uPA／PAI－1在乳腺癌中的表達(dá)及其臨床意義的研究進(jìn)展

董 歡（綜述） 林燕蘋(píng) 應(yīng)學(xué)翔 何萍青（審校）

（上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院普外科 上海 200233）

目前，乳腺癌的發(fā)病率不斷升高，已經(jīng)成為女性中最高發(fā)的惡性腫瘤之一，在過(guò)去的幾十年內(nèi)系統(tǒng)性治療已使乳腺癌的死亡率大大降低，主要的致死原因是腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。腫瘤的轉(zhuǎn)移是一個(gè)多步驟參與的復(fù)雜過(guò)程，包括了腫瘤的局部浸潤(rùn)、降解細(xì)胞外間質(zhì)（extracellular matrix，ECM）、進(jìn)入血液循環(huán)及在新的部位種植生存。傳統(tǒng)的預(yù)后指標(biāo)如年齡、月經(jīng)狀態(tài)、腫瘤大小、病理組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)狀態(tài)、激素受體情況和人表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER－2）狀態(tài)等并不能完全反映出宿主、腫瘤及環(huán)境的所有信息，由此來(lái)評(píng)價(jià)預(yù)后及制定治療方案可能有偏頗。因此，與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)的一些指標(biāo)在不斷研究發(fā)展中，其中最主要的成員之一是尿激酶型纖溶酶原反應(yīng)系統(tǒng)，這一系統(tǒng)包括了尿激酶型纖溶酶原激活物（urokinase－type plasminogen，uPA）及其受體（uPA receptor，uPAR）與纖溶酶原激活物抑制因子－1（plasminogen inhibitor 1，PAI－1）。隨著乳腺癌早期診斷水平的提高，淋巴結(jié)陰性患者的比例增高，這一反映乳腺癌侵襲指標(biāo)的纖溶酶原反應(yīng)系統(tǒng)的預(yù)后價(jià)值越來(lái)越凸顯，本文對(duì)uPA／PAI－1在乳腺癌中的表達(dá)及其臨床意義作一綜述。

uPA在乳腺癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中的作用uPA是一種絲氨酸組蛋白酶，在正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞均有表達(dá)，其最初的分泌形式為一種無(wú)酶活性的單鏈酶原，即纖溶酶原激活物前體（pro－uPA），pro－uPA通過(guò)纖溶酶的裂解作用成為活性形式uPA。uPA能夠?qū)⒗w溶酶原轉(zhuǎn)化為有源矩陣絲氨酸組蛋白纖溶酶［1］，并通過(guò)蛋白水解作用降解腫瘤組織周圍多種上皮膜蛋白及基底膜成分；它同時(shí)也能活化多種生長(zhǎng)因子，并促使上皮膜蛋白降解基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMP）。在腫瘤進(jìn)展過(guò)程中，uPA、uPAR、PAl－1及 MMP相互作用，從而使得腫瘤細(xì)胞易于浸潤(rùn)組織［1－2］。uPA和 MMP受到一系列的生長(zhǎng)因子的調(diào)控，特別是表皮生長(zhǎng)因子及其受體。研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)物（extracellular MMP inducer，EMMPRIN）是一種高度甲基化的免疫球蛋白家族成員，存在于腫瘤細(xì)胞及其間質(zhì)的細(xì)胞膜表面，與惡性腫瘤進(jìn)展相關(guān)［3］。Giusti等［4］的研究發(fā)現(xiàn)，一種表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）的配體可以通過(guò)促進(jìn)產(chǎn)生uPA而引起腫瘤細(xì)胞擴(kuò)增。研究也顯示，多種實(shí)體瘤中都常見(jiàn)表皮生長(zhǎng)因子受體信號(hào)通路激活，伴隨表皮生長(zhǎng)因子受體增加，EMMPRIN在乳腺癌中的表達(dá)也明顯增加［5］?？赡苷峭ㄟ^(guò)上調(diào)EMMPRIN在乳腺癌中的表達(dá)，EGFR增加了uPA和MMP的表達(dá)，從而使得腫瘤易于浸潤(rùn)。

PAI－1在乳腺癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中的作用纖溶酶原激活物抑制因子（plasminogen inhibitor，PAI）屬于絲氨酸蛋白酶抑制因子家族，目前已知有PAI－1、PAI－2、蛋白酶nexin和蛋白酶 C抑制劑（protein C inhibitor，PCI）4種。PAI－1和 PAI－2是uPA 的主要抑制物，但PAI－1的活性遠(yuǎn)高于PAI－2，并且兩者與腫瘤預(yù)后的相關(guān)性也截然不同。PAI－1與細(xì)胞的移行、轉(zhuǎn)移及血管新生相關(guān)［6］，其高表達(dá)與腫瘤不良預(yù)后密切相關(guān)［7－9］。最新研究認(rèn)為是PAI1特殊的分子結(jié)構(gòu)使得它未能發(fā)揮抑制纖溶酶原激活物的作用［10］。PAI－1通過(guò)與uPA形成穩(wěn)定的復(fù)合物，對(duì)纖溶酶原的形成產(chǎn)生負(fù)反饋抑制作用，PAI－1能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞對(duì)復(fù)合物產(chǎn)生細(xì)胞內(nèi)攝取作用，因而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲基底膜。PAI－1與整合素（integrin）、玻璃粘連蛋白（vitronectin，VN）、層粘連蛋白（laminin，LN）通過(guò)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑影響腫瘤細(xì)胞遷移及增殖。PAI－1／VN 復(fù)合物能使PAI－1具有抑制劑無(wú)關(guān)的功能。uPA－PAI－1復(fù)合物也可以通過(guò)與低密度脂蛋白（low density lipoprotein receptor，LDLR）家族的交互作用而間接地影響信號(hào)活性，更可以直接通過(guò)受體胞質(zhì)區(qū)發(fā)出細(xì)胞信號(hào)［11］。PAI－1同樣可以刺激細(xì)胞發(fā)生不依賴uPA、組織纖維蛋白溶酶原激活（tissue plasminogen activator，tPA）和粘連蛋白的細(xì)胞移行。另一項(xiàng)研究也證明［12］，PAI－1和LDLR相互作用后，可間接導(dǎo)致刺激細(xì)胞JaK／STAT信號(hào)通路的活化，從而導(dǎo)致細(xì)胞移行的增加。

uPA／PAI－1表達(dá)對(duì)早期乳腺癌臨床預(yù)后的預(yù)測(cè)及化療、內(nèi)分泌治療的指導(dǎo)作用對(duì)于乳腺癌患者，一些傳統(tǒng)的預(yù)后因素很重要，其中之一就是淋巴結(jié)狀態(tài)，它是評(píng)估早期乳腺癌危險(xiǎn)分級(jí)最重要的因素。由于淋巴結(jié)狀態(tài)并不影響系統(tǒng)治療反應(yīng)性，因此它只是純預(yù)后因素［13］。考慮到淋巴結(jié)陰性乳腺癌比例的升高和對(duì)潛在治愈患者過(guò)度治療現(xiàn)象的不斷出現(xiàn)，充分評(píng)估淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)特別重要。嚴(yán)格按照St．Gallen共識(shí)原則［14］，90%以上的淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者將得到全身治療，雖然僅30%的患者將最終復(fù)發(fā)。在淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者中，由uPA和PAI－1水平篩選出的低?；颊呒s占50%［9］，明顯高于前者，因此更接近局部治療可治愈的淋巴結(jié)陰性患者的實(shí)際比例（70%）。

歐洲癌癥研究組織（EORTC）對(duì)來(lái)自歐洲18個(gè)不同地區(qū)的8 377名早期乳腺癌患者中位隨訪6．5年的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析［15］，最重要的發(fā)現(xiàn)是uPA和PAI－1是僅次于淋巴結(jié)狀態(tài)的無(wú)病生存和總生存最可靠的預(yù)后因素。在包括所有預(yù)后因素（年齡、腫瘤大小、淋巴結(jié)累及情況、激素受體狀態(tài)和組織分級(jí)）以及輔助治療的多因素分析中，uPA和PAI－1仍是重要而可靠的危險(xiǎn)因素。另外，并未發(fā)現(xiàn)其與激素受體狀態(tài)存在相關(guān)性，因此uPA和PAI－1不能預(yù)測(cè)內(nèi)分泌治療的效果。再對(duì)其中未接受全身治療的3 362例淋巴結(jié)陰性的亞組分析后發(fā)現(xiàn)，uPA和PAI－1是最強(qiáng)有力的預(yù)后因素，有助于從這組人群中進(jìn)一步區(qū)分出高或低復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的患者。

一項(xiàng)前瞻性多中心隨機(jī)臨床試驗(yàn)Chemo N0納入556名淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者，運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定腫瘤組織中uPA和PAI－1水平，并以此對(duì)患者進(jìn)行分組，uPA／PAI－1低水平患者的腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)相當(dāng)?shù)停词共挥枞碇委煟?年生存率也超過(guò)95%，10年生存率約為90%［9，16－17］。uPA／PAI－1表達(dá)高的患者隨機(jī)分成接受CMF方案化療組和觀察組，隨訪10年的結(jié)果顯示，CMF化療能降低一半的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，結(jié)果也肯定了EORTC研究中所提示的uPA／PAI－1水平對(duì)化療療效的預(yù)測(cè)價(jià)值。這些結(jié)果均提示uPA／PAI－1作為反映腫瘤早期侵襲的指標(biāo)是化療敏感性的標(biāo)記物之一，從而有助于臨床上制定相關(guān)的化療方案。若采用現(xiàn)在較新的化療方案，則Chemo N0 10年生存曲線可能會(huì)更高。

同時(shí)，另一項(xiàng)回顧性研究［15］共入組3 424名早期乳腺癌患者，主要探索腫瘤組織uPA／PAI－1水平（ELISA方法）對(duì)化療和內(nèi)分泌治療反應(yīng)性的影響。經(jīng)過(guò)83個(gè)月中位隨訪后，COX多因素生存分析顯示uPA／PAI－1與患者的無(wú)病生存率顯著相關(guān)（P＜0．001，HR＝2．0，95%CI為1．8～2．3）。uPA／PAI－1高水平患者比低水平患者從輔助化療中獲益更多，這個(gè)發(fā)現(xiàn)與Chemo N0試驗(yàn)中高危患者從CMF化療更大獲益的結(jié)論一致。無(wú)論從總體還是淋巴結(jié)亞組分析上看，化療效果和uPA／PAI－1水平有明顯相關(guān)性（P＜0．003，HR＝0．68，95%CI為0．53～0．88）。另外，該研究并未發(fā)現(xiàn)內(nèi)分泌治療與uPA／PAI－1水平存在顯著相關(guān)性，uPA／PAI－1水平的高低與內(nèi)分泌治療獲益并未見(jiàn)明顯差異。而其他有關(guān)于晚期乳腺癌的研究則提示高表達(dá)uPA、uPAR及PAI－1的腫瘤對(duì)一線三苯氧胺治療的反應(yīng)性較差，從而降低了無(wú)進(jìn)展生存率［18］。這一結(jié)果提示我們對(duì)尿激酶系統(tǒng)指標(biāo)的測(cè)定有助于從激素受體陽(yáng)性乳腺癌患者中區(qū)分出高?；颊?，從而采取更為積極的治療，有助于提高生存率。

uPA／PAI－1水平在臨床上為我們提供了腫瘤患者復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)和治療反應(yīng)的參考水準(zhǔn)，幫助我們調(diào)整乳腺癌患者全身治療的概念，即根據(jù)個(gè)體腫瘤生物學(xué)特點(diǎn)選擇治療方案。

2005年，國(guó)際早期乳腺癌試驗(yàn)者協(xié)作組（the Early Breast Cancer Trialists′ Collaborative Group，EBCTCG）提出：除內(nèi)分泌治療的效果外，包括蒽環(huán)類的化療方案能使早期乳腺癌15年累計(jì)死亡率減少38%（絕經(jīng)后）和20%（絕經(jīng)前）［19］。后來(lái)一項(xiàng)病例對(duì)照研究［20］論證了包括蒽環(huán)類的化療比CMF對(duì)uPA／PAI－1高表達(dá)乳腺癌效果更好，而對(duì)uPA／PAI－1低表達(dá)乳腺癌來(lái)說(shuō)療效沒(méi)有明顯區(qū)別。當(dāng)然，該試驗(yàn)樣本量較小且存在交互因素的影響，其結(jié)論尚需要其他大樣本前瞻性試驗(yàn)的驗(yàn)證。

綜上所述，大量回顧性和前瞻性研究都表明uPA／PAl－1能預(yù)測(cè)淋巴結(jié)陰性乳腺癌高復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，且能從全身化療中明顯獲益。因此，在美國(guó)臨床腫瘤學(xué) 會(huì) （American Society of Clinical Oncology，ASCO）的乳腺癌腫瘤標(biāo)記物應(yīng)用指南更新版（2007年）中將uPA／PAI－1列入是乳腺癌患者新的預(yù)后指標(biāo)［21］。最新的一項(xiàng)隨機(jī)臨床試驗(yàn) NNBC3（Node Negative Breast Cancer 3－Europe）試 圖 闡 述 以u(píng)PA／PAI－1和／或臨床病理因素定義的高低危復(fù)發(fā)患者對(duì)含紫衫類化療的療效［22］。該試驗(yàn)?zāi)壳耙淹瓿扇虢M，2 661名患者歸為高危組并得到及時(shí)化療，其中1 334名高?；颊呤褂?周期FE100C序貫3周期多西紫杉醇，1327名高?；颊呤褂?周期FE100 C。主要終點(diǎn)事件是無(wú)病生存（disease－free survival，DFS），次要終點(diǎn) 事件是 總 生存 （overall survival，OS）。該試驗(yàn)結(jié)果將有助于我們進(jìn)一步從淋巴結(jié)陰性患者中區(qū)分出高復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的患者，并采用可能更為有效的化療方案。

uPA系統(tǒng)在乳腺癌靶向治療中的研究進(jìn)展

由于uPA系統(tǒng)參與了腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移、細(xì)胞增殖及血管生成等乳腺癌發(fā)展的各個(gè)方面，加之所涉及的細(xì)胞因子多，作用機(jī)制復(fù)雜，使得將uPA作為靶點(diǎn)治療乳腺癌成為目前的研究熱點(diǎn)。目前探討較多的有DNA甲基化、RNA干擾、與uPA抑制相關(guān)的細(xì)胞因子等。

關(guān)于DNA甲基化的研究，主要是基于乳腺癌中uPA基因的表達(dá)與其非甲基化狀態(tài)存在緊密聯(lián)系這一理論基礎(chǔ)。DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1（DNA methyltransferase 1，DNMT1）可導(dǎo)致uPA 基因的甲基化及沉默，且抑制浸潤(rùn)性乳腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。Pakneshan等［23］將RAS基因轉(zhuǎn)染入乳腺癌細(xì)胞MDA－MB－231中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)DNMTl表達(dá)被激活，而uPA基因的表達(dá)及其活性被抑制，進(jìn)而使癌細(xì)胞的侵襲能力被削弱。由此看出，在很多癌癥中刺激腫瘤生長(zhǎng)的RAS－DNMT1DNA甲基化路徑卻對(duì)高侵襲乳癌細(xì)胞MDAMB231的侵襲力產(chǎn)生了抑制的作用［23］。通過(guò)這一機(jī)制，在接下來(lái)的研究中直接應(yīng)用S－腺苷－L－蛋氨酸（AdoMet，具有超甲基化及抑制去甲基化作用）處理MDA－MB－231細(xì)胞，同樣發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞的uPA表達(dá)及侵襲能力明顯下降，在動(dòng)物模型中則表現(xiàn)為腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移受到抑制，從而也揭示了一條乳腺癌的治療途徑［24］。AdoMet對(duì)uPA表達(dá)的抑制作用可被去甲基藥物5－氮雜胞苷逆轉(zhuǎn)，在Ateeq等［25］的實(shí)驗(yàn)中也證實(shí)了臨床用抗癌藥5－氮雜2′－脫氧胞苷（5－aza－CdR）在抑制乳腺癌細(xì)胞增殖的同時(shí)，還誘導(dǎo)了uPA、趨化因子受體（CXC chemokine receptor4，CXCR4）及轉(zhuǎn) 化 生 長(zhǎng) 因 子（transfor－ming growth factorβ，TGF－β）等腫瘤轉(zhuǎn)移基因的表達(dá)。

RNA干擾是抗腫瘤研究中的一種常用手段。RAS－細(xì) 胞 外 信 號(hào) 調(diào) 節(jié) 激 酶 （extracellular signal regulated kinase，ERK）信號(hào)通路的激活 有賴于uPA與uPAR之間的結(jié)合，因此uPA與uPAR的RNA干擾不僅抑制uPA和uPAR的表達(dá)，同時(shí)也抑制了癌細(xì)胞增殖［26］。而 Kunigal等［27］則利用pUM（uPA與 MMP－9共同的小干擾RNA質(zhì)粒載體）轉(zhuǎn)染兩種乳腺癌細(xì)胞 MDA－MB－231和ZR－75－1，致使uPA 和 MMP－9的表達(dá)同時(shí)下調(diào)，同時(shí)MAPK、ERK和AKT（絲裂原活化蛋白激酶、ERK、蛋白激酶B）信號(hào)通路分子的磷酸化水平受到抑制，其結(jié)果是癌細(xì)胞的侵襲及遷移能力明顯減弱，細(xì)胞增殖降低，動(dòng)物轉(zhuǎn)移瘤的血管生成減少，甚至完全抑制了裸鼠的原位乳腺癌。目前已有數(shù)種RNA干擾藥物（如 Bevasiranib、sirna－027）進(jìn)入臨床試驗(yàn)。2008年11月，Wyszko等［28］則報(bào)道了第一個(gè)應(yīng)用RNA干擾技術(shù)治療腫瘤（神經(jīng)膠質(zhì)瘤）的臨床試驗(yàn)，為這項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用于臨床提供了先例。

近年來(lái)發(fā)現(xiàn)多種在正常乳腺組織中表達(dá)且與uPA抑制相關(guān)的細(xì)胞因子。乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子－1可通過(guò)抑制核因子－kappaB（NF－κB）的活性，下調(diào)uPA乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)［29］。Maspin是一種特殊的絲氨酸蛋白酶抑制劑，實(shí)驗(yàn)證實(shí)乳腺癌細(xì)胞MDA－MB－231中的 Maspin能下調(diào)uPA／uPAR的表達(dá)以及uPA的活性，從而減弱其侵襲能力［30］。酪氨酸激酶（Sky）與白細(xì)胞特異性激酶（Lck）之間的反應(yīng)抑制了小鼠中乳腺癌細(xì)胞的uPA、MMP－9及VEGF的表達(dá)，對(duì)乳腺癌的進(jìn)展有負(fù)向調(diào)節(jié)作用［31］。以上幾種細(xì)胞因子均在正常乳腺組織中表達(dá)，但在乳腺癌組織中沉默，通過(guò)對(duì)其表達(dá)水平的上調(diào)，可能發(fā)現(xiàn)有效的治療途徑。

結(jié)語(yǔ)眾多研究表明uPA／PAI－1的過(guò)度表達(dá)與早期乳腺癌患者的臨床預(yù)后較差有關(guān)，這些研究提示應(yīng)用這兩個(gè)因素進(jìn)行分析，能提示2～8倍的復(fù)發(fā)和死亡風(fēng)險(xiǎn)［32－33］。更重要的是在淋巴結(jié)陰性患者中，這兩個(gè)指標(biāo)是獨(dú)立的預(yù)后因素，有助于輔助治療方案的制定。隨著臨床上淋巴結(jié)陰性患者的比例逐漸升高，uPA／PAI－1狀態(tài)判定越來(lái)凸顯其重要性，一方面讓我們更為精準(zhǔn)地治療那些真正需要通過(guò)輔助治療提高生存率的患者，另一方面對(duì)乳腺癌早期侵襲的靶點(diǎn)治療研究也提供了治療失敗后的另一個(gè)有效方法。靶向治療的機(jī)制主要是干擾uPA系統(tǒng)，抑制uPA／PAI－1的同時(shí)抑制乳腺癌的侵襲及轉(zhuǎn)移。對(duì)于uPA／PAI－1高表達(dá)的早期乳腺癌或許可以聯(lián)合化療和靶向治療，當(dāng)然，尚需大量前瞻性研究探索最佳化療方案，何種化療方案最適合與靶向治療聯(lián)用，以及與何種靶向治療方案連用才能獲得較大的獲益，同時(shí)使不良反應(yīng)降到最小。

［1］ Muehlenweg B，Sperl S，Magdolen V．Interference with the urokinase plasminogen activator system：apromising therapy concept for solid tumours［J］．Expert Opin Biol Ther，2001，1（4）：683－691．

［2］ Romer J，Nielsen BS，Ploug M．The urokinase receptor as apotential target in cancer therapy［J］．Curr Pharm Des 2004，10（19）：2359－2376．

［3］ Gabison EE，Hoang－Xuan T，Mauviel A．EMMPRIN／CD147，an MMP modulator in cancer，development and tissue repair［J］．Biochimie，2005，87（3－4）：361－368．

［4］ Giusti C，Desruisseau S，Ma L．Transforming growth factor beta－1and amphiregulin act in synergy to increase the production of urokinase－type plasminogen activator in transformed breast epithelial cells［J］．Int J Cancer，2003，105（6）：769－778．

［5］ Menashi S，Serova M，Ma L．Regulation of extracellular matrix metalloproteinase inducer and matrix metalloproteinase expression by amphiregulin in transformed human breast epithelial cells［J］．Cancer Res，2003，63（22）：7575－7580．

［6］ Bajou K，Maillard C，Jost M．Host－derived plasminogen activator inhibitor－1 （PAI－1）concentration is critical for in vivo tumoral angiogenesis and growth［J］．Oncogene，2004，23（41）：6986－6990．

［7］ Harbeck N，Kates RE，Gauger K． Urokinase－type plasminogen activator （uPA）and its inhibitor PAI－1：novel tumor－derived factors with a high prognostic and predictive impact in breast cancer［J］．Thromb Haemost，2004，91（3）：450－456．

［］ ， ，significance of urokinase－type plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor－1in primary breast cancer［J］．Br J Cancer，1998，77（6）：932－940．

［9］ Janicke F，Prechtl A，Thomssen C．Randomized adjuvant chemotherapy trial in high－risk，lymph node－negative breast cancer patients identified by urokinase－type plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor type 1［J］．J Natl Cancer Inst，2001，93（12）：913－920．

［10］ Croucher DR，Saunders DN，Stillfried GE．A structural basis for differential cell signalling by PAI－1and PAI－2in breast cancer cells［J］．Biochem J，2007，408（2）：203－210．

［11］ Webb DJ，Thomas KS，Gonias SL．Plasminogen activator inhibitor 1functions as a urokinase response modifier at the level of cell signaling and thereby promotes MCF－7 cell growth［J］．J Cell Biol，2001，152（4）：741－752．

［12］ Degryse B，Neels JG，Czekay RP．The low density lipoprotein receptor－related protein is a motogenic receptor for plasminogen activator inhibitor－1［J］．J Biol Chem2004，279（21）：22595－22604．

［13］ Lonning PE，Knappskog S，Staalesen V．Breast cancer prognostication and prediction in the postgenomic era［J］．Ann Oncol，2007，18（8）：1293－1306．

［14］ Goldhirsch A，Wood WC，Gelber RD．Meeting highlights：updated international expert consensus on the primary therapy of early breast cancer［J］．J Clin Oncol，2003，21（17）：3357－3365．

［15］ Harbeck N，Kates RE，Look MP．Enhanced benefit from adjuvant chemotherapy in breast cancer patients classified high－risk according to urokinase－type plasminogen activator（uPA）and plasminogen activator inhibitor type 1 （n＝3424）［J］．Cancer Res，2002，62（16）：4617－4622．

［16］ Harbeck N，Meisner C，Prechtl A．Level－1evidence for prognostic and predictive impact of uPA and PAI－1in node－negative breast cancer provided by second scheduled analysis of multicenter Chemo－N0therapy trial［J］．Breast Cancer Res Treat，2001，69：213．

［17］ Harbeck N，Schmitt M，Meisner C．Final 10－year analysis of prospective multicenter Chemo N0trial for validation of ASCO－recommended biomarkers uPA／PAI－1for therapy decision making in node－negative breast cancer［J］．J Clin Oncol，2009，27（suppl 15）：511．

［18］ Meijer－van Gelder ME，Look MP，Peters HA．Urokinasetype plasminogen activator system in breast cancer：association with tamoxifen therapy in recurrent disease［J］．Cancer Res，2004，64（13）：4563－4568．

［19］ Early Breast Cancer Trialists′ Collaborative Group．Effects of chemotherapy and hormonal therapy for early breast cancer on recurrence and 15－year survival：an overview of the randomised trials［J］．Lancet，2005，365（9472）：1687－1717．

［20］ Borstnar S，Sadikov A，Mozina B．High levels of uPA and PAI－1predict a good response to anthracyclines［J］．Breast Cancer Res Treat，2010，121（3）：615－624．

［21］ Harris L，F(xiàn)ritsche H，Mennel R．American Society of Clinical Oncology 2007update of recommendations for the use of tumor markers in breast cancer［J］．J Clin Oncol，2007，25（33）：5287－5312．

［22］ Kantelhardt EJ，Vetter M，Schmidt M．Prospective evaluation of prognostic factors uPA／PAI－1in nodenegative breast cancer：phase Ⅲ NNBC3－Europe trial（AGO，GBG，EORTC－PBG）comparing 6xFEC versus 3xFEC／3xDocetaxel［J］．BMC Cancer，2011，11：140．

［23］ Pakneshan P，Szyf M，Rabbani SA．Methylation and inhibition of expression of uPA by the RAS oncogene：divergence of growth control and invasion in breast cancer cells［J］．Carcinogenesis，2005，26（3）：557－564．

［24］ Pakneshan P，Szyf M，F(xiàn)arias－Eisner R．Reversal of the hypomethylation status of urokinase （uPA）promoter blocks breast cancer growth and metastasis［J］．J Biol Chem，2004，279（30）：31735－31744．

［25］ Ateeq B，Unterberger A，Szyf M．Pharmacological inhibition of DNA methylation induces proinvasive and prometastatic genes in vitro and in vivo［J］．Neoplasia，2008，10（3）：266－278．

［26］ Subramanian R，Gondi CS，Lakka SS．siRNA－mediated simultaneous downregulation of uPA and its receptor inhibits angiogenesis and invasiveness triggering apoptosis in breast cancer cells［J］．Int J Oncol，2006，28（4）：831－839．

［27］ Kunigal S， Lakka SS， Gondi CS． RNAi－mediated downregulation of urokinase plasminogen activator receptor and matrix metalloprotease－9in human breast cancer cells results in decreased tumor invasion，angiogenesis and growth［J］．Int J Cancer，2007，121（10）：2307－2316．

［28］ Wyszko E，Rolle K，Nowak S．A multivariate analysis of patients with brain tumors treated with ATN－RNA［J］．Acta Pol Pharm，2008，65（6）：677－684．

［29］ Cicek M，F(xiàn)ukuyama R， Welch DR．Breast cancer metastasis suppressor 1inhibits gene expression by targeting nuclear factor－kappaB activity［J］．Cancer Res，2005，65（9）：3586－3595．

［30］ Amir S， Margaryan NV， Odero－Marah V． Maspin regulates hypoxia－mediated stimulation of uPA／uPAR complex in invasive breast cancer cells［J］．Cancer Biol Ther，2005，4（4）：400－406．

［31］ Chakraborty G，Rangaswami H，Jain S．Hypoxia regulates cross－talk between Syk and Lck leading to breast cancer progression and angiogenesis［J］．J Biol Chem，2006，281（16）：11322－11331．

［32］ Duffy MJ．Urokinase plasminogen activator and its inhibitor，PAI－1，as prognostic markers in breast cancer：from pilot to level 1evidence studies［J］．Clin Chem，2002，48（8）：1194－1197．

［33］ Harbeck N，Schmitt M，Kates RE．Clinical utility of urokinase－type plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor－1determination in primary breast cancer tissue for individualized therapy concepts［J］．Clin Breast Cancer，2002，3（3）：196－200．