人參果復(fù)方顆粒抗疲勞作用的研究

張鳳清，付彥臣，刁冬梅

（1.長春工業(yè)大學(xué) 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，吉林 長春 130012；2.四平宏寶萊飲品股份有限公司，吉林 四平 136000）

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為疲勞是機(jī)體過用（超限）而引起的功能降低并出現(xiàn)不適的狀態(tài)，主要表現(xiàn)為疲勞困倦，可出現(xiàn)頭暈、健忘、睡眠質(zhì)量下降等伴隨癥狀[1]。疲勞的產(chǎn)生與能源物質(zhì)消耗、代謝產(chǎn)物堆積、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性失調(diào)、自由基影響等因素關(guān)系密切[2]。長期以來，尋找安全、有效、無毒副作用的有效藥物來延緩疲勞的發(fā)生和加速疲勞的消除一直是藥物研究的熱點(diǎn)之一，以中草藥為原料的保健食品在這一領(lǐng)域展示出廣闊的前景。

人參果為五加科植物人參（Panax ginsengC.A.Mey.）的成熟果實(shí)，人參果中富含人參皂苷，此外還含有多糖、生物堿、揮發(fā)油、氨基酸、無機(jī)鹽、胡蘿卜苷、β-谷甾醇等多種化學(xué)成分[3-4]。國內(nèi)外學(xué)者研究表明，人參果的藥理作用在許多方面與人參相似，但是在許多功能方面，人參果又具有人參無法比擬的獨(dú)特作用，其具有降低血糖、抗休克、保護(hù)心肌、保護(hù)腎功能、提高記憶力、增強(qiáng)免疫力、抗疲勞等多種保健作用[5-7]。此外，據(jù)文獻(xiàn)報道，紅景天[8-10]、靈芝[11-13]和枸杞子[14-16]中也含有豐富的活性成分，在緩解體力疲勞方面起著重要的作用。因此，本品利用人參果、紅景天、靈芝、枸杞子為原料，輔以白砂糖，采用現(xiàn)代制備工藝研制成“人參果復(fù)方顆粒”，該產(chǎn)品符合國家食品藥品監(jiān)督管理局保健食品原料使用規(guī)定，本文旨在研究人參果復(fù)方顆粒的抗疲勞作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品

人參果復(fù)方顆粒（主要成分為人參果、紅景天、靈芝、枸杞子等），固體顆粒劑，鋁塑復(fù)合膜袋裝，外包裝為紙盒。由長春工業(yè)大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院研制，吉林紫鑫藥業(yè)股份有限公司加工。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動物

選用吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心提供的ICR清潔級雄性小鼠，體重18g～22g，生產(chǎn)許可證號：SCXK-（吉）2007-0003。小鼠基礎(chǔ)飼料由長春市億斯實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，生產(chǎn)許可證號：SCXK-（吉）2010-0001。本清潔級動物室環(huán)境設(shè)施合格證號：吉動設(shè)字10-1005號，實(shí)驗(yàn)動物使用許可證號：SYXK（吉）2010-0011，清潔級。

1.1.3 劑量選擇

廠家推薦成人（體重以60kg計），每天攝入2次，每次1袋，5g/袋，即166.7mg/kg BW d，以廠家日推薦成人攝入量的1、10、30倍設(shè)置灌胃劑量，即166.7mg/kg BW d、1666.7mg/kg BW d、5000mg/kg BW d，分別取1667mg、16667mg、50000mg定型產(chǎn)品加蒸餾水至200mL，蒸餾水作陰性對照組，該樣品含糖量81.33%，因此以本試驗(yàn)相應(yīng)的高劑量組含糖量20.33%設(shè)糖對照組。各組小鼠灌胃量均為0.2mL/10g BW d，連續(xù)灌胃30d。

1.1.4 儀器與試劑

日本東芝TBA-120FR型全自動生化分析儀，SBA-40C型生物傳感分析儀，血乳酸測試酶膜，尿素測定試劑盒，肝糖原試劑盒，游泳箱（50cm×50cm×40cm），電子天平，722分光光度計，鉛皮，秒表等。

1.2 方法

1.2.1 人參果復(fù)方顆粒的制備

人參果復(fù)方顆粒的生產(chǎn)工藝：

1.2.2 負(fù)重游泳試驗(yàn)

末次給予受試物30min后，置小鼠在游泳箱中游泳，水深約30cm，水溫（25±1）℃，鼠尾根部負(fù)荷5%體重的鉛皮。記錄小鼠自游泳開始至死亡時間，作為小鼠游泳時間（min）。

1.2.3 血清尿素測定

末次給予受試物30min，在溫度為（30±0.5）℃的水中游泳90min，休息60min摘眼球采血，取血清，進(jìn)行尿素含量測定。

1.2.4 肝糖原測定

末次給予受試物30min處死小鼠取肝臟，經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，精確稱取肝臟75mg，每管加入225μL試劑盒提供的堿溶液，用簿膜封住管口，扎一透氣孔，沸水浴20min，冷卻后加入7.2mL蒸餾水，充分混勻，按試劑說明書操作加入顯色劑，沸水浴5min，用722分光光度計在波長620nm處進(jìn)行比色測定，按說明書提供的公式換算肝糖原。

1.2.5 血乳酸測定

末次給予受試物30min后采血20μL，再在溫度為（30±0.5）℃的水中不負(fù)重游泳10min，分別于游泳后立即（游泳后0min）和游泳后休息20min各采血20μL，采用山東省科學(xué)院生物研究所生產(chǎn)的生物傳感分析儀測定以上3個時間點(diǎn)的血乳酸值。以3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積（計算公式見后）判斷結(jié)果。

1.2.6 統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)的統(tǒng)計處理采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件中單因素方差分析進(jìn)行均值比較，方差齊時，各組間兩兩比較用LSD法；方差不齊時，各組間兩兩比較采用Tamhane法。

2 結(jié)果與分析

2.1 人參果復(fù)方顆粒對小鼠負(fù)重游泳時間及小鼠增重的影響

表1 人參果復(fù)方顆粒對小鼠負(fù)重游泳時間及小鼠增重的影響Table 1 Effect of complex ginseng fruit granule on swimming time and body weight of mice

由表1可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），高劑量組游泳時間長于糖對照組，且差異有顯著性（p<0.05），說明人參果復(fù)方顆粒能延長小鼠負(fù)重游泳時間而對小鼠增重?zé)o影響。

2.2 人參果復(fù)方顆粒對小鼠血清尿素及小鼠增重的影響

由表2可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），高、中劑量組小鼠游泳后血清尿素低于糖對照組，且與糖對照組比較有顯著性差異（p<0.01，p<0.05），說明人參果復(fù)方顆粒具有抑制小鼠游泳后血清尿素升高的作用而對小鼠增重?zé)o影響。

2.3 人參果復(fù)方顆粒對小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影響

表2 人參果復(fù)方顆粒對小鼠游泳后血清尿素及小鼠增重的影響Table 2 Effect of complex ginseng fruit granule on content of blood urea nitrogen and body weight of mice

表3 人參果復(fù)方顆粒對小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影響Table 3 Effect of complex ginseng fruit granule on the content of liver glycogen and body weight of mice

由表3可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），僅高劑量組肝糖原儲備高于糖對照組且差異具有顯著性（p<0.05），表明人參果復(fù)方顆粒能增加肝糖原儲備但對小鼠增重未見影響。

2.4 人參果復(fù)方顆粒對小鼠血乳酸值及小鼠體重的影響

表4 給予人參果復(fù)方顆粒小鼠游泳前、后及休息20min 三個時間點(diǎn)血乳酸值Table 4 Change of the contents of blood lactic acid after overfeeding complex ginseng fruit granule

由表5可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），各劑量組小鼠游泳后3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積雖有所降低，但與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），說明人參果復(fù)方顆粒對抑制游泳時血乳酸的產(chǎn)生及小鼠增重均無影響。

表5 人參果復(fù)方顆粒對小鼠三個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積及小鼠增重的影響Table 5 Effect of complex ginseng fruit granule on the area of blood lactic acid under the curve in three time points and body weight of mice

3 結(jié)論

經(jīng)口給予小鼠人參果復(fù)方顆粒166.7、1666.7、5000mg/kg BW d，連續(xù)灌胃30d，與糖對照組比較5000mg/kg BW d劑量組能延長小鼠負(fù)重游泳時間，減少小鼠游泳時血清尿素的產(chǎn)生，增加肝糖原儲備；1666.7mg/kg BW d劑量組能減少小鼠游泳時血清尿素的產(chǎn)生，與糖性對照組比較有顯著性差異（p<0.05），各劑量組對小鼠體重及血乳酸的產(chǎn)生均未見影響。由此判定人參果復(fù)方顆粒具有緩解體力疲勞功能。

[1]王 瑋，金吉中，郜葉紅，等.抗運(yùn)動性疲勞單味中藥研究概述[J].中藥材，2007，27（2）：138-142.

[2]黃林章，黃寶康，秦路平，等.中藥抗疲勞作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2010，25（3）：161-165.

[3]王繼彥，孫光芝，李向高.人參果的化學(xué)、藥理研究進(jìn)展[J].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2005，27（1）：71-75，78.

[4]趙文莉，張立實(shí)，賈旭東，等.人參皂甙抗疲勞作用的研究進(jìn)展[J].中國食品衛(wèi)生雜志，2008，20（5）：445-448.

[5]田 剛，劉 立，遲國興，等.人參果粗多糖的初步藥理研究[J].人參研究，1999，11（2）：22-24.

[6]鄔 榮，高守紅，辛海量.人參抗輻射損傷研究概況[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志，2007，25（6）：364-366.

[7]王 瑩，蔡東聯(lián).人參抗疲勞作用研究進(jìn)展[J].氨基酸和生物資源，2005，27（3）：68-70.

[8]陳少遷，吳少雄，殷建忠.大花紅景天的研究進(jìn)展[J].農(nóng)產(chǎn)食品科技，2008，2（2）：40-44.

[9]賈建昌.紅景天抗疲勞作用機(jī)理的研究進(jìn)展[J].甘肅中醫(yī)，2005，18（11）：45-47.

[10]劉三強(qiáng)，張 棋，苑文房.紅景天對大鼠輻射損傷防護(hù)作用的試驗(yàn)研究[J].臨床醫(yī)學(xué)工程，2010，17（2）：50-51.

[11]夏 勇，趙 碩，傅劍云，等.靈芝粉抗疲勞作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國臨床康復(fù)，2002，17（6）：2618-2619.

[12]顏 燕，徐建華，呂實(shí)波，等.靈芝抗輻射功能的研究[J].中國公共衛(wèi)生，2002，18（10）：1221-1222.

[13]季修慶，吳士良，周迎會，等.靈芝多糖對γ 射線照射后NIH3T3成纖維細(xì)胞細(xì)胞周期及細(xì)胞增殖的影響[J].蘇州醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2001，21（4）：379-382.

[14]鄭哲君，李德遠(yuǎn).枸杞子、枸杞子多糖抗疲勞作用的研究進(jìn)展[J].中國食物與營養(yǎng)，2008（12）：53-54.

[15]徐承水.枸杞子對小鼠耐力影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2000（4）：48-49.

[16]尹曉雯，王 莉.枸杞子對小鼠抗缺氧抗疲勞能力的影響[J].農(nóng)業(yè)科學(xué)研究，2010，31（1）：40-43.