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    甘藍(lán)型油菜與菘藍(lán)原生質(zhì)體融合及植株再生體系的研究

    2012-04-29 08:25:47杜雪竹李再云
    湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2012年11期

    杜雪竹 李再云

    摘要:以甘藍(lán)型油菜(Brassica napus)和菘藍(lán)(Isatis tinctoria)葉片為材料提取原生質(zhì)體,采用PEG—高鈣高pH法融合親本原生質(zhì)體,采用固液雙層培養(yǎng)法誘導(dǎo)愈傷組織的形成。研究適宜原生質(zhì)體分離的酶種類及濃度,并考察了激素種類和用量對愈傷組織誘導(dǎo)和分化的影響。結(jié)果表明,5 mg/L纖維素酶+3 mg/L離析酶適合甘藍(lán)型油菜和菘藍(lán)的酶解。各培養(yǎng)基中適宜的激素濃度分別為,誘導(dǎo)培養(yǎng)基PellB 1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.25 mg/L 2,4-D;增殖培養(yǎng)基PellC 2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L 2,4-D;分化培養(yǎng)基PellE 2.0 mg/L 6-BA +0.1 mg/L NAA+0.02 mg/L 2,4-D。獲得了15株再生植株,雜種幼苗葉片均呈深綠色,葉表面覆有厚的蠟質(zhì),葉片肥厚,植株在成熟期時(shí)株高比甘藍(lán)型油菜矮,開花較晚,雄蕊發(fā)育不完全,雜種體細(xì)胞染色體數(shù)目為48~66。

    關(guān)鍵詞:甘藍(lán)型油菜(Brassica napus);菘藍(lán)(Isatis tinctoria);原生質(zhì)體融合;植株再生

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