• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    響應(yīng)面優(yōu)化微波輔助乙醇提取蜂膠黃酮工藝優(yōu)化

    2012-06-01 10:59:46趙巖巖陳曉平
    食品科學(xué) 2012年18期
    關(guān)鍵詞:中總蜂膠黃酮

    李 帥,趙巖巖,陳曉平

    響應(yīng)面優(yōu)化微波輔助乙醇提取蜂膠黃酮工藝優(yōu)化

    李 帥,趙巖巖,陳曉平*

    (吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,吉林 長(zhǎng)春 130118)

    對(duì)蜂膠中黃酮類(lèi)化合物提取工藝條件進(jìn)行優(yōu)化。采用單因素試驗(yàn)分析微波時(shí)間、微波功率、乙醇體積分?jǐn)?shù)、浸提溫度、浸提時(shí)間、液料比6個(gè)因素對(duì)總黃酮得率影響,根據(jù)中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,采用四因素三水平響應(yīng)面分析法進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn),并對(duì)各個(gè)因素的顯著性和交互作用進(jìn)行分析。結(jié)果表明,最優(yōu)工藝條件為微波時(shí)間70s、微波功率282W、乙醇體積分?jǐn)?shù)80%、提取溫度77℃、浸提時(shí)間12h、液料比25∶1(mL/g),在此條件下,蜂膠總黃酮得率為25.08%。

    蜂膠;總黃酮;提取;響應(yīng)面分析法

    蜂膠是蜜蜂從植物樹(shù)芽、花苞和樹(shù)干處采集的樹(shù)膠,并混入蜜蜂上顎腺分泌物和蜂蠟等加工而成的一種具有芳香氣味的膠狀固體物[1]。蜂膠有“黃酮化合物寶庫(kù)”之稱(chēng),其主要活性成分包括黃酮類(lèi)、萜烯類(lèi)、有機(jī)酸、芳香醛、酯類(lèi)及多種氨基酸、酶、維生素、礦物質(zhì)等[2-4]。具有抗真菌,抗病毒和抗腫瘤特性[5]。本實(shí)驗(yàn)采用微波法對(duì)蜂膠中總黃酮進(jìn)行提取并測(cè)定提取液中總黃酮含量,在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,利用響應(yīng)面分析法優(yōu)化微波法提取蜂膠中總黃酮的工藝條件。旨在為蜂膠黃酮的開(kāi)發(fā)利用提供進(jìn)一步的參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料、試劑與儀器

    粗蜂膠 吉林市毛氏蜜蜂養(yǎng)殖廠(chǎng)。

    蘆丁(AR) 天津天一方科技有限公司;無(wú)水乙醇(AR) 北京化工廠(chǎng);硝酸鋁 中國(guó)上海新星精細(xì)化工廠(chǎng);氫氧化鈉 天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司;亞硝酸鈉 萊陽(yáng)化工實(shí)驗(yàn)廠(chǎng);其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

    DHG-9146A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;電子恒溫水浴鍋 天津泰斯特儀器有限公司;LG-10-2.4A高速離心機(jī) 北京醫(yī)用離心機(jī)廠(chǎng);A-20組織粉碎機(jī) 金壇市科析儀器有限公司;標(biāo)準(zhǔn)篩(60目) 浙江上虞市道墟儀器篩具廠(chǎng)。

    1.2 方法

    1.2.1 樣品處理

    粗蜂膠置于-20℃冷凍5h,粉碎過(guò)60目篩,石油醚回流提取3h脫蠟[6-7]。

    1.2.2 總黃酮提取的工藝流程

    將預(yù)處理后的蜂膠進(jìn)行微波處理,微波一段時(shí)間后用乙醇浸泡一定時(shí)間,提取液離心取上清液用乙醇定容至25mL,得蜂膠黃酮樣品溶液[8-9]。

    1.2.3 黃酮的測(cè)定與計(jì)算[10]

    1.2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作

    配制一定濃度的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液,測(cè)定波長(zhǎng)510nm處吸光度,以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),得回歸方程:A=0.014C+0.0024,相關(guān)系數(shù)R2=0.9996,說(shuō)明蜂膠中總黃酮在所提取的質(zhì)量濃度范圍內(nèi),其質(zhì)量濃度和吸光度成良好的線(xiàn)性關(guān)系。

    1.2.3.2 總黃酮含量的測(cè)定

    吸取0.1mL提取液于10mL容量瓶中,按蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制方法配制溶液,以空白試劑為參比液調(diào)零,測(cè)其吸光度記為A,測(cè)3次取平均值,代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得提取液質(zhì)量濃度C/(μg/mL),按下式計(jì)算蜂膠中黃酮得率(X)。

    式中:C為樣液質(zhì)量濃度/(μg/mL);V0為定容后的體積/mL;V1為樣液體積/mL;V2為稀釋體積/mL;m為稱(chēng)取蜂膠質(zhì)量/g。

    1.2.3.3 單因素試驗(yàn)

    在試驗(yàn)條件:液料比20∶1(mL/g)、乙醇體積分?jǐn)?shù)60%、提取時(shí)間4h、提取溫度40℃、微波功率240W、微波時(shí)間60s不變的情況下,進(jìn)行單因素試驗(yàn),參考各因素對(duì)蜂膠總黃酮得率的影響。

    1.2.3.4 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)[11-13]

    在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,利用響應(yīng)面分析法優(yōu)化微波輔助乙醇提取蜂膠黃酮工藝條件。綜合單因素試驗(yàn)結(jié)果,選取微波時(shí)間、微波功率、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度4個(gè)因素,利用Design-Expert 7.0軟件設(shè)計(jì)進(jìn)行多元回歸分析[14-15]。試驗(yàn)方案及結(jié)果見(jiàn)表1。

    表1 微波輔助乙醇提取蜂膠黃酮工藝優(yōu)化響應(yīng)面試驗(yàn)因素水平表Table 1 Factors and their coded levels tested in response surface analysis

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單因素試驗(yàn)

    2.1.1 微波時(shí)間對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響

    圖1 微波時(shí)間對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響Fig.1 Effect of microwave treatment time on extraction rate of flavonoids

    由圖1可知,隨著微波時(shí)間的延長(zhǎng),蜂膠中總黃酮得率先增加后減少。在60s達(dá)到最大,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),蜂膠中總黃酮的得率逐漸減少。這可能是因?yàn)檫^(guò)長(zhǎng)的微波時(shí)間會(huì)導(dǎo)致蜂膠膠質(zhì)的變化。

    2.1.2 微波功率對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響

    圖2 微波功率對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響Fig.2 Effect of microwave power on extraction rate of flavonoids

    由圖2可知,微波功率對(duì)得率影響較大,隨著微波功率的增加,蜂膠中總黃酮得率先增加后減少,當(dāng)微波功率達(dá)到240W時(shí)蜂膠中總黃酮得率達(dá)到最大值,隨后微波功率增加總黃酮得率開(kāi)始減少,這可能是因?yàn)樵谳^大的微波功率下部分黃酮被分解的原因。

    2.1.3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響

    圖3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響Fig.3 Effect of alcohol concentration on extraction rate of flavonoids

    由圖3可知,隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加,蜂膠總黃酮得率逐漸增加。這可能是因?yàn)殡S著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大,一些醇溶性雜質(zhì)、色素等的浸出量也有所增加,從而影響了總黃酮得率。

    2.1.4 乙醇提取溫度對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響

    圖6 液料比對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響Fig.6 Effect of solvent-to-solid on extraction rate of flavonoids

    圖4 提取溫度對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響Fig.4 Effect of extraction temperature on extraction rate of flavonoids

    由圖4可知,隨著提取溫度的增加蜂膠總黃酮提取率逐漸增加。這可能是因?yàn)殡S著溫度的升高,分子運(yùn)動(dòng)速度加快,滲透和擴(kuò)散作用加強(qiáng),使蜂膠中總黃酮更易于溶出。

    2.1.5 提取時(shí)間對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響

    圖5 乙醇提取時(shí)間對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響Fig.5 Effect of extraction time of on extraction rate of flavonoids

    由圖5可以看出,隨著乙醇提取時(shí)間的增加,蜂膠總黃酮得率逐漸升高,這可能是因?yàn)樘崛r(shí)間越長(zhǎng)蜂膠黃酮的溶出量越大。確定最佳提取時(shí)間為12h。

    2.1.6 液料比對(duì)蜂膠中總黃酮得率的影響

    由圖6可以看出,隨著液料比的增加,蜂膠中總黃酮得率有所增加,但增加并不明顯,再增加液料比蜂膠中總黃酮得率趨于穩(wěn)定。可以看出液料比為25∶1時(shí)蜂膠中總黃酮已基本溶出。由于過(guò)大的液料比會(huì)造成溶劑和能源的浪費(fèi),從浸提效果和經(jīng)濟(jì)兩方面綜合考慮,確定最佳料液比為25∶1(mL/g)。

    2.2 響應(yīng)面法優(yōu)化蜂膠中總黃酮提取工藝參數(shù)

    2.2.1 回歸方程的建立與分析

    本試驗(yàn)共有29個(gè)試驗(yàn)點(diǎn),其中1~24號(hào)為析因試驗(yàn),25~29號(hào)為中心試驗(yàn),用來(lái)估計(jì)試驗(yàn)誤差。試驗(yàn)方案及結(jié)果見(jiàn)表2。利用Design-Expert 7.0軟件對(duì)表2結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,可建立如下二次回歸方程:

    表2 微波輔助乙醇提取蜂膠黃酮工藝優(yōu)化響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2 Experimental design and results for response surface analysis

    其中二次多項(xiàng)式的相關(guān)系數(shù)R2=95.12%、=90.23%、=71.87%。與值在一致性上是合理的。所以此模型能被用來(lái)指導(dǎo)設(shè)計(jì)響應(yīng)面。

    表3 響應(yīng)面試驗(yàn)方差分析Table 3 Variance analysis for the developed regression model

    對(duì)二次回歸方程進(jìn)行方差分析,結(jié)果見(jiàn)表3。從表3可知,回歸模型達(dá)到極顯著水平(P<0.01),而誤差項(xiàng)不顯著,說(shuō)明回歸方程與實(shí)際情況吻合得較好,試驗(yàn)誤差小。因此可用該回歸方程代替試驗(yàn)真實(shí)點(diǎn)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析?;貧w系數(shù)R2=0.9512>0.9,表明該模型相關(guān)度好?;貧w模型各項(xiàng)的方差分析還表明,一次項(xiàng)、二次項(xiàng)、交互項(xiàng)都有較顯著影響,所以響應(yīng)值的變化相當(dāng)復(fù)雜,各個(gè)具體試驗(yàn)因素對(duì)響應(yīng)值的影響不是簡(jiǎn)單的線(xiàn)性關(guān)系,而是呈二次拋物面關(guān)系。回歸模型中作用顯著項(xiàng)是X1、X2、X3、X4、X1X2、X1X3、X2X4、X12、X22、X32、X42。從各變量顯著性檢驗(yàn)P值的大小,可以看出影響蜂膠黃酮提取效果的各因素按大小排序依次為提取溫度>微波時(shí)間>微波功率>乙醇體積分?jǐn)?shù)。

    2.2.2 響應(yīng)面及等高線(xiàn)分析結(jié)果

    為了考察交互項(xiàng)對(duì)蜂膠中黃酮效果的影響,在兩個(gè)因素條件固定不變的情況下,考察交互項(xiàng)對(duì)蜂膠中黃酮提取效果的影響,對(duì)模型進(jìn)行降維分析。經(jīng)響應(yīng)面7.0軟件分析,所得響應(yīng)面及其等高線(xiàn)見(jiàn)圖7。由圖7可知,兩因素交互作用由大到小為:微波時(shí)間和微波功率>乙醇體積分?jǐn)?shù)和提取溫度>微波時(shí)間和乙醇體積分?jǐn)?shù)>微波時(shí)間和提取溫度。

    圖7 各兩因素交互作用對(duì)蜂膠總黃酮得率影響的響應(yīng)面及等高線(xiàn)圖Fig.7 Response surface and contour plots for the effects of four process parameters on extraction rate of flavonoids

    2.2.3 浸提法提取蜂膠黃酮工藝的優(yōu)化與驗(yàn)證結(jié)果

    為進(jìn)一步確定工藝最佳點(diǎn),用Design-Expert 7.0軟件進(jìn)行數(shù)值優(yōu)化分析,以獲得最優(yōu)的浸提條件。經(jīng)分析,最適條件值分別為微波時(shí)間69.19s、微波功率282.33W、乙醇體積分?jǐn)?shù)79.87%、提取溫度77.06℃,在此條件下蜂膠中黃酮得率為25.41%??紤]到實(shí)際工作的便利,將浸提工藝修正為微波時(shí)間70s、微波功率282W、乙醇體積分?jǐn)?shù)80%、提取溫度77℃。采用修正后的工藝參數(shù)進(jìn)行3次平行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),試驗(yàn)結(jié)果測(cè)得蜂膠黃酮提取率25.08%,與模型預(yù)測(cè)值相差不大。證明該模型具有一定的可靠性。

    3 結(jié) 論

    采用浸提技術(shù)對(duì)蜂膠中總黃酮進(jìn)行提取,通過(guò)單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面分析對(duì)浸提工藝進(jìn)行優(yōu)化,對(duì)微波時(shí)間、微波功率、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度進(jìn)行方差分析。結(jié)果表明微波時(shí)間、微波功率、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度對(duì)蜂膠黃酮得率有顯著影響。模型擬合程度高,試驗(yàn)誤差小。

    利用響應(yīng)面方法結(jié)合實(shí)際可操作性得出最佳工藝條件為微波時(shí)間70s、微波功率282W、乙醇體積分?jǐn)?shù)80%、提取溫度77℃,該條件下的蜂膠黃酮提取率為25.08%,與模型預(yù)測(cè)值25.41%相差較小,表明將響應(yīng)面設(shè)計(jì)引用到蜂膠黃酮提取工藝中可行,結(jié)果可靠。

    [1]楊兆起, 封秀娥. 中藥鑒別手冊(cè)∶ 第三冊(cè)[M]. 北京∶ 科學(xué)出版社, 1994∶102.

    [2]張?jiān)丛? 崔同. 總黃酮含量分析法快速評(píng)價(jià)蜂膠原料質(zhì)量[J]. 中國(guó)食品學(xué)報(bào), 2002, 2(3)∶ 46-48.

    [3]MELLO B C B S, PETRUS J C C, HUBINGER M D. Concentration of flavonoids and phenolic compounds in aqueous and ethanolic propolis extracts through nanofiltration[J]. Journal of Food Engineering, 2000, 96(4)∶ 533-539.

    [4]王貽節(jié). 蜜蜂產(chǎn)品學(xué)[M]. 北京∶ 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社, 1995∶ 83-89.

    [5]BLONSKA M, BRONIKOWSKA J, PIETSZ G, et al. Effects of ethanol extract of propolis (EEP) and its flavones on inducible gene expression in J774A.1 macrophages[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2004, 91(1)∶25-30.

    [6]程偉賢, 陳鴻雁, 張義平, 等. 蜂膠中黃酮成分及提取方法研究[J].云南大學(xué)學(xué)報(bào), 2006, 28(增刊1)∶ 245-147.

    [7]CHEN Chaorui, LEE Y N, CHANG C M J, et al. Hot-pressurized fluid extraction of flavonoids and phenolic acids from Brazilian propolis and their cytotoxic assay in vitro[J]. Journal of the Chinese Institute of Chemical Engineers, 2007, 38(3/4)∶ 191-196.

    [8]劉元法, 王興國(guó), 金青哲. 超聲波技術(shù)提取蜂膠黃酮類(lèi)功能性物質(zhì)的研究[J]. 食品科學(xué), 2004, 25(6)∶ 35-39.

    [9]牟蘭, 王海燕, 曾唏. 貴州蜂膠成分分析(二)[J]. 中國(guó)養(yǎng)蜂, 2001, 52 (2)∶ 12-13.

    [10]王影. 綠豆牙總黃銅的提取工藝研究[J]. 食品與發(fā)酵科技, 2010, 46 (5)∶ 45-48.

    [11]吳東青, 徐新建, 張麗, 等. 響應(yīng)面分析法優(yōu)化竹節(jié)草黃酮提取工藝[J]. 食品科學(xué), 2011, 32(8)∶ 125-128.

    [12]劉洋, 趙謀明, 楊寧. 響應(yīng)面分析法優(yōu)化仙人掌多糖提取工藝的研究[J]. 食品與機(jī)械, 2006, 22(6)∶ 42-45.

    [13]姚狄, 馬平, 王穎, 等. 響應(yīng)面法優(yōu)化玉米芯中木聚糖的提取工藝[J].食品科學(xué), 2011, 32(8)∶ 111-115.

    [14]楊文雄, 高彥祥. 響應(yīng)面法及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用[J]. 中國(guó)食品添加劑, 2005(2)∶ 68-71.

    [15]李亞娜, 林永成, 余志剛. 響應(yīng)面分析法優(yōu)化羊棲菜多糖的提取工藝[J]. 華南理工大學(xué)學(xué)報(bào)∶ 自然科學(xué)版, 2004, 32(11)∶ 29-31.

    Optimization of Microwave-Assisted Extraction of Flavonoids from Propolis by Response Surface Methodology

    LI Shuai,ZHAO Yan-yan,CHEN Xiao-ping*
    (College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China)

    This paper reports the optimization of process conditions for microwave-assisted extraction of flavonoids from propolis using response surface methodology. The effects of six operating parameters including microwave treatment time, microwave power, solvent composition (ethanol concentration), temperature, time and solvent-to-solid on total flavonoid yield were investigated through one-factor-at-a-time experiments. The significance and interaction effects of microwave treatment time, microwave power, ethanol concentration and temperature were analyzed by response surface analysis based on a threelevel central composite design. The optimal microwave-assisted extraction conditions for total flavonoids were determined as follows∶ 70 s microwave treatment at 282 W followed by extraction with 80% ethanol aqueous solution at a solvent-to-solid of 25 mL/g and 77 ℃ for 12 h. Under these conditions, the yield of total flavonoids from propolis was up to 25.08%.

    propolis;flavonoids;extraction;response surface methodology

    TS201.2

    A

    1002-6630(2012)18-0127-06

    2011-07-16

    李帥(1986—),女,碩士研究生,研究方向?yàn)槭称飞锘瘜W(xué)與功能食品。E-mail:huajiyuji1986@163.com

    *通信作者:陳曉平(1963—),男,教授,博士,研究方向?yàn)槭称飞锘瘜W(xué)與功能食品。E-mail:XP63@Tom.com

    猜你喜歡
    中總蜂膠黃酮
    2018版蜂膠國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)解讀
    本期熱點(diǎn)追蹤蜂膠:去偽存真 國(guó)標(biāo)助力
    HPLC法同時(shí)測(cè)定固本補(bǔ)腎口服液中3種黃酮
    中成藥(2017年8期)2017-11-22 03:19:40
    MIPs-HPLC法同時(shí)測(cè)定覆盆子中4種黃酮
    中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:50:13
    天冬中總氨基酸及多糖的提取工藝研究
    DAD-HPLC法同時(shí)測(cè)定龍須藤總黃酮中5種多甲氧基黃酮
    中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:50
    瓜馥木中一種黃酮的NMR表征
    正交試驗(yàn)法優(yōu)化苦豆子總生物堿的超聲提取工藝
    大孔吸附樹(shù)脂分離純化蒲公英中總黃酮的工藝研究
    蜂膠可作為飼料添加劑
    黑人猛操日本美女一级片| 久久久久久久午夜电影 | 夜夜爽天天搞| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 国产黄a三级三级三级人| 天堂√8在线中文| 国产一区二区三区综合在线观看| 一二三四社区在线视频社区8| 亚洲激情在线av| avwww免费| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 欧美午夜高清在线| 亚洲国产看品久久| 久久久久亚洲av毛片大全| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 欧美亚洲日本最大视频资源| 天堂俺去俺来也www色官网| 九色亚洲精品在线播放| 国产精品1区2区在线观看.| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 又黄又粗又硬又大视频| netflix在线观看网站| 中文字幕高清在线视频| 又黄又爽又免费观看的视频| av免费在线观看网站| 一级黄色大片毛片| 啦啦啦在线免费观看视频4| 天堂影院成人在线观看| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 亚洲,欧美精品.| 国产av精品麻豆| 中文字幕人妻熟女乱码| www.熟女人妻精品国产| 91九色精品人成在线观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产高清视频在线播放一区| 精品电影一区二区在线| 97碰自拍视频| 韩国精品一区二区三区| 国产成人欧美| 日韩欧美国产一区二区入口| 1024香蕉在线观看| 成人免费观看视频高清| 18禁美女被吸乳视频| 成人黄色视频免费在线看| 少妇的丰满在线观看| 黑人猛操日本美女一级片| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 精品一区二区三区av网在线观看| 亚洲精品一二三| 亚洲国产精品sss在线观看 | 国产黄a三级三级三级人| 亚洲七黄色美女视频| 成人黄色视频免费在线看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 真人做人爱边吃奶动态| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲精品国产区一区二| 国产高清激情床上av| 亚洲人成77777在线视频| 在线天堂中文资源库| 久久久国产精品麻豆| 露出奶头的视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 黄频高清免费视频| 国产精品 国内视频| 交换朋友夫妻互换小说| a在线观看视频网站| 欧美色视频一区免费| 99热国产这里只有精品6| 国产亚洲欧美98| 免费不卡黄色视频| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 啦啦啦在线免费观看视频4| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲性夜色夜夜综合| 最新在线观看一区二区三区| 9热在线视频观看99| 日韩欧美一区视频在线观看| av超薄肉色丝袜交足视频| www.精华液| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产成年人精品一区二区 | 成人国产一区最新在线观看| 亚洲精品美女久久av网站| 国产三级黄色录像| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产不卡一卡二| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 宅男免费午夜| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 国产精品永久免费网站| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 啦啦啦在线免费观看视频4| 91九色精品人成在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产麻豆69| 一本综合久久免费| 1024香蕉在线观看| 真人一进一出gif抽搐免费| 一级毛片女人18水好多| 亚洲国产精品999在线| 满18在线观看网站| 黄色怎么调成土黄色| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 精品第一国产精品| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 性色av乱码一区二区三区2| 精品日产1卡2卡| 国产精品99久久99久久久不卡| 丰满的人妻完整版| 热99re8久久精品国产| 国产熟女xx| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 男女下面插进去视频免费观看| 午夜久久久在线观看| 亚洲五月色婷婷综合| 国产精品二区激情视频| 女警被强在线播放| 亚洲一区中文字幕在线| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 欧美中文日本在线观看视频| 久久精品91蜜桃| 亚洲精品美女久久av网站| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 欧美人与性动交α欧美软件| 欧美激情 高清一区二区三区| 在线观看日韩欧美| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 免费看十八禁软件| 可以在线观看毛片的网站| 韩国精品一区二区三区| 视频在线观看一区二区三区| 亚洲中文日韩欧美视频| 黄色女人牲交| 久久久国产成人免费| 精品国产国语对白av| 国产不卡一卡二| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲午夜理论影院| 18禁国产床啪视频网站| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 一级毛片高清免费大全| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 在线av久久热| 欧美成人午夜精品| 黄色视频,在线免费观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 大陆偷拍与自拍| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 免费在线观看日本一区| 久久狼人影院| 久久九九热精品免费| 亚洲中文日韩欧美视频| 男女下面进入的视频免费午夜 | 一本大道久久a久久精品| 天天影视国产精品| 国产成人影院久久av| 9色porny在线观看| 最好的美女福利视频网| av网站免费在线观看视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 精品国产亚洲在线| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 欧美成人免费av一区二区三区| av免费在线观看网站| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 精品久久蜜臀av无| 三上悠亚av全集在线观看| 淫秽高清视频在线观看| www.精华液| 日本黄色视频三级网站网址| 成在线人永久免费视频| 午夜成年电影在线免费观看| 超碰97精品在线观看| 视频区欧美日本亚洲| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲熟女毛片儿| 亚洲久久久国产精品| 精品熟女少妇八av免费久了| 香蕉久久夜色| 亚洲视频免费观看视频| 午夜老司机福利片| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 少妇被粗大的猛进出69影院| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲成人国产一区在线观看| 精品一区二区三区四区五区乱码| 国产乱人伦免费视频| 成年人免费黄色播放视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 在线观看www视频免费| 精品久久久久久久毛片微露脸| 老司机福利观看| 老汉色∧v一级毛片| 精品免费久久久久久久清纯| 黄色毛片三级朝国网站| 久久中文看片网| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲专区国产一区二区| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产高清国产精品国产三级| 搡老岳熟女国产| 欧美日韩视频精品一区| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲精品美女久久av网站| 色综合欧美亚洲国产小说| 免费在线观看影片大全网站| 国产精品 国内视频| 一区二区三区国产精品乱码| 岛国视频午夜一区免费看| 性欧美人与动物交配| 久久久久久免费高清国产稀缺| 精品国产乱码久久久久久男人| 两个人看的免费小视频| 亚洲第一av免费看| 成人黄色视频免费在线看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 18禁观看日本| 国产精品久久久人人做人人爽| 咕卡用的链子| 999精品在线视频| 国产一区二区激情短视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产熟女xx| 成人精品一区二区免费| 91字幕亚洲| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 欧美不卡视频在线免费观看 | 国产高清视频在线播放一区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 免费不卡黄色视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 欧美一区二区精品小视频在线| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 啦啦啦 在线观看视频| 后天国语完整版免费观看| 黄片播放在线免费| 麻豆成人av在线观看| a级片在线免费高清观看视频| 国产精品久久视频播放| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 一边摸一边做爽爽视频免费| 日韩欧美免费精品| 国产精品野战在线观看 | 国产1区2区3区精品| 精品国产美女av久久久久小说| 桃色一区二区三区在线观看| 日韩免费av在线播放| 国产精品久久视频播放| a级毛片黄视频| 淫秽高清视频在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 成人亚洲精品av一区二区 | 亚洲精品国产一区二区精华液| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲五月色婷婷综合| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 久久天堂一区二区三区四区| 精品久久久久久成人av| 日本欧美视频一区| 无人区码免费观看不卡| 麻豆久久精品国产亚洲av | 成人av一区二区三区在线看| 青草久久国产| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| av国产精品久久久久影院| 久热这里只有精品99| 在线av久久热| 嫩草影视91久久| 亚洲人成电影观看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 交换朋友夫妻互换小说| 热99国产精品久久久久久7| 国产三级黄色录像| 亚洲精品久久午夜乱码| 丰满的人妻完整版| 男女高潮啪啪啪动态图| 一区福利在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产深夜福利视频在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 12—13女人毛片做爰片一| 1024视频免费在线观看| 曰老女人黄片| 日日干狠狠操夜夜爽| 黑人操中国人逼视频| 在线天堂中文资源库| 亚洲欧美精品综合久久99| 搡老熟女国产l中国老女人| 99热国产这里只有精品6| 国产单亲对白刺激| 夫妻午夜视频| 麻豆久久精品国产亚洲av | 在线播放国产精品三级| 18禁观看日本| 久久亚洲真实| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 日韩免费av在线播放| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 色尼玛亚洲综合影院| 欧美一区二区精品小视频在线| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 色综合欧美亚洲国产小说| 亚洲av五月六月丁香网| www.999成人在线观看| 美女 人体艺术 gogo| 欧美激情久久久久久爽电影 | 亚洲精品美女久久av网站| 中文字幕色久视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 露出奶头的视频| 午夜成年电影在线免费观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 国产精品影院久久| 在线看a的网站| 日本三级黄在线观看| 激情视频va一区二区三区| 成人亚洲精品一区在线观看| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 99香蕉大伊视频| 精品国产乱子伦一区二区三区| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 亚洲精品美女久久av网站| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产亚洲欧美在线一区二区| 精品久久久久久成人av| 精品电影一区二区在线| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 色播在线永久视频| 日本 av在线| 在线观看免费午夜福利视频| 老司机亚洲免费影院| 深夜精品福利| 精品久久蜜臀av无| 午夜视频精品福利| 最近最新中文字幕大全免费视频| 欧美大码av| 亚洲自拍偷在线| 香蕉丝袜av| 亚洲精品久久午夜乱码| 免费少妇av软件| 久久性视频一级片| 99久久99久久久精品蜜桃| 男女下面进入的视频免费午夜 | 伦理电影免费视频| 欧美日韩亚洲高清精品| 黄色视频,在线免费观看| 久久久国产一区二区| 悠悠久久av| 午夜福利在线免费观看网站| √禁漫天堂资源中文www| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 午夜福利免费观看在线| 多毛熟女@视频| 999久久久精品免费观看国产| 视频区欧美日本亚洲| 男女高潮啪啪啪动态图| av中文乱码字幕在线| 91国产中文字幕| 热re99久久精品国产66热6| 一区二区三区精品91| 国产视频一区二区在线看| 又大又爽又粗| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 欧美日韩黄片免| 欧美色视频一区免费| 999精品在线视频| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 成人国语在线视频| av欧美777| svipshipincom国产片| 精品人妻在线不人妻| 国产av一区在线观看免费| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲av熟女| 欧美日韩精品网址| 超色免费av| 日本黄色视频三级网站网址| 欧美日韩福利视频一区二区| 亚洲精品在线观看二区| 99久久综合精品五月天人人| avwww免费| 伦理电影免费视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 色综合婷婷激情| av在线天堂中文字幕 | av有码第一页| 午夜福利影视在线免费观看| 免费搜索国产男女视频| 亚洲三区欧美一区| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | www.自偷自拍.com| 久久草成人影院| 久久亚洲精品不卡| 人人澡人人妻人| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 成人精品一区二区免费| 天堂中文最新版在线下载| 日韩精品中文字幕看吧| 在线观看午夜福利视频| 少妇粗大呻吟视频| 女人精品久久久久毛片| 国产又色又爽无遮挡免费看| 久久人妻av系列| 国产一区二区三区综合在线观看| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 午夜亚洲福利在线播放| 又紧又爽又黄一区二区| av福利片在线| 村上凉子中文字幕在线| 午夜成年电影在线免费观看| 99国产精品免费福利视频| 一区二区三区国产精品乱码| 丰满饥渴人妻一区二区三| 亚洲五月天丁香| 动漫黄色视频在线观看| 精品国产一区二区久久| 啦啦啦免费观看视频1| 成人18禁在线播放| 日本黄色日本黄色录像| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲精华国产精华精| 久久精品91蜜桃| 国产极品粉嫩免费观看在线| 午夜视频精品福利| 狂野欧美激情性xxxx| 国产免费av片在线观看野外av| 精品一区二区三区av网在线观看| videosex国产| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 看免费av毛片| 国产精品av久久久久免费| 手机成人av网站| 国产精品成人在线| 精品人妻1区二区| 亚洲avbb在线观看| 99国产精品免费福利视频| 亚洲av片天天在线观看| av网站免费在线观看视频| 啦啦啦 在线观看视频| 日日夜夜操网爽| 香蕉丝袜av| 国产精品免费视频内射| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲自拍偷在线| 免费av中文字幕在线| 国产精品二区激情视频| 国产亚洲精品一区二区www| av网站免费在线观看视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | av国产精品久久久久影院| 叶爱在线成人免费视频播放| 一级黄色大片毛片| 人人妻人人澡人人看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 搡老乐熟女国产| 99在线人妻在线中文字幕| 咕卡用的链子| 免费看十八禁软件| 97碰自拍视频| 日韩欧美在线二视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 久久精品国产综合久久久| 久久久久久久久久久久大奶| 欧美一区二区精品小视频在线| www国产在线视频色| 亚洲成人国产一区在线观看| netflix在线观看网站| av网站免费在线观看视频| 麻豆久久精品国产亚洲av | 久久天堂一区二区三区四区| 真人做人爱边吃奶动态| 免费搜索国产男女视频| 欧美一区二区精品小视频在线| 中文字幕色久视频| 88av欧美| 一本大道久久a久久精品| 十八禁人妻一区二区| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 久久久国产一区二区| 一二三四社区在线视频社区8| 国产伦一二天堂av在线观看| 午夜免费激情av| 婷婷精品国产亚洲av在线| 夫妻午夜视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 怎么达到女性高潮| 51午夜福利影视在线观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 美女 人体艺术 gogo| 欧美黑人精品巨大| 窝窝影院91人妻| 满18在线观看网站| 12—13女人毛片做爰片一| 99久久综合精品五月天人人| 91精品三级在线观看| 国产免费男女视频| 午夜精品在线福利| 国产在线观看jvid| 怎么达到女性高潮| 满18在线观看网站| 老熟妇仑乱视频hdxx| 狂野欧美激情性xxxx| 国产精品二区激情视频| 欧美国产精品va在线观看不卡| 中文欧美无线码| 欧美av亚洲av综合av国产av| 精品久久久久久久久久免费视频 | 国产精品野战在线观看 | 亚洲国产欧美日韩在线播放| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 久久精品影院6| 老司机亚洲免费影院| 99在线视频只有这里精品首页| 日本欧美视频一区| 日日夜夜操网爽| 交换朋友夫妻互换小说| 男人舔女人的私密视频| 男女高潮啪啪啪动态图| 黑丝袜美女国产一区| 国产精品亚洲一级av第二区| 三级毛片av免费| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲中文日韩欧美视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 男女午夜视频在线观看| 亚洲在线自拍视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 欧美中文综合在线视频| 精品久久久久久久毛片微露脸| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 夜夜夜夜夜久久久久| 欧美黑人欧美精品刺激| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 老司机亚洲免费影院| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| avwww免费| 在线国产一区二区在线| 超色免费av| 亚洲国产精品999在线| 久久青草综合色| 国产成人精品无人区| 亚洲 国产 在线| 色尼玛亚洲综合影院| 成在线人永久免费视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 一本综合久久免费| 成人黄色视频免费在线看| 午夜a级毛片| 国产成人精品久久二区二区免费| 又大又爽又粗| 国产在线观看jvid| 免费一级毛片在线播放高清视频 | av天堂久久9| 叶爱在线成人免费视频播放| 身体一侧抽搐| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| videosex国产| 亚洲中文字幕日韩| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产精品九九99| 国产精品国产高清国产av| 精品国产一区二区久久| 在线免费观看的www视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 午夜老司机福利片| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲一区中文字幕在线| 很黄的视频免费| 亚洲男人天堂网一区| a级毛片黄视频| x7x7x7水蜜桃| 欧美黑人欧美精品刺激| 曰老女人黄片| 夜夜夜夜夜久久久久| 99在线人妻在线中文字幕| 黄色成人免费大全| 99久久精品国产亚洲精品| 免费高清视频大片| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产精品二区激情视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 99久久精品国产亚洲精品| 国产一区二区三区综合在线观看| 一级a爱视频在线免费观看| 女人被狂操c到高潮| 19禁男女啪啪无遮挡网站|