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    HPLC法同時(shí)測(cè)定八號(hào)膏中大黃素和大黃酚

    2012-09-06 14:29:08許杜娟高昌琨
    中成藥 2012年8期
    關(guān)鍵詞:八號(hào)蒽醌黃素

    高 建, 趙 萍, 夏 泉, 許杜娟,2, 高昌琨

    (1.安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院,國(guó)家中醫(yī)藥管理局三級(jí)實(shí)驗(yàn)室安徽合肥 230022;2.安徽醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院安徽合肥 230032;3.安徽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院安徽合肥 230038)

    眾所周知,燒傷可引起嚴(yán)重的皮膚損害。中藥在燒傷治療上有其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)[1-2],八號(hào)膏是安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院在上世紀(jì)七十年代中西醫(yī)結(jié)合治療燒傷的研究成果之一,是治療燒傷的特色中藥制劑,具有清熱解毒、收斂生肌等功效,主要治療深Ⅱ度燒傷,大量的臨床使用證明其效果顯著。八號(hào)膏處方由大黃、地榆、五倍子等中藥組成,由于其處方組成復(fù)雜,至今仍沒有明確的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),嚴(yán)重制約其進(jìn)一步開發(fā)和利用,因此對(duì)其中主要成分質(zhì)量控制的研究十分迫切。

    大黃具有涼血解毒、逐瘀通經(jīng)[3]的功效?,F(xiàn)代研究表明[4]大黃中的活性成分具有瀉下、抗炎、抗菌、抗病毒等作用;此外通過大量閱讀文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),大黃、冰片等中藥在燒燙傷治療中的使用頻率最高。故為建立該制劑的定量分析方法,更好地控制質(zhì)量,對(duì)該制劑進(jìn)行了定量測(cè)定方法的研究,本試驗(yàn)選取大黃中大黃素和大黃酚為指標(biāo),運(yùn)用目前使用廣泛的HPLC法進(jìn)行測(cè)定。

    1 儀器與試藥

    Agilent 1100(美國(guó))高效液相儀;Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5 μL,迪馬科技公司)色譜柱;AB135-S十萬分之一電子天平 (梅特勒-托利多中國(guó)地區(qū)生產(chǎn));SB3200超聲波清洗器 (必能信超聲公司);電熱恒溫水浴鍋 (上海醫(yī)療器械五廠)。

    八號(hào)膏 (安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院制劑中心生產(chǎn),批號(hào):20111021,20120110,20110724,20110821,20111222,20110623,20110305,20110725);大黃素對(duì)照品 (中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào):110756-200110)、大黃酚對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào):11796-200615)、大黃酸對(duì)照品 (中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào):110757-200206)、蘆薈大黃素對(duì)照品 (中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào):110795-200806)、大黃素甲醚對(duì)照品 (中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào):110758-200611)。甲醇 (色譜純,美國(guó)Tedia公司),滅菌注射用水 (超純水,湖南科倫制藥有限公司);甲醇 (分析純,上海潤(rùn)捷化學(xué)試劑有限公司),85%磷酸,石油醚溶液等。

    2 方法與結(jié)果

    2.1色譜條件 DiamonsilC18(4.6 mm×250 mm,5 μm,迪馬科技公司),phenomenex保護(hù)柱,柱芯 (3 mm×4 mm);流動(dòng)相為甲醇-0.1%磷酸 (85∶15),進(jìn)樣量10 μL;檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm;體積流量1.0 mL/min;柱溫30℃。在此條件下大黃樣品中兩種對(duì)照品與其他組分均能達(dá)到基線分離,見圖1。

    圖1 對(duì)照品 (A)、制劑 (B)、大黃對(duì)照藥材 (C)和陰性對(duì)照 (D)HPLC色譜圖

    2.2 對(duì)照品溶液 精密稱取大黃素對(duì)照品和大黃酚對(duì)照品適量,加入甲醇溶液定容,制成大黃素質(zhì)量濃度為0.105 g/L,大黃酚質(zhì)量濃度為0.103 g/L的對(duì)照品貯備液。

    2.3 供試品溶液 取八號(hào)膏約5 g,精密稱定,加45 mL 20%硫酸,超聲20 min酸化;于3 000 r/min離心機(jī)中離心10 min,棄去酸液后,濾渣加40 mL石油醚超聲15 min濾過,濾渣加20 mL石油醚超聲15 min,濾過,合并兩次石油醚溶液,于60℃下?lián)]干溶劑,加甲醇溶解后定容至10 mL,用0.45 μm微孔濾膜濾過,取續(xù)濾液,即得供試品溶液。

    2.4 陰性對(duì)照溶液 按照八號(hào)膏的制備工藝,制備缺少大黃的陰性樣品,并按2.3項(xiàng)下方法制成陰性對(duì)照溶液。

    2.5 線性關(guān)系考察 精密稱取大黃素對(duì)照品貯備液,甲醇稀釋至5種不同質(zhì)量濃度的對(duì)照品溶液;精密稱取大黃酚對(duì)照品貯備液,甲醇稀釋至5種不同質(zhì)量濃度的對(duì)照品溶液。以上系列標(biāo)準(zhǔn)溶液在2.1項(xiàng)下色譜條件下,進(jìn)樣10 μL,測(cè)定各組分峰面積。以峰面積為縱坐標(biāo) (Y),以進(jìn)樣量 (μL)為橫坐標(biāo) (X),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算其回歸方程及線性范圍。大黃素:Y=2 301X-9.604 1,r=0.999 9,線性范圍:0.016 41~0.522 μg;大黃酚:Y=420 6.8X-15.55,r=0.999 9,線性范圍:0.016 10~0.515 μg。

    2.6 精密度試驗(yàn) 精密吸取混合對(duì)照品溶液10 μL,連續(xù)進(jìn)樣6次,記錄峰面積,大黃素、大黃酚的日內(nèi)精密度RSD(n=5)分別為0.35%、0.15%。精密吸取相同對(duì)照品溶液10 μL,連續(xù)進(jìn)樣3 d,每天3次,記錄峰面積,大黃素、大黃酚的日間精密度RSD分別為0.27%、0.37%。

    2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液,在相同色譜條件下,分別在0、2、4、6、12、24 h進(jìn)樣,測(cè)得大黃素峰面積RSD為2.7%(n=6)、大黃酚峰面積RSD為2.9%(n=6),結(jié)果表明,供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

    2.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)供試品,按2.3項(xiàng)下供試品溶液制備方法制備6份,在上述相同色譜條件下進(jìn)行測(cè)定,測(cè)得供試品中大黃素峰面積RSD為2.7%(n=6),大黃酚峰面積RSD為2.1%(n=6)。

    2.9 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取八號(hào)膏6份,按2.3項(xiàng)下制備供試品溶液,在相同色譜條件下進(jìn)行測(cè)定,測(cè)得其中大黃素和大黃酚的濃度。分別精密移取上述溶液各100 μL,精密加入混合對(duì)照品溶液100 μL,進(jìn)樣量為10 μL,分別計(jì)算大黃素和大黃酸的加樣回收率,結(jié)果見表1。

    2.10 供試品定量測(cè)定 取8個(gè)批次的八號(hào)膏,按2.3項(xiàng)下制備供試品溶液,分別精密吸取10 μL,按上述色譜條件,每批次供試品溶液分別連續(xù)進(jìn)樣3次,分別計(jì)算每批次供試品溶液中大黃素、大黃酚的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)及RSD,并計(jì)算大黃素和大黃酚的相對(duì)保留值,結(jié)果見表2。

    表1 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (n=6)

    表2 不同批次八號(hào)膏測(cè)定結(jié)果 (n=8)

    3 討論

    3.1 提取方法的選擇[5-7]經(jīng)甲醇、乙醇、三氯甲烷等提取溶劑以及超聲、回流等提取方法比較,發(fā)現(xiàn)酸化后,加熱回流方法破壞了一部分蒽醌類成分;由于超聲提取在常溫下進(jìn)行,較之加熱回流方法,蒽醌類成分不容易被破壞且提取更完全,因此選擇超聲法進(jìn)行提取。

    3.2 流動(dòng)相的選擇 通過閱讀參考文獻(xiàn) [8-12]和查閱2010年版《中國(guó)藥典》[3],以及預(yù)實(shí)驗(yàn)中使用的流動(dòng)相如:甲醇-0.1%磷酸 (85∶15)、甲醇 -乙腈 -0.1%磷酸(23∶42∶35)、乙腈-0.1%磷酸 (85∶15)等,最終選擇甲醇-0.1%磷酸 (85∶15)為流動(dòng)相,分離完全,峰形較好且出峰時(shí)間最短,適合對(duì)八號(hào)膏中兩種蒽醌類成分的同時(shí)測(cè)定。

    3.3 實(shí)驗(yàn)意義 燒傷制劑八號(hào)膏由大黃、地榆、五倍子等中藥組成,其中大黃為主藥之一。其含有游離的蒽醌類衍生物如大黃素、大黃酚、大黃酸等,它們對(duì)多種病毒和細(xì)菌具有抑制和殺滅作用[4]。所以制劑中大黃有效成分含有量的高低是評(píng)價(jià)其質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。蒽醌類含有量測(cè)定方法文獻(xiàn)報(bào)道較多,但多集中在大黃藥材中蒽醌類成分的含有量測(cè)定,提取方法和色譜條件多種多樣;而制劑則往往是單一成分的測(cè)定。經(jīng)過多次預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),八號(hào)膏制劑中含有5種蒽醌類成分,其中大黃素、大黃酚的含有量均較高,其余3種成分含有量較低,故本實(shí)驗(yàn)選擇大黃素、大黃酚作為含有量測(cè)定的指標(biāo)成分,對(duì)燒傷制劑八號(hào)膏中大黃的含有量測(cè)定方法進(jìn)行研究,為八號(hào)膏及含有大黃的中藥制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    [1]袁 汀,周瑜妹.外用中藥治療燒燙傷的研究進(jìn)展[J].光明中醫(yī),2010,25(11):2151-2153.

    [2]陸樹良.燒傷創(chuàng)面愈合的理論探索與臨床實(shí)踐[J].中華燒傷雜志,2008,24(5):359-361.

    [3]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典:2010年版一部[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010:20.

    [4]王 磊,張靜澤,高文遠(yuǎn).大黃活性成分藥代動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展[J].中成藥,2011,33(9):1571-1574.

    [5]李志梅,HPLC法測(cè)定致康膠囊中大黃酸、大黃素和大黃酚的含量[J].海峽藥學(xué),2012,22(7):102-103.

    [6]劉善心,馬 毅,鐘方曉,等.HPLC法測(cè)定復(fù)方大黃利膽片中大黃素、大黃酚的含量[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2007,13(12):13-14.

    [7]陳廣通,汪東庚,李玉琴.王氏保赤丸中大黃5種成分的HPLC測(cè)定[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2011,27(1):20-21.

    [8]賀凡珍,蔡學(xué)瑩,彭 維,等.HPLC法同時(shí)測(cè)定酒大黃中5種蒽醌的含量[J].中藥材,2011,34(9):1384-1385.

    [9]李鑫健,方翠芬,祝 明.HPLC法同時(shí)測(cè)定利膽排石片中大黃素、大黃酚及大黃素甲醚[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2011,23(17):82-84.

    [10]匡學(xué)海,董小萍,石任兵,等主編.中藥化學(xué)[M].北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2010:71.

    [11]Gao Xiaoyan,Jiang Yong,Lu Jianqiu ,et al.One single standard substance for the determination of multiple anthraquinone derivatives in rhubarb using high-performance liquid chromatography-diode array detection[J].J Chromatogr A,2009,1216(11):2118-2123.

    [12]陳興田,黃金華.HPLC法測(cè)定導(dǎo)赤丸中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的含量[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2011(27):179-180.

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