骨碎補中的化學(xué)成分及藥理作用研究進展*

彭 雙，韓立峰，王 濤，潘桂湘

骨碎補為水龍骨科植物槲蕨 [Drynaria fortunei（Kunze）J.Sm.]的干燥根莖。槲蕨屬植物主產(chǎn)于亞洲及大洋洲，其中2種產(chǎn)于非洲中部，1種產(chǎn)于馬達(dá)加斯加及附近島嶼，其余的分布于亞洲至澳大利亞的昆士蘭及太平洋的一些島嶼，該屬在亞洲大陸最為分化。中國有9種，主產(chǎn)長江以南各省區(qū)，向西達(dá)西藏，向北達(dá)秦嶺[1]?！吨袊幍洹酚涊d骨碎補具有補腎強骨、續(xù)傷止痛的功效。現(xiàn)已被制成多種制劑用于腎虛腰痛、耳鳴耳聾、牙齒松動、跌撲閃挫、筋骨折傷，外治斑禿、白癜風(fēng)[2]。因其療效顯著，國內(nèi)外學(xué)者對其化學(xué)成分和藥理作用作了較多研究，現(xiàn)筆者對其綜述如下。

1 化學(xué)研究概況

通過研究表明，骨碎補中的主要化學(xué)成分為黃酮類、三萜類、苯丙素類等。

1.1 黃酮類化合物 骨碎補中的黃酮類化合物主要有二氫黃酮、黃烷-3-醇（又稱兒茶素類）、黃酮、黃酮醇、色原酮、查爾酮、橙酮類及其衍生物等。近年來，從骨碎補的乙醇提取物中已經(jīng)分離得到40種黃酮類化合物。高穎等[3]和Wang等[4]從骨碎補60%乙醇提取物-大孔吸附樹脂-30%和50%乙醇洗脫物中總共分離得到了21個黃酮類化合物，其中11個是首次從該屬植物中分離得到。Wang等[5]從骨碎補中分離得到了9種黃酮類化合物，這9種化合物都是在該屬中首次報道[6-9]，見表1。

1.2 三萜類化合物 周銅水等[10]從骨碎補的石油醚提取物中分離得到了6種三萜類化合物：羊齒-9（11）-烯、環(huán)勞頓醇、里白烯、何帕-21-烯、里白醇和環(huán)勞頓醛。Liang等[11]也從骨碎補中分離得到了6種三萜類化合物，分別為東北貫眾醇乙酸酯、東北貫眾醇、何帕-22（29）－烯和 Chiratone，其中 Chiratone是一種罕見的、新穎的三萜類化合物，它對海拉癌細(xì)胞株、人前列腺癌細(xì)胞系和人肝癌細(xì)胞株有著明顯的細(xì)胞毒素活性。

1.3 苯丙素類化合物 王新巒等[12]從骨碎補的60%乙醇提取物-大孔吸附樹脂-30%乙醇洗脫物中分離得到了7個苯丙素類化合物，分別為（E）－4-O-β-D-吡喃葡萄糖基反式咖啡酸、反式咖啡酸、二氫異阿魏酸、二氫咖啡酸、（E）－p-松針?biāo)?β-D-吡喃葡萄糖苷、阿魏酸-β-D-吡喃葡萄糖苷和p-香豆酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。尚振蘋等[13]從骨碎補的乙酸乙酯萃取層分離得到了4個苯丙酸類化合物，為4-O-β-D-吡喃葡萄糖基香豆酸、咖啡酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、對羥基反式肉桂酸和反式桂皮酸，后兩者為首次從槲蕨屬植物中分離得到。Wang XL等[5]從骨碎補中分離得到了一種新的苯丙素類化合物為12-O-caffeoyl-12-hydroxyldodecanoic acid。

1.4 其他成分 通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，從骨碎補中分離得到并鑒定了29種揮發(fā)油成分，其類型主要有直鏈烷烴、烯烴、酸醛酮及萜類等。王新巒等[7，12]從骨碎補的60%乙醇提取物-大孔吸附樹脂-30%乙醇洗脫物中分離得到了2個苯甲酸類化合物為原兒茶酸和香草酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，從50%乙醇洗脫物中分離得到了3-乙酰胺基-4-羥基苯甲酸和5-乙氧基-2-羥基苯甲酸乙酯，后3者都為首次從該屬植物中分離得到。此外，還從骨碎補石油醚提取物中分離得到了一些脂溶性成分，如三十二烷酸、環(huán)麻根醇、25-烯-環(huán)阿爾廷醇、25-烯-環(huán)阿爾廷酮、24-烯-環(huán)阿爾廷醇、24-烯-環(huán)阿爾廷醇、5-豆甾烯-3-醇和5-豆甾烯-3-酮等及首次從槲蕨屬中分離得到的5-羥甲基糠醛和蔗糖[10，13]。

表1 已分離鑒定的黃酮類化合物

2 藥理作用

2.1 保護腎臟和強健筋骨

2.1.1 保腎 蔣文功等[14]通過實驗發(fā)現(xiàn)骨碎補中的類黃酮提取物注射到由氯化汞（HgCl2）誘導(dǎo)的急性腎衰竭動物模型中后，不僅使急性腎功能衰竭大鼠的血肌酐明顯下降，而且使大鼠發(fā)生腎小管急性局部壞死及完全壞死的百分比也明顯下降，表明骨碎補類黃酮對HgCl2誘導(dǎo)的腎組織損傷有保護作用。Long等[15]也通過對幾種急性腎衰竭動物模型進行生物活性測定，其結(jié)果表明骨碎補類黃酮提取物可以預(yù)防中毒性腎損害，改善腎功能，促進主要的上皮腎小管細(xì)胞再生，從而起到保護腎的作用。同時骨碎補類黃酮提取液可通過清除腎組織中的活性氧化產(chǎn)物，對大鼠系膜增殖性腎小球腎炎起到抑制作用[16]。此外，骨碎補總黃酮對由大腸桿菌脂多糖誘導(dǎo)的急性腎功能衰竭也具有防治作用[17]。

2.1.2 抗骨質(zhì)疏松 謝雁鳴等[18]通過去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松模型，研究了骨碎補總黃酮不同劑量組對成骨細(xì)胞體外培養(yǎng)的作用機制，在實驗中發(fā)現(xiàn)骨碎補總黃酮對成骨細(xì)胞分化和增殖均有促進作用，高劑量組明顯增加細(xì)胞的分化和增殖，并且隨時間延長，其作用效果越大。但其劑量相關(guān)效應(yīng)不如堿性磷酸酶（ALP）明顯。劉金文等[19]采用大鼠長骨骨髓體外培養(yǎng)的方法，通過檢測抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）陽性細(xì)胞生成數(shù)，發(fā)現(xiàn)骨碎補可抑制骨髓體外培養(yǎng)中破骨樣細(xì)胞的生長，主要抑制破骨母細(xì)胞向多核破骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化,但與濃度有關(guān)。

同時，骨碎補總黃酮具有提高動物血鈣水平，增加大鼠骨密度的作用[20]。劉劍剛等[21]利用維甲酸造成大鼠實驗性骨質(zhì)疏松癥模型，觀察骨碎補總黃酮對大鼠骨密度的影響，結(jié)果表明骨碎補總黃酮能提高大鼠的骨密度含量，提高大鼠的血鈣濃度。

2.1.3 護牙健齒 胡其勇[22]以人牙周組織細(xì)胞為模型，通過四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT法）檢測細(xì)胞增殖，堿性磷酸酶活性測定細(xì)胞分化，觀察了含不同濃度骨碎補柚皮苷的細(xì)胞培養(yǎng)液對人牙周組織細(xì)胞增殖、分化作用的影響，結(jié)果表明骨碎補柚皮苷能促進人牙周組織細(xì)胞增殖與分化，提示它可能促進牙周組織的修復(fù)再生。

2.2 抗炎 龔曉健等[23]利用兔和大鼠造成膝關(guān)節(jié)炎模型，通過實驗發(fā)現(xiàn)骨碎補總黃酮能減輕軟骨病變，顯著降低Mankin法軟骨積分。病理檢測結(jié)果表明骨碎補總黃酮組形態(tài)明顯優(yōu)于模型對照組。掃描電鏡觀察到骨碎補總黃酮組大鼠軟骨表面光滑，似覆蓋一層無定形物質(zhì)，較模型對照組有明顯的改善。從而得出骨碎補總黃酮具有較強的抗膝骨關(guān)節(jié)炎作用。

骨碎補中的總黃酮除了對膝骨節(jié)的炎癥有一定的抑制作用外，對其他的炎癥也有一定的效果。劉劍剛等[24]采用二甲苯所致小鼠耳廓腫脹實驗、醋酸所致小鼠毛細(xì)血管滲透實驗及大鼠蛋清足跖腫脹實驗、大鼠棉球肉芽腫增生實驗來研究骨碎補總黃酮的抗炎作用，結(jié)果表明其對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有一定的抑制作用，和對照組比較有明顯差異；對醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管擴張和滲透性增高有拮抗作用，大劑量組和對照組比較有明顯差異；對蛋清造成大鼠足跖腫脹、棉球誘發(fā)的肉芽腫有抑制作用，和對照組比較有顯著差異。從而得出總黃酮具有抗炎作用，并能抑制毛細(xì)血管滲透性的增高。

2.3 預(yù)防氨基苷類抗生素的不良反應(yīng) 卡那霉素、鏈霉素和慶大霉素是臨床上常用的氨基苷類抗生素，但因具有耳毒性而使其應(yīng)用受到限制。當(dāng)大劑量注射鏈霉素時會引起內(nèi)耳淋巴中藥物的積蓄，導(dǎo)致內(nèi)耳毛細(xì)胞損害?？敲顾?、鏈霉素和慶大霉素對腎和耳都有毒性，從耳蝸形態(tài)及耳蝸電生理角度證明骨碎補對卡那霉素引起的耳聾及腎損害有一定的預(yù)防作用。通過實驗證明了骨碎補對鏈霉素所致耳蝸聽毛細(xì)胞損傷有一定的防治作用。Long等[25]通過動物實驗得出骨碎補類黃酮提取物對抑制內(nèi)耳毛細(xì)胞的缺失有顯著的保護作用并能促進受損毛細(xì)胞的修復(fù)，被證明了在預(yù)防慶大霉素的耳毒性中毒中起到很大的作用。

2.4 降血脂及防止主動脈粥樣硬化斑塊形成 骨碎補不僅可以預(yù)防造型動物血清膽固醇增高，而且對血清膽固醇已增高的動物也有一定的降低作用。另外也可預(yù)防血清甘油三酯的升高，對家兔高甘油三酯血癥有明顯的治療作用，但要在連續(xù)用藥5~10周后，才能出現(xiàn)明顯的效果，故用藥時間應(yīng)稍長些。

骨碎補在防止主動脈粥樣硬化斑塊形成方面作用亦是顯著的。全部造型組動物的主動脈均有斑塊形成，病變亦很嚴(yán)重，有的幾乎遍及整個主動脈；而預(yù)防組及治療組則顯著減少，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理差異有意義，提示了骨碎補具有明顯的防止斑塊形成的作用。

2.5 其他藥理作用 骨碎補還具有活血化瘀[21]、免疫抑制、抗氧化、抗過敏作用等[26-27]。

3 結(jié)語

骨碎補作為常用中藥，其資源豐富，在中國有悠久的應(yīng)用歷史?，F(xiàn)代研究表明，骨碎補的化學(xué)成分復(fù)雜，目前已分離并鑒定的黃酮類化合物、三萜類、苯丙素類等就多達(dá)100多種。對于這些成分的功效，只有少數(shù)已知，絕大部分尚不明確，只知柚皮苷是骨碎補中的有效成分，但還不能確定是惟一的有效成分。近年來國內(nèi)外對骨碎補中總黃酮的藥理作用研究較多，但對其具體的某類化學(xué)成分的藥理作用研究尚不夠深入。因此，建議更透徹的去研究某類黃酮物質(zhì)的藥理作用，找出骨碎補中除了柚皮苷外，其他的有效成分，為以后科學(xué)的應(yīng)用中藥，開發(fā)新藥提供新的依據(jù)。

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