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    飼料脂肪水平對吉富羅非魚生長性能及其在低溫應(yīng)激下血清生化指標和肝臟脂肪酸組成的影響

    2012-09-04 08:54:34石桂城董曉慧譚北平遲淑艷楊奇慧劉泓宇
    動物營養(yǎng)學(xué)報 2012年11期
    關(guān)鍵詞:羅非魚脂肪酸低溫

    石桂城 董曉慧* 陳 剛 譚北平 遲淑艷楊奇慧 劉泓宇

    (1.廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料實驗室,湛江 5 24025;2.廣東普通高等學(xué)校南海水產(chǎn)經(jīng)濟動物增養(yǎng)殖重點實驗室,湛江 524025)

    吉富羅非魚(GIFT,Oreochromis niloticus)屬鱸形目(Perciformes)麗魚科(Cichlidae)羅非魚屬(Tilapia),屬于熱帶暖水性魚類,適宜在一年中水溫較高的季節(jié)生長,適宜生長溫度為20~35℃,其低溫耐受能力比較弱,冬季嚴寒天氣常常造成養(yǎng)殖生產(chǎn)上大量死亡。低溫應(yīng)激是魚類養(yǎng)殖過程中經(jīng)常面臨的問題,人們一直在尋求有效的方法減輕低溫應(yīng)激對水產(chǎn)養(yǎng)殖所帶來的危害。許多學(xué)者對魚類在低溫應(yīng)激下血液指標的變化進行了研究,包括遮目魚(Chanos chanos)[1]、鯉魚(Cyprinus capio)[2]、大黃魚(Pseudosciaena crocea)[3]、吉富羅非魚[4]等。魚類血液指標與機體自身的代謝、營養(yǎng)狀況及疾病有著密切關(guān)系,當魚體受到外界環(huán)境影響發(fā)生生理或病理變化時,血液生理生化指標往往能夠反映魚類在環(huán)境應(yīng)激下的健康狀況、營養(yǎng)狀況及對環(huán)境的適應(yīng)狀況。應(yīng)激情況下,魚類必須調(diào)動機體內(nèi)大量糖、脂肪和蛋白質(zhì)等能量物質(zhì)分解供能以抵抗應(yīng)激,因此均衡充裕的營養(yǎng)是保證養(yǎng)殖動物健康生長和提高抵抗應(yīng)激能力的關(guān)鍵。脂肪是魚類體內(nèi)重要的能源物質(zhì)和主要的能量貯備形式,飼料中添加適量的脂肪可以改善飼料的適口性,提高魚體的生長速率和飼料的利用效率[5-6],過多攝入脂肪則會使代謝系統(tǒng)紊亂,從而導(dǎo)致機體組織器官損害,影響生長[7-8]。飼料脂肪還能為養(yǎng)殖動物提供必需脂肪酸,而脂肪酸在預(yù)防和緩解應(yīng)激負效應(yīng)中起著重要作用,特別是二十二碳六烯酸(DHA)及大豆磷脂。相關(guān)研究表明,在真鯛(Pugrus major)[9]和黃蓋鰈(Limanda yokohamae)[10]飼料中添加 DHA及大豆磷脂能有效減緩應(yīng)激反應(yīng),增強機體抵抗應(yīng)激的能力。到目前為止,國內(nèi)外通過脂肪營養(yǎng)調(diào)控途徑來調(diào)節(jié)魚類低溫應(yīng)激下的生理代謝,調(diào)整魚體脂肪酸組成,尤其在提高暖水性魚類抵抗低溫應(yīng)激能力方面的研究報道較少。因此,本試驗通過配制4種不同脂肪水平的飼料,旨在探討飼料脂肪水平對吉富羅非魚生長性能及其在低溫應(yīng)激下血液指標及脂肪酸組成的影響,了解羅非魚抵抗低溫應(yīng)激的生理代謝機制,為越冬羅非魚飼料脂類的運用提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗飼料

    以魚粉、豆粕、棉籽粕、菜籽粕等為主要原料,通過添加0、4%、6%、8%的豆油制成脂肪水平分別為1.95%(F2組)、6.19%(F6 組)、8.03%(F8組)、9.95%(F10組)的4種試驗飼料(表1),其脂肪酸組成見表2。將各種飼料原料粉碎過60目篩,按配方比例準確稱重后混勻,少量組分采用逐級擴大法混合,然后加入豆油,攪拌機攪拌15 min,加入氯化膽堿和磷酸二氫鈣,繼續(xù)攪拌15 min,將攪拌好的飼料壓制成粒徑為3.0 mm的顆粒飼料,風(fēng)干后用封口袋編號分裝,-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.2 試驗動物及飼養(yǎng)管理

    試驗用吉富羅非魚由廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)經(jīng)濟動物養(yǎng)殖實驗室提供,養(yǎng)殖試驗在廣東海洋大學(xué)霞山校區(qū)第二實驗樓可控溫循環(huán)水族系統(tǒng)中進行。暫養(yǎng)時試驗魚投喂商品飼料(蛋白質(zhì)水平為30%,脂肪水平為5%),暫養(yǎng)期2周。試驗開始前魚禁食24 h后,挑選規(guī)格一致、體格健壯的試驗魚[平均體重為(37.0±1.0)g]300尾,隨機分為4組,每組3個重復(fù),每個重復(fù)25尾魚,以重復(fù)為單位放養(yǎng)于水族箱(長80 cm×寬45 cm×高45 cm)中。飼養(yǎng)試驗持續(xù)8周,每天投喂2次(08:00和18:00),日投喂量為魚體重的5%,每天記錄投喂量和水溫。養(yǎng)殖期間不間斷充氧,水溫(28±1)℃,溶氧 >6 mg/L,氨氮 <0.01 mg/L,pH 為7.2~7.6。

    1.3 低溫應(yīng)激試驗設(shè)計及樣品采集

    飼養(yǎng)試驗結(jié)束后,統(tǒng)計生長指標,然后在養(yǎng)殖水溫(28℃)條件下,每個重復(fù)隨機取3尾魚作為對照條件的樣品分析,然后利用自動控溫裝置(HXSWT-301,大連匯新)以1℃/h的速率降至15℃,3 h后每個重復(fù)隨機取3尾魚作為應(yīng)激條件的樣品分析。低溫應(yīng)激期間不投喂。

    采樣時,將魚撈起,用毛巾拭干體表水分,尾靜脈采血,血樣在4℃冰箱靜置5 h后,4℃4 500 r/min離心15 min制備血清。血清放置于-20℃保存待分析。采血后解剖,取20 g左右肝臟放入封口袋后,立即放入-80℃冰箱中,備測脂肪酸組成。

    1.4 測定指標及方法

    1.4.1 生長性能

    成活率(survival rate,SR,%)=100 ×試驗結(jié)束時魚尾數(shù)/試驗開始時魚尾數(shù);

    增重率(weigh gain rate,WGR,%)=100 ×(終末體重-初始體重+死亡體重)/初始體重;特定生長率(specific growth rate,SGR,%/d)=100×(ln終末體重-ln初始體重)/試驗天數(shù);飼料系數(shù)(feed conservation rate,F(xiàn)CR)=攝食量/

    (終末體重-初始體重+死亡體重)。1.4.2 血清生化指標

    血清生化指標用日立7600-110型全自動生化分析儀測定,測定指標包括血清葡萄糖(GLU)、總蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、膽固醇(CHOL)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)。

    表1 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets(air-dry basis) %

    1)維生素預(yù)混料可為每千克飼料提供The vitamin premix provided the following per kg of diets:VA 75 000 IU,VD33 000 IU,VE 120 mg,VC 75 mg,VK 15 mg,VB115 mg,VB27.5 mg,VB615 mg,VB120.075 mg,煙酸 nicotinic acid 180 mg,泛酸鈣 calcium pantothenate 75 mg,葉酸 folic acid 7.5 mg,生物素 biotin 1.5 mg,肌醇 inositol 600 mg。

    2)礦物質(zhì)預(yù)混料可為每千克飼料提供The mineral premix provided the following per kg of diets:MgSO4·7H2O 126 mg,ZnSO4·7H2O 107 mg,KI 10 mg,F(xiàn)eSO4·7H2O 369 mg,CuSO4·5H2O 32 mg,MnSO4·H2O 74 mg,CoCl21 mg,Na2SeO33 mg,NaCl 52 mg。

    3)總能為計算值,其余為實測值。GE was a calculated value,while others were measured values.1.4.3 肝臟脂肪酸組成

    總脂肪提取參照Folch等[11]介紹的氯仿-甲醇法,脂肪甲酯化參考氫氧化鉀-甲醇酯化法[12],方法略有改進,處理后含脂肪酸的甲酯溶液供色譜分析用。色譜分析條件:氣相色譜儀為瓦里安430-GC,色譜柱為60 m ×0.25 mm ×0.2 μm(安捷倫HP-88);氫離子火焰檢測器(FID)溫度為260℃,進樣口溫度為260℃,分流比為30∶1;柱溫程序升溫,初始溫度 140℃,維持 5 min,以5℃/min的速率升至240℃保持20 min;柱流量2 mL/min,線速度59.6 cm/min;載氣為高純氮氣(25 mL/min);燃氣為高純氫氣(30 mL/min)。以單種和混合標準脂肪酸甲酯(Sigma)進行定性分析,脂肪酸組成用面積歸一化方法計算。

    1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

    試驗結(jié)果以平均值±標準差表示。試驗數(shù)據(jù)用SPSS 16.0軟件進行統(tǒng)計分析,先對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(one-way ANOVA),如有顯著差異(P<0.05),則采用Duncan氏法進行多重比較。

    2 結(jié)果

    2.1 生長性能

    由表3可知,F(xiàn)8組和F10組WGR及SGR均顯著高于F2組(P<0.05),與F6組無顯著差異(P>0.05)。飼料脂肪水平對SR、FCR無顯著影響(P>0.05)。

    表2 試驗飼料脂肪酸組成(相對比例)Table 2 Fatty acid composition of experimental diets(relative proportion)

    SFA:飽和脂肪酸;MUFA:單不飽和脂肪酸;EPA:二十碳五烯酸;DHA:二十二碳六烯酸;PUFA:多不飽和脂肪酸;UFA:不飽和脂肪酸。表5同。

    SFA:saturated fatty acid;MUFA:monounsaturated fatty acid;EPA:eicosapentaenoic acid;DHA:docosahexenoic acid;PUFA:polyunsaturated fatty acid;UFA:unsaturated fatty acid.The same as Table 5.

    表3 飼料脂肪水平對吉富羅非魚生長性能的影響Table 3 Effects of dietary lipid level on growth performance of GIFT,Oreochromis niloticus

    同行數(shù)據(jù)肩標無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05),不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

    In the same row,values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference(P>0.05),while with different small letter superscripts mean significant difference(P<0.05).

    2.2 血清生化指標

    28℃下不同處理間各指標的比較見表4。各血清生化指標除TG外均隨飼料脂肪水平升高呈逐漸升高的趨勢。F10組GLU水平顯著高于F2組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。F8組和F10組TP水平均顯著高于F2組和F6組(P<0.05),且 F8組與 F10組、F2組與F6組間無顯著差異(P>0.05)。CHOL水平除F6組和F8組間無顯著差異(P>0.05)外,其他各組間均差異顯著(P<0.05)。TG水平各組間無顯著差異(P>0.05)。F10組HDL-C水平顯著高于其他各組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。F8組 LDL-C水平顯著高于 F2組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。F10組AST活性顯著高于F2組和 F6組(P<0.05),F(xiàn)8組顯著高于F2組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。F8組和F10組ALT活性顯著高于F2組和F6組(P<0.05),且F8組與F10組、F2組與 F6組間無顯著差異(P>0.05)。

    同行數(shù)據(jù)肩標無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05),不同大寫字母表示28℃下差異顯著(P<0.05),不同小寫字母表示15℃下差異顯著(P<0.05),*表示同一處理不同溫度下差異顯著(P<0.05)。下表同。

    In the same row,values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference(P>0.05),while with different capital letter superscripts mean significant difference at 28℃ (P<0.05),with different small letter superscripts mean significant difference at 15℃ (P<0.05),and with* superscripts mean significant difference under different temperatures with the same treatment(P<0.05).The same as below.

    15℃下不同處理間各指標的比較見表4。TP、CHOL、TG、LDL-C 水平隨著飼料脂肪水平升高有逐漸升高的趨勢。GLU、TG水平各組間無顯著差異(P>0.05)。F10組TP水平顯著高于F2組和F6組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。F10組CHOL水平顯著高于F2組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。F10組和F8組LDL-C水平顯著高于F2組和F6組(P<0.05),且F8組與F10組、F2組與F6組間無顯著差異(P>0.05)。HDL-C水平隨著脂肪水平升高呈先升高后降低趨勢。F6組HDL-C顯著高于F10組和F2組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。AST、ALT活性隨著飼料脂肪水平升高先略微下降后逐漸升高。F10組AST活性顯著高于F2組和F6組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。F2組、F8組和 F10組ALT活性顯著高于F6組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。

    2種溫度下同一處理各指標的比較見表4。各組 GLU、TP、CHOL、TG、LDL-C 水平在 2 種溫度下無顯著差異(P>0.05)。F6組和F8組15℃下HDL-C水平顯著高于28℃下(P<0.05),F(xiàn)2組和F10組HDL-C水平在2種溫度下無顯著差異(P>0.05)。各組15℃下AST、ALT活性均顯著高于28℃下(P<0.05)。

    2.3 肝臟脂肪酸組成

    28℃下不同處理間肝臟脂肪酸組成的比較見表5。吉富羅非魚肝臟脂肪酸組成與飼料脂肪酸組成具有較高的相關(guān)性。隨著飼料脂肪水平升高,飽和脂肪酸(SFA)比例呈下降趨勢,不飽和脂肪酸(UFA)比例呈上升趨勢,與飼料中二者的變化規(guī)律相一致。F2組二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)比例顯著高于F6組、F8組和F10組(P<0.05),F(xiàn)6組DHA比例顯著高于F8組和F10組(P<0.05)。F2組單不飽和脂肪酸(MUFA)比例顯著低于F10組和F8組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。多不飽和脂肪酸(PUFA)比例各組間均無顯著差異(P>0.05)。F2組n-3 PUFA比例顯著高于其他各組(P<0.05),F(xiàn)6組和F8組顯著高于F10組(P<0.05)。隨著飼料脂肪水平升高,n-6 PUFA比例顯著升高(P <0.05),n-3/n-6 顯著降低(P <0.05)。

    表5 飼料脂肪水平對吉富羅非魚肝臟脂肪酸組成的影響(相對比例)Table 5 Effects of dietary lipid level on fatty acid composition in liver of GIFT,Oreochromis niloticus(relative proportion)

    續(xù)表5

    脂肪酸Fatty acid組別Groups F2 28℃ 15℃F6 28℃ 15℃F8 28℃ 15℃F10 28℃ 15℃C18∶(1n-9+1n-7)/% 21.95±1.52B 22.84±1.01b 25.18±1.04B 27.12±0.63a 26.23±0.62A 28.24±0.31a 27.95±3.31A 28.61±1.31a C20∶1n-9/% 0.76±0.21 0.92±0.42 0.99±0.20 0.86±0.22 1.09±0.10 0.94±0.13 1.16±0.17 1.29±0.19 C22∶1n-11/% 0.23±0.03 0.25±0.08 0.29±0.03 0.27±0.06 0.25±0.05 0.27±0.06 0.21±0.04 0.34±0.12 MUFA/% 25.14±1.90B 26.02±1.40b 28.38±1.22AB 30.58±1.17a 29.24±0.83A 31.46±0.95a 31.05±3.35A 31.94±1.19a C18∶2n-4/% 0.16±0.04 0.18±0.02 0.16±0.06 0.16±0.03 0.12±0.01 0.13±0.01 0.12±0.05 0.14±0.01 C18∶2n-6/% 9.47±0.38D 11.36±3.29c 14.13±1.28C 15.79±0.79b 18.07±0.35B 19.92±0.73a 21.21±1.20A 22.95±0.81a C18∶3n-3/% 0.46±0.02 0.54±0.09b 0.68±0.12 0.61±0.05b 0.79±0.08 0.88±0.12a 0.81±0.38 0.91±0.10a C18∶3n-6/% 0.90±0.18A 0.86±0.09 1.04±0.07A 0.90±0.32 0.73±0.05B 0.82±0.17 1.02±0.12A 0.73±0.06 C20∶2/% 1.02±0.14B 0.89±0.06b 1.45±0.19A 1.19±0.31ab 1.44±0.25A 1.29±0.20ab 1.28±0.07B 1.57±0.26a C20∶3n-6/% 1.23±0.32 0.97±0.07 1.17±0.13 0.93±0.17 1.13±0.43 0.99±0.33 0.87±0.07 0.88±0.24 C20∶4n-6/% 3.91±0.60A 3.60±0.62a 2.58±0.38B 3.08±0.35ab 2.23±0.39B 2.25±0.59b 2.33±0.42B 2.32±0.86b C20∶5n-3(EPA)/% 0.29±0.06A 0.37±0.10a 0.16±0.11B 0.23±0.12ab 0.12±0.01B 0.13±0.03b 0.14±0.06B 0.15±0.05b C22∶5n-3/% 1.21±0.20 1.38±0.19 0.77±0.31 0.92±0.30 0.70±0.22 0.63±0.08 0.70±0.30 0.65±0.25 C22∶6n-3(DHA)/% 15.67±1.72A 16.66±1.54a 10.80±0.45B 11.31±0.91b 10.69±0.55B 10.22±1.07b 6.07±0.15C 6.80±1.16c PUFA/% 34.33±2.54 36.82±2.02 32.94±1.62 35.13±1.16 36.02±1.36 37.26±1.47 34.56±1.12 37.10±0.99 UFA/% 59.47±1.16B 62.84±2.40c*61.32±1.08AB 65.71±0.85b*65.26±1.71A 68.72±1.37a 65.61±3.89A 69.05±0.84a*n-3 PUFA/% 17.63±1.72A 18.95±1.19a 12.41±0.47B 13.08±0.98b 12.30±0.75B 11.86±1.22b 7.73±0.16C 8.51±1.07c n-6 PUFA/% 15.51±0.80D 16.79±2.84d 18.92±1.51C 20.70±0.33c 22.16±0.92B 23.98±0.35b 25.43±1.06A 26.88±0.81a n-3/n-6 1.14±0.07A 1.13±0.28a 0.66±0.05B 0.63±0.05b 0.55±0.04C 0.49±0.05c 0.30±0.01D 0.32±0.05d

    15℃下不同處理間肝臟中脂肪酸組成的比較見表5,低溫應(yīng)激下,吉富羅非魚肝臟脂肪酸組成與飼料脂肪酸組成同樣具有較高的相關(guān)性。隨著飼料脂肪水平升高,SFA比例呈下降趨勢,UFA比例呈上升趨勢,與飼料中二者的變化規(guī)律相一致。F2組EPA顯著高于F8組和F10組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。F2組DHA比例顯著高于F6組、F8組和F10組(P<0.05),F(xiàn)6組和F8組顯著高于F10組(P<0.05),F(xiàn)6組與F8組間差異不顯著(P>0.05)。F2組MUFA比例顯著低于F6組、F8組和F10組(P<0.05),其他各組間無顯著差異(P>0.05)。PUFA比例各組間均無顯著差異(P>0.05)。F2組 n-3 PUFA比例顯著高于其他各組(P<0.05),F(xiàn)6和F8組顯著高于F10組(P<0.05),F(xiàn)6組與F8組間差異不顯著(P>0.05)。隨著飼料脂肪水平升高,n-6 PUFA 比例顯著升高(P < 0.05),n-3/n-6 顯著降低(P<0.05)。

    2種溫度下同一處理肝臟脂肪酸組成的比較見表5。F2組、F6組和F10組15℃下SFA比例顯著低于28℃下(P<0.05),UFA比例顯著高于28℃下(P<0.05),溫度對其余脂肪酸比例均無顯著影響(P>0.05)。F8組各種脂肪酸比例在2種溫度下均無顯著差異(P>0.05)。

    3 討論

    3.1 飼料脂肪水平對吉富羅非魚生長性能的影響

    大量研究表明,通過在飼料中添加適量的脂肪可以改善飼料的適口性,提高魚體的生長率和飼料的利用效率。龐思成[13]研究了飼料脂肪水平對尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)生長的影響,結(jié)果表明,當添加3% ~5%的豆油,使飼料的總脂肪水平達到8.8%~10.7%時,尼羅羅非魚生長最佳,飼料系數(shù)最低,蛋白質(zhì)效率最高。Chou等[14]研 究 發(fā) 現(xiàn),雜 交 羅 非 魚 (Oreochromis niloticus×Oreochromis aureu)獲得最大生長率的最適飼料脂肪水平為12%,而5%即能滿足其最低需求。甘輝等[5]研究表明,隨著飼料脂肪水平升高,奧尼羅非魚幼魚的增重率、肥滿度和攝食量先上升后下降,而飼料系數(shù)則先下降后上升,飼料脂肪水平為4%時幼魚的生長最好,肥滿度最高,超過6%時羅非魚幼魚的各項生長指標下降,飼料系數(shù)上升。池作授等[8]通過對飼料脂肪添加水平和增重率的二次回歸分析發(fā)現(xiàn),飼料脂肪含量在10.98%時,奧尼羅非魚仔稚魚有最大的增重效果。韓光明等[6]研究發(fā)現(xiàn),當飼料蛋白質(zhì)水平為30%、脂肪水平為7.67%時,吉富羅非魚的生長效果最佳,脂肪水平過低或過高均會導(dǎo)致吉富羅非魚成活率及增重率下降。本研究結(jié)果表明,飼料脂肪水平對吉富羅非魚的生長性能有顯著影響,羅非魚的增重率及特定生長率隨飼料脂肪水平升高而升高,但當飼料脂肪水平達到6.19%時其增重率及特定生長率變化不再顯著,這說明本試驗條件下飼料脂肪水平達到6.19%時即可滿足吉富羅非魚最大生長需求。由此可見,羅非魚對脂肪的需要量因品種或試驗初始體重、環(huán)境等因素的不同而不同。

    3.2 飼料脂肪水平對吉富羅非魚血清生化指標的影響

    魚類血液生理生化指標與機體自身的代謝、營養(yǎng)狀況及疾病有著密切關(guān)系,當魚體受到外界環(huán)境影響發(fā)生生理或病理變化時,血液生理生化指標往往能夠反映魚類在環(huán)境應(yīng)激下的健康狀況、營養(yǎng)狀況及對環(huán)境的適應(yīng)狀況。本試驗中,低溫應(yīng)激下飼料脂肪水平對血清GLU水平?jīng)]有產(chǎn)生顯著影響,說明低溫應(yīng)激下羅非魚的糖代謝沒有受到脂肪水平的影響,可能是應(yīng)激時間較短,羅非魚體內(nèi)糖原貯備充足,未出現(xiàn)能量供應(yīng)不足而導(dǎo)致的血糖降低的現(xiàn)象[15]。Chatzifotis等[16]也指出,飼料脂肪水平不影響魚類對GLU的利用,與本試驗結(jié)果一致,但低溫應(yīng)激使各組血清GLU水平略有升高,說明低溫下魚類首先利用糖類作為能量來源,肝臟、肌肉組織將糖原分解為GLU,GLU進入血液供組織利用而使血糖升高。本試驗中,血清TG水平隨飼料脂肪水平升高而顯著升高,可能是隨著脂肪攝入的增加,魚類肝臟代謝合成的TG相應(yīng)升高,使得脂類代謝運輸中的血脂水平升高所致,此結(jié)果與王愛民等[17]研究結(jié)果一致。低溫應(yīng)激下飼料脂肪水平對血清CHOL水平?jīng)]有顯著影響,但有隨飼料脂肪水平升高而升高的趨勢,說明低溫下脂類的代謝速度加快,魚類動員脂類釋放能量以抵御低溫應(yīng)激。血液中的TP主要包括白蛋白及球蛋白,白蛋白的主要功能是維持血液中膠體的滲透壓,而球蛋白主要參與脂類或脂溶性物質(zhì)的運輸以及機體免疫反應(yīng)[18]。本試驗發(fā)現(xiàn),低溫應(yīng)激下血清TP水平隨飼料脂肪水平升高而升高,其機制可能是脂肪進入血液后,參與血液物質(zhì)代謝或產(chǎn)生反饋機制,從而改變血液滲透壓,魚體通過合成白蛋白來調(diào)節(jié),而球蛋白運輸脂類或脂溶性物質(zhì)的功能可能會進一步影響魚體免疫抵抗能力[17]。本試驗中血清HDL-C水平隨飼料脂肪水平升高呈先升高后降低的趨勢,LDL-C水平的變化趨勢與之相反。血清HDL-C水平升高說明肝臟合成的高密度脂蛋白增加并分泌到血液中,將TG從外周組織運輸至肝臟進行代謝產(chǎn)能以抵抗低溫應(yīng)激,或合成膽汁酸排泄出體外,減少低溫應(yīng)激引起的脂質(zhì)過氧化傷害[19]。當飼料脂肪水平過高時,血清HDL-C水平下降,這不利于TG的代謝產(chǎn)能或轉(zhuǎn)運和清除,影響了肝臟的正常脂肪代謝;與此同時,血清LDL-C水平升高,其攜帶的TG進入血液中,過量的TG在血管壁堆積,容易形成動脈粥樣硬化[20],對魚體健康不利。本研究發(fā)現(xiàn),吉富羅非魚在低溫應(yīng)激下血清AST、ALT活性升高,且隨著飼料脂肪水平升高其活性亦逐漸升高,提示過高的飼料脂肪水平可能會進一步加重低溫應(yīng)激下吉富羅非魚肝臟或心肌細胞受損程度,導(dǎo)致細胞膜通透性增加,AST、ALT等酶滲入血液,使血液中這些酶的活性顯著升高[21]。與此相似的是,在奧尼羅非魚(Oreochromis aureus)[5]、魚(Elopichthys bambusa)[22]及 紅白錦鯉(Cyprinus capio)[23]的研究中均發(fā)現(xiàn)飼料脂肪水平升高會導(dǎo)致血液轉(zhuǎn)氨酶活性升高,對魚類機體組織造成損傷。

    3.3 飼料脂肪水平對吉富羅非魚肝臟脂肪酸組成的影響

    在雜交羅非魚[24]、鱸魚(Atractoscion nobilis)[25]和吉富羅非魚[6]的研究中發(fā)現(xiàn),魚體脂肪的脂肪酸組成明顯受所攝食飼料脂肪酸組成模式的影響。本試驗結(jié)果顯示,吉富羅非魚肝臟脂肪酸組成反映了飼料脂肪水平和脂肪酸組成,隨著飼料脂肪水平升高,魚體肝臟中SFA比例呈下降趨勢,UFA比例呈上升趨勢,與飼料中的變化規(guī)律具有較高的相關(guān)性。此外,結(jié)果還顯示,當吉富羅非魚受到低溫應(yīng)激時,肝臟組織中不同脂肪酸種類的比例變化明顯,C16∶0及C18∶0等飽和脂肪酸比例明顯下降,亞油酸(C18∶2n-6)、油酸[C18∶(1n-9+1n-7)]、花生四烯酸(C20∶4n-6)等主要不飽和脂肪酸比例明顯升高。Hsieh等[26-27]研究發(fā)現(xiàn),遮目魚(Chanos chanos)、草魚(Ctenopharyngodon idella)、雜交羅非魚等魚類的肝臟脂肪酸不飽和程度組成受水溫影響,低溫應(yīng)激后魚類肝臟的飽和脂肪酸比例減少,不飽和脂肪酸比例增加,有利于提高魚類抵抗低溫應(yīng)激的能力。本試驗中,飼料脂肪水平為1.95%和6.19%的組15℃下SFA比例顯著低于28℃下,而UFA比例則顯著高于28℃下,說明適當?shù)娘暳现舅接欣诩涣_非魚調(diào)整機體組織脂肪酸組成以應(yīng)對外界環(huán)境應(yīng)激,此結(jié)果進一步驗證了上述觀點。本試驗添加的脂肪源為豆油,豆油中 C18∶2n-6比例高達54.97%。有 研 究 表 明,C18∶2n-6 及 亞 麻 酸(C18∶3n-3)是淡水魚的必需脂肪酸,淡水魚能將飼料中的 C18∶2n-6 或 C18∶3n-3 有效地轉(zhuǎn)化為DHA、EPA 等高不飽和脂肪酸(HUFA)[28-29]。本試驗結(jié)果表明,吉富羅非魚肝臟中DHA、EPA比例遠遠高于飼料中二者的比例,說明吉富羅非魚能有效地將 C18∶2n-6 或 C18∶3n-3 轉(zhuǎn)化 DHA、EPA等HUFA,而DHA、EPA等HUFA在提高魚類抵抗應(yīng)激能力方面有重要作用,這在真鯛[9]和黃蓋鰈[10]等魚類中已有過報道。對4種鯉科魚類的研究表明,越冬期間魚體 UFA比例上升,其中 n-3 PUFA與越冬成活率關(guān)系極大,因此,在越冬前的配合飼料中增加n-3 PUFA,特別是 EPA和DHA的添加量,提高越冬前魚體內(nèi)的長鏈UFA比例,對魚類越冬是有重要作用的[30]。但是,隨著飼料脂肪水平升高,肝臟中EPA及DHA比例呈下降趨勢,可能是當飼料中脂肪酸滿足了魚體的生長需求后,過多的 C18∶2n-6 或 C18∶3n-3 不再轉(zhuǎn)化為EPA和DHA,而是直接被吸收,造成EPA及DHA在肝臟脂肪酸組成中相對比例下降。因此,在以植物油(豆油)為脂肪源的條件下若能適當添加動物油(魚油)進行配比,則可以增加飼料中EPA和DHA等HUFA的比例,這有利于提高魚類抵抗低溫應(yīng)激的能力。

    4 結(jié)論

    ①適當?shù)娘暳现舅?6.19%)能夠促進吉富羅非魚的生長,飼料脂肪水平高于6.19%后其生長性能不再顯著增加。

    ②飼料脂肪水平影響吉富羅非魚血清生化指標,適當?shù)娘暳现舅?6.19%)能夠改善脂肪代謝,有利于提高魚類抵抗低溫應(yīng)激的能力;過高的飼料脂肪水平(8.03%及以上)可導(dǎo)致血清轉(zhuǎn)氨酶活性升高,加重低溫應(yīng)激下魚類代謝負擔(dān),甚至造成機體組織器官損害,不利于魚體健康及生長。

    ③吉富羅非魚肝臟脂肪酸組成與飼料脂肪酸組成具有較高相關(guān)性,魚體肝臟SFA比例降低,UFA比例升高有利于提高魚類抵抗低溫應(yīng)激的能力。

    致謝

    感謝廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院董曉慧教授對文稿所提的寶貴意見。

    [1] HSIEH S L,CHEN Y N,KUO C M.Physiological re-sponses,desaturase activity,and fatty acid composition in milkfish(Chanos chanos)under cold stress[J].Aquaculture,2003,220:903 -918.

    [2] 常玉梅,匡友誼,曹鼎臣,等.低溫脅迫對鯉血液學(xué)和血清生化指標的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報,2006,30(5):701-706.

    [3] 冀德偉,李明云,王天柱,等.不同低溫脅迫時間對大黃魚血清生化指標的影響[J].水產(chǎn)科學(xué),2009,28(1):1-4.

    [4] 劉波,王美垚,謝駿,等.低溫應(yīng)激對吉富羅非魚血清生化指標及肝臟HSP70基因表達的影響[J].生態(tài)學(xué)報,2011,3(17):4866 -4873.

    [5] 甘輝,李堅明,馮廣朋,等.飼料脂肪水平對奧尼羅非魚幼魚生長和血漿生化指標的影響[J].上海海洋大學(xué)學(xué)報,2009,18(1):35 -41.

    [6] 韓光明,王愛民,徐跑,等.飼料脂肪水平對吉富羅非魚體脂沉積及脂肪酸組成的影響[J].中國水產(chǎn)科學(xué),2011,18(2):338 -349.

    [7] 李堅明,甘輝,馮廣朋,等.飼料脂肪含量與奧尼羅非魚幼魚肝臟形態(tài)結(jié)構(gòu)特征的相關(guān)性[J].南方水產(chǎn),2008,4(5):37 -43.

    [8] 池作授,耿旭,郭云學(xué),等.奧尼羅非魚仔稚飼料中適宜脂肪水平的研究[J].中國飼料,2010(4):32-36.

    [9] 陳世杰.添加飼料營養(yǎng)以緩解真鯛仔魚的應(yīng)激反應(yīng)[J].福建水產(chǎn),1995(3):72 -73.

    [10] KANAZAWA A.Effects of docosahexaenoic acid and phospholipids on stress tolerance of fish[J].Aquaculture,1997,155:129 -134.

    [11] FOLCH J,LEES M,SLOANE-STANLEY G M.A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues[J].Journal of Biological Chemistry,1957,226:497 -509.

    [12] 寇秀穎,于國萍.脂肪和脂肪酸甲酯化方法的研究[J].食品研究與開發(fā),2005,26(2):46 -47.

    [13] 龐思成.飼料中脂肪含量對羅非魚生長的影響[J].飼料研究,1994(12):10-11.

    [14] CHOU B S,SHIAU S Y.Optimal dietary lipid level for growth of juvenile hybrid tilapia,Oreochromis niloticus × Oreochromis aureus[J].Aquaculture,1996,143:185 -195.

    [15] ZHOU M,WANG A L,XIAN J A.Variation of free amino acid and carbohydrate concentrations in white shrimp,Litopenaeus vannamei:effects of continuous cold stress[J].Aquaculture,2011,317:182 - 186.

    [16] CHATZIFOTIS S,PANAGIOTIDOU M,PAPAIOANNOU N,et al.Effeet of dietary lipid levels on growth,feed utilization,body composition and serum metabolites of meager(Argyrosomus regius)juveniles[J].Aquaculture,2010,307:65 - 70.

    [17] 王愛民,韓光明,封功能,等.飼料脂肪水平對吉富羅非魚生產(chǎn)性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化及血液生化指標的影響[J].水生生物學(xué)報,2011,35(1):80 -87.

    [18] 尾崎久雄.魚類血液與循環(huán)生理[M].許學(xué)龍,熊國強,繆圣賜,譯.上海:上??茖W(xué)出版社,1982:116-120.

    [19] FREDENRICH A,BAYER P.Reverse cholesterol transport,high density lipoproteins and HDL cholesterol:recent data[J].Diabetes & Metabolism,2003,29:201-205.

    [20] 何志謙.人類營養(yǎng)學(xué)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:123.

    [21] 劉莉.動物生物化學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2001:147.

    [22] 趙巧娥.飼料脂肪水平對鱤幼魚生長、血液生化指標及消化生理的影響[D].碩士學(xué)位論文.武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2011:24-25.

    [23] 崔培,姜志強,韓雨哲,等.飼料脂肪水平對紅白錦鯉體色、生長及部分生理生化指標的影響[J].天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報,2011,18(2):23 -31.

    [24] HUANG C H,HUANG M C,HOU P C.Effect of dietary lipids on fatty acid composition and lipid peroxidation in sarcoplasmic reticulum of hybrid tilapia,Oreochromis niloticus × O.aureus[J].Comparative Biochemistry and Physiology,1998,120:331 -336.

    [25] LOPEZ L M,DURAZO E,VIANA M T,et al.Effect of dietary lipid levels on performance,body composition and fatty acid profile of juvenile white seabass,Atractoscion nobilis[J].Aquaculture,2009,289:101-105.

    [26] HSIEH S L,KUO C M.Stearoyl-CoA desaturase expression and fatty acid composition in milkfish(Chanos chanos)and grass carp(Ctenopharyngodon idella)during cold acclimation[J].Comparative Biochemistry and Physiology,2005,141:95 -101.

    [27] HSIEH S L,CHUN Y H,HSU Y T,et al.Influence of dietary lipids on the fatty acid composition and stearoyl-CoA desaturase expression in hybrid tilapia(Oreochromis niloticus×O.aureus)under cold shock[J].Comparative Biochemistry and Physiology:Part B,2007,147:438 -444.

    [28] OLSEN R E,RINGO E.Lipids of Arctic charr,Salvelinus alpinus(L.)Ⅱ.Influence of dietary fatty acids on the elongation and desaturation of linoleic and linolenic[J].Fish Physiological Biochemistry,1992,9:393-399.

    [29] YANG X,DICK T A.Arctic char(Salvelinus alpinus)and rainbow trout(Oncorynchus mykiss)differ in their growth and lipid metabolism in response to dietary polyunsaturated fatty acids[J].Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences,1994,51:1391 -1400.

    [30] 童圣英.四種鯉科魚類越冬時脂肪酸組成的變化[J].水產(chǎn)學(xué)報,1997,21(4):373-379.

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