聚合酶鏈反應(yīng)與涂片法檢測對診斷結(jié)核病的價值

王盈

(江西省撫州市第一醫(yī)院檢驗科，江西 撫州 344000)

結(jié)核病是當(dāng)前對人類的健康具有嚴(yán)重威脅的重大傳染性疾病之一，作為一種傳染疾病，結(jié)核病已經(jīng)成為全球性的社會問題和公共衛(wèi)生問題。在我國，根據(jù)抽樣調(diào)查結(jié)果，其感染率達(dá)到44.5%，而2004年WHO的一項統(tǒng)計顯示，我國每年新發(fā)的結(jié)核病例占全球每年新發(fā)病例的15%，感染人數(shù)位居全球第二[1]。結(jié)核病不僅感染率高，其患病率、耐藥率以及死亡率也處于較高水平。當(dāng)前，對結(jié)核病的預(yù)防、診斷以及臨床治療已經(jīng)成為我國重點解決的醫(yī)學(xué)課題。臨床癥狀、實驗室檢查以及影像學(xué)檢查等是當(dāng)前結(jié)核診斷的主要途徑，通過早診斷、早治療，絕大多數(shù)的結(jié)核病患者均可以治愈[2]。由于患者數(shù)量較多，現(xiàn)有的實驗室檢查手段無法滿足臨床上的快速檢測需求，因此建立快速和準(zhǔn)確的診斷方法，是當(dāng)前結(jié)核病研究的重要方向。我院2011年1月至2012年1月間收集了疑似結(jié)核病呼吸道和體液標(biāo)本共426份，采用FQ-PCR 法和涂片法對其進(jìn)行同步檢測，現(xiàn)對這兩種方法的診斷效果進(jìn)行分析總結(jié)，報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 我院2011年1月至2012年1月間收集了疑似結(jié)核病呼吸道和體液標(biāo)本共426份，均為我院門診或住院患者，每位患者留取呼吸道或體液標(biāo)本一份。426份標(biāo)本全部送檢，其中痰液198份，支氣管灌洗液100份，尿液51份，胸腔積液28份，淋巴穿刺液21份、腦脊液18份，膿性分泌物10份。426例患者中，最終有201例臨床確診為結(jié)核病，非結(jié)核 病患者則為225例，包括肺炎、肺癌、慢性支氣管炎、哮喘等。

1.2 試劑和儀器 FQ-PCR 儀：美國ABI7300 擴(kuò)增儀，購自中山達(dá)安基因；TB-PCR 熒光定量檢測試劑盒：購自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司。

1.3 檢測方法 本次共送檢426份呼吸道和體液合格標(biāo)本，對每個標(biāo)本同時進(jìn)行FQ-PCR 法和 涂片法檢測，對于痰液標(biāo)本則先用4%的氫氧化鈉溶液進(jìn)行消化濃縮結(jié)核桿菌。FQ-PCR 法檢測 按照試劑盒說明進(jìn)行操作，涂片法則按照常規(guī)的實驗操作規(guī)程進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 統(tǒng)計數(shù)據(jù)采用SPSS 12.0軟件分析，變量數(shù)據(jù)分析采用t 驗，率的比較則采用秩和檢驗分析，P＜0.05 差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 426份標(biāo)本的FQ-PCR和涂片法檢測結(jié)果426份標(biāo)本的FQ-PCR和涂片法檢測結(jié)果如表1所示，總陽性率:FQ-PCR 法34.51%，涂片法為14.32%，結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。

2.2 201例確診病例的檢測結(jié)果 本組共有201例患者臨床確診為結(jié)核病患者，陽性率：FQ-PCR 法66.67%,涂片法29.85%,結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，如表2 所示。

2.3 兩種方法的敏感性和特異性結(jié)果 兩種檢測方法的敏感性和特異性結(jié)果如表3 所示，F(xiàn)Q-PCR法分別為66.67%和100%，涂片法分別為29.85%和100%。

表1 426份標(biāo)本的FQ-PCR和涂片法檢測結(jié)果

表2 201例確診病例的檢測結(jié)果

表3 兩種方法的敏感性和特異性結(jié)果

3 討論

結(jié)核病的實驗室診斷長期以來主要依賴細(xì)菌學(xué)的涂片和培養(yǎng)法進(jìn)行檢查。涂片法具有操作簡便、快捷、價格低廉且可以明確結(jié)核傳染源等優(yōu)點，但通常情況下敏感性較低，無法滿足對結(jié)核病的診斷需求[3]。分子生物學(xué)技術(shù)近年來得到了飛速發(fā)展和進(jìn)步，已被廣泛應(yīng)用結(jié)核的實驗室鑒別和診斷，具有快速準(zhǔn)確、高靈敏度、高特異性等特點[4]。本文共收集各類標(biāo)本426份，其中采用涂片法的陽性率僅為14.32%，敏感性僅為29.85%，而FQ-PCR 法的陽性率則可以達(dá)到34.51%，敏感性更是達(dá)到了66.67%，但兩者的特異性結(jié)果則均為陽性和假陰性均具有較好的檢測準(zhǔn)確率。由此可見結(jié)核病診斷中，F(xiàn)Q-PCR 法與涂片法相比具有更高的敏感性和陽性檢出率，檢測結(jié)果更加可靠，但該法相對價格較高，需要醫(yī)院具備相應(yīng)的醫(yī)療設(shè)施。綜合上述，F(xiàn)Q-PCR 法因其顯著的優(yōu)勢必將在臨床上得到越來越廣泛的應(yīng)用，而涂片法亦因其自身存在的優(yōu)勢而繼續(xù)在臨床上得到使用。

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