大理地區(qū)豬源甲型、乙型、戊型肝炎病毒血清流行病學(xué)調(diào)查＊

李麗娟 申元英、△ 艾志瓊 王濤 張文 李東 段彪

（1.大理學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院，云南 大理671000；2.大理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，云南 大理671000）

病毒性肝炎是嚴(yán)重威脅人類健康的一類疾病，一直以來都受到研究者的重視。隨著研究的不斷深人，新的病毒不斷被發(fā)現(xiàn)。迄今，已確定的有7種肝炎病毒，即甲型肝炎病毒（HAV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、丁型肝炎病毒（HDV）、戊型肝炎病毒（HEV）、庚型肝炎病毒（HGV）、輸血傳播的病毒（TTV）等。由于各型肝炎病毒之間病毒的生物學(xué)特性不同，傳播方式不同，病毒感染后無交叉免疫，因而同一個(gè)體可以感染兩種或兩種以上肝炎病毒，這種現(xiàn)象稱為病毒性肝炎多重感染。本文將探討與人類接觸密切的豬體內(nèi)甲肝、乙肝、戊肝的感染情況。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 研究對(duì)象

以大理市屠宰生豬為研究對(duì)象，于2011年5～7月于大理市屠宰場(chǎng)采集屠宰生豬血197份，逐一編號(hào)，其中甲肝戊肝檢測(cè)所用標(biāo)本為1－178號(hào)標(biāo)本，乙肝檢測(cè)所用標(biāo)本為1－197號(hào)標(biāo)本。

1.1.2 試劑

抗－HAV IgM（批號(hào)：20110401）和抗－HAV IgG（批號(hào)：20110403）購自濰坊三維生物工程集團(tuán)有限公司；HBsAg（批號(hào)：01009051）、HBsAb（批 號(hào)：201011021）、HBeAg（批 號(hào)：201011021）、HBeAb（批 號(hào)：201011021）、HBcAb（批 號(hào)：201011011）均購自上海科華生物工程公司；抗－HEV IgM（批號(hào)：EG20110402）和抗－HEV IgG（批號(hào)：EG20110402）購自北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司。

1.1.3 儀器

微量移液器（Eppenddorf公司，德國），酶標(biāo)儀（Elx800，美國）。

1.2 方法

無菌采集大理市屠宰生豬全血197份，分離血清，－20℃保存?zhèn)溆?；采用酶?lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）方法對(duì)甲型、乙型和戊型肝炎病毒感染學(xué)指標(biāo)，即抗－HAV IgM、抗－HAV IgG、乙型感染“二對(duì)半”和抗－HEV IgM、抗－HEV IgG進(jìn)行檢測(cè)，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，結(jié)果按試劑盒說明書進(jìn)行判斷。

2 結(jié)果

2.1 甲肝檢測(cè)結(jié)果

甲肝、戊肝檢測(cè)標(biāo)本有178份，其結(jié)果如表1所示。

表1 甲肝病毒、戊肝病毒檢測(cè)結(jié)果

2.2 乙肝檢測(cè)結(jié)果

乙肝檢測(cè)標(biāo)本數(shù)197份，其檢測(cè)結(jié)果如表2所示。

2.3 戊肝檢測(cè)結(jié)果

檢出戊肝血清標(biāo)志物總陽性數(shù)42份，陽性率為23.6%（42／178），其中HEV－lgG陽性血清有31份，所占比例為17.4%（42／178）；HEV－lgM陽性血清有11份，所占比例為6.2%（11／178）；lgG和lgM 同時(shí)陽性的標(biāo)本有0份。

表2 乙肝病毒檢測(cè)結(jié)果

2.4 三種嗜肝病毒重疊感染情況

1－178號(hào)標(biāo)本，均有肝炎病毒的感染，其中HAV、HBV、HEV單獨(dú)感染率分別為3.4% （6／178）、4.5% （8／178）、0；HAV和 HBV 二重感染率為67.97%（121／178）；HAV、HBV和HEV三重感染率為20.2%（36／178）；HAV和HEV二重感染率為1.7%（3／178）；HBV 和 HEV 二重感染率為2.2%（4／178），見圖1。

圖1 三種嗜肝病毒感染情況

3 討論

血清抗體lgM出現(xiàn)早，消失快，是新近感染的重要指標(biāo)?？贵wlgG在血中持續(xù)存在的時(shí)間可達(dá)數(shù)年，lgG的檢測(cè)主要用于了解既往感染史或進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。本實(shí)驗(yàn)甲肝血清標(biāo)志物陽性率為91%，提示可能有91%的屠宰豬感染或既往感染過HAV。由于本次實(shí)驗(yàn)所用試劑盒為人用試劑盒，尚不能確定引起試劑盒反應(yīng)的是否為豬體內(nèi)的甲肝病毒所致。查文獻(xiàn)也未見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)首次在豬體內(nèi)檢測(cè)HAV免疫學(xué)標(biāo)志物，且檢出率頗高。其具體原因有待于進(jìn)一步的病原學(xué)和分子生物學(xué)的研究。

Meng［1］曾在不同月齡的豬血清中檢測(cè)出了HEV RNA，李文貴等［2］應(yīng)用RT－PCR方法從屠宰豬肝中擴(kuò)增出了 HEV RNA，證實(shí)了豬體內(nèi)確實(shí)存在HEV的感染。韋獻(xiàn)飛等［3］對(duì)廣西地區(qū)豬戊型肝炎病毒感染血清學(xué)分析結(jié)果表明，豬血清抗－HEV IgG陽性率為26.40%（66／250）。李文貴等［4］對(duì)云南省豬戊型肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，屠宰豬的HEV抗體陽性率高達(dá)68.9%。本研究HEV抗體陽性率為23.6%（42／178），與韋獻(xiàn)飛報(bào)道相符，與李文貴等、秦毅斌等［5］報(bào)道存在差異。

HBsAg是乙型肝炎的早期診斷最重要的指標(biāo)，HBeAg是目前臨床上評(píng)價(jià)HBV復(fù)制的較敏感、穩(wěn)定、可靠的指標(biāo)［6］。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果為HBsAg陽性標(biāo)本2例，HBeAg陽性標(biāo)本3例，說明有2.5%（5／197）的屠宰豬體內(nèi)存在 HBV 的復(fù)制。HBsAb是HBsAg刺激機(jī)體產(chǎn)生的特異性中和抗體，保護(hù)性抗體，其出現(xiàn)表示機(jī)體對(duì)乙肝已產(chǎn)生免疫力。本實(shí)驗(yàn)HBsAb陽性率為50.3%（99／197），表明50.3%的屠宰豬經(jīng)自然感染HBV后產(chǎn)生了免疫力。傅妹伢等［7］曾對(duì)大理屠宰豬HBV流行病學(xué)檢測(cè)，結(jié)果表明豬HBV感染流行率為59.1%，本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果可能是不同來源的豬，其感染情況不同，具體原因有待進(jìn)一步調(diào)查。

本研究發(fā)現(xiàn)，三種肝炎病毒的血清標(biāo)志物均有檢出，尤其是甲肝、乙肝血清標(biāo)志物檢出率頗高，這是很值得注意的問題。因?yàn)閺墓残l(wèi)生的角度來看，屠宰豬已經(jīng)進(jìn)入到了豬肉品生產(chǎn)鏈的末端。雖然未見從豬肉中檢測(cè)到HAV、HBV、HEV的報(bào)道，但豬血清標(biāo)志物陽性檢出率如此之高，可能會(huì)對(duì)人類健康構(gòu)成潛在的威脅。

1 Meng XJ.Hepatitis E virus：cross－species infection and zoo－notic risk［J］.Clin Microbiol New，2005，27（6）：43－48.

2 李文貴，佘銳萍，韋海濤，等.屠宰豬肝和血清中乙型肝炎病毒及戊型肝炎病毒的檢測(cè)［J］.中國獸醫(yī)科學(xué)，2007，37（11）：921－925.

3 韋獻(xiàn)飛，梁靖瑞，唐榮蘭，等.廣西地區(qū)豬、鼠、狗戊型肝炎病毒感染血清學(xué)分析［J］.中國公共衛(wèi)生，2007，23（2）：228－229.

4 李文貴，李精華，楊貴樹，等.云南省豬戊型肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查［J］.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，26（4）：917－919.

5 秦毅斌，趙武，肖愛歡，等.廣西豬戊型肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查［J］.廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，41（4）：383－385.

6 王建軍，成軍.乙型肝炎病毒e抗原的生物學(xué)作用［J］.胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2004，13（1）：76－77.

7 傅妹伢，申元英，艾志瓊，等.大理屠宰豬HBV流行病學(xué)檢測(cè)［J］.大理學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，9（6）：32－34.