淫羊藿總黃酮的藥理作用研究進(jìn)展

張玉萱,徐玲玲

(上海中醫(yī)藥大學(xué)岳陽(yáng)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院藥劑科,上海,200437)

淫羊藿性味辛、甘、溫,歸肝、腎經(jīng),具有補(bǔ)腎陽(yáng)、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕之功效。淫羊藿來(lái)源于小檗科植物心葉淫羊藿、箭葉淫羊藿等的干燥葉,藥用價(jià)值較高,藥用歷史悠久。早在《本草綱目》中已有記載,稱其“益精氣、堅(jiān)筋骨、補(bǔ)腰膝、強(qiáng)心力”?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示,淫羊藿的有效成分主要為淫羊藿總黃酮(TFE)和淫羊藿多糖(EPS),可增強(qiáng)機(jī)體免疫、增加心腦血管血流量,促進(jìn)內(nèi)分泌功能、造血功能、骨髓細(xì)胞DNA合成,還可祛痰、鎮(zhèn)咳、平喘,具有抗衰老、抗腫瘤之功效。已有大量研究發(fā)現(xiàn),TFE是淫羊藿發(fā)揮以上作用的主要有效成分,本文就近年來(lái)TFE藥理作用相關(guān)的研究報(bào)道綜述如下。

1 對(duì)免疫系統(tǒng)的影響

許蘭芝等[1]選取健康成年雄性Wistar大鼠,隨機(jī)分為生理鹽水組、模型組、淫羊藿總黃酮100、200 mg/(kg·d)組 ,每組 10 只 。生理鹽水組給予生理鹽水連用30 d;模型組大鼠后肢肌肉注射醋酸潑尼松龍注射液10 mg/(kg·d)造模;用藥治療第30 d取血,分離血清,測(cè)定各組大鼠血清的促甲狀腺激素、甲狀腺激素 T3、T4含量,以及下丘腦、垂體、甲狀腺組織中鈣調(diào)蛋白基因的表達(dá)。結(jié)果表明,TFE可以促進(jìn)腎陽(yáng)虛大鼠甲狀腺激素的分泌,較大劑量的TFE能明顯抑制其促甲狀腺激素的分泌,且對(duì)腎陽(yáng)虛大鼠下丘腦、甲狀腺組織中鈣調(diào)蛋白基因的表達(dá)有顯著的抑制作用。

劉小雨等[2]采用Th1、Th2、Th3 cDNA 芯片,分別檢測(cè)正常青年(YC)組、老齡大鼠(OM)組、TFE組、NF-KB阻斷劑(PDTC)組、PDTC組+TFE組的Th1、Th2、Th3各類細(xì)胞因子信號(hào)差異表達(dá)。最終,老齡大鼠脾淋巴細(xì)胞過(guò)度凋亡,Th1、Th2、Th3類細(xì)胞因子分泌增高,Th2、Th3類細(xì)胞因子優(yōu)勢(shì)應(yīng)答;TFE可以抑制淋巴細(xì)胞過(guò)度凋亡,校正老齡大鼠 Th1、Th2、Th3類細(xì)胞因子之間的比例失衡,重塑Th1-Th2-Th3細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的良性平衡。Liu等[3]還進(jìn)行了TEF經(jīng)由核因子-κ B(NF-κ B)家族相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑進(jìn)行調(diào)控免疫衰老的有效機(jī)制,結(jié)果證實(shí),TEF可抑制老年大鼠脾淋巴細(xì)胞過(guò)度凋亡,激活老年大鼠Rel/NF-κ B/IB/IKK及其相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,最終經(jīng)由 I Bε、I Bα的調(diào)節(jié),使NF-κ B在適度范圍上調(diào)。

沈自尹等[4]采用基因芯片技術(shù),比較老年大鼠和青年大鼠在TFE干預(yù)后的淋巴細(xì)胞基因表達(dá)。結(jié)果表明,TFE在上調(diào)老年大鼠淋巴細(xì)胞抗凋亡基因表達(dá)的同時(shí),下調(diào)抗增殖基因的表達(dá);上調(diào)促增殖基因表達(dá)的同時(shí),下調(diào)抗增殖基因的表達(dá),重塑基因表達(dá)良性平衡;還協(xié)同調(diào)節(jié) TCR/CD3、CD28、CT LA4、TGFβ/IL-2R 等介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,發(fā)揮抗凋亡效應(yīng)。

孫奕等[5]采用TFE325、650和1300mg/(kg·d)與羥基脲 320 mg/(kg·d)ig小鼠,同時(shí)以正常和模型小鼠作對(duì)照實(shí)驗(yàn),第11 d用3H-TdR摻入法和同位素釋放法檢測(cè)各組小鼠IL-2和NK細(xì)胞活性,并計(jì)算脾臟指數(shù)。結(jié)果顯示,TFE可拮抗羥基脲抑制模型小鼠IL-2和NK細(xì)胞活性,尤以650 mg/(kg·d)劑量組效果最為顯著,模型組小鼠體重、脾臟指數(shù)下降程度明顯大于正常組和治療組。因此,TFE對(duì)免疫功能低下的小鼠具有良好的免疫促進(jìn)作用。

2 對(duì)骨骼系統(tǒng)的影響

雷光華等[6]選用2月齡SD大鼠,結(jié)果發(fā)現(xiàn)TFE干預(yù)可明顯改善被動(dòng)吸煙大鼠的骨密度和骨形態(tài)學(xué)指標(biāo),且骨密度與骨形態(tài)學(xué)指標(biāo)之間存在明顯的相關(guān)性。

Chen等[7]將60只4月齡雌性SD大鼠隨機(jī)分為3對(duì)照組(假手術(shù))、去卵巢組、淫羊藿組。當(dāng)骨密度(BMD)下降>20%,骨質(zhì)疏松模型建立,TEF組予TFE灌胃4周。結(jié)果TEF組大鼠腰椎BMD顯著改善,且骨組織護(hù)骨素(OPG)mRNA的表達(dá)較去卵巢組明顯增強(qiáng),但對(duì)護(hù)骨素配體(OPGL)mRNA表達(dá)的促進(jìn)作用不明顯。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明,TEF可促進(jìn)骨組織中OPG mRNA的表達(dá)來(lái)抑制破骨細(xì)胞的分化與成熟,從而治療骨質(zhì)疏松。

許碧連等[8]選取4～5月齡雌性SD大鼠40只,隨機(jī)分為假手術(shù)組、去卵巢組、己烯雌酚組和淫羊藿總黃酮組。己烯雌酚組和淫羊藿總黃酮組大鼠行雙側(cè)卵巢去除術(shù)后,分別灌胃DES 22.5 μ g/(mg·d)、TFE 300 μ g/(mg·d),持續(xù) 90 d 。用骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)等方法測(cè)量脛骨上段和第5腰椎松質(zhì)骨及脛骨中段皮質(zhì)骨的動(dòng)態(tài)參數(shù)和靜態(tài)參數(shù),同時(shí)測(cè)量股骨鈣、磷及羥脯氨酸含量,測(cè)量子宮濕重及子宮內(nèi)膜厚度。由此可知,TFE能有效預(yù)防去卵巢大鼠的股骨丟失,但不能有效預(yù)防脛骨上段和腰椎松質(zhì)骨的丟失,對(duì)子宮沒(méi)有刺激作用。

Wu等[9]將48例骨質(zhì)疏松大鼠分為對(duì)照組、卵巢切除組(雙側(cè)卵巢切除)、TEF組及17β-雌二醇組共4組,應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)大鼠下丘腦及海馬 ERα、ERβ mRNA 的表達(dá)。結(jié)果顯示,骨質(zhì)疏松大鼠的血清雌二醇、骨密度、子宮重量、下丘腦及海馬ERα、ERβ mRNA的表達(dá)明顯下降;經(jīng)17β-雌二醇治療后,除了 ERβ mRNA表達(dá)水平以外,其他指標(biāo)均得到顯著改善;TFR治療后,除了子宮重量外,其余指標(biāo)均得到顯著改善。本實(shí)驗(yàn)說(shuō)明TFE可提高骨質(zhì)疏松大鼠的骨密度,而對(duì)子宮無(wú)副作用,其機(jī)制可能和提高下丘腦及海馬ERα、ERβ mRNA 的表達(dá)水平相關(guān)。

Xu等[10]進(jìn)行體外分離培養(yǎng)去勢(shì)雌性大鼠來(lái)源骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,分別在成骨誘導(dǎo)液和脂肪誘導(dǎo)液條件下連續(xù)培養(yǎng)15 d,并添加10 μ g/mL的TFE。結(jié)果顯示,TFE可顯著上調(diào)ALP,以及Runx2(成骨早期分化因子)mRNA的表達(dá),并下調(diào)PPARγ-2(脂肪形成關(guān)鍵基因)mBNA的表達(dá)。在成骨誘導(dǎo)條件下,EFs呈時(shí)間依賴性下調(diào)DKK1的表達(dá);在脂肪誘導(dǎo)條件下,EFs呈時(shí)間依賴性抑制DKK1蛋白的上調(diào)。因此,TFE可能通過(guò)抑制DKK1蛋白的表達(dá)調(diào)控去勢(shì)雌性大鼠BMSCs成骨和成脂分化平衡,來(lái)治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥。

曲萍等[11]予維甲酸14 d灌胃,造成大鼠骨質(zhì)疏松癥。以TFE連續(xù)給藥28 d,檢測(cè)血清鈣、血清磷、ALP水平的變化,并取股骨進(jìn)行骨鈣含量測(cè)定及股骨病理組織學(xué)檢查,結(jié)果顯示,各劑量的TFE對(duì)血清鈣、血清磷、ALP正常生理水平均無(wú)顯著影響,但均可增加股骨骨鈣含量、骨皮質(zhì)厚度及骨小梁數(shù)量。因此可知,TFE對(duì)骨質(zhì)疏松癥具有明顯的預(yù)防和治療作用。

3 對(duì)心血管系統(tǒng)的影響

尹曉飛等[12]采用常壓缺氧條件下分別觀察小鼠平均存活時(shí)間和心肌耗氧量;采用夾閉氣管法觀察小鼠平均心電消失時(shí)間。結(jié)果淫羊藿總黃酮高、低劑量組均能延長(zhǎng)小鼠平均存活時(shí)間,降低心肌耗氧量。由此可知,淫羊藿總黃酮能明顯降低小鼠心肌氧耗,保護(hù)缺氧心肌,延長(zhǎng)小鼠存活時(shí)間。

Huang等[13]將大鼠分為假手術(shù)組、模型組、陽(yáng)性藥組以及受試藥小、中、大劑量組共6組,麻醉開(kāi)胸后結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支,復(fù)制急性心肌梗死模型。受試藥小、中、大劑量組分別靜脈注射TFE 10、20 、40 mg/kg,結(jié)果小 、中、大劑量組可不同程度地縮小心肌梗死面積,降低血清肌酸磷酸激酶、乳酸脫氫酶活性和丙二醛水平,并升高血清超氧化物歧化酶活性;給藥后5 min,心電圖ST-T段抬高程度開(kāi)始降低,3 h后仍有降低。由此可知,TFE可保護(hù)冠脈結(jié)扎致大鼠心肌缺血,且起效較快。

4 對(duì)血液系統(tǒng)的影響

黃曉瑾等[14]對(duì)TFE灌胃給藥對(duì)家兔血黏度和血小板聚集的影響進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示,TFE灌胃30～120 mg/kg可顯著降低家兔全血黏度、紅細(xì)胞壓積和紅細(xì)胞聚集指數(shù);抑制腺苷二磷酸誘導(dǎo)的家兔血小板聚集。最后得出結(jié)論:TFE具有改善家兔血液流變性、血小板聚集的作用。

黃秀蘭等[15]研究了TFE注射液對(duì)正常麻醉開(kāi)胸術(shù)血流動(dòng)力學(xué)的影響。結(jié)果顯示,TFE具有如下作用:減慢心率(15 mg/kg組持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng))、升高收縮壓、短暫降低舒張壓;降低左室內(nèi)壓最大變化速,升高心臟做功指數(shù)率;增加心輸出量、冠脈流量、心臟指數(shù);降低總外周阻力、冠脈阻力及心肌耗氧指數(shù)?？傊?TFE注射液可通過(guò)增加冠脈流量,增加氧的供應(yīng),降低心肌耗氧量,改善心臟血流動(dòng)力學(xué)。

5 對(duì)生殖系統(tǒng)的影響

佘白蓉等[16]通過(guò)測(cè)定TFE灌胃給藥7 d后,未成年大鼠腺垂體、附睪及精囊腺的重量,來(lái)觀察TFE對(duì)生殖器官重量的影響;并檢測(cè)不同年齡大鼠應(yīng)用相同劑量的TFE灌胃給藥7 d后,體內(nèi)睪酮、雌二醇、黃體生成素水平的變化。結(jié)果顯示,TFE可增加未成年大鼠生殖器官重量,提高性激素分泌水平,并能顯著促進(jìn)離體大鼠間質(zhì)細(xì)胞睪酮基礎(chǔ)分泌。因此,TFE可促進(jìn)雄性生殖系統(tǒng)和生殖內(nèi)分泌功能。

6 抗炎作用

張逸凡等[17]通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明了200、400 mg/kg的TFE對(duì)巴豆油所致小鼠耳腫脹、醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加有顯著抑制作用,而70、140 mg/kg的TFE可顯著抑制角叉菜膠所致大鼠足腫脹,140、280 mg/kg的TFE對(duì)巴豆油所致肉芽組織增生具有顯著抑制作用,并可抑制慢性炎癥發(fā)生。另外,280 mg/kg的TFE對(duì)佐劑關(guān)節(jié)炎大鼠的原發(fā)性和繼發(fā)性足腫脹均有顯著抑制作用。

7 抗腫瘤作用

張玲等[18]應(yīng)用 MTT法,NBT、Giemsa染色法,TRAP-PCR檢測(cè)法,流式細(xì)胞術(shù)以及RTPCR檢測(cè)法檢測(cè)淫羊藿甙(ICA)抑制腫瘤HL-60細(xì)胞端粒酶活性及作用機(jī)制,結(jié)果顯示,ICA對(duì)于HL-60細(xì)胞端粒酶火星的抑制作用可能是通過(guò)基因-蛋白-細(xì)胞的級(jí)聯(lián)調(diào)節(jié)作用完成的。

8 總結(jié)與展望

Wu等[19]研究了老化對(duì)小鼠尿代謝物的影響以及 TFE的抗衰老作用。研究中分別對(duì)4、10、18、24個(gè)月以及應(yīng)用TFE治療的小鼠進(jìn)行質(zhì)子核磁共振分析,結(jié)果顯示大多數(shù)共振態(tài)與小鼠年齡高度相關(guān);應(yīng)用TFE治療的24個(gè)月小鼠的代謝情況與18個(gè)月小鼠相似;另外,大多數(shù)共振態(tài)結(jié)果顯示應(yīng)用TFE治療的小鼠更加年輕。本研究說(shuō)明TFE治療可顯著影響老化進(jìn)程,顯示出抗衰老作用。

9 抗衰老作用

淫羊藿的多種藥理活性使得其具有較高的藥用價(jià)值,但目前對(duì)于淫羊藿各種化學(xué)成分的研究尚不十分深入[20-21]。因此,針對(duì)當(dāng)前發(fā)病率較高的疾病,如腫瘤、心腦血管疾病、腫瘤等,對(duì)淫羊藿開(kāi)展更深入、更全面的研究具有深遠(yuǎn)的意義和廣闊的前景,可以為臨床帶來(lái)更多獲益。

[1] 許蘭芝,蔣淑君.腎陽(yáng)虛大鼠下丘腦-垂體-甲狀腺軸內(nèi)分泌及鈣調(diào)蛋白基因表達(dá)與淫羊藿總黃酮的干預(yù)[J].中國(guó)臨床康復(fù),2006,10(11):138.

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