龍葵水煎劑對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用

嚴(yán) 珂 ，周細(xì)根 ，羅 勇 ，梁生林

（1.吉安市婦幼保健院藥劑室；2.井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室；3.井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)院2009級(jí)藥學(xué)本科班，江西 吉安 343000）

龍葵為茄科屬植物龍葵的全草，性寒﹑味苦﹑有小毒，具有清熱解毒﹑利水消腫等功效[1]。現(xiàn)代藥理研究表明，龍葵全草含多種甾體生物堿，包括澳洲茄邊堿、澳洲茄堿等[2]，具有抗腫瘤[3-4]、抗菌[5-6]、保腎[7]、保肝[8]、提高免疫功能[9]、祛痰止咳[10]等作用。但龍葵的鎮(zhèn)痛作用少有報(bào)道。本研究探討龍葵水煎劑腹腔注射對(duì)小鼠熱板法致痛的鎮(zhèn)痛作用，旨在為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用龍葵提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1）動(dòng)物：昆明種小鼠，體質(zhì)量（22±2）g，雌性，由井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

2）藥品與試劑：哌替啶注射液（宜昌人福藥業(yè)有限責(zé)任公司，規(guī)格：2 mL:100 mg，批號(hào)：021003），龍葵（2010年11月采于江西吉安，經(jīng)井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系彭才圣副教授鑒定為茄科屬植物龍葵），生理鹽水。

3）主要儀器：HSS-1B型恒溫浴槽（成都儀器廠生產(chǎn)），天平，秒表，注射器等。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1）龍葵水煎劑的制備：取切成小段的干燥龍葵50 g，用蒸餾水浸泡30 min，加10倍量蒸餾水（第一次多加2倍量）用文火煎煮3次，每次0.5 h，合并3次煎出液，靜置過(guò)濾去渣，濃縮為50 mL備用（即生藥質(zhì)量濃度為1 g·mL-1，并以此作為高劑量組的給藥濃度，再用蒸餾水配制中劑量組的給藥濃度0.75 g·mL-1和低劑量組的給藥濃度 0.5 g·mL-1）。

2）哌替啶溶液的制備：用蒸餾水將哌替啶注射液配成 0.002 5 g·mL-1。

3）實(shí)驗(yàn)儀器的設(shè)定：將HSS-1B型恒溫浴槽中的水槽蓋取掉，往水槽中加水至以放入鎮(zhèn)痛槽后水不溢出為準(zhǔn)；鎮(zhèn)痛槽放入恒溫浴槽后用支承板上左右兩側(cè)的螺套和壓緊板壓住鎮(zhèn)痛槽；將水槽的出水及回水口用一根橡膠管連通；開(kāi)啟電源開(kāi)關(guān)；在電源接通的狀態(tài)下，將設(shè)定鈕子開(kāi)關(guān)置于“設(shè)定”后，調(diào)節(jié)溫度調(diào)節(jié)旋鈕，直到顯示器顯示出所需要的55℃，設(shè)定完成后將設(shè)定鈕子開(kāi)關(guān)置于“液溫”，儀器顯示溫度逐漸達(dá)到設(shè)定值，直至穩(wěn)定顯示槽內(nèi)實(shí)際液溫（55±0.1）℃[11-12]。

4）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的篩選與分組：將小鼠置于（55±0.1）℃鎮(zhèn)痛槽內(nèi)，以舔后爪出現(xiàn)時(shí)間作為痛閾的指標(biāo)。當(dāng)出現(xiàn)舔后爪時(shí)，立即記錄時(shí)間(即痛閾值)，然后取出小鼠。用此法篩選出痛閾值在5~30 s的雌性小鼠60只供實(shí)驗(yàn)用。將篩選好的60只小鼠，按隨機(jī)數(shù)字表法分為5組，每組12只，即生理鹽水對(duì)照組，哌替啶溶液組，高、中、低劑量龍葵水煎劑組。

5）給藥與痛閾測(cè)定方法：生理鹽水對(duì)照組給予生理鹽水，哌替啶溶液組給予0.002 5 g·mL-1的哌替啶溶液，龍葵水煎劑高、中、低劑量組分別給予1﹑0.75﹑0.5 g·mL-1的龍葵水煎劑，均腹腔注射給藥，給藥量均為 0.1 mL·（10 g）-1。 于給藥前及用藥后 15、30、60 min測(cè)量各組小鼠痛閾值，如果用藥后放入鎮(zhèn)痛槽內(nèi)60 s仍無(wú)反應(yīng)，即將小鼠取出，其痛閾值按60 s計(jì)算。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量資料用±s表示，組間﹑組內(nèi)比較采用t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

各組給藥前痛閾值比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），哌替啶溶液組及高、中、低劑量龍葵水煎劑組給藥后15、30、60 min與生理鹽水對(duì)照組相同時(shí)點(diǎn)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。給藥后15、30、60 min與自身給藥前比較：生理鹽水對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05)，其余各組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 各組給藥前后痛閾值比較 ±s，t/s

表1 各組給藥前后痛閾值比較 ±s，t/s

*P<0.01與生理鹽水對(duì)照組比較；△P<0.01與自身給藥前比較。

給藥后15 min 30 min 60 min生理鹽水對(duì)照組 12 17.48±3.57 17.44±5.97 17.12±4.30 17.88±4.38哌替啶溶液組 12 17.64±3.54 46.75±7.15*△ 38.62±6.64*△ 33.42±4.63*△龍葵水煎劑高劑量組 12 17.67±3.30 52.18±8.17*△ 52.74±7.56*△ 48.36±6.36*△龍葵水煎劑中劑量組 12 17.53±2.36 35.67±5.01*△ 43.68±4.45*△ 47.12±6.88*△龍葵水煎劑低劑量組 12 17.60±3.00 28.11±6.32*△ 30.33±4.41*△ 29.30±5.58*△組 別 n 給藥前

3 討論

龍葵具有清熱解毒，利水消腫等功效?，F(xiàn)代藥理研究[3－10]表明，龍葵具有抗腫瘤、抗菌、保腎、保肝、提高免疫功能、祛痰止咳等作用。龍葵目前以民間應(yīng)用為主，主要用于治療感冒發(fā)熱，牙痛，痢疾，泌尿系感染，乳腺炎，白帶，癌癥；外用治癰癤疔瘡，蛇咬傷等。

為探討龍葵是否具有鎮(zhèn)痛作用，本實(shí)驗(yàn)采用熱板法疼痛模型對(duì)龍葵水煎劑進(jìn)行了鎮(zhèn)痛作用的初步研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，各劑量龍葵水煎劑明顯提高熱板法所致小鼠的痛閾值，與生理鹽水對(duì)照組比較和自身給藥前比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明龍葵水煎劑具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，為其進(jìn)一步研究提供了初步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。其鎮(zhèn)痛有效成份及作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

[1]《全國(guó)中草藥匯編》編寫組.全國(guó)中草藥匯編：上冊(cè)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1996:265-266.

[2]李明慧，丁崗，孟兆青,等.龍葵藥材中澳洲茄堿、澳洲茄邊堿的含量測(cè)定[J].中國(guó)天然藥物,2007,5（5）:360.

[3]梅全喜.廣東地產(chǎn)藥材研究[M].廣東:廣東科技出版社,2011:247-249.

[4]季宇彬，王宏亮，高世勇.龍葵堿對(duì)荷瘤小鼠腫瘤細(xì)胞DNA 和 RNA 的影響[J].中草藥，2005，36（8）:1200-1202.

[5]古麗扎爾·阿布都克依木，薩代提古麗·馬合木提，拉孜古麗·買買提，等.紅果龍葵莖和葉的抑菌作用研究[J].生物技術(shù)通訊，2010，21（4）:555-557.

[6]朱明，薛志琴，宮海燕，等.維吾爾藥龍葵果提取物的抑菌實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2009，18（22）:21-22.

[7]吳軍，陳晨，王宇環(huán).龍葵提取物對(duì)小牛血清白蛋白所致大鼠實(shí)驗(yàn)性腎炎的影響[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2009,20（5）:1236-1237.

[8]高世勇，蘇怡君，季宇彬.龍葵堿對(duì)HepG2細(xì)胞NAT1酶活性的影響[J].哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，26（5）:514-535.

[9]李詠梅,王冰梅,艾金霞.龍葵濃縮汁對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響[J].北華大學(xué)學(xué)報(bào),2005,6（3）:232.

[10]王立業(yè)，王乃利，姚新生.龍葵中的非皂苷類成分[J].中藥材，2007，30（7）:792.

[11]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006:366-367.

[12]梁生林，溫定文，肖紅鈴，等.地錦草煎劑對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2009，29（23）:1993-1995.