臺(tái)海川 徐 荔 王 娟 卯明霞
(云南省西雙版納州食品藥品檢驗(yàn)所,云南 景洪 666100)
傣藥扁擔(dān)藤為葡萄科植物十字崖爬藤Tetrastigma cruciatum Craib et Gagnep.的干燥藤莖,西雙版納傣醫(yī)將扁擔(dān)藤稱為“嘿扁”。扁擔(dān)藤性平,味微澀,入風(fēng)、火、土、水塔。有除風(fēng)解毒,消腫止痛之功。用于風(fēng)濕痹痛,頸項(xiàng)強(qiáng)痛,腰膝疼痛;跌打損傷,骨折;濕疹,蛇竄瘡等。目前對(duì)扁擔(dān)藤的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法未見報(bào)道。為了有效控制其藥材質(zhì)量,本文對(duì)3個(gè)不同產(chǎn)地藥材的性狀、成分系統(tǒng)預(yù)試驗(yàn)、顯微鑒別、薄層色譜鑒別、水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物、急性毒性等方面進(jìn)行了研究,為扁擔(dān)藤藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了科學(xué)依據(jù)。
1.1 材料:樣品采自景洪市景訥鄉(xiāng)(1號(hào)樣)、勐臘縣勐侖鎮(zhèn)(2號(hào)樣)、勐臘縣勐伴鄉(xiāng)(3號(hào)樣),植物標(biāo)本經(jīng)中國科學(xué)院西雙版納熱帶植物園鑒定為葡萄科植物十字崖爬藤Tetrastigma cruciatum Craib et Gagnep.。硅膠G(青島海洋化工廠),所用其它試劑均為分析純。
1.2 儀器:LEICA RM-2016生物組織切片機(jī)(上海徠卡儀器有限公司)、SA3300PL生物顯微鏡(北京泰克儀器有限公司)、計(jì)算機(jī)顯微分析系統(tǒng)(北京泰克儀器有限公司)。
2.1 性狀:本品為不規(guī)則條塊狀,厚0.3~1cm。栓皮淺褐色至綠褐色,可見綠色苔蘚附著物,栓皮脫落處顯棕紅色。質(zhì)硬。切面皮部較薄,棕紅色。木質(zhì)部淺棕色,由纖維束與導(dǎo)管群相間排列呈多個(gè)同心環(huán),導(dǎo)管孔明顯,有裂隙,易縱向?qū)訝顒冸x。髓部小。氣微,味淡、微澀。
2.2 成分系統(tǒng)預(yù)試驗(yàn):試驗(yàn)顯示含有還原糖、多糖類、黃酮類、植物甾醇、酚類、鞣質(zhì)、香豆素、強(qiáng)心苷、有機(jī)酸類等成分。
2.3 顯微鑒別:橫切面:寬.5cm,0.7cm。呈兩端膨大,中部狹窄的啞鈴狀,兩端切面最外為落皮層。落皮層向內(nèi)有3~4個(gè)排列整齊的木栓層帶,兩個(gè)層帶中間為頹廢的皮層組織,有纖維束及少量石細(xì)胞環(huán)繞分隔。維管束被髓射線分隔為數(shù)束,向兩端沿明顯輻射。韌皮部細(xì)胞由纖維環(huán)繞分隔成10~13個(gè)格子狀,束中形成層可見,木質(zhì)部導(dǎo)管在外側(cè)直徑較大,向內(nèi)漸小。中部切面木栓層數(shù)列,外被落皮層,皮層細(xì)胞4~5列,維管束亦被射線分隔成束;韌皮部一面較寬,一面窄,髓部類圓形,偏向窄面。韌皮部、射線及髓部均有黏液細(xì)胞散在,內(nèi)含針晶束。薄壁細(xì)胞中含淀粉粒及草酸鈣簇晶(見圖1)。
粉末:粉末紅棕色。木栓細(xì)胞黃棕色,多角形,壁略增厚。黏液細(xì)胞內(nèi)含草酸鈣針晶束,針晶長50~150μm。草酸鈣簇晶眾多,棱角短鈍,直徑10~70μm。導(dǎo)管為具緣紋孔,直徑60~120μm。纖維長梭形,壁連珠狀增厚,可見壁孔,直徑15~35μm。淀粉粒多單粒,長卵形、廣卵形、類三角形、不規(guī)則形,臍點(diǎn)點(diǎn)狀、人字狀,直徑5~15μm;復(fù)粒由2~3分粒組成??梢婞S棕色色素塊。(見圖2)。
2.4 薄層色譜鑒別:取本品粉末1g,加乙醇10ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)蛹状?ml使溶解,作為供試品溶液。另取扁擔(dān)藤對(duì)照藥材1g,同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》一部附錄)試驗(yàn),吸取上述2種溶液各3μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(1∶8∶1)為展開劑,預(yù)平衡15分鐘,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)(見圖3)。
2.5 水分:取1、2、3號(hào)樣粉末約2g,精密稱定,照水分測定法(《中國藥典》2010年版一部附錄第一法)測定,結(jié)果分別為.08%、8.90%、9.30%,平均值為.09%。
2.6 總灰分:取、2、3 號(hào)樣粉末約g,精密稱定,照(《中國藥典》2010年版一部附錄),結(jié)果分別為7.67%、6.77%、7.74%,平均值為.39%。
2.7 酸不溶性灰分:取總灰分結(jié)果按(《中國藥典》2010年版一部附錄),結(jié)果分別為.53%、0.44%、0.54%,平均值為.50%。
2.8 重金屬:取1、2、3號(hào)樣粉末約2g,精密稱定,照(《中國藥典》2010年版一部附錄),結(jié)果均未超過百萬分之一。
2.9 浸出物:取1、2、3號(hào)樣粉末約4g,精密稱定,照醇溶性浸出物測定法項(xiàng)下的熱浸法(《中國藥典》一部附錄)測定,用稀乙醇作溶劑,結(jié)果分別為.48%、17.32%、16.68%,平均值為16.83%。
2.10 急性毒性試驗(yàn):對(duì)扁擔(dān)藤藥材的水煎濃縮液(6.03g生藥/ml)進(jìn)行了小鼠急性毒性試驗(yàn),未測出LD50值,故測定其最大耐受量。取18~22gSPF級(jí)ICR小鼠40只,分為2組,每組20只,雌雄各半,以4.22g生藥/ml,按40ml/kg給藥,24小時(shí)內(nèi)灌胃給藥1次,觀察14天。結(jié)果表明小鼠的最大耐受量為168.8g生藥/kg,相當(dāng)于臨床成人(體重按60kg計(jì))擬用量的338倍。與對(duì)照組(生理鹽水)比較,給藥組小鼠體重、飲食、外觀、行為、分泌物、排泄物等均未見明顯異常,亦無死亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死小鼠,肉眼觀察各主要臟器未見異常。
3.1 水分、總灰分、酸不溶性灰分和浸出物是評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量的重要參數(shù),因此制定相應(yīng)的限度是十分必要的。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,規(guī)定其水分不得過13.0%,總灰分不得過10.0%,酸不溶性灰分不得過1.0%,浸出物不得少于11.0%。重金屬結(jié)果均未超過百萬分之十,暫不在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)置此項(xiàng)目。
3.2 試驗(yàn)分別以水、乙醇、稀乙醇為溶劑,采用冷浸法及熱浸法測定本品浸出物的含量。結(jié)果表明,稀乙醇浸出量高于乙醇和水的浸出量,熱浸法浸出量高于冷浸法浸出量。因此,確定以稀乙醇為溶劑,熱浸法測定本品浸出物的含量。
3.3 在急性毒性試驗(yàn)中測出最大耐受量為168.8g生藥/kg,顯示扁擔(dān)藤藥材在處方用藥范圍內(nèi)仍是安全的。
3.4 上述研究項(xiàng)目內(nèi)容全面,方法簡便快速,能有效控制傣藥材扁擔(dān)藤的質(zhì)量。