260例乙型肝炎兩對半檢測結(jié)果分析

苗 靜

（長春市綠園區(qū)婦幼保健院，吉林 長春 130062）

目前臨床上對于乙型肝炎的檢測主要依據(jù)病毒感染肝細胞后產(chǎn)生的相應的血清學指標，主要指：乙型肝炎表面抗原（HBsAg）-表面抗體（抗-HBs）；乙型肝炎e抗原（HBeAg）-e抗體（抗-HBe）；乙型肝炎核心抗原（HBcAg）-核心抗體（抗-HBc）。因血清中檢測不到游離的核心抗原，臨床上只檢測其他的五項指標即通常所稱的乙型肝炎兩對半[1-4]。為了提高對乙型病毒性肝炎的預防、診斷、治療水平，提高檢測準確性，本文對2009年12月至2011年12月來我院檢測的260例患者的結(jié)果進行分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年12月至2011年12月期間我院收集的260例乙型肝炎兩對半患者的血清樣本，其中男170例，女90例；年齡為23～65歲，平均為44歲。

1.2 檢測方法

病毒血清標志物的檢測按說明書關于操作步驟及陰陽性判斷標準的要求嚴格進行。

1.2.1 材料

標本：患者空腹，檢測當日清晨采肘靜脈血3～5mL，分離出血清待檢。試劑盒：英科新創(chuàng)乙型肝炎兩對半檢測試劑盒，各試劑盒的反應板上已經(jīng)包被好相應的抗原或抗體。其他：微量移液器，吸頭，37℃恒溫箱，洗滌液，吸水紙，離心機等。

1.2.2 檢測步驟

乙型肝炎兩對半檢測采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）的方法。步驟如下：①離心得到患者血清標本。②取出微量反應板，依次作好標記HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc標記，各三孔。③第一排中，依次向各孔加入100μL待檢血清標本。④第二排中，依次加入1滴陽性對照血清。⑤第三排中，依次加入1滴陰性對照血清。⑥向各孔分別加入相應的酶結(jié)合物1滴，振蕩搖勻，置37℃恒溫箱恒溫30min。⑦取出后用洗滌液洗板5次，每次沖洗后拍干。⑧加入底物A、B各1滴，置37℃恒溫箱恒溫15min。⑨取出后加終止液1滴。根據(jù)顏色判定結(jié)果。

1.3 檢測結(jié)果評定

大三陽指檢測結(jié)果HBsAg、HBeAg、抗HBc均為陽性。小三陽指檢測結(jié)果HBsAg、抗HBe、抗HBc為陽性。一五陽指檢測結(jié)果中HBsAg、抗HBc為陽性。二五陽指檢測結(jié)果中抗HBs、抗HBc陽性。單五陽指檢測結(jié)果抗HBc呈陽性。

2 結(jié) 果

260例乙型肝炎患者中大三陽者90例，占34.6%；小三陽40例，占15.4%。一五陽者57例，占21.9%；二五陽者44例，16.9%；單五陽者29例，占11.2%。

3 小 結(jié)

3.1 HBV病毒感染發(fā)病機制

HBV病毒本身并不能引起疾病，它肝造成細胞損傷的主要致病機制與是病毒引起機體自身免疫系統(tǒng)的免疫清除反應。病毒經(jīng)血液侵入肝細胞，引起肝細胞結(jié)構(gòu)發(fā)生某些變化，激發(fā)自身免疫系統(tǒng)對變化的肝細胞產(chǎn)生免疫清除反應，甚至造成過度清除，進而引起肝細胞損傷。更有甚者，在某些嚴重病例中，甚至將未被病毒侵犯的肝細胞一同清除。

3.2 乙型肝炎兩對半指標意義

對相關概念的理解是對檢測結(jié)果進行客觀評價的基礎，各指標有不同的臨床指示意義。乙型肝炎兩對半包括HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc 5個檢測指標，不同指標在臨床上有不同的意義。①HBsAg是由蛋白質(zhì)組成的HBV病毒顆粒的外殼部分，反應體檢者體內(nèi)有無HBV病毒，陽性多見于急性乙型肝炎潛伏期、慢性遷延性、慢性活動性肝炎、肝硬化者體內(nèi)。②抗HBs人感染HBV以后。對HBsAg產(chǎn)生的一種免疫反應保護性抗體，它可在一定程度上中和HBsAg?？笻Bs陽性說明體檢者以曾有過HBV病毒感染史，機體抵抗力較強，產(chǎn)生了免疫；也可見于注射了乙型肝炎疫苗抗HBs免疫球蛋白者。它說明體檢者體內(nèi)有一定保護性，可以抵抗HBV病毒入侵。③HBeAg是HBV病毒核心中的一種可溶性蛋白質(zhì)，可經(jīng)被感染的肝細胞入血，游離存在于血液中。HBeAg增高表示體檢者體內(nèi)存在病毒復制，常見于乙型肝炎早期或活動期，表明有較強傳染性。如果HBeAg持續(xù)陽性超過10周，患者則極有進展為慢性持續(xù)性感染的可能，通常肝組織也會有較嚴重的損害。④抗HBe是體檢者體內(nèi)病毒復制受抑的指征。⑤抗HBc是體檢者有無感染過病毒的指征，通常作為乙型肝炎急性感染窗口期或既往感染遺跡而存在。另據(jù)文獻報道，抗HBc于健康人中也約有超過25%的可能測到。

3.3 乙型肝炎兩對半檢測的質(zhì)量控制

質(zhì)量控制是乙型肝炎兩對半檢測結(jié)果準確可靠的前提和保證。

3.3.1 室間質(zhì)評。衛(wèi)生部臨床檢驗中心自1988年起在全國開展乙型肝炎血清標志物檢驗的質(zhì)量評價活動，并制定相應的臨床檢驗室間質(zhì)量評價方案（EQA）。我院每年都會按照規(guī)定進行3次的室間質(zhì)量評價。

3.3.2 室內(nèi)質(zhì)控。雖然室間質(zhì)評在一定程度上可以提高定量檢測的水平，但每年3次的數(shù)量顯然不能滿足對全部結(jié)果準確性的要求，對實驗報告而言，室內(nèi)質(zhì)控就顯得更為重要，它對保證日常檢驗結(jié)果準確性意義更明顯。特別需注意實驗室操作人員主觀意識、責任心程度能更真實反映其檢測水平。宏觀上具體做法包括：①工作環(huán)境：作為一種精密的光學儀器酶標儀，對周圍工作環(huán)境的要求也十分嚴格。儀器放置環(huán)境的磁場、噪聲、陽光直射，工作臺面是否干燥、干凈、平整，操作空間是否足夠都會對儀器的使用產(chǎn)生影響，進而影響監(jiān)測數(shù)據(jù)的準確性和穩(wěn)定性，并對儀器的壽命產(chǎn)生影響。②操作注意事項：酶聯(lián)免疫試劑盒的使用必須按照說明進行，用來讀取反應結(jié)果的酶標儀的使用也應嚴格按規(guī)范進行。③準確性：準確性是指結(jié)果要真實可靠，檢測的準確性要求進行全面質(zhì)量控制包括對干擾因素、操作規(guī)范、科學方法的不斷提高。④精確性：精確性是指結(jié)果要可重復[5]。

此外，正確的檢測方法對于結(jié)果的準確性十分重要。酶聯(lián)免疫吸附試驗操作中需要注意的事項：①微孔板的質(zhì)量：試劑盒中包被好的微孔板的吸附強度、透光度、均一性，對檢驗結(jié)果影響明顯。②加樣：加樣時要務必一個樣品只使用一個加樣頭，以防止引起交叉污染，同時要注意加樣頭的消毒、回收。酶標抗體加樣過程中應防止加樣頭與已加入樣本的微孔板壁接觸。③樣品：樣品送檢之前，要注意保存、處置。④酶標抗體：要防止反復凍融酶標抗體，一次用不完時應及時放入冰箱恒溫4℃保存[6]。⑤洗滌：ELISA操作中最重要的環(huán)節(jié)是洗滌。洗“干凈”，是質(zhì)量保證的關鍵。有條件食物實驗室應盡可能采用機器洗滌，這是必要，它對于減輕交叉污染，保持結(jié)果一致性有重要意義。⑥溫育：溫育要注意溫箱的溫度應符合試劑盒的需求，應保證微孔板各孔“漂浮”于37℃水面上均一受熱，切記微孔板不可架在試管架上，脫離水面；微孔板也不能疊放于溫箱內(nèi)。

我國是肝炎大國，乙型肝炎病毒攜帶者比例也較大，由于乙型肝炎是一種嚴重的傳染性疾病，因此臨床上加強對人群的乙型肝炎兩對半檢測可以起到有效預防、診治乙型肝炎的作用。本研究利用英科新創(chuàng)的試劑盒采用酶聯(lián)免疫法進行檢測是目前臨床應用廣的方法之一，它靈敏度、特異性均較高，加上操作簡便，已成為目前乙型肝炎臨床診斷和篩查的常用方法，檢測結(jié)果能更準確反映出體檢者體內(nèi)真正的情況，以更好的服務于臨床。

[1]陸小華.3000名鐵路職工乙肝檢測結(jié)果分析[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2010,31(7):61-62.

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