轉(zhuǎn)鐵蛋白和血紅蛋白聯(lián)合檢測消化道出血的臨床應(yīng)用

林麗英 張 泳 楊素冰

1.廣州醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院檢驗科，廣東 廣州 510150；2.廣州市中醫(yī)院檢驗科，廣東 廣州 510130；3.廣州市腫瘤醫(yī)院檢驗科，廣東 廣州 510095

便隱血試驗（OBT）是指消化道出血量少，肉眼不見血色，而且少量紅細(xì)胞又被消化分解，以至顯微鏡下也無從發(fā)現(xiàn)的出血[1-3]。正常人糞便隱血試驗為陰性。其陽性常見于消化性潰瘍的活動期、胃癌、鉤蟲病以及消化道炎癥、出血性疾病等；消化性潰瘍呈間斷陽性，消化道癌癥呈持續(xù)性陽性，故本試驗對消化道出血的診斷及消化道腫瘤的普查、初篩和監(jiān)測均有重要意義[4]。目前主要采用化學(xué)法、單克隆抗體法，但血紅蛋白由于受到腸內(nèi)細(xì)菌的作用及大腸黏膜產(chǎn)生的黏液成分影響而變性，常出現(xiàn)假陰性反應(yīng)。有報道指出應(yīng)用聯(lián)合免疫法同時測定血紅蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白，對消化道出血性疾病的陽性檢出率有顯著提高。本文對聯(lián)合免疫法、血紅蛋白法（OB）、轉(zhuǎn)鐵蛋白法（TF）檢測便隱血的3種方法進(jìn)行比較?，F(xiàn)報道如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1 944例糞便標(biāo)本，均來自廣州醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院就診的患者，其中，男917例，女 1 027例；年齡 0～82歲。消康保便隱血試紙和轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金診斷試紙購自萬華普曼生物工程有限公司。

1.2 方法

1.2.1 血紅蛋白的檢測 用采便棒采集便樣后，將其放入裝有緩沖液的小試管中，充分混勻便樣；撕開鋁錫箔袋，取出試紙條；將試紙標(biāo)有MAX箭頭的一端插入待測樣本中，待測標(biāo)本界面不得超過MAX線；5 min內(nèi)判讀結(jié)果。在反應(yīng)線和控制線同時出現(xiàn)一條色帶，代表OB陽性，提示標(biāo)本有隱形出血；在控制線出現(xiàn)一條色帶，反應(yīng)線無色帶出現(xiàn)，則為陰性，即提示標(biāo)本無隱性出血；在控制線和反應(yīng)線均無色帶出現(xiàn)，或在反應(yīng)線出現(xiàn)一條色帶，表明試驗無效。血紅蛋白的檢測范圍為 0.2～2 000.0μg/mL。

1.2.2 轉(zhuǎn)鐵蛋白的檢測 方法同上，其中轉(zhuǎn)鐵蛋白的檢測范圍為 40 ng/mL～400μg/mL。

1.2.3 聯(lián)合檢測法 OB法和TF法有任何一項為陽性，聯(lián)合檢測法即為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件建立數(shù)據(jù)庫進(jìn)行統(tǒng)計分析處理，計數(shù)資料以百分率表示，采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

其中，TF法的陽性率明顯高于OB法，差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=20.38，P＜0.01），聯(lián)合檢測法的陽性率明顯高于OB 法，差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=36.01，P ＜ 0.01）。 雖然聯(lián)合檢測法的陽性率（11.11%）略高于TF法的陽性率（9.62%），但兩者陽性率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=2.33，P=0.127＞0.05）。見表 1。

表1 3種方法陽性率的比較（例）

3 討論

轉(zhuǎn)鐵蛋白的檢測對于消化道出血的診斷有很重要的參考價值[5]?，F(xiàn)在常規(guī)檢查方法是化學(xué)法和免疫法?；瘜W(xué)法方法種類繁多，但試驗原理基本相同，都是基于血紅蛋白中的含鐵血黃素部分有催化過氧化物分解的作用，能催化試劑中的過氧化氫，分解釋放新生態(tài)氧，氧化上述色原物質(zhì)而呈色，顏色的深淺反映了血紅蛋白的多少[6]。免疫法檢測的指標(biāo)一般是人血紅蛋白或人紅細(xì)胞基質(zhì)，所用抗體是抗人血紅蛋白抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)抗體，檢測人血紅蛋白可檢出消化道任何部位的出血，檢測人紅細(xì)胞基質(zhì)只能檢出下消化道出血。但是血紅蛋白由于受到腸內(nèi)細(xì)菌的作用及大腸黏膜產(chǎn)生的黏液成分的影響而變性，易出現(xiàn)假陰性反應(yīng)。轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金診斷試紙用來檢測糞便中的轉(zhuǎn)鐵蛋白，可以排除以上方法的缺點(diǎn)，不僅有較好的特異性和靈敏度，還對消化道出血者陽性率有顯著的提高[7]。

在糞便的形成過程中，少量的消化道出血不一定與之混合均勻，而且消化道出血具有間斷性，所以要連續(xù)3次檢測以獲得更為準(zhǔn)確的結(jié)果，只要一次結(jié)果為陽性，就可認(rèn)為有隱形性出血存在。免疫法檢測便隱血的結(jié)果呈陽性，可能由于以下干擾情況導(dǎo)致，如牙齦、口鼻腔出血，月經(jīng)出血、某些藥物（如阿司匹林）刺激胃腸道造成的出血，應(yīng)引起臨床醫(yī)生的注意[8]。

出現(xiàn)柏油樣便時，血紅蛋白濃度超出2 000μg/mL檢測范圍可能會因為前滯反應(yīng)出現(xiàn)假陰性結(jié)果，此時需要充分稀釋便樣后再進(jìn)行測試。隨著社會環(huán)境的改變、工作壓力增大、食品添加劑的應(yīng)用、藥品的使用和飲食習(xí)慣的改變，上、下消化道的感染、損傷、腫瘤和胃腸不適所致的出血病例有所增加。單純的血紅蛋白單克隆抗體法檢測糞便隱血試驗有一定的局限性，對于十二指腸及胃以上部位的上消化道出血則會出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因為血紅蛋白在消化道存留時間過長，可能被胃酸或腸道內(nèi)細(xì)菌分泌的酶所降解或破壞，使其免疫原性減弱或出現(xiàn)假陰性的結(jié)果[9-11]，此時應(yīng)增加樣本濃度檢測或者連續(xù)檢測3次，并結(jié)合臨床進(jìn)行判斷?，F(xiàn)我科開展的金標(biāo)法測定糞便中轉(zhuǎn)鐵蛋白隱血試驗，兩法聯(lián)用，填補(bǔ)了血紅蛋白法測定的缺陷，減少了上消化道出血病例的漏診[12]。

就像其他檢驗方法一樣，便隱血試驗不能對胃腸道出血性疾病做出結(jié)論性診斷，只能作為篩選或輔助診斷用，但是不能代替臨床內(nèi)窺鏡、X線片和其他檢查。對于陽性結(jié)果，應(yīng)結(jié)合臨床做進(jìn)一步的檢查。

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