8～12周齡肉兔纈氨酸和異亮氨酸需要量及其與賴氨酸的適宜比例

周月華 賈 剛 吳秀群 王康寧

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)研究所，雅安 6 25014)

目前，關(guān)于肉兔氨基酸需要量的研究滯后于豬和雞，確定一定能量水平下氨基酸的需要量及適宜比例對(duì)提高肉兔的生長性能實(shí)有必要。對(duì)于生長兔氨基酸水平的推薦不盡一致，賴氨酸(Lys)、纈氨酸(Val)和異亮氨酸(Ile)的比例也存在很大差異。NRC(1977)推薦的 Lys水平為0.65%，Lys、Val和 Ile 三者的比例為 1.00∶1.08∶0.92，AEC(1993) 推 薦 標(biāo) 準(zhǔn) 與 此 相 近［1－2］。然 而Moughan等［3］分析機(jī)體氨基酸組成所得三者比例為 1.00∶0.62∶0.51，何瑞國［4］用正交試驗(yàn)得到的結(jié)果為1.00∶0.64∶0.57。德國和中國推薦的Lys需要量分別為1.0%和0.8%，卻沒有Val和Ile的推薦需要量［2，5］。按照 NRC(1977)對(duì)此 3 種氨基酸推薦量的比例估計(jì)，Val和Ile的需要量高達(dá)1.08%和0.93%。同時(shí)，各國標(biāo)準(zhǔn)多為4～11周齡，沒再分階段，而后備種兔的氨基酸需要又缺乏研究。因此，確定肉兔生長后期及后備期一定Lys水平下相應(yīng)的Val和Ile需要量值得進(jìn)一步研究。本試驗(yàn)以8～12周齡新西蘭肉兔為研究對(duì)象，在一定的能量和Lys水平下，通過對(duì)生長性能和血清尿素氮(UN)含量的考察，探討Val和Ile的需要量及其與Lys的適宜比例。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)采用4×3兩因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，即4個(gè) Val水平(0.51%、0.65%、0.69%、0.73%)和3個(gè)Ile水平(0.57%、0.61%、0.65%)。選擇平均體重(2 235.75±45.10)g的健康可作種用的新西蘭肉兔96只，隨機(jī)分為12組，每組8個(gè)重復(fù)(公母各占1/2)，每個(gè)重復(fù)1只兔。

1.2 試驗(yàn)飼糧與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)飼糧參照NRC(1977)和AEC(1993)建議的生長兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，并結(jié)合我國肉兔的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)［6－8］而配制。各組試驗(yàn)飼糧能量、粗蛋白質(zhì)和Lys水平一致，添加合成Val和Ile調(diào)整試驗(yàn)飼糧Val和Ile水平。試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)所教學(xué)科研試驗(yàn)基地進(jìn)行，試驗(yàn)兔單籠飼養(yǎng)，試驗(yàn)期間每天飼喂2次。舍內(nèi)溫度21～29℃，濕度保持在60% ～65%。自由采食和飲水，按常規(guī)程序免疫消毒。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets(air－dry basis) %

續(xù)表1

項(xiàng)目Items組別Groups 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12蘇氨酸Thr* 0.68 0.68 0.68 0.68 0.68 0.68 0.68 0.68 0.68 0.68 0.68 0.68異亮氨酸Ile 0.57 0.61 0.65 0.57 0.61 0.65 0.57 0.61 0.65 0.57 0.61 0.65異亮氨酸Ile* 0.46 0.51 0.56 0.46 0.51 0.56 0.46 0.51 0.56 0.46 0.51 0.56纈氨酸Val 0.51 0.51 0.51 0.65 0.65 0.65 0.69 0.69 0.69 0.73 0.73 0.73纈氨酸Val* 0.52 0.52 0.52 0.59 0.59 0.59 0.63 0.63 0.63 0.67 0.67 0.67精氨酸Arg 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96精氨酸Arg* 1.05 1.05 1.05 1.05 1.05 1.05 1.05 1.05 1.05 1.05 1.05 1.05亮氨酸Leu 1.09 1.09 1.09 1.09 1.09 1.09 1.09 1.09 1.09 1.09 1.09 1.09亮氨酸Leu* 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 The premix provided the following per kg of diet:VA 8 000 IU，VD31 000 IU，VE 60 mg，VK 2.4 mg，Cu 1.25 mg，Zn 43.5 mg，Mn 30 mg，F(xiàn)e 100 mg，I 0.5 mg，Se 0.3 mg。

2)營養(yǎng)水平肩標(biāo)“*”為實(shí)測(cè)值，其余為計(jì)算值。The nutrient levels with* superscript were measured values，while others were calculated values.

1.3 指標(biāo)測(cè)定

試驗(yàn)期第1、14和28天以重復(fù)為單位空腹稱重，并測(cè)定采食量，計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

正試期最后1天晨飼前每組隨機(jī)抽取4只兔，心臟采血5 mL，室溫避光靜置 15 min后，3 000 r/min離心10 min，分離所得血清分裝于Eppendorf管中，置于－20℃下冷凍保存，用意大利進(jìn)口全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清UN含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel軟件初步處理后，采用SPSS 17.0進(jìn)行兩因素方差分析，存在顯著性差異的結(jié)合Duncan氏法進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧Val和Ile水平對(duì)肉兔生長性能的影響

由表2可見，飼糧Val水平極顯著影響肉兔ADG(P＜0.01)，主效應(yīng)方差分析表明，0.69%Val組ADG最大，與0.65%和0.73%Val組差異不顯著(P＞0.05)，但與0.51%Val組差異顯著(P＜0.05)。ADG隨Ile水平的增加而增加，在0.65%Ile組達(dá)最高，0.65%與0.61%Ile組差異不顯著(P＞0.05)，但與0.57%Ile組差異顯著(P＜0.05)。按兩因素方差分析，以0.69%Val和0.61%Ile組的 ADG最高，但與 0.69%Val和0.65%Ile、0.65%Val和 0.65%Ile、0.73%Val和0.61%Ile和0.73%Val和0.65%Ile組的差異均不顯著(P＞0.05)。各組間的ADFI、F/G均無顯著差異(P＞0.05)。Val和 Ile的互作效應(yīng)對(duì)ADG、ADFI和F/G也影響不顯著(P＞0.05)。綜合回歸和方差分析的結(jié)果，以0.69%Val和0.61%Ile組的生長性能最佳。

2.2 飼糧Val和Ile水平對(duì)肉兔血清UN含量的影響

由表3可見，Val、Ile水平對(duì)肉兔血清UN含量影響不顯著(P＞0.05)，但仍以0.69%Val和0.61%Ile組含量(4.56 mmol/L)最低，與ADG的結(jié)果一致。

3 討論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，綜合回歸和方差分析的結(jié)果，當(dāng) Lys水平為 0.82%時(shí)，以 0.69%Val和0.61%Ile組生長性能最佳。NRC(1977)推薦生長兔的Val水平為0.70%，Ile水平為0.60%，而Lys水平是0.65%，Val和Ile與本試驗(yàn)最佳生長性能的水平比較一致，但0.65%的Lys水平與本試驗(yàn)的0.82%相差較大。AEC(1993)推薦的3種氨基酸需要量與NRC(1977)近似。如果參照NRC(1977)推薦的3種氨基酸比例，中國長毛兔標(biāo)準(zhǔn)的Val和Ile需要量分別應(yīng)是0.86%和0.74%，德國標(biāo)準(zhǔn)高達(dá)1.08%和0.93%。何瑞國［4］采用正交設(shè)計(jì)得到日本大耳白兔的Lys、Val、Ile需要量分別為0.90%、0.58%和0.51%。本試驗(yàn)結(jié)果Val和Ile的適宜水平居中。

表2 飼糧Val和Ile水平對(duì)肉兔生長性能的影響Table 2 Effects of dietary Val and Ile levels on growth performance of meat rabbits(n=96)

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P＜0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P＞0.05)。

In the same column，values with different small letter superscripts mean significant difference(P＜0.05)，while with the same or no letter superscripts mean no significant difference(P＞0.05).

表3 飼糧Val和Ile水平對(duì)肉兔血清UN含量的影響Table 3 Effects of dietary Val and Ile levels on serum UN content of meat rabbits(n=45) mmol/L

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P＜0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P＞0.05)。

In the same row，values with different small letter superscripts mean significant difference(P＜0.05)，while with the same or no letter superscripts mean no significant difference(P＞0.05).

本試驗(yàn) Lys、Val、Ile 的比例為 1.00∶0.84∶0.74，Val和 Ile較 NRC(1977)的 1.00∶1.08∶0.92 和AEC(1993)的 1.00∶1.00∶0.86 低 20% 左右;而較Moughan 等［4］提 出 的 機(jī) 體 氨 基 酸 組 成1.00∶0.62∶0.51和何瑞國［4］提出的 1.00∶0.64∶0.57 高20%左右，本試驗(yàn)結(jié)果界于中間。以上研究表明，無論是氨基酸的絕對(duì)需要量或是其比例，各報(bào)道的差異都很大，原料氨基酸分析誤差較大和采用的總氨基酸而不是可消化氨基酸可能是其主要原因。又因兔飼糧粗飼料比例較大，可用的原料種類較多，不同的飼糧組成和精粗原料比例，勢(shì)必導(dǎo)致氨基酸的消化率存在較大差異，即有可能提供的總氨基酸相同而可消化氨基酸卻不同，得出的結(jié)論也就不盡相同。今后的研究以可消化氨基酸為基礎(chǔ)，可能會(huì)有較好而又較一致的結(jié)果。對(duì)于此3種氨基酸的比例，不同生理階段對(duì)氨基酸模式影響很小，所以本試驗(yàn)的結(jié)果仍有其參考價(jià)值。

本試驗(yàn)所用試驗(yàn)兔是8～12周齡，體重在2～3 kg階段，雖不能完全代表4～11周齡肉兔氨基酸需要量情況，但從本試驗(yàn)結(jié)果看，所得 Val、Ile及Lys的需要量和三者的比例基本處于各家報(bào)道水平的中間，有其參考價(jià)值。同時(shí)，對(duì)確定后備種兔氨基酸的需要也有其參考價(jià)值。本試驗(yàn)ADG較低，而ADFI和F/G也較高，且差異不顯著。究其原因主要是本試驗(yàn)采用的是粉料，適口性較顆粒料差，而且浪費(fèi)較大，因此也增大了試驗(yàn)誤差，可能是ADFI和F/G差異不顯著的又一原因。但從數(shù)值分析仍是0.69%Val和0.61%Ile組最低，與ADG吻合。

血清UN含量的高低能反映相同粗蛋白質(zhì)水平下蛋白質(zhì)的質(zhì)量，即氨基酸平衡的好壞和可利用性［9］。較低的血清UN含量表明氨基酸平衡較好，比例恰當(dāng)，利用率高。本試驗(yàn)也以0.69%Val和0.61%Ile組最低。盡管各組之間差異不顯著，但趨勢(shì)是明顯的，與生長性能的結(jié)果也相吻合，表明0.69%Val和0.61%Ile組在Lys為0.82%時(shí)是恰當(dāng)?shù)摹?/p>

本試驗(yàn)用實(shí)測(cè)飼料氨基酸含量計(jì)算的該飼糧的 Lys、Val和 Ile分 別 為 0.77%、0.63% 和0.51%，其比例為 1.00∶0.82∶0.66，比估計(jì)值偏低。但考慮到飼料氨基酸含量的測(cè)定誤差較大，實(shí)測(cè)值也不一定很準(zhǔn)確，國際上都以飼料氨基酸含量與粗蛋白質(zhì)的關(guān)系建立回歸模型來推算［10－12］，所以用實(shí)測(cè)值與估計(jì)值的平均值作為推薦量較合理，即 Lys、Val和 Ile的需要量分別為0.80%、0.66%和 0.56%，其比例為 1.00∶0.83∶0.70。

關(guān)于兔飼料的消化能資料很少，一般是借用豬的。本試驗(yàn)測(cè)定了生長性能較好的4組試驗(yàn)飼糧的消化能，計(jì)算得各試驗(yàn)飼糧的消化能為9.80～10.75 MJ/kg，均 值 為 (10.33 ±0.35)MJ/kg，與各國標(biāo)準(zhǔn)的推薦值及 De Blas［13］推薦的生長肉兔的消化能范圍為10.30～11.30 MJ/kg接近。結(jié)合本試驗(yàn) Lys、Val和 Ile的水平，10.33 MJ/kg的消化能是可行的。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，當(dāng)飼糧消化能為10.33 MJ/kg，Lys為 0.80% 時(shí)，Val和 Ile的適宜添加水平分別為0.66%和0.56%，Lys、Val、Ile三者的適宜比例為1.00∶0.83∶0.70。該結(jié)果也可作為確定肉用后備種兔對(duì)Val和Ile的需要量及其與Lys的適宜比例的參考。

［1］ NRC.Nutrient requirements of rabbits［S］.2th ed.Washington，D.C.:National Academy Press，1977.

［2］ 張宏福.動(dòng)物營養(yǎng)參數(shù)與飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)［M］.2版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2010:520－522.

［3］ MOUGHAN P J，SCHULIZE W H，SMITH W C.A－mino acid requirements of the growing meat rabbit.1.The amino acid composition of rabbit whole body tissue－a theoretical estimate of ideal amino acid balance［J］.Animal Production，1988，47:297 － 301.

［4］ 何瑞國.生長期實(shí)驗(yàn)兔日糧消化能、蛋白質(zhì)、粗纖維適宜水平和氨基酸模式的研究［J］中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2000(8):53－61.

［5］ KLAUS J.A compendium of Rabbit production;appropriate for conditions in developing countries［M］.Eschborn:GTZ，1985:224.

［6］ 徐立德.家兔生產(chǎn)學(xué)［M］.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，1998:56－61.

［7］ 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧系.兔營養(yǎng)需要研究論文選編［M］.南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，1988.

［8］ 楊正.現(xiàn)代養(yǎng)兔［M］.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，1999.

［9］ MALMLOF K.Amino acid in farm animal nutrition metabolism partition and consequences of imbalance［J］.Journal of Agriculture Research，1988，18:191 －193.

［10］ DEGUSSA.The amino acids composition of feedstuffs［M］.Allendale，N.J.:Degussa Corporation，1990.

［11］ NRC.Nutrient requirement of poultry［S］.9th ed.Washington，D.C.:The National Academy Press，1994.

［12］ NRC.Nutrient requirement of swine［S］.10th ed.Washington，D.C.:The National Academy Press，1998.

［13］ DE BLAS C J，MATEOS G G.Feed formulation［M］.New York:CABI Publishing，1998:241－253.