王硯冰
相關(guān)的研究結(jié)果表明:抗體封閉紅細(xì)胞血型的檢測具有重要的意義[1]。本文基于此,為了進(jìn)一步研究抗體封閉紅細(xì)胞血型的鑒別和血型鑒定的方法,選取了鐵嶺市婦嬰醫(yī)院2011年1月至2012年1月間檢測的血型正反定型不符、后經(jīng)鑒定為抗體封閉標(biāo)本22例,以此為研究對象,針對相關(guān)結(jié)果進(jìn)行了比較分析。
1.1 一般資料 以鐵嶺市婦嬰醫(yī)院2011年1月至2012年1月間檢測的血型正反定型不符、后經(jīng)鑒定為抗體封閉標(biāo)本22例為研究對象。這22例標(biāo)本中,都屬于正定型不凝集。在22例標(biāo)本中有6例屬于自身免疫溶血性貧血的患者,4例屬于錯誤輸血漿,還有12例屬于HDN患兒標(biāo)本。
1.2 檢測方法
1.2.1 家族及病情調(diào)查 針對患者的父母進(jìn)行相關(guān)的血型調(diào)查分析,根據(jù)患者父母的血型調(diào)查結(jié)果可以對患者的血型進(jìn)行初步的判斷。通過這種家族及病情的調(diào)查,來確定病情是否對紅細(xì)胞抗原的產(chǎn)生了不同程度的影響。
1.2.2 直接抗人球蛋白試驗(yàn) 首先要求對患者的紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌,洗滌的次數(shù)為3次。洗滌3次以后,按照一定的濃度要求配制懸液,一般濃度控制為0.5%。然后,取50 μL分別加入抗球蛋白卡中,1000 r/min離心10 min觀察結(jié)果。
1.2.3 放散試驗(yàn) 首先要求對患者的紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌,洗滌的次數(shù)為3次。洗滌3次以后,壓積紅細(xì)胞放入等量生理鹽水。然后將其放置在溫度為56℃的水浴箱中,使其孵育10 min。在整個過程中要進(jìn)行適當(dāng)?shù)妮p微振蕩。振蕩以后,使用溫度為56℃的溫鹽水再次進(jìn)行洗滌,洗滌的次數(shù)為3次。洗滌以后的紅細(xì)胞按照上述的直接抗人球蛋白試驗(yàn)進(jìn)行檢測,如果檢測結(jié)果為陽性,則重復(fù)本操作,直至直接抗人球蛋白試驗(yàn)進(jìn)行檢測的結(jié)果顯示為陰性。
1.2.4 血型鑒定 按照一定的濃度要求將放散后的紅細(xì)胞配制懸液,一般濃度控制為0.5%。然后,取50 μL分別加入血型微柱凝膠卡正定型孔及ctl孔中,1000 r/min離心10 min觀察結(jié)果。
本文研究的結(jié)果為,全部22例標(biāo)本的直接抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果均為強(qiáng)陽性(4+)。
在血型鑒定的正定型試驗(yàn)中,只有紅細(xì)胞抗原的充分暴露才能與鑒定血清發(fā)生結(jié)合從而出現(xiàn)凝集。但在臨床上,有少數(shù)患者在病理狀態(tài)下,如存在自身抗體、新生兒溶血(HDN)、輸注不配合血液后,紅細(xì)胞上結(jié)合了大量的抗體,導(dǎo)致紅細(xì)胞抗原被抗體封閉,不能與檢測血清中的抗體結(jié)合,從而出現(xiàn)正反定型不符[2]??贵w封閉血型檢測的關(guān)鍵是如何判斷紅細(xì)胞抗原被封閉,因?yàn)樵谟行┎±?,特別是新生兒抗體還未產(chǎn)生時,病理狀態(tài)、標(biāo)本本身的特殊情況與抗體封閉難以區(qū)分。以上病例中,自身免疫溶血性貧血患者檢測時,正反定型結(jié)果不一致,那么結(jié)合患者家族和病情調(diào)查,很容易判斷出抗體封閉[3]。但錯誤輸血時,如果患者血清中存在游離的抗A抗體,如以上患者,如果輸注的抗B抗體在血清中存在,則正反定型都可能是O型,從而導(dǎo)致血型鑒定的錯誤。同樣,新生兒紅細(xì)胞如果被抗體封閉,反定型又沒有抗體產(chǎn)生的時候,也很容易導(dǎo)致血型錯判。所以,在血型鑒定中,直接抗人球蛋白試驗(yàn)和病情的了解也是非常重要的,通過放散、洗滌患者紅細(xì)胞,結(jié)合病情等方法,全面、仔細(xì)、準(zhǔn)確鑒定患者血型。
[1]Liu Fengmin,Li Chunfang,von Shuangli.Anti E cause hemolytic disease of the newborn E antigen blocking phenomenon:report of 1 cases.China Journal,2009,22(9):759-760.
[2]王藍(lán)鴿,周金安.抗體封閉紅細(xì)胞血型的檢測.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(4):458-459.
[3]邱艷,章?lián)P培.紅細(xì)胞血型抗原化學(xué)修飾的研究進(jìn)展.軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊,2010,12(3):238-239.