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      耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的檢測與耐藥性的研究進展

      2012-01-24 16:54:21
      中國醫(yī)藥導報 2012年2期
      關鍵詞:耐甲氧西林金黃色

      馮 明

      廣西壯族自治區(qū)賀州市人民醫(yī)院檢驗科,廣西 賀州 542800

      自抗菌藥物聞世之后,使得許多感染性疾病得到了救治,其實效已經得到了臨床的證實。但隨著抗菌藥物的廣泛使用,細菌的生態(tài)亦發(fā)生了變化,致使耐藥菌群越來越多。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 (methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA)是目前醫(yī)院感染最常見的致病菌之一。由于其傳播速度快,流行范圍廣泛,多部位感染,并且表現(xiàn)出多重耐藥性,已與乙型肝炎(HBV)、艾滋病(AIDS)并列世界范圍內的三大難解決的感染性疾病[1]。因此,遏止MRSA的產生及其耐藥機制一直是國內外醫(yī)學工作者研究的熱點。本文就近年國內外對MRSA的檢測方法及其耐藥機制的研究進展進行綜述如下:

      1 耐甲氧西林的金色葡萄球菌產生的原因與后果

      MRSA致病性強,在全球范圍內感染率不斷增加,是引起院內感染的重要致病菌[2]。Jevons于1961年在英國首次報道了MRSA,但到了20世紀80年代后期MRSA在已成為全球性的病原微生物,并居醫(yī)院感染病原菌的首位。據閏中期等[3]報道,MRSA在綜合性三級甲等醫(yī)院的檢出率都在80%左右。魏軍等[4]認為,在金黃色葡萄球菌中,MRSA占64.1%。稍高于肖永紅于2006~2007年Mohnarin細菌耐藥監(jiān)測研究組全國84所醫(yī)院MRSA檢測結果 (56.1%)。有資料顯示,MRSA的感染季節(jié)集中在春、秋、冬三季,這與此時期呼吸系統(tǒng)較易受到感染有關[5]。

      孫玉明等[6]研究顯示,成人院內金黃色葡萄球菌感染中,MRSA所占比較高,達81.8%~92.0%,神經外科ICU可達100.0%。有研究證據表明,MRSA感染致病后可引起難以控制的致命的敗血癥[7]。MRSA所造成的院內感染一直是臨床普遍關注的問題[8],MRSA的出現(xiàn),為臨床治療帶來了極大的挑戰(zhàn)[9]。

      2 耐甲氧西林的金色葡萄球菌的易感人群

      由于人體是金黃色葡萄球菌的天然宿主,有30%~50%的健康成人體表有金黃色葡萄球菌定植,其中10%~20%是永久定植,定植率高的人群主要包括1型糖尿病、靜脈吸毒、血液病、獲得性免疫功能缺陷或者是外科手術術后患者。研究顯示,ICU新入患者的MRSA定植率為11.9%[10]。

      MRSA在住院患者和醫(yī)務人員中的攜帶率非常高,是院內交叉感染的重要傳染源,而手是傳播MRSA的關鍵性媒介[11]。而國外流行病學調查表明,來自急診室和社區(qū)的患者也可能攜帶有MRSA。同時MRSA可能通過患者、家屬、醫(yī)護人員的相互密切接觸進行傳播,對于患者是一個極大的威脅。由于MRSA體外生存能力較強,對β內酰胺類抗生素及其他多種抗生素高度、多重耐藥,存活長,傳染性較強,臨床治療頗為棘手。

      3 耐甲氧西林的金色葡萄球菌的耐藥機制

      MRSA耐藥問題已成為臨床上的主要問題。MRSA的耐藥機制雖未完全闡明,但已證實與細菌產生的一種新的青霉素結合蛋白2a(PBP2a)密切相關。金黃色葡萄球菌對β內酰胺類藥物的耐藥機制主要包括產β內酰胺酶和PBP2a的突變[12]。美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)文件指出,一旦金黃色葡萄球菌檢出mecA基因或PBP2a蛋白即可定為MRSA[13]。

      參照NCCLS標準,從臨床標本分離的金黃色葡萄球菌轉種至LB培養(yǎng)基,培養(yǎng)24 h,配成1×1010cfu/L的細菌懸液,沾取1.2 μL接種至MH瓊脂板上 (MH平板含40 g/L NaCl,對倍稀釋的苯唑西林)直徑5~8 mm的圓形區(qū),32℃孵育48 h后觀察結果,MIC≥4 mg/L即為MRSA。從藥敏結果分析,MRSA通過不同的機制對氨基苷類、大環(huán)內酯類、氯霉素和四環(huán)素等耐藥,但是通常對萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺及一些氟喹諾酮類敏感[14]。汪鈴等[15]研究認為,MRSA呈多重耐藥特點,MRSA對利奈唑胺、替考拉寧、萬古霉素敏感率為100%。萬古霉素屬快速殺菌劑,對MRSA具有較佳的抗菌效果。吳超[16]認為MRSA表現(xiàn)出多重耐藥,耐藥譜越來越廣。2002年自美國報道了第1株耐萬古霉素金黃色葡萄球菌(VRSA)以來,先后出現(xiàn)了3株VRSA[17]。

      近年來MRSA感染率逐年增加,人們逐漸發(fā)現(xiàn)MRSA幾乎對所有β內酰胺類抗生素耐藥,甚至累及紅霉素、環(huán)丙沙星和慶大霉素[18],成為臨床治療的難點。

      4 耐甲氧西林的金色葡萄球菌的檢測方法

      由MRSA引起的感染已經成為臨床抗感染治療的難題之一。如何快速、準確地檢測出MRSA及預測其耐藥性變化對細菌耐藥的檢測及耐藥機制的研究是全球醫(yī)藥界傾力關注的焦點問題,為此臨床實驗室準確、快速地對該類菌株進行篩選和確認,是控制MRSA感染的關鍵。依據藥敏試驗結果,不僅可指導選擇合適的抗生素,還有利于控制MRSA的傳播。因此檢驗科室應提高細菌培養(yǎng)和監(jiān)測技術水平,特別是應縮短報告時間,為MRSA感染提供準確的診斷依據。

      目前臨床常用的方法有紙片擴散法、肉湯稀釋法、瓊脂篩選法、分子生物學診斷方法等,國內許多大中型醫(yī)院都在使用Vitek-32型全自動細菌分析系統(tǒng)(Vitek-32 AMS)進行對MRSA的檢測(儀器法)和藥敏實驗[19]。其中包括有頭孢西丁紙片擴散法(FOX法)和苯唑西林鹽瓊脂紙片擴散法(OXA法)。李蓓等[20]對紙片擴散法(CLSI推薦)、乳膠凝集法和PCR方法進行比較,由于其僅對52例樣本進行了檢測,顯示3種方法檢測的差異無統(tǒng)計學意義。隨著PCR技術尤其是熒光標記技術的發(fā)展,目前臨床上多采用熒光PCR方法檢測MRSA也更為精確的。

      5 耐甲氧西林的金色葡萄球菌的預防和治療

      由于MRSA的多重高度耐藥,臨床上抗生素的應用譜已較為狹窄,所以應合理使用抗生素,延緩或減少耐藥菌株的產生,控制耐藥菌株的擴散和流行,有利于疾病的治療,應做到以下幾點:①避免濫用抗生素,積極控制院內感染。對感染者的治療要綜合考慮臨床表現(xiàn)、病原學、用藥史,并結合臨床診斷,根據細菌對藥物的敏感試驗選擇抗菌藥物。②定期對病房進行消毒,對MRSA感染或攜帶者進行隔離或床邊隔離。③篩查新入患者,對新入院患者進行MRSA篩查有利于減低醫(yī)院內MRSA感染的發(fā)生率[21]。新入患者的MRSA篩查作為一個獨立的有利因素已經被許多感染管理機構認同,并推廣到各個醫(yī)院成為感染管理控制的法規(guī)條例[22]。④醫(yī)務人員的規(guī)范化洗手。MRSA的主要傳播方式是定植或感染患者所帶細菌經醫(yī)護人員的手傳播至其他患者,為接觸性傳播[23]。所以規(guī)范化洗手也是相當重要的。尹利華等[24]研究證實,手部清潔是預防醫(yī)院獲得性感染最簡單,同時也是最有效的措施。

      6 小結與展望

      MRSA是目前醫(yī)院感染的重要病原體之一,越來越引起醫(yī)學界的重視。雖然受菌株來源、藥敏試驗的方法、測試條件、抗菌藥物選用等不同條件的影響,使MRSA在各醫(yī)院的檢出有一些差異,由于MRSA對多種抗菌藥物耐藥,造成臨床治療困難,已引起臨床普遍關注與重視[25]。

      雖然目前萬古霉素仍是治療金黃色葡萄球菌感染最有效的藥物,但隨著該藥物在臨床上的用量增加,臨床上已出現(xiàn)了對萬古霉素產生耐藥的MRSA[26]。為此國內外醫(yī)學工作者不斷探討新的治療方法和篩選敏感的抗生素。

      用利奈唑胺治療MRSA感染療效顯著,其抗菌機制是利奈唑胺與細菌50S核糖體亞單位結合,終止蛋白質合成的最早階段。我國有著非常豐富的中草藥資源,已經證實多種中草藥及其成分有抑菌或抗菌作用。部分中草藥通過提高機體的免疫功能、降低抗生素的毒副作用、增強抗菌藥物的作用,間接體現(xiàn)抗菌或抑菌作用,近年來,中藥抗MRSA耐藥性的研究也倍受關注。

      綜上所述,由于MRSA的危害表現(xiàn)是對多種抗菌藥物的嚴重耐藥性,所以長期大量使用抗生素會使MRSA甚至MSSA的耐藥譜更加擴大,耐藥率會進一步上升,因此,必須加強對抗菌藥物的合理應用和管理,特別是臨床醫(yī)生應根據藥敏試驗結果選擇抗生素,這才是防止MRSA流行的最有效措施。

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