2例體檢人員乙型肝炎表面抗原檢測(cè)弱陽(yáng)性反應(yīng)的分析

樸順福

2例體檢人員乙型肝炎表面抗原檢測(cè)弱陽(yáng)性反應(yīng)的分析

樸順福

資料與方法

1.一般資料:在近期在本院體檢的1000例人員中，有2例人員出現(xiàn)乙型肝炎表面抗原檢測(cè)弱反應(yīng)，采用的ELISA方法，顯示為陽(yáng)性。該2例人員血、尿常規(guī)檢測(cè)正常，生化肝、腎功能指標(biāo)均正常。2例人員不相信這次的檢測(cè)結(jié)果，要求進(jìn)一步檢測(cè)。

2.評(píng)定方法:體檢人員再用ELISA方法復(fù)查，仍舊陽(yáng)性。改用金標(biāo)方法復(fù)查HBsAg，結(jié)果甲為陰性。工作人員又檢測(cè)了甲標(biāo)本的HBV－DNA含量，結(jié)果為低于檢測(cè)值下線。而乙仍然是陽(yáng)性。最后評(píng)定甲為陰性，乙為弱陽(yáng)性。

分析:對(duì)弱反應(yīng)樣本作雙例復(fù)檢，復(fù)檢雙孔陰性報(bào)陰性，復(fù)檢雙孔陽(yáng)性報(bào)陽(yáng)性，復(fù)檢雙孔一陰一陽(yáng)加做確認(rèn)試驗(yàn)?；蛘哌M(jìn)行其他方式的檢測(cè)作為補(bǔ)充，或者H BsAg定量或者 H BV-DNA檢測(cè)來(lái)綜合分析報(bào)告［2］。

對(duì)甲人員的臨床原因進(jìn)行分析，首先排除了試劑的問題，再次檢測(cè)，排除了操作的問題，最后進(jìn)行風(fēng)濕四項(xiàng)檢測(cè)時(shí)，發(fā)現(xiàn)甲人員的RF(+)，這使得陰性的標(biāo)本產(chǎn)生了弱反應(yīng)，表現(xiàn)為陽(yáng)性。

對(duì)乙人員的分析，最后依然被確定為HBsAg(+)，最后進(jìn)行的H BsAg定量顯示了H BsAg低水平表達(dá)。以及H BV－DNA的表達(dá)，該患者并具有一定的傳染性。

討 論

乙型肝炎表面抗原檢查是最常用的檢驗(yàn)乙型肝炎病原體的試驗(yàn)。乙肝表面抗原(HBsAg)是乙肝病毒的外殼，對(duì)乙肝病毒DNA起到保護(hù)作用。單項(xiàng)乙肝表面抗原陽(yáng)性并不能確定有沒有乙肝病毒的存在，因?yàn)楹芏啾憩F(xiàn)單項(xiàng)乙肝表面抗原陽(yáng)性者體內(nèi)病毒已經(jīng)完全清除，而有些人體內(nèi)仍可以檢測(cè)到乙肝病毒。當(dāng)人體發(fā)現(xiàn)乙肝表面抗原了，這只能說(shuō)明人體內(nèi)有乙肝病毒外殼，但是外殼里面有沒有乙肝病毒DNA還要通過乙肝PCR檢查來(lái)確定。

乙肝(乙型病毒性肝炎)表面抗原弱陽(yáng)性第一種:就是表面抗原的血清轉(zhuǎn)換，也即乙肝(乙型病毒性肝炎)表面抗原陰轉(zhuǎn)，表面抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)。此時(shí)是恢復(fù)期的表現(xiàn)是好事。但是還要定期的復(fù)查，防止第二種情況的發(fā)生。乙肝(乙型病毒性肝炎)表面抗原弱陽(yáng)性第二種:體內(nèi)的乙肝(乙型病毒性肝炎)病毒DNA發(fā)生變異，檢測(cè)不到大量的HBV－DNA的存在。而HBV卻在人體內(nèi)大量的復(fù)制，患者的肝功能會(huì)進(jìn)一步的遭到破壞。

HBsAg的檢查方法很多，有瓊脂免疫擴(kuò)散法、對(duì)流電泳法、反向被動(dòng)血凝法(RPHA)、酶聯(lián)免疫法、固相放射免疫法等。但前二者靈敏度不夠，已很少用。RPHA法操作簡(jiǎn)單快速，不需特殊儀器，靈敏度高于前二者，為目前應(yīng)用較多之方法，但其靈敏度與特異性仍不如酶聯(lián)免疫法，故將會(huì)被酶聯(lián)免疫法所取代。放射免疫法雖然靈敏、特異，但須同位素標(biāo)記，試劑來(lái)源不足，不宜推廣［3－4］。

檢驗(yàn)人員在利用ELISA法監(jiān)測(cè)HBsAg時(shí)要詳細(xì)閱讀試劑說(shuō)明書及掌握ELISA法作業(yè)指導(dǎo)書的內(nèi)容。從加樣、洗板、加酶液、上酶標(biāo)儀測(cè)試及最后判定結(jié)果［5］，其中每一步都得具有責(zé)任性強(qiáng)，嚴(yán)格每一步的操作規(guī)程。

乙肝表面抗原陽(yáng)性說(shuō)明機(jī)體已經(jīng)感染了乙肝病毒，屬于乙肝患者，需要根據(jù)患者的肝功能情況，乙肝病毒dna的情況以及肝臟受損情況等判斷乙肝病情輕重情況，從而及時(shí)采取適當(dāng)?shù)脑\療措施。但在臨床上有不少的人員報(bào)道乙型肝炎表面抗原檢測(cè)有假陽(yáng)性或者假陰性的結(jié)果。但對(duì)于體檢人群HBsAg的報(bào)告更應(yīng)謹(jǐn)慎，弱反應(yīng)標(biāo)本產(chǎn)生的假陽(yáng)性結(jié)果造成的誤診，可能會(huì)影響體檢人群身心健康。因此，對(duì)這些弱反應(yīng)標(biāo)本的處理和報(bào)告必須引起檢驗(yàn)工作者的重視。

酶標(biāo)儀測(cè)得吸光度值(A)小于0.07為陰性，大于0.2為陽(yáng)性，在0.07～0.2之間判讀為弱反應(yīng)。能導(dǎo)致弱反應(yīng)的原因有多種:①確實(shí)有一部分血清 H BsAg存在低水平表達(dá)狀態(tài);②一些內(nèi)源性干擾因素包括類風(fēng)濕因子(RF)、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等和一些外源性干擾因素包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過長(zhǎng)和標(biāo)本凝固不全等，這些因素可以使陰性的標(biāo)本成為弱反應(yīng)標(biāo)本甚至陽(yáng)性標(biāo)本;③由于試劑材料純度和來(lái)源不同，以及定性試劑檢測(cè)存在變異系數(shù)大等因素均會(huì)造成結(jié)果差異，也影響到弱反應(yīng)結(jié)果的報(bào)告［6－7］。

因此，建議HBsAg測(cè)定結(jié)果為弱反應(yīng)的標(biāo)本，應(yīng)通過確認(rèn)試驗(yàn)來(lái)確定到底是陽(yáng)性還是陰性，或者可采用H BsAg定量或者H BV－DNA檢測(cè)來(lái)綜合分析報(bào)告，復(fù)檢可以減少外源性干擾，復(fù)檢結(jié)果不一致的再做確認(rèn)試驗(yàn)［5］，其目的是要排除內(nèi)源性的干擾因素，得到最準(zhǔn)確的結(jié)果，以對(duì)群眾的身心健康負(fù)責(zé)。

1 張家均.酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)乙肝病毒表面抗原假陽(yáng)性原因的分析及解決方法［J］.現(xiàn)代檢測(cè)醫(yī)學(xué)雜志，2005，20:88.

2 許斌，朱虎定.ELISA檢測(cè)HBsAg影響因素的探討［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，2000，18:232.

3 李金明.感染性疾病血清學(xué)檢驗(yàn)中應(yīng)重視對(duì)弱反應(yīng)性標(biāo)本的確認(rèn)［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，29(7):577-580.

4 張運(yùn)洪，秦蘇，何靜波，等.ELISA法結(jié)合MEIA能有效檢測(cè)低水平 H BsAg［J］，臨床檢驗(yàn)雜志，2002，20(2):103.

5 陳傳德，冷霜.ELISA一步法檢測(cè)HBsAg影響因素分析［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2003，13(3):853.

6 肖征，周薇薇，徐雅萍，等.乙型肝炎表面抗原檢測(cè)中的偶然誤差及對(duì)策［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2003，13(3):292-294.

7 葉千紅，張麗霞.關(guān)于標(biāo)本因素對(duì)ELISA檢測(cè)結(jié)果影響的分析［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2003，7:440-441.

133300 吉林省琿春市婦幼保健所

在體檢中，HBsAg檢測(cè)是最常規(guī)的體檢項(xiàng)目之一，其結(jié)果的準(zhǔn)確性非常重要。HBsAg的檢查方法很多，有瓊脂免疫擴(kuò)散法、對(duì)流電泳法、反向被動(dòng)血凝法(RPHA)、酶聯(lián)免疫法、固相放射免疫法等，其中以酶聯(lián)免疫法的靈敏度與特異性較高，為目前應(yīng)用較多的方法［1］。但在測(cè)定中影響其結(jié)果的因素很多，可能會(huì)造成假陽(yáng)性或假陰性的結(jié)果。觀察臨床常規(guī)檢測(cè)乙型肝炎表面抗原(HB sA g)中出現(xiàn)假陽(yáng)性或者假陰性的原因以及探討相應(yīng)的解決辦法。現(xiàn)就近期體檢中發(fā)現(xiàn)的2例假陽(yáng)性結(jié)果分析如下。