丁香| 能在线免费观看的黄片| 婷婷精品国产亚洲av| 国产精品爽爽va在线观看网站| av黄色大香蕉| 亚洲av中文av极速乱| 午夜福利在线观看吧| 成人午夜精彩视频在线观看| 欧美bdsm另类| 国产精品一区www在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲av成人av| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 精品熟女少妇av免费看| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲自拍偷在线| 午夜精品在线福利| 日韩国内少妇激情av| 日日撸夜夜添| 美女高潮的动态| av在线蜜桃| 69av精品久久久久久| 国产在线精品亚洲第一网站| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产精品野战在线观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲真实伦在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 在线观看66精品国产| a级毛片免费高清观看在线播放| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 色综合色国产| 国产精品三级大全| 亚洲久久久久久中文字幕| 神马国产精品三级电影在线观看| 在线观看午夜福利视频| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| www.色视频.com| 久久99热6这里只有精品| 成年女人看的毛片在线观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 99久久精品热视频| 国产69精品久久久久777片| 亚洲欧美精品自产自拍| 久久韩国三级中文字幕| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产av不卡久久| 99久久成人亚洲精品观看| 哪个播放器可以免费观看大片| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲成人av在线免费| а√天堂www在线а√下载| 美女被艹到高潮喷水动态| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 麻豆av噜噜一区二区三区| 悠悠久久av| 欧美成人一区二区免费高清观看| 国产精品99久久久久久久久| 床上黄色一级片| 久久人妻av系列| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 成年免费大片在线观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 99久国产av精品国产电影| 成人亚洲欧美一区二区av| 嫩草影院新地址| kizo精华| a级毛片a级免费在线| 真实男女啪啪啪动态图| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 久久草成人影院| 99国产极品粉嫩在线观看| 人妻少妇偷人精品九色| 在线a可以看的网站| 最近中文字幕高清免费大全6| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲国产欧美人成| 亚洲在线观看片| 美女黄网站色视频| 级片在线观看| 成人国产麻豆网| 极品教师在线视频| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 岛国毛片在线播放| 偷拍熟女少妇极品色| 中文字幕av成人在线电影| 能在线免费看毛片的网站| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 久久久精品欧美日韩精品| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 一本精品99久久精品77| 男女下面进入的视频免费午夜| 成人二区视频| 国产精品福利在线免费观看| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 人体艺术视频欧美日本| 毛片一级片免费看久久久久| 国产午夜精品论理片| 亚洲无线在线观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产精品人妻久久久影院| 乱码一卡2卡4卡精品| 男女下面进入的视频免费午夜| 成人二区视频| 2021天堂中文幕一二区在线观| 少妇熟女欧美另类| 久久热精品热| 久99久视频精品免费| 我的老师免费观看完整版| 亚洲最大成人手机在线| 在线天堂最新版资源| 午夜老司机福利剧场| 亚洲最大成人中文| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产伦理片在线播放av一区 | 午夜福利视频1000在线观看| 日本成人三级电影网站| 欧美激情在线99| 不卡视频在线观看欧美| 校园人妻丝袜中文字幕| 搞女人的毛片| 偷拍熟女少妇极品色| 国产精品99久久久久久久久| 18禁在线播放成人免费| 国产伦理片在线播放av一区 | 毛片女人毛片| 免费无遮挡裸体视频| 99国产精品一区二区蜜桃av| 日本熟妇午夜| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产毛片a区久久久久| 日韩av在线大香蕉| 免费无遮挡裸体视频| 毛片一级片免费看久久久久| 网址你懂的国产日韩在线| 国产精品久久视频播放| 在线观看66精品国产| 亚洲va在线va天堂va国产| 欧美日韩综合久久久久久| 能在线免费看毛片的网站| 成人特级黄色片久久久久久久| 春色校园在线视频观看| 永久网站在线| 可以在线观看的亚洲视频| 亚洲av中文av极速乱| 桃色一区二区三区在线观看| 村上凉子中文字幕在线| 成人二区视频| 黄片wwwwww| 久久久久久久久久久丰满| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲av成人精品一区久久| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产探花在线观看一区二区| 欧美一区二区国产精品久久精品| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产精品精品国产色婷婷| 国产成人freesex在线| 99久久无色码亚洲精品果冻|