矽肺患者血清白介素-8和血小板衍生生長因子-AA 的變化

胡愛根，李清祥，周美英，雷 震

（1.豐城礦物局職工總醫(yī)院檢驗科，江西 豐城 331141；2.南昌市第三醫(yī)院檢驗科，南昌 330009；3.南昌市第九醫(yī)院檢驗科,南昌 330002）

矽肺是由于長期吸入含二氧化硅粉塵導致肺組織彌漫性纖維化而引發(fā)的一種慢性疾病，其發(fā)病機制尚未完全清楚。肺損傷纖維化是一個復雜的病理過程，早期特征是肺泡炎性水腫，繼之出現(xiàn)肺間質(zhì)增生和肺纖維化，最終導致呼吸功能的完全喪失[1],許多細胞因子參與其反應，但這方面的研究多限于動物實驗[2]。為此，本研究檢測矽肺患者血清白介素－8（IL-8）和血小板衍生生長因子-AA（PDGF-AA）含量，探討其在矽肺發(fā)病機制中的作用，為尋找新的療效觀察指標和治療途徑提供依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2008年1月至2012年6月在豐城礦物局職工總醫(yī)院進行體檢、住院及門診隨訪者為研究對象。以健康體檢者為對照組（n=110），年齡（49.6±5.3）歲。某鑄造廠接觸矽塵作業(yè)、工齡在1年以上者211名（清砂工88例、型砂工100例、其他工種23例）接塵工人為接塵組，年齡（50.2±5.9）歲。矽肺患者155例為矽肺組，其中Ⅰ期矽肺74例、Ⅱ期56例，Ⅲ期25例清砂工120例、型砂工26例、其他工種9例，年齡（51.6±6.4）歲。48例非矽肺患者為作業(yè)觀察對象（0＋）（觀察對象組，即指粉塵作業(yè)人員健康檢查發(fā)現(xiàn)X射線胸片有不能確定的塵肺樣影像學改變，其性質(zhì)和程度需要在一定期限內(nèi)進行動態(tài)觀察者），清砂工27例、型砂工13例、其他工種8例，年齡（53.0±5.2）歲。各組對象均為男性。剔除心臟病、高血壓病、糖尿病、腎臟病、肝臟病、血液病、風濕免疫系統(tǒng)疾病、腫瘤患者等。所有研究對象均未從事過各類輻射和有毒作業(yè)，也未長期接觸過各類農(nóng)藥和毒物；營養(yǎng)和消化吸收功能良好，在受檢前1個月內(nèi)均未服用維生素C、銀杏葉制劑和茶多酚等抗氧化藥物。各組對象的年齡比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）,具有可比性。

采用問卷調(diào)查方法，了解研究對象的粉塵接觸史、吸煙史、既往史、家族史。由研究人員填寫問卷。

1.2 矽肺的診斷

根據(jù)國家塵肺X線診斷標準，參考受檢者的系列胸片和該單位矽肺發(fā)病情況，由豐城礦物局總醫(yī)院塵肺診斷小組依據(jù)GBZ70-2002和 GBZ70－2009《塵肺病診斷標準》[3－4]進行診斷、分期。

1.3 試劑與儀器

ELISA檢測試劑盒（美國Biosource公司），全自動生化分析儀（美圍Beckman公司），spiro IabⅡ型便攜式肺功能儀（意大利MIR公司）。

1.4 IL-8和PDGF-AA的檢測

清晨空腹抽取外周靜脈血5 mL。置于EDTA的干燥試管中，立即混勻。 2 500 r·min－1離心 10 min，分離血清，于-80℃保存待測。所有操作步驟由專人完成，嚴格按照試劑盒提供的方法操作。

1.5 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

與對照組比較，接塵組、觀察對象組和矽肺組IL-8水平明顯升高（P<0.01）；與接塵組比較，觀察對象組和矽肺組IL-8水平明顯升高（P<0.05或P<0.01）。與對照組和接塵組比較，觀察對象組和矽肺組PDGF-AA水平明顯升高（P<0.05或P<0.01）。見表1。

表 1 各組對象 IL-8和PDGF-AA 的比較 ±s，ρ/ng·L－1

表 1 各組對象 IL-8和PDGF-AA 的比較 ±s，ρ/ng·L－1

△P＜0.01與對照組比較，#P＜0.05與對照組和接塵組比較。

組別 n IL-8 PDGF-AA對照組 110 6.55±1.94△ 26.38±10.14接塵組 211 49.66±5.42△ 27.31±12.22觀察對象組 48 111.07±10.08△ 56.26±14.35#矽肺組 155 226.45±19.03△ 65.16±11.94#

3 討論

正常情況下，肺泡上皮細胞接受來自環(huán)境的顆粒和微生物刺激，巨噬細胞和上皮細胞分泌化學增活素和細胞因子以調(diào)節(jié)粒細胞和淋巴細胞聚集、滲出，清除各種刺激影響，但廣泛的組織損傷可導致肺組織炎癥、異常組織修復、纖維化發(fā)生。矽肺目前在我國接塵工人中發(fā)病率很高，危害嚴重[1]。矽肺的發(fā)生機制目前還不十分清楚，但SiO2刺激機體分泌多種細胞因子等生物活性物質(zhì)導致肺組織纖維化是肯定的，如果能夠早期檢測到這些細胞因子的變化，并找到某個或某些細胞因子作為相對特異的觀察指標，將對矽肺的早期監(jiān)測及接塵人群的普查具有重要意義[5]。 已有研究[6]表明，多種細胞因子參與了塵肺病的發(fā)生、發(fā)展過程，其中轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factor β1,TGF β1）、胰島素樣生長因子（insulinlike growth factor,IGF1）和結(jié)締組織生長因子（connective tissue growth factor,CTGF）等對調(diào)控肺成纖維細胞的分裂、增殖及膠原蛋白的合成與降解起著十分重要的作用。

本研究發(fā)現(xiàn)，矽肺患者血清IL-8和PDGF-AA水平升高在肺纖維化的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要作用。IL-8可趨化單核細胞、中性粒細胞、淋巴細胞在誘導素（如刀豆素A）作用下合成與釋放，并且具有時間和劑量依賴性，不同細胞類型對誘導劑反應各異，以單核細胞產(chǎn)量最高。另外，PDGF是刺激細胞生長的主要致分裂原，對成纖維細胞有趨化作用，PDGF具有多種形式的二聚體結(jié)構(gòu)，通常所說的PDGFI即PDGF-AA可以與肺成纖維細胞及肺內(nèi)其他多種細胞PDGFα亞單位受體相結(jié)合，從而誘導成纖維細胞的趨化、分裂[7]。因此，接塵工人、觀察對象以及矽肺患者的IL-8和PDGF-AA呈較高水平。接觸矽塵作業(yè)工人的防護措施不當導致SiO2刺激機體，使細胞因子相互作用，造成肺纖維化，觀察對象組介于矽肺的發(fā)病前期。本研究結(jié)果提示觀察對象組和矽肺組的IL-8和PDGF-AA明顯高于接塵組，表明接塵工人中在X線胸片未達到矽肺診斷標準的“觀察對象”時，即可出現(xiàn)IL-8和PDGF-AA含量升高，提示IL-8和PDGF-AA含量可作為矽肺早期生物標志物之一。由于血清IL-8和PDGF-AA含量采用ELISA測定，方法成熟、簡便可靠，標本易于取得，具有良好的可重復性和可操作性，適合在基層單位及職業(yè)健康監(jiān)護中使用。

[1] Brown T.Silica exposure，smoking，silicosis and lung cancer-complex interactions[J].Occup Med（Lond），2009，59（2）:89-95.

[2] 高曉方，崔社懷.干擾素γ對實驗大鼠肺纖維化的治療作用及機制的初步研究[J].第三軍醫(yī)大學學報，2005,27（2）:143-145.

[3] 中華人民共和國衛(wèi)生部.GBZ 70-2002．塵肺病診斷標準[S]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2002.

[4] 中華人民共和國衛(wèi)生部.GBZ 70-2009塵肺診斷標準[S].北京：人民衛(wèi)生出版社，2009.

[5] 張雪濤，倪為民,繆榮明，等．矽肺患者氧化應激指標及外周血單核細胞NF-κB的變化[J]．中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志，2011,29（4）:251-253.

[6] Wintersberger E.Regulation and biological function of thymidine kinase[J].Biochem Soc Trans，1997，25（1）：303-308.

[7] Reist R H，Dey R D，Durham J P，et al.Inhibition of proliferative activity of pulmonary fibroblasts by tetrandrine[J].Toxicol Appl Pharmacol，1993,122（1）:70-76.