忍冬不同栽培類型花蕾形態(tài)學(xué)比較Δ

郭慶梅，周鳳琴，郭偉，邢玉娜，張永清（.山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，濟南5055；.山東省千佛山醫(yī)院，濟南 5004；.魯南制藥股份有限公司厚普公司，山東臨沂 76000）

金銀花為忍冬科植物忍冬Lonicera japonicaThunb.的干燥花蕾或初開的花，具有清熱解毒、涼散風(fēng)寒的功效。山東金銀花的栽培歷史長達數(shù)百年[1]，長期的自然選擇和人工選擇，使其形態(tài)發(fā)生了明顯的變異和分化，形成了很多農(nóng)家品種或品系，藥材產(chǎn)量與質(zhì)量均呈現(xiàn)差異[2～5]。但有關(guān)忍冬花蕾的形態(tài)學(xué)研究較少，主要集中于忍冬屬花粉形態(tài)的研究[6～9]。有研究者對不同產(chǎn)地金銀花的花瓣、花冠管及柱頭進行了觀察和比較，表明不同種間花部形態(tài)有明顯區(qū)別[9]。金銀花從花蕾到全開放這一過程大體分為7個階段，即幼蕾（綠色小花蕾，長約1 cm）、三青期（綠色花蕾，僅上端膨大，長約2.2～2.4 cm）、二白期（呈淡黃綠色，中部以上略膨大，長約3～3.9 cm，一般為大白期前一天）、大白期（類白色花蕾，中部以上充分膨大，長約3.8～4.6 cm，一般為花蕾開放的前一天）、金花（花冠變黃色，長約4～4.5 cm）、凋花（棕黃色）等不同發(fā)育階段[10]。山東產(chǎn)區(qū)金銀花的采收期以二白期花蕾為主。筆者對忍冬不同栽培類型二白期花蕾進行了形態(tài)學(xué)的觀察和比較，包括花蕾長度、最粗處直徑、外表面非腺毛和腺毛密度等，旨在為忍冬栽培品種的劃分和優(yōu)選積累資料。

1 儀器與材料

PM-10AP實體顯微鏡（日本Olympus公司）；DMWB1-C生物顯微鏡（廈門市麥克奧迪實業(yè)集團有限公司）。

水合氯醛、甘油為分析純，水為蒸餾水。

材料為山東省平邑縣鄭城鎮(zhèn)種植的9個傳統(tǒng)栽培類型的于二白期采摘忍冬頭茬花的花蕾，鮮用或曬干后備用，干燥花蕾均為黃白色。樣品經(jīng)山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院周鳳琴教授鑒定來源均為忍冬科植物忍冬L.japonicaThunb.，憑證標(biāo)本存放于山東中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物標(biāo)本室。9個不同栽培類型忍冬花蕾外觀形態(tài)比較見表1。

2 方法與結(jié)果

2.1 方法

取忍冬不同栽培類型的新鮮花蕾，進行形態(tài)學(xué)觀察、描述。隨機取不同栽培類型忍冬二白期鮮花蕾10個，分別測量其長度和最粗處的直徑，計算平均值與標(biāo)準(zhǔn)偏差。

另取花蕾用水浸透，置水合氯醛中冷浸至半透明，然后貯藏于稀甘油中。每個栽培類型取花蕾10個，平均分為上、中、下三段，分別制作外表面裝片[8]。在10×10光學(xué)顯微鏡下，每段隨機觀察3個視野，對腺毛、非腺毛分別計數(shù)，計算其分布密度。所得數(shù)據(jù)使用SAS軟件進行統(tǒng)計分析及顯著性檢驗（P＜0.05）。

2.2 結(jié)果

忍冬不同栽培類型花蕾長度等指標(biāo)測量、統(tǒng)計結(jié)果見表2。

由表2可見，2號小雞爪最長，8號大麻葉最短；2號小雞爪與3號細毛針、4號紅褲腿、5號麻針、7號大毛花、8號大麻葉、9號牻牛兒腿之間有顯著性差異；與其他類型之間無顯著性差異?；ɡ僮畲痔幹睆?號小毛花最粗，與其他類型之間有顯著性差異；8號大麻葉最小，與4號紅褲腿、5號麻針之間無差異，但與其他類型之間有顯著性差異。

忍冬花蕾外表面均有非腺毛分布，但不同栽培類型、不同部位上的分布密度均有差異。忍冬花蕾上段9號牻牛兒腿非腺毛密度最大，1號小毛花最小，但與8號大麻葉之間無顯著性差異。中段6號大雞爪最大，與其他類型間有顯著性差異；8號大麻葉最小，與1號小毛花無顯著性差異，但與其他類型間有顯著性差異。下段2號小雞爪最大，與其他類型間有顯著性差異；1號小毛花最小，與除8號大麻葉外的其他類型間有顯著性差異；除6號大雞爪外，7號大毛花與其他類型間均有顯著性差異。

忍冬不同栽培類型花蕾腺毛分布密度結(jié)果見表3。

由表3可見，忍冬花蕾上段9號牻牛兒腿腺毛分布密度最大，1號小毛花最??；其中3號細毛針與其他類型之間均有顯著性差異；1號小毛花、8號大麻葉之間無差異，而與其他類型之間均有顯著性差異；5號麻針、7號大毛花之間無差異，但與其他類型之間均有顯著性差異；2號小雞爪、4號紅褲腿、6號大雞爪、9號牻牛兒腿之間無差異，但與其他類型之間均有顯著性差異。中段6號大雞爪最大且與其他類型之間均有顯著性差異，8號大麻葉最?。黄渲?號麻針與其他類型之間均有顯著性差異；1號小毛花、8號大麻葉、9號牻牛兒腿之間無差異，但與其他類型之間有顯著性差異；2號、3號、4號、7號之間無差異，但與其他類型之間均有顯著性差異。下段6號最大，與其他類型之間均有顯著性差異；1號最小，與除2號以外的其他類型之間有顯著性差異。

表1 忍冬不同栽培類型花蕾外觀形態(tài)比較Tab 1 Comparison of shapes of flower buds of different cultivated types of L.japonica

表2 忍冬不同栽培類型花蕾長度、最大直徑和非腺毛密度（個/視野）比較（±s）Tab 2 Comparison of the length，maximum diameter and the density of non-glandular hair（piece/visual field）of flower bud in different cultivated types of L.japonica（±s）

表2 忍冬不同栽培類型花蕾長度、最大直徑和非腺毛密度（個/視野）比較（±s）Tab 2 Comparison of the length，maximum diameter and the density of non-glandular hair（piece/visual field）of flower bud in different cultivated types of L.japonica（±s）

＊同一列不同字母表示差異顯著，P＜0.05＊Same column with different lefters indicate significant difference，P＜0.05

編號±s花蕾長度/cm 花蕾最大直徑/cm 花蕾上段非腺毛密度 花蕾中段非腺毛密度 花蕾下段非腺毛密度±s ±s＊±s ±s 1 2 3 4 5 6 7 8 9 3.59±0.27 4.00±1.90 2.90±0.09 2.75±0.11 2.82±0.09 3.13±0.16 2.74±0.07 2.65±0.16 2.80±0.09名稱小毛花小雞爪細毛針紅褲腿麻針大雞爪大毛花大麻葉牻牛兒腿AB＊ A B＊C A B CBC ABBBA 0.33±0.03 0.30±0.01 0.28±0.01 0.26±0.01 0.26±0.02 0.29±0.01 0.29±0.02 0.25±0.04 0.30±0.02 CCDDB C 82.8±11.2 122.4±25.5 120.6±16.4 122.7±14.5 126.3±9.9 128.8±12.3 125.8±24.3 88.0±22.2 130.6±15.4 93.9±16.0 122.4±12.2 125.8±19.8 112.1±13.4 131.0±15.1 140.0±21.4 129.2±26.1 87.5±15.9 112.5±7.8＊ E B＊ F A C D BBBB AB AB BC CD C BC B EF CDE DB AAACA DBABEC D 120.2±22.8 185.4±30.7 146.2±21.2 144.8±29.3 152.6±10.7 156.1±13.3 166.3±22.3 129.9±26.8 142.7±9.3

表3 忍冬不同栽培類型花蕾各段的腺毛分布密度（個/視野）比較（±s）Tab 3 Comparison of the density of glandular hair in different cultivated types of L.japonica（piece/visual field）（±s）

表3 忍冬不同栽培類型花蕾各段的腺毛分布密度（個/視野）比較（±s）Tab 3 Comparison of the density of glandular hair in different cultivated types of L.japonica（piece/visual field）（±s）

＊同一列不同字母表示差異顯著，P＜0.05＊Same column with different lefters indicate significant difference，P＜0.05

編號 花蕾上段 花蕾中段 花蕾下段±s 10.5±2.1 23.5±3.0 20.2±4.1 24.8±4.8 17.9±3.6 24.4±4.4 17.1±4.9 12.0±5.2 25.4±4.1 CABC D 1 2 3 4 5 6 7 8 9±s＊DBBBCABDD名稱小毛花小雞爪細毛針紅褲腿麻針大雞爪大毛花大麻葉牻牛兒腿＊EABACACEA±s 13.4±4.0 20.9±3.6 21.8±5.9 20.7±4.4 17.5±4.0 25.9±5.1 20.4±5.2 12.4±5.0 14.1±2.9 12.7±3.2 14.6±3.1 22.2±4.6 15.9±2.6 21.3±5.6 28.9±3.5 22.6±5.9 19.0±6.5 21.1±2.7 F B E B＊ F E BC

3 分析與討論

3.1 忍冬花蕾形態(tài)與大小對栽培類型劃分的意義

不同栽培類型忍冬二白期花蕾的形態(tài)不一。依據(jù)花蕾形態(tài)和色澤，可以很容易將紅褲腿與其他栽培類型分出；大毛花花蕾中部1/2處明顯內(nèi)彎，可以與其他類型分開；麻針花蕾直立平直，與其他栽培類型差異顯著。不同栽培類型花蕾長度在2.65～4.00 cm之間，其中小雞爪最長，可以與其他栽培類型分開。花蕾最粗處的直徑在0.25～0.33 cm之間，小毛花最粗，可以與其他栽培類型分開。

3.2 忍冬花蕾外表面非腺毛對栽培類型劃分的意義

花蕾外表面非腺毛的分布密度在花蕾的上、中、下三段不完全一致，按在每個視野內(nèi)非腺毛的密度，呈現(xiàn)上段＜中段＜下段的規(guī)律。不同栽培類型花蕾各段非腺毛的分布密度具有一定的差異。經(jīng)統(tǒng)計，花蕾上段可以分出疏毛類的小毛花和大麻葉，非腺毛密度每視野內(nèi)僅為83～88個；在花蕾的中段可以明顯地區(qū)分出大雞爪，非腺毛密度每視野內(nèi)為140個，小毛花和大麻葉仍為非腺毛分布密度最小的類型；花蕾的下段，小雞爪非腺毛分布密度每視野內(nèi)為185個，屬于密毛類種質(zhì)。因此，以花蕾外表面非腺毛的密度為依據(jù)，可以將1、2、6、8號與其他栽培類型予以區(qū)分。

3.3 忍冬花蕾外表面腺毛對栽培類型劃分的意義

不同栽培類型忍冬花蕾各段，腺毛的分布密度也有一定的區(qū)別。在花蕾上、中段，小毛花與大麻葉為密度最小的類型，每視野內(nèi)僅有11～13個，但二者在花蕾下段的密度上可以區(qū)分，前者的密度為13，后者為19?；ɡ俚闹卸魏拖露?，大雞爪為腺毛分布密度最大的類型，分別為26（中段）和29（下段），易與其他栽培類型區(qū)分。統(tǒng)計學(xué)結(jié)果還可依據(jù)腺毛分布的密度將細毛針、麻針、大毛花與其他栽培類型明顯分開。

4 小結(jié)

將毛被作為忍冬栽培類型劃分依據(jù)的設(shè)想基于以下幾個方面：金銀花藥材表面被毛；《藥用植物學(xué)》描述花冠“外被柔毛和腺毛”；《中國藥典》描述藥材表面“密被短柔毛”；《中藥鑒定學(xué)》描述為“粉末中有兩種腺毛；兩種非腺毛”；藥農(nóng)以表面毛茸的多少劃分不同的栽培類型；毛茸是忍冬花蕾遺傳性特征，栽培類型不同，毛茸的形態(tài)、性狀應(yīng)有差異。本研究僅初步比較了不同栽培類型忍冬花蕾間形態(tài)特征及其毛被的差異，結(jié)果證明了不同栽培類型之間有一定差異。

總之，忍冬花蕾的形態(tài)與顏色、花蕾外表面非腺毛的密度和長度、腺毛密度、腺柄細胞數(shù)等可以作為忍冬栽培類型區(qū)分的依據(jù)之一。

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