人表皮生長(zhǎng)因子受體-2在胃癌組織中的表達(dá)及意義

劉 莉，姜 勇，李 麗，劉都禮

(1.成都大學(xué)附屬醫(yī)院病理科，四川 成都 610081;2.四川大學(xué)華西醫(yī)院病理科，四川 成都 610041)

胃癌是我國(guó)最常見的消化道惡性腫瘤之一，手術(shù)與化療仍是治療胃癌的主要手段。隨著腫瘤分子生物學(xué)的發(fā)展，分子靶向藥物治療成為目前腫瘤治療的一個(gè)熱點(diǎn)。靶向治療聯(lián)合化療應(yīng)用已開始進(jìn)行臨床試驗(yàn)［1-3］，人表皮生長(zhǎng)因子受體-2(human epidermal growth factor receptor 2，HER-2)是胃癌靶向治療的靶點(diǎn)基因。本研究采用免疫組化方法檢測(cè)胃癌組織中HER-2的表達(dá)，旨在探討HER-2與胃癌臨床病理特征的關(guān)系，為臨床分子靶向藥物的選擇提供參考，也為胃癌的預(yù)后判斷提供客觀的參考指標(biāo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2009年6月至2010年6月在成都大學(xué)附屬醫(yī)院和四川大學(xué)華西醫(yī)院行根治性手術(shù)的胃癌手術(shù)標(biāo)本70例進(jìn)行研究。全部病例術(shù)前均未行放、化療。男43例，女27例，年齡22～87歲，平均年齡53.23歲。腫瘤直徑0.8～15.0 cm，平均4.56 cm。腫瘤部位:胃上部(賁門/胃底)20例，中部(胃體)17例，下部(胃竇/幽門)33例。分化程度:高、中分化30例，低分化及印戒細(xì)胞癌40例。侵襲深度:未侵及漿膜45例，侵及漿膜25例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況:有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移49例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移21例。根據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)關(guān)于胃癌TNM分期方法進(jìn)行臨床分期，Ⅰ期/Ⅱ期32例，Ⅲ期/Ⅳ期38例。

1.2 方法 主要試劑:HER-2，鼠抗人單克隆抗體，編號(hào)ZM-0065，克隆號(hào):B68。試劑盒選用即用型免疫組化二步法Elnvision廣譜染色試劑盒及DAB顯色試劑盒，均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。方法:腫瘤組織標(biāo)本均經(jīng)甲醛固定、石蠟包埋，并經(jīng)HE染色組織學(xué)確診。免疫組化采用Envision二步法，嚴(yán)格按產(chǎn)品說明書操作。鏡下圖像以O(shè)lympus數(shù)碼顯微成像系統(tǒng)BX40進(jìn)行采集、分析。

1.3 結(jié)果判定 參照修訂后的HercepTestP評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［1］，0為沒有染色或＜10%的瘤細(xì)胞有膜染色;1+為＞10%的瘤細(xì)胞有微弱的膜染色，或瘤細(xì)胞只有部分膜染色;2+為＞10%的瘤細(xì)胞有弱到中等的完全或基底外側(cè)膜染色;3+為＞10%的瘤細(xì)胞有中等到強(qiáng)的完全或基底外側(cè)膜染色。用PBS代替一抗作陰性對(duì)照。每張切片由二位高年資病理醫(yī)師閱片判讀。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料采用兩個(gè)(或多個(gè))樣本率比較的χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HER-2基因在胃癌組織中的表達(dá)情況 HER-2陽性定位于細(xì)胞膜，呈棕褐色顆粒狀，部分細(xì)胞漿著色(圖1)。陽性表達(dá)率為27.1%(19/70)，過表達(dá)率為15.7%(11/70)。

圖1 胃癌組織HER-2的免疫組化染色(×400)

2.2 HER-2基因表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系HER-2在胃癌組織中的表達(dá)與腫瘤分化程度、侵襲深度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及 TNM分期有關(guān)(P＜0.05)，而與患者的性別、年齡、腫瘤部位和大小無關(guān)(P＞0.05)。分化好的胃癌病例陽性表達(dá)明顯高于低分化癌，見表1。

3 討論

HER-2也稱為 c-erB-2或 HER-2/neu，屬于HER/ErbB家族的四個(gè)成員之一。HER-2單體無活性，必須形成二聚體才能產(chǎn)生活化信號(hào)。HER-2異質(zhì)二聚體大大減弱了EGFR與cab1的偶聯(lián)，減少了EGFR在細(xì)胞內(nèi)吞過程中的降解，促進(jìn)EGFR循環(huán)回到細(xì)胞膜，使EGFR在細(xì)胞膜過度表達(dá)，加速了細(xì)胞的增殖，導(dǎo)致腫瘤的形成和增長(zhǎng)加快。國(guó)內(nèi)張杰等［4］通過對(duì)123例胃癌組織的研究認(rèn)為HER-2/ neu基因擴(kuò)增或過表達(dá)與胃癌患者的預(yù)后有明顯關(guān)系，特別是有該基因擴(kuò)增的患者，其術(shù)后死亡率高、生存期短、預(yù)后差。本研究結(jié)果顯示:HER-2在胃癌組織中的陽性率為27.1%，在胃癌中過表達(dá)率(IHC3+)為15.7%。而ToGAⅢ期臨床試驗(yàn)［1］研究的IHC3+為5.9%～32.8%，在不同國(guó)家和地區(qū)差異較大。

表1 胃癌組織中HER-2的表達(dá)與其臨床病理參數(shù)的關(guān)系

本研究還顯示HER-2表達(dá)隨腫瘤分化越高表達(dá)越強(qiáng)，HER-2陽性表達(dá)與胃癌的侵襲、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，和文獻(xiàn)基本一致。說明HER-2參與了胃癌的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等行為，HER-2過表達(dá)提示胃癌患者預(yù)后越差，并且HER-2已經(jīng)成為胃癌靶向治療的靶標(biāo)［5.6］。

曲妥珠單抗作為乳腺癌治療的第一個(gè)分子靶向藥物，已在HER-2過表達(dá)的乳腺癌臨床治療中取得了明顯療效。篩選患者時(shí)，HER2蛋白表達(dá)IHC3+可以直接進(jìn)行靶向治療，IHC2+則需進(jìn)行熒光原位雜交(FISH)基因檢測(cè)。IHC3+患者可避免做FISH檢測(cè)的高昂費(fèi)用。曲妥珠單抗在胃癌中的應(yīng)用和HER2檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化尚在研究中。Tanner等［7］曾專門進(jìn)行了曲妥珠單抗對(duì)胃癌和乳腺癌藥物敏感性比較的研究，發(fā)現(xiàn)兩種腫瘤對(duì)曲妥珠單抗的敏感性相同，因此曲妥珠單抗臨床治療HER-2高表達(dá)的胃癌理應(yīng)有效。在2009美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)(ASCO)年會(huì)上，曲妥珠單抗治療HER-2陽性胃癌的ToGA研究結(jié)果［1］格外引人矚目。在3807例晚期胃癌患者中，HER-2陽性表達(dá)率為22.1%，曲妥珠單抗與化療聯(lián)合的療效明顯優(yōu)于單純化療。曲妥珠單抗成為HER-2陽性胃癌患者的重要治療藥物。本研究結(jié)果提示，檢測(cè)胃癌組織中HER-2的表達(dá)有助于篩選對(duì)曲妥珠單抗治療敏感的胃癌患者，同時(shí)對(duì)胃癌患者的預(yù)后評(píng)價(jià)提供參考。

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