陳效杰 薛 勇孫 睿邵 紅 姜 成 朱德全
(1.黑龍江農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 黑龍江 佳木斯 154007;2.佳木斯大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 黑龍江 佳木斯 154007)
啶嘧磺隆屬磺酰脲類除草劑,主要抑制產(chǎn)生側(cè)鏈氨基酸、亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的前驅(qū)物乙酰乳酸合成酶的反應(yīng)。海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG為內(nèi)吸性傳導(dǎo)型除草劑,可被雜草莖葉和根部吸收,并傳導(dǎo)至整株雜草發(fā)揮作用[1]。
甲醇:色譜純甲醇(HPLC級試劑);蒸餾水:新蒸二次蒸餾水;磷酸、磷酸二氫鉀:分析純;啶嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品:≥98.8%;過濾器:濾膜孔徑為0.45μm;微量進(jìn)樣器:10μL;色譜工作站:N2000色譜工作站(浙江大學(xué)智達(dá)信息有限公司);超聲波清洗器:超聲波清洗器(杭州賽智科技有限公司);高效液相色譜儀:LC-10Tvp等度高效液相色譜儀(杭州賽智科技有限公司);海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG。
流動相:甲醇-水(pH值4.0,用磷酸二氫鉀、磷酸調(diào)節(jié))(體積比75:25),流量:1.0mL/min,柱溫:室溫,檢測波長:228nm,進(jìn)樣體積:20mL,保留時間:海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG 4.208min。
稱海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG0.07g(精確至0.0002g),標(biāo)樣置于100mL容量瓶中,加入適量甲醇溶解,置此容量瓶于超聲波浴槽中約10min,取出降至室溫用甲醇定容,搖勻,再用0.45μm濾膜過濾,濾液待測[2]。
稱海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG0.02g(準(zhǔn)確至0.0002g)試樣置于50mL容量瓶中,加入適量甲醇溶解,容量瓶置于超聲波浴槽中約10min,取出降至室溫用甲醇定容,搖勻,再用0.45μm濾膜過濾,濾液待測。
LC-10Tvp等度高效液相色譜儀操作條件下,LC-10Tvp等度高效液相色譜儀待基線穩(wěn)定后,連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)準(zhǔn)溶液,計算各針相對響應(yīng)值,直至相鄰兩針海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的峰面積變化小于1.5%,按標(biāo)準(zhǔn)溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液的順序進(jìn)行測定[3]。
海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG殘留高效液相色譜分析測定,將測得的兩針試樣溶液和試樣溶液前后兩針標(biāo)準(zhǔn)溶液中的海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的峰面積分別進(jìn)行平均。以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示的海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的含量(X)按下式計算:
X(%)=(A2×m1×P)/(A1×m2) 式中:
A1—標(biāo)準(zhǔn)溶液中海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG峰面積的平均值;
A2—試樣溶液中海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG峰面積的平均值;
m1—海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG標(biāo)樣的質(zhì)量(g);
m2—海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG試樣的質(zhì)量(g);
P—標(biāo)準(zhǔn)品中海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)[4]。
4.1.1 流動相的選擇原則
①由強到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進(jìn)行試驗,這樣可以很快地得到分離結(jié)果,然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。②三倍規(guī)則:每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量,保留因子約增加3倍,此為三倍規(guī)則。這是一個聰明而又省力的辦法。調(diào)整的過程中,注意觀察各個峰的分離情況。③粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào):當(dāng)分離達(dá)到一定程度,應(yīng)將有機溶劑10%的改變量調(diào)整為5%,并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調(diào)整率,直至各組分的分離情況不再改變[5]。
4.1.2 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG流動相的選擇
海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG分析過程中,遵守流動相的選擇原則能得到好的峰形且簡便快捷,通過海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG多次配比試驗,最后發(fā)現(xiàn)甲醇:水=70:30(V/V)的體積比為流動相,流速為1.0mL/min時,海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG分析時間短,出峰尖銳對稱保留時間適合要求,樣品中加入磷酸二氫鉀、磷酸可使海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG有效成分及其雜質(zhì)完全分開。
海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的判定,往往并不通過外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法測定,而采用面積歸一化法結(jié)合其它測定結(jié)果。
4.2.1 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品采用其它手段,確認(rèn)主體是所需化學(xué)結(jié)構(gòu)
4.2.2 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品很純條件下,用頂空色譜法測定殘留溶劑
4.2.3 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品中游離的水分,一般要求小于0.2%,在液相色譜中無法測定其含水量
4.2.4 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品中灼燒殘渣或灰分,在液相中無法測定無機鹽類
4.2.5 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品用離子色譜測定可能存在的一些小分子有機酸
4.2.6 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品用其它輔助手段,如熔點、折光率、元素分析等[6]
海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG經(jīng)全波長掃描,發(fā)現(xiàn)在228nm處海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG有較強吸收峰,最終選定228 nm作為檢測波長。
海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG在檢測波長228nm處,移取海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品質(zhì)量濃度0.750 g/L的標(biāo)樣溶液5、10、15、20、30mL稀釋至50mL,然后分別進(jìn)樣。測得海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的線性方程為y=668.22x+3408.8,相關(guān)系數(shù)為r=0.9998。
海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的試驗分析方法,從試驗分析結(jié)果來看有定量準(zhǔn)確與重復(fù)性好及非常好的線性關(guān)系和非常高的準(zhǔn)確度及精密度,海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的試驗分析方法操作簡便及快速,是肇東苜蓿進(jìn)行質(zhì)量檢測理想的分析方法。
[1]http://www.yuanlin365.com/product/20621.shtml[OL].
[2]邵建果,楊俊柱.25%啶嘧磺隆水分散粒劑的反相高效液相色譜測定[J].安徽化工,2008,2:64-65.
[3]廖戎,吳軍.除草劑啶嘧磺隆原藥高效液相色譜分析[J].農(nóng)藥,2008,9:659-660.
[4]閆好民,張云楓.氟嘧磺隆高效液相色譜分析方法的研究[J].浙江化工,2012,7:33-34.
[5]http://bbs.antpedia.com/thread-21408-1-1.html[OL].
[6]http://www.360doc.com/content/11/0317/09/2867540_101863160.shtml[OL].