幾種中草藥提取物防治萵苣霜霉病研究

黃興學(xué)，王斌才，胡偵華，林處發(fā)，周國林，汪愛華，鄧耀華，張潤花，姚芳

（武漢市蔬菜科學(xué)研究所，430345）

萵苣霜霉病是萵苣上的毀滅性病害，化學(xué)防治是當(dāng)前控制該病的主要措施，但由于化學(xué)殺菌劑連續(xù)使用，病菌的抗藥性越來越強(qiáng)，而為了提高防治效果又不得不增加施藥量和施藥次數(shù)，導(dǎo)致農(nóng)藥殘留問題日趨嚴(yán)重。有機(jī)蔬菜不能使用任何化學(xué)藥劑，目前對萵苣霜霉病尚無有效辦法，急需研制出對該病治療和預(yù)防比較有效的且對蔬菜和環(huán)境友好的藥劑。植物源殺菌劑符合有機(jī)蔬菜生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)，針對其他病害的植物源殺菌劑已有報(bào)道，但是對萵苣霜霉病有效的植物源殺菌劑尚少有研究，本研究報(bào)道了幾種中草藥防治萵苣霜霉病的藥效試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試病原菌為萵苣霜霉病 （Bremia lactucae Regel），萵苣品種為武漢花葉萵苣。

1.2 試驗(yàn)方法

①植物中草藥提取物的制備 將各中藥稱取30 g，加入1 500 mL水用煎藥壺熬煮。熬煮完成后過濾，用水定容至500 mL，即為60 g/L的藥劑。如果是混合物提取液，總質(zhì)量100 g，濃度60 g/L。

②抑制孢子囊萌發(fā)試驗(yàn) 從大田采回萵苣霜霉病病葉，用自來水洗去原有孢子囊，保濕24 h后，用毛筆輕輕將病斑處新產(chǎn)生的病原孢子囊刷入不同處理藥液中，配制成含藥孢子懸浮液，以不含藥的孢子懸浮液為對照。用懸滴法測定孢子萌發(fā)情況，于25℃下培養(yǎng)4 h后，顯微鏡下檢查萌發(fā)率，計(jì)算抑制率：抑制率（%）＝[（對照萌發(fā)率-處理萌發(fā)率）/對照萌發(fā)率]×100%。

③苗期試驗(yàn) 將供試藥劑分別配制成12.5，25，50，100 mg/L， 以 500 mg/L 甲霜靈為標(biāo)準(zhǔn)藥劑對照，清水為空白對照，每個處理重復(fù)3次。當(dāng)萵苣長出2片葉時進(jìn)行試驗(yàn)。a.預(yù)防作用測定試驗(yàn)。用點(diǎn)滴法施藥，保濕24 h后，再用點(diǎn)滴法接菌保濕24 h，然后轉(zhuǎn)入常規(guī)管理，待清水對照充分發(fā)病后，調(diào)查防治效果。b.治療作用測定試驗(yàn)。方法與保護(hù)作用基本相同，區(qū)別在于先接菌，保濕24 h后再施藥。分級方法及計(jì)算公式：0級，葉片無病斑；1級，病斑面積占整個葉片面積5%以下；3級，病斑面積占整個葉片面積6%～10%；5級，病斑面積占整個葉片面積11%～25%；7級，病斑面積占整個葉片面積26%～50%；9級，病斑面積占整個葉片面積的50%以上。病情指數(shù)＝（∑病級葉片數(shù)×該病級數(shù)值）/（調(diào)查總?cè)~數(shù)×最高病級數(shù)值）；相對防效（%）＝[（對照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)指數(shù)）/對照區(qū)病情指數(shù)]×100%。

1.3 數(shù)據(jù)分析

用Excel 2003進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析，用SAS 8.1進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 中草藥提取液對孢子萌發(fā)的影響

從表1可以看出，8種中草藥提取液對萵苣霜霉病孢子的萌發(fā)抑制效果以穿心蓮最好，其次是厚樸和牛蒡，其他幾種中草藥提取液對孢子萌發(fā)的抑制率均在80%以下，對照最低。

2.2 3種中草藥混合物提取液對萵苣霜霉病孢子的萌發(fā)的影響

對萵苣霜霉病孢子萌發(fā)最大的用3種中草藥混合物進(jìn)行室內(nèi)抑菌測定（表2）。表2結(jié)果表明，3種混合物提取液抑制效果比兩種混合物和對照抑制效果好， 穿心蓮∶厚樸∶牛蒡＝2∶1∶1 混合物對萵苣霜霉病孢子的萌發(fā)抑制效果最好，其次是 1∶1∶1、1∶2∶1、1∶1∶2。 2種混合物抑制效果比3種混合物抑制效果差，但比對照好，差異達(dá)顯著水平。

2.3 中草藥提取物對萵苣苗期霜霉病的防效測定

由表3可知，除了苦參的治療效果，其他提取物的預(yù)防和治療效果都顯著高于對照。每一種提取物的預(yù)防效果都優(yōu)于其對萵苣霜霉病的治療效果。從對萵苣霜霉病的預(yù)防效果來看，以牛蒡和穿心蓮最佳，顯著高于其他處理。而苦參和黃柏提取物效果較差，與其他中草藥提取物保護(hù)效果差異顯著。牛蒡?qū)λ共“l(fā)生后的治療效果優(yōu)于其他提取物，其次為穿心蓮和厚樸。最差的是對照和苦參。

2.4 中草藥提取物混合液對萵苣霜霉病的田間防效

將對萵苣霜霉病孢子萌發(fā)抑制和萵苣幼苗霜霉病田間防效較好的穿心蓮、厚樸和牛蒡混合提取后進(jìn)行防效測定。結(jié)果表明（表4），中草藥混合物對萵苣霜霉病的預(yù)防和治療作用分別優(yōu)于于單個中藥提取物。預(yù)防效果和治療效果最好的是穿心蓮∶厚樸∶牛蒡=2∶1∶1 和 1∶1∶2 處理， 較差的是 1∶1∶0處理。

3 小結(jié)與討論

從對萵苣霜霉病孢子抑制和田間防效的觀察來說，都是穿心蓮、厚樸和牛蒡效果較好，3種中草藥混合物的防治效果比單個中藥要好。當(dāng)混合物中穿心蓮和牛蒡比例增加的時候，藥效提高，因此改善防治萵苣霜霉病的中草藥配方，應(yīng)選用混合制劑，其中穿心蓮和牛蒡是必須的組分，但比例還需要進(jìn)一步研究。試驗(yàn)證明，用中草藥提取物防治萵苣霜霉病是可行的。

中草藥制劑對孢子囊萌發(fā)的抑制率高于田間試驗(yàn)的防效，原因可能是孢子萌發(fā)試驗(yàn)測得的僅是藥劑與病原菌相互作用的結(jié)果；而田間試驗(yàn)是藥劑、病原菌、寄主及環(huán)境條件之間相互作用的結(jié)果。

表1 中草藥提取液對萵苣霜霉病孢子萌發(fā)的影響

表2 3種混合物提取液對萵苣霜霉病孢子萌發(fā)的影響

表3 中草藥提取物對萵苣苗期霜霉病的防效測定

表4 3種中草藥混合物對萵苣霜霉病田間防效測定

中草藥制劑防治霜霉病的效果與其在田間的穩(wěn)定性、滲透性、提取介質(zhì)等有關(guān)，為進(jìn)一步加強(qiáng)其防治效果，減少其有效防治濃度，降低成本，須在劑型、穩(wěn)定性和滲透性等方面加強(qiáng)研究。另外，因?yàn)槎喾N中藥混合物可以通過不同的方式抑制霜霉病的發(fā)生和蔓延，所以中草藥的配方還可進(jìn)一步完善。