復方加替沙星搽劑的研制

張 楊 孫安國 江蘇省連云港市海州區(qū)寧海鄉(xiāng)衛(wèi)生院 000； 江蘇省連云港市第一人民醫(yī)院藥學部

加替沙星（Gatifloxacin）是第四代氟諾酮類抗菌藥，對革蘭陽性菌和革蘭陰性菌均具有廣譜和高效的抗菌活性［1］，地塞米松具有降低毛細血管的通透性，減少炎性物滲出的作用［2］，二者合用治療細菌所致皮膚軟組織感染效果顯著。為此，根據(jù)皮膚科臨床用藥需要，筆者制備了復方加替沙星搽劑，并進行質(zhì)量控制方法的探討?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 600型HPLC儀，包括PP6型二極管陣列檢測器，empower色譜工作站（美國waters公司）；752c紫外分光光度計（上海第三分析儀器廠）；BLANSON超聲波清洗機（上海必能信）；METTLER－AE240型電子分析天平（瑞士）；電熱恒溫水浴箱（江蘇常熟醫(yī)藥器械廠）；PHS－2型酸度計（上海雷磁儀器廠）。

1.2 試藥 鹽酸加替沙星對照品及原料（重慶惠普藥業(yè)有限公司，對照品批號040901，原料批號041001）；醋酸地塞米松（天津天藥藥業(yè)股份有限公司，批號DAC061102）；其他藥物均符合《中國藥典》要求；試劑均分析純，乙腈為色譜純。

2 處方與制備

2.1 處方 加替沙星3.0g，醋酸地塞米松50mg，薄荷腦10g，二甲基亞100ml，乙醇200ml，丙二醇加至1 000ml。

2.2 制備 取加替沙星加入200ml 95%乙醇中，用1mol／L鹽酸液邊攪拌邊加至溶解備用。另取醋酸地塞米松、薄荷腦溶于二甲基亞砜中。將兩液合并攪勻濾過，加入適量丙二醇，攪勻調(diào)節(jié)pH值6.0～7.0，最后加丙二醇至1 000ml攪勻即得。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀 應為淡黃色或微黃色的澄明液體。有薄荷清香氣味。

3.2 鑒別 取本品適量（約含加替沙星30mg）置于表面皿中，在水浴上蒸干，殘渣加丙二酸約10ml，醋酐10滴置于80～90℃水浴上，加熱5～10min，溶液顯紅棕色。取本品1ml加硫酸銅試液2滴與氫氧化鈉試液（1→5）1ml，顯藍紫色，加乙醚1ml，振搖，放置，乙醚層即顯紫色，水層變成藍色。

3.3 檢查 pH值應為6.0～7.0，其他檢查應符合2010年版《中國藥典（二部）》附錄ⅠT搽劑項下有關(guān)規(guī)定。

3.4 含量測定

3.4.1 檢測波長選擇。精密稱取105℃干燥至恒重的加替沙星對照品適量，用流動相稀釋并制成濃度為10μg／ml的對照品溶液，按照紫外分光光度法［3］于200～400nm波長范圍內(nèi)掃描。結(jié)果加替沙星在293nm波長處有最大吸收，故選擇293nm為測定波長。

3.4.2 色譜條件。色譜柱SymmeryC18柱（150mm× 4.6mm，5μm）；流動相：三乙胺磷酸－乙腈（81∶19）；流速：1ml／min；檢測波長：293nm；進樣量：20μl。

3.4.3 系統(tǒng)適用性試驗。在擬定的色譜條件下，對供試品溶液、對照品溶液及空白輔料溶液進行測定，色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

可見，供試品溶液主峰的保留時間與對照品溶液主峰的保留時間一致，并且空白輔料可測定，無干擾。

3.4.4 標準曲線制備。精密稱加替沙星對照品100mg，置200ml量瓶中，用流動相溶解，并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取該稀釋液1、2、3、4、5、6、7ml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，再分別進樣20μl，測定各溶液的峰面積。以加替沙星的濃度（C）為橫坐標，峰面積（S）為縱坐標，進行回歸，得回歸方程S＝7.981×103C－5.012×103（r＝0.9993）。結(jié)果加替沙星濃度線性范圍為50～350μg／ml。

3.4.5 回收率試驗。精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的加替沙星對照品適量，按處方比例加入輔料，配成濃度為2mg／ml的加替沙星溶液，精密吸取該溶液1ml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，照3.4.4項方法操作，結(jié)果見表1。

表1 加替沙星回收率試驗結(jié)果（n＝5）

3.4.6 樣品含量測定。精密吸取樣品適量，用流動相稀釋成濃度為200μg／ml的溶液，作為供試品溶液，按3.4.2項下方法操作，以外標法計算含量，結(jié)果3批樣品中加替沙星相對含量為標示量的99.36%，101.21%，99.67%（n＝3）。

3.5 微生物限度檢查 取上述3批樣品，按《中國藥典》方法［3］檢查金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、霉菌、雜菌均符合規(guī)定。

3.6 穩(wěn)定性試驗

3.6.1 光照及熱穩(wěn)定性試驗。取上述3批樣品，分別置于強光（4500lx）、高溫（60℃）條件下，放置10d，分別于第5、10d取樣觀察測定，并于零天數(shù)據(jù)比較［3］，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，強光下本品的pH值、含量均無明顯變化，但顏色加深，顯示樣品對光照不穩(wěn)定，本制劑應避光保存。在高溫條件下，各項指標未發(fā)生明顯變化，顯示樣品對高溫穩(wěn)定。

3.6.2 留樣觀察。將3批樣品置于室溫下作留樣觀察，分別于0、4、8、12個月時，對其外觀性狀、pH值、含量等進行觀察檢測，結(jié)果均未見明顯變化。

3.7 刺激性試驗 取小白鼠10只，平均體重（20.48± 0.45）g，雌雄不限，用電剃刀在其背部脫毛1cm×1cm，將復方加替沙星搽劑每天涂3次，連續(xù)使用7d，實驗顯示，小白鼠背部皮膚無紅斑、水腫。

4 討論

采用高效液相色譜法直接測定加替沙星的含量，樣品可不經(jīng)分離，方法簡便快捷。加替沙星遇光不穩(wěn)定，在配制和貯藏時應避光。處方中加醋酸地塞米松，可迅速減少炎癥滲出，增強抗炎效果，故二者配合有較好的協(xié)同作用，由于其含量較低，故不作質(zhì)控要求。薄荷腦局部應用時，有促進血液循環(huán)、消炎、止癢、減輕浮腫等作用。二甲基亞砜為強極性溶媒，可使很多水溶性和脂溶性有機物增溶，與水、醇、丙酮能相混合，毒性低、滲透性強，并且有消炎、鎮(zhèn)痛、止癢、促進傷口愈合等作用。丙二醇的刺激性與毒性均較甘油小，黏度亦較低，涂于患處較舒適。為了使用及保存方便，筆者將復方加替沙星搽劑裝于20ml噴霧瓶中，用時對準患處直接噴霧即可。

［1］ 徐雅萍、羅燕萍、白立彥.加替沙星與4種喹諾酮類藥物體外抗菌活性比較〔J〕.中華醫(yī)院感染學雜志，2005，15（1）：76－78.

［2］ 陳新謙，等.新編藥物學〔M〕.第16版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：629.

［3］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）〔S〕.北京：化學工業(yè)出版社，2010：附錄ⅣA：22，附錄X1J：P3－P8，附錄X1XC：177.