燈盞生脈滴丸的制備工藝研究

趙惠茹，馮素香，靖會(huì)

(1.西安醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，陜西西安710021;2.河南中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，河南鄭州450008)

燈盞生脈膠囊由燈盞細(xì)辛、人參、五味子、麥冬組成，具有益氣養(yǎng)陰、活血健腦之功效，臨床上用于氣陰兩虛，瘀阻腦絡(luò)引起的胸痹心痛、中風(fēng)后遺癥［1-3］。其有效化學(xué)成分為燈盞乙素、芹菜素、高黃芹菜素等黃酮類化合物及二咖啡?？鼘幩岬龋?-6］。因該復(fù)方制劑中有部分難溶性組分不利于藥物的吸收利用，為達(dá)到提高藥物的生物利用度，增加藥物的穩(wěn)定性，確保藥物的質(zhì)量和療效的目的，故將其制成滴丸劑。本實(shí)驗(yàn)對(duì)燈盞生脈滴丸制備工藝進(jìn)行了研究，并以燈盞生脈膠囊劑作對(duì)照考察了其體外溶出度。

1 試藥與儀器

燈盞細(xì)辛、人參、五味子、麥冬購自西安市藥材公司;聚乙二醇-4000(河北省邢臺(tái)科王助劑有限公司);聚乙二醇-6000(上海光明化工廠);液體石蠟(廣州市德隆化工貿(mào)易有限公司);DY-201-100硅油、DY-201-200硅油、DY-201-300硅油(山東大易化工有限公司);野黃芩苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110842-200705);甲醇、四氫呋喃為色譜純，其余試劑均為分析純;燈盞生脈膠囊(云南生物谷燈盞花藥業(yè)有限公司規(guī)格:0.18g/粒);高效液相色譜儀(LC—10ATvp泵，SPD—M10Avp二極管陣列檢測(cè)器，日本島津公司);DWJ—2000型滴丸機(jī)(山東煙臺(tái)康達(dá)爾藥業(yè)有限公司);ZLPG—25型噴霧干燥機(jī)(常州市遠(yuǎn)宇干燥設(shè)備有限公司);ZRS—8G智能溶出儀(天津大學(xué)天發(fā)科技有限公司)。

2 滴丸制備的方法與結(jié)果

2.1 藥材的提取以上四味藥材，粉碎成粗粉，加75%乙醇回流提取3次，第1次、第2次加10倍量，各提取2 h，第3次加8倍量，提取1 h，合并提取液，減壓濃縮至約20 mL，用正丁醇提取3次，每次15 mL，合并正丁醇提取液，減壓濃縮至無正丁醇味，加水10 mL，加熱溶解，再加稀氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至7，濾過，濾液噴霧干燥，分別稱定質(zhì)量，計(jì)算藥粉收率為(3.06±0.31)%，HPLC法測(cè)定其燈盞乙素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(10.86±0.29)%。

2.2 滴丸制備工藝稱取基質(zhì)適量，置燒杯中水浴加熱溶融，加入噴霧干燥所得藥粉(過100目篩)，混勻，保溫滴制，滴入冷卻劑中滴制成丸，用濾紙吸除其表面的冷卻劑，即得。

2.3 基質(zhì)的選擇滴丸常選用水溶性基質(zhì)以發(fā)揮速效作用。聚乙二醇類基質(zhì)可用于釋放水溶性或油溶性藥物，同時(shí)能容納部分液體藥物，是比較理想的水溶性基質(zhì)［7］。本實(shí)驗(yàn)以聚乙二醇4000和聚乙二醇6000為備選基質(zhì)，按上述工藝制備滴丸，用10分制對(duì)包括滴丸成型性、外形、圓整度、硬度和光澤度在內(nèi)的外觀質(zhì)量評(píng)分，以確定比較理想的基質(zhì)及其用量。結(jié)果見表1。

表1 不同基質(zhì)對(duì)滴丸外觀質(zhì)量的影響

從表1可以看出:單獨(dú)用聚乙二醇4000或聚乙二醇6000為基質(zhì)時(shí)，滴丸的外觀質(zhì)量均不佳，而選用聚乙二醇4000∶聚乙二醇6000(2∶3)作為滴丸的基質(zhì)較好。

2.4 冷卻劑的選擇冷卻劑是滴丸劑的重要助劑，其密度和黏度直接影響著藥液的沉降速度和滴丸的圓整度，本實(shí)驗(yàn)以聚乙二醇4000∶聚乙二醇6000(2∶3)作為滴丸的基質(zhì)，以液體石蠟和二甲基硅油為備選冷卻劑，按上述工藝制備滴丸，結(jié)果可見用液體石蠟、二甲基硅油DY-201-200和DY-201-300作冷卻劑，沉降速度及圓整性均不理想;而在二甲基硅油DY-201-100中下沉速度適中且成型圓整，故選其為冷卻劑。

2.5 藥物與基質(zhì)配比的選擇本實(shí)驗(yàn)在制作滴丸的配方設(shè)計(jì)時(shí)，按藥物與基質(zhì)的配比分別為1∶1、1∶2、1∶3、1∶4進(jìn)行了研究。選擇聚乙二醇4000∶聚乙二醇6000(2∶3)為基質(zhì)，二甲基硅油DY-201-100為冷卻劑，以丸重變異系數(shù)、溶散時(shí)限和用10分制對(duì)包括滴丸成型性、外形、圓整度、硬度和光澤度在內(nèi)的外觀質(zhì)量評(píng)分，以確定比較理想的藥物與基質(zhì)的比例。結(jié)果見表2。

表2 藥物與基質(zhì)配比對(duì)滴丸成型的影響

由試驗(yàn)結(jié)果可知，當(dāng)基質(zhì)的比例愈大時(shí)，滴丸的成型率愈高，滴制愈容易，丸劑的外觀質(zhì)量愈好，丸重的變異系數(shù)愈小，相對(duì)溶散時(shí)限愈短。當(dāng)藥物與基質(zhì)的比例小于1∶2時(shí)，滴丸劑的成型性不佳，外觀質(zhì)量也不符合滴丸劑的規(guī)定。因此，為了保證滴丸劑的質(zhì)量，同時(shí)保證藥物的療效，選擇藥物與基質(zhì)的比例為1∶3。

2.6 滴頭口徑大小的選擇分別考察滴頭口徑(內(nèi)-外徑)為3.0～3.5 mm、3.5～4.5 mm、4.0～5.5 mm時(shí)滴丸的成型情況。結(jié)果表明，當(dāng)?shù)慰诒谳^厚時(shí)，有些液滴需要充滿整個(gè)滴口外壁后才能下滴，而有些液滴則直接沿著滴口內(nèi)徑往下滴，故滴丸大小不均勻，丸重差異較大;當(dāng)?shù)慰诒谳^薄時(shí)，丸重差異愈小且圓整度好。故選擇滴頭口徑(內(nèi)-外徑)為3.0～3.5 mm。

2.7 滴丸成型工藝的選擇在前述單因素篩選出基質(zhì)的種類及配比、冷卻劑的種類、載藥量、滴頭口徑大小等試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選出對(duì)滴丸成型影響最大的4個(gè)因素即藥液溫度(A)、冷卻劑溫度(B)、滴速(C)及滴距(D)為考察因素，以丸重變異系數(shù)、溶散時(shí)限及用10分制對(duì)包括滴丸成型性、外形、圓整度、硬度和光澤度在內(nèi)的外觀質(zhì)量作為考察指標(biāo)，采用L9(34)正交表進(jìn)行試驗(yàn)。根據(jù)各指標(biāo)對(duì)制備工藝影響的重要程度，分別給予相應(yīng)的權(quán)重，進(jìn)行綜合評(píng)分來確定最佳制備工藝。綜合評(píng)分=丸重變異系數(shù)評(píng)分×0.3+溶散時(shí)限評(píng)分×0.3+外觀質(zhì)量評(píng)分×0.4。正交設(shè)計(jì)及結(jié)果見表3、表4、表5。

表3 因素水平

表4 L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

表5 方差分析

由表4、表5可知，影響滴丸成型的主次因素為B＞A＞C＞D，因素B、A、C即冷卻劑的溫度、藥液溫度和滴速對(duì)試驗(yàn)結(jié)果均有顯著性影響。根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，選取顯著因素的最好水平，得到最佳滴制條件為A2B2C1D3，即:藥液的溫度為85℃保溫滴制，冷卻劑的溫度為5～10℃，滴速為35滴/min，滴口距冷卻液面6 cm。

2.8 驗(yàn)證試驗(yàn)因?yàn)锳2B2C1D3不是正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表中的組合，因此按照最佳滴制工藝條件重復(fù)制備3批滴丸樣品，對(duì)樣品丸重變異系數(shù)、溶散時(shí)限及外觀質(zhì)量進(jìn)行檢查，結(jié)果見表6。

表6 燈盞生脈滴丸驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明，用正交試驗(yàn)優(yōu)選燈盞生脈滴丸制備工藝穩(wěn)定可行。

3 體外溶出度試驗(yàn)

3.1 色譜條件Hypersil-C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，檢測(cè)波長(zhǎng)335 nm，流動(dòng)相甲醇-四氫呋喃-0.2%磷酸水(15∶15∶70)，體積流量1.0 mL/min，柱溫為室溫。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取野黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇溶解并稀釋至每1 mL含野黃芩苷0.064 mg的對(duì)照品溶液。分別精密吸取此對(duì)照品溶液1、5、10、15、20 mL置25 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。按照3.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積。以野黃芩苷對(duì)照品進(jìn)樣量X為橫坐標(biāo)，峰面積Y為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:Y=3.62×106X+2.14×104，r=0.999 7，結(jié)果表明野黃芩苷在7.00～160.0 μg/mL范圍內(nèi)進(jìn)樣量與峰面積呈良好線性關(guān)系。

3.3 回收率采用標(biāo)準(zhǔn)添加法，用3個(gè)不同質(zhì)量濃度測(cè)定回收率，加入量為規(guī)定量的80%、100%、120%，平均回收率為94.78%(n=9)，RSD為0.94%。

3.4 精密度制備含野黃芩苷高、中、低3種質(zhì)量濃度的溶液，每個(gè)質(zhì)量濃度測(cè)定5次，記錄峰面積，結(jié)果表明，3種質(zhì)量濃度的RSD均小于0.83%(n=5)。

3.5 體外溶出度測(cè)定按照《中國(guó)藥典》2010年版規(guī)定釋放度測(cè)定法中的測(cè)定法(漿法)［8］，分別取實(shí)驗(yàn)室自制燈盞生脈滴丸3批和燈盞生脈膠囊，以0.5%十二烷基硫酸鈉水溶液900 mL作為溶出介質(zhì)，維持溫度37℃，轉(zhuǎn)速100 r/min，分別于5、8、10、15、20、30、45、60 min取樣5 mL(同時(shí)補(bǔ)加預(yù)溫好的同體積的空白介質(zhì))，經(jīng)0.45 μm的微孔濾膜過濾后，取續(xù)濾液2 mL，在3.1項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣，記錄峰面積，按標(biāo)準(zhǔn)曲線求得質(zhì)量濃度。計(jì)算溶出度。結(jié)果見圖1。

圖1 燈盞生脈滴丸與膠囊的溶出度曲線

由圖1可見:與燈盞生脈膠囊比較，滴丸體外溶出度有所增加，30 min內(nèi)滴丸累積釋放量達(dá)到91.07%，而燈盞生脈膠囊累積釋放量為80.23%。

4 討論

4.1 PEG4000和PEG6000均是常用的滴丸劑基質(zhì)，在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)單用PEG6000與藥粉混合后黏稠度較大，滴制困難，易拖尾。而單用PEG4000滴丸硬度又不夠，而采用PEG4000∶PEG6000(2∶3)為混合基質(zhì)，藥液黏度適中，可以順利滴制成丸，且外觀質(zhì)量評(píng)分最高。

4.2 試驗(yàn)中選用的冷卻劑二甲基硅油的表面張力比較?。?］，由試驗(yàn)結(jié)果可見:其種類、密度、黏度會(huì)影響滴丸的沉降速度和圓整度。二甲基硅油的密度、黏度越大，滴丸沉降越慢，滴丸易變成扁圓形。由于二甲基硅油DY-201-100黏度適中，滴丸下沉速度合適且成型圓整，因此適合于燈盞生脈滴丸的制備。

4.3 滴丸的成型和質(zhì)量受各種因素的影響，因此在用正交試驗(yàn)法優(yōu)選制備工藝時(shí)，難于用一個(gè)指標(biāo)來衡量。本研究采用丸重變異系數(shù)、溶散時(shí)限及外觀質(zhì)量作為評(píng)價(jià)工藝優(yōu)劣的指標(biāo)，結(jié)果更合理可靠。

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