細胞信號通路與動脈粥樣硬化

盧瓊，譚睿，崔文婷，蔡少青

細胞信號通路與動脈粥樣硬化

盧瓊，譚睿，崔文婷，蔡少青

心血管疾病是當今世界導致人類死亡的頭號疾病殺手，動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是其中常見的一種血管病變。目前認為，動脈粥樣硬化是由單核/淋巴細胞黏附并激活內皮細胞（EC）而開啟的由多種原因導致的疾病[1]。伴隨著對其研究的深入，越來越多 AS 相關的細胞因子及信號通路被發(fā)現(xiàn)，介導細胞因子活性的信號通路在 AS 的發(fā)生、發(fā)展中有重要作用。對這些細胞因子及信號通路的廣泛研究將有助于我們尋找新的抗 AS 藥物，并進一步從分子水平研究藥物抗 AS 的作用機制。本文總結了動脈粥樣硬化中相關的信號通路，并對中藥抗 AS 作用研究進行了展望。

1 炎癥通路與 AS

在 AS 形成發(fā)展的整個過程中，從早期炎癥反應期、脂紋期到成熟斑塊期以及斑塊破裂期，始終都有各種炎癥細胞及因子的參與。眾多炎性細胞因子、黏附因子、趨化因子等相互作用，相互交聯(lián)，擴大炎癥反應的級聯(lián)，促成了 AS病變的發(fā)生和發(fā)展?！把装Y學說”、“損傷-反應學說”已成為AS 發(fā)病機制的主流學說之一[2]。核轉錄因子-κB（NF-κB）、絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-aetivated protein kinase，MAPK）、Janus 激酶-信號轉導轉錄激活因子（JAK-STAT）以及 T 細胞共刺激分子介導的共刺激信號通路，在炎癥信號轉導中具有重要意義。

1.1 NF-κB 信號通路與 AS

NF-κB 是最初在鼠成熟 B 細胞和粒細胞瘤中發(fā)現(xiàn)并命名為細胞核 Kappa 輕鏈基因表達的調節(jié)子。NF-κB 是NF-κB/Rel 家族中的一員，由家族中的 p50 和 p65 組成，通常以同源或異源二聚體 p50/p65 非活性形式存在于幾乎所有類型細胞中。其中 p65 能夠使調控基因轉錄活性增強，p50 則與調控基因結合的親和力有關。在胞漿內，p50/p65二聚體與 NF-κB 抑制蛋白（IκB）結合，隱藏 p65 與靶DNA 結合的關鍵氨基酸殘基，抑制 NF-κB 與靶 DNA 調節(jié)區(qū)的特異性結合。一旦被病毒、氧化劑、炎癥細胞因子等刺激劑激活，便會與抑制蛋白（IκB）解離，轉入核內與靶基因的啟動子或增強子的 κB 位點結合，進而調控基因的表達[3]。

NF-κB 參與炎癥反應中的多種信號轉導途徑，激活后可促進促炎細胞因子、黏附分子、趨化因子、生長因子以及環(huán)氧合酶 2（cyclooxygease-2，COX-2）和誘導型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）等氧化應激相關酶基因的過度表達，引起明顯的炎癥反應，進而誘導 AS的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)，動脈粥樣硬化病灶的巨噬細胞、平滑肌細胞、內皮細胞等多種細胞中均存在活化的 NF-κB。用高脂飲食喂養(yǎng)低密度脂蛋白受體基因缺陷（LDLR-/-）的小鼠，早期即可在小鼠主動脈根部的內皮細胞中發(fā)現(xiàn)核因子 κB的活化，并且發(fā)現(xiàn)該部位逐漸發(fā)展成為動脈粥樣斑塊[4]。抑制 NF-κB 通路活化則有助于緩解動脈粥樣硬化。姜黃素通過抑制 AS 過程中 NF-κB 的表達，抑制炎癥因子的產(chǎn)生，減輕 AS 炎癥反應[5]。通過 RNAi 技術沉默巨噬細胞Ana-1 NF-κB p65 基因，發(fā)現(xiàn)經(jīng) NF-κB p65 基因沉默的Ana-1 細胞受 LPS 刺激后促炎因子 TNF-α、IL-1β、IL-6 的表達明顯減少，抑炎因子 IL-10 的表達增多[6]。

泡沫細胞的形成和巨噬細胞炎癥反應是 AS 過程中的兩個重要事件。已證實脂肪細胞增強子結合蛋白 1（adipocyte enhancer-binding protein 1，AEBP1）在 AS 中扮演重要的調控作用，通過下調 IκBα 誘導核因子 NF-κB 產(chǎn)生活性，進而促進巨噬細胞炎癥反應。這意味著巨噬細胞 AEBP1 可作為預防或治療 AS 潛在的治療靶點[7]。而炎癥反應中常見的高度乙?；瘎t表明組蛋白乙酰轉移酶（HATs）的小分子抑制劑有抑制炎癥的潛能[8]。研究還發(fā)現(xiàn)，miroRNAs（miR-146、miR-155、miR-181b、miR-21 以及 miR-301a）與凋亡抑制蛋白（IAP）在 NF-κB 活化中均起到一定作用[9-10]，這些都有可能為 AS 治療提供新的靶點。

1.2 MAPK 信號轉導通路與 AS

MAPK 是一類絲氨酸/蘇氨酸激酶，由多種同工酶組成，包括細胞外調節(jié)蛋白激酶（extra cellular regulated protein kinases，ERK）、c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）/應激活化蛋白激酶（SAPK）、ERK5/大絲裂素活化蛋白激酶（BMK1）和 p38 MAPK[11]。MAPK 信號轉導以三級激酶級聯(lián)的方式進行，首先 MAPKKK 受有絲分裂原刺激磷酸化而激活，然后 MAPKKK 磷酸化激活MAPKK，最后由 MAPKK 磷酸化激活 MAPK，進而轉入核內發(fā)揮作用。ERK、JNK、p38、ERK5/BMK1 可以由不同的刺激因素激活，形成不同的轉導通路，激活各不相同的轉錄因子，介導不同的生物學效應，但這幾條通路存在廣泛的“cross talk”，從而導致通路間產(chǎn)生相互協(xié)同或抑制作用[12]。MAPK 途徑是介導細胞反應的重要信號系統(tǒng)，普遍存在于多種生物，參與細胞生長、發(fā)育、分裂、死亡以及細胞間的功能同步等多種生理反應的過程。

其中 ERK、JNK 以及 p38 在動脈粥樣硬化中具有重要作用，許多促炎基因包括編碼 TNF-α、IL-2、IL-6、E-選擇素、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1 和 COX-2 等的基因表達均受到這些通路的調節(jié)。郭津和徐長慶[13]發(fā)現(xiàn)在大鼠動脈粥樣硬化模型中，促凋亡 JNK 和 p38 蛋白激酶被激活，抗凋亡 ERK1/2 也被激活，抑制或減輕細胞凋亡可有效防止 AS 的發(fā)生與發(fā)展。血管內皮細胞（vascular endothelial cell，VEC）功能障礙不僅是 AS 的早期病理改變，也是使動因素，在 AS 的發(fā)生、發(fā)展過程中起著關鍵性的作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)，在 AS 病理生理狀態(tài)下，某些病理因素如細胞因子、細菌產(chǎn)物、氧化脂蛋白、晚期糖基化終產(chǎn)物和高半胱氨酸均能夠導致 VEC 中 ERKs 蛋白水平的改變，因而認為 ERK 的激活與調節(jié)是 AS 發(fā)生發(fā)展的始動機制之一[14]。研究發(fā)現(xiàn)，多球殼菌素通過抑制 ERK 磷酸化上調肝臟載脂蛋白 A-I 表達[15]，從而達到抗 AS 的目的。抑制 JNK 和 p38 蛋白激酶同樣可達到抗 AS 的效果。與載脂蛋白 E 基因敲除小鼠比較，JNK2 缺失的載脂蛋白 E 基因敲除小鼠動脈粥樣硬化損害明顯減少[16]。當歸補血湯下調 p38 MAPK 活性，避免了 ox-LDL 誘導單核細胞聚集到血管內皮，從而在 AS 病變的早期發(fā)展階段阻斷其進程，緩解后期病變的發(fā)展[17]。

1.3 JAK-STAT 信號通路與 AS

JAK/STAT 途徑是細胞因子信號轉導的重要途徑之一，不僅參與炎癥反應，同時也與氧化應激、細胞損傷、凋亡等密切相關[18-19]。JAK 家族包括 JAK1、JAK2、JAK3 和TYR2 4 個成員。STAT 家族包括 STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5a、STAT5b 和 STAT6 共 7 個成員。細胞膜上的各種細胞因子受體與相應的配體結合，形成同源或異源二聚體后，促使細胞質內的 JAKs 相互磷酸化而被激活，活化后的 JAKs 磷酸化其受體酪氨酸殘基，STAT 補位到受體復合物的酪氨酸磷酸化特異位點，JAKs 接近 STATs 并磷酸化 STAT 的一個羥基酪氨酸，從而激活 STAT?；罨蟮?STAT 與受體分離，形成同源二聚體或異源二聚體，然后轉位到細胞核，與 DNA 上的特定調節(jié)序列結合，調節(jié)基因的轉錄[20]。JAK/STAT 通路調控的基因包括凋亡相關基因如 Fas、Bcl-2、Bax，炎性相關基因如 COX-2、iNOS、IL-8、IL-6 及其他如內皮素 1（ET-1）、NADPH 氧化酶基因等[21]。

實驗證明 JAK/STAT 信號通路在 AS 的發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮重要作用。Gharavi 等[22]發(fā)現(xiàn)磷酸化激活的STAT3（P-STAT3）主要存在于動脈粥樣硬化斑塊炎癥區(qū)的內皮細胞中，而在其他炎性細胞中較少，非炎癥區(qū)則幾乎沒有。比較 STAT3-/- 小鼠（內皮細胞敲除 STAT3 的小鼠）和 STAT3+/+ 小鼠（野生型的小鼠），發(fā)現(xiàn)在斑塊大小、巨噬細胞及 P-STAT3 的含量上 STAT3-/- 小鼠都明顯低于STAT3+/+ 小鼠。而 JAK/STAT 的抑制劑可以通過抑制INF-γ 誘導的人血管平滑肌細胞 Nox 的活性[21]，從而減少氧自由基的產(chǎn)生，減少細胞的氧化損傷。

此外，有研究報道 T 細胞共刺激分子介導的共刺激信號通路與 AS 也有密切關系。T 細胞介導的針對斑塊抗原的適應性免疫應答反應是一系列炎癥反應的主要環(huán)節(jié)[23]。T 細胞促 AS 主要是通過 T 細胞共刺激分子介導的信號通路。T 細胞表面的 CD40 分子，被認為是首要的共刺激物；主要表達于某些動脈粥樣損害部位的細胞：內皮細胞，T 細胞，B 細胞，巨噬細胞及血管平滑肌細胞[24]。T 細胞表面的 CD40 分子與 B 細胞、巨噬細胞和樹突狀細胞等抗原呈遞細胞表面的 CD40 受體配對后可上調共刺激分子（ICAM-1、VCAM-1、E-Selectin、B7-1、B7-2、MHCII 類分子和 CD40）的活性，并促進 IL-2、IL-1、IL-6 和 TNF-α等促炎細胞因子的產(chǎn)生，進而促進動脈粥樣硬化的形成[25]。

2 泛素-蛋白酶體通路與 AS

泛素-蛋白酶體（ubiquitin-proteasome system，UPS）途徑是細胞內非溶酶體途徑蛋白質降解通路，廣泛存在于真核生物細胞中，由泛素（Ub）、泛素活化酶（E1）、泛素偶聯(lián)酶（E2s）、泛素-蛋白連接酶（E3s）、26S 蛋白酶體以及泛素再循環(huán)酶等組成[26]。UPS 對蛋白質的降解包括兩個連續(xù)的步驟：①在多種蛋白酶的作用下，Ub 分子結合底物蛋白并標記；②標記了的底物蛋白，被 26S 蛋白酶體識別并降解。UPS 除了介導蛋白降解外，還在抗原提呈、細胞周期、NF-κB 代謝、基因轉錄及表達等方面發(fā)揮重要調控作用[27]，UPS 的異常則與許多疾病如腫瘤、炎癥、動脈粥樣硬化、心功能不全、高血壓等的致病機制有關。

最近有證據(jù)顯示，在 AS 初期、發(fā)展期以及 AS 的并發(fā)癥期，都可能有 UPS 的參與。在血管平滑肌細胞（SMCs）從收縮型向增殖型轉變過程中，UPS 起著重要的作用。這可能是由于新內膜泛素化增加，導致 SMCs 內的肌原纖維蛋白降解增加所致[28]。UPS 還可聚集 ox-LDL 或 LDL，誘導人單核細胞泛素偶聯(lián)酶 E2-25k 表達并泛素化細胞內蛋白，參與泡沫細胞形成。研究發(fā)現(xiàn)在人 AS 的冠狀動脈內，泛素與 SMCs 肌動蛋白的免疫反應，同時出現(xiàn)在新內膜的基底部；而用蛋白酶體抑制劑處理 SMCs，細胞的增殖及凋亡呈劑量依賴性抑制，同時 NF-kB 的活性降低而 p53和 p21 表達上調[29]，這表明 UPS 與 SMCs 內膜增生密切相關，抑制其活性可能從某種程度上達到抗 AS 的目的。雖然外源性的蛋白酶體抑制劑己成功地用于癌癥的輔助治療，具有上調 p53、p21 及 Bax 等促凋亡因子及抗增殖的作用。然而，能否防治 AS，還有待進一步研究[30]。

3 Rho/Rho 激酶信號通路與 AS

Rho 是一種小分子 G 蛋白，包括 3 個亞型：RhoA，RhoB，RhoC。Rho 激酶（Rho-associated coiled-coil forming protein serine/threonine kinase，ROCK）是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，主要包括氨基端的催化結構域（即激酶域，kinase domain）、中間的 α 螺旋區(qū)（包含 Rho 蛋白結合結構域，Rho-binding domain，RBD）和羧基端富含半胱氨酸的 pH 結構域（pleckstrin-homology domain，PHD）。ROCK的活性受細胞外信號和一些胞漿蛋白的調節(jié)。當 ROCK 接受 Rho 傳遞的活化信號后，會發(fā)生多個氨基酸位點的磷酸化而被激活，并介導其下游一系列磷酸化/脫磷酸化反應。

ROCK 的異?；罨c許多心血管疾病包括 AS 的發(fā)病機制密切相關。近年來關于 ROCK 在 AS 中作用的研究發(fā)現(xiàn)：① Rho/ROCK 通路參與的各種細胞功能在 AS 的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮作用；② Rho/ROCK 通路通過多種血管活性物質，參與 AS 的病理生理過程；③他汀類藥物的降脂作用，也與抑制 Rho/RocK 相關[31]。ROCK 通過參與細胞遷移、黏附、炎癥反應、平滑肌細胞收縮，胞質分裂及下調一氧化氮合酶（eNOS）合成和表達導致動脈粥樣硬化[32]。抑制ROCK 的活性，能夠減少相關黏附分子的表達，阻止 AS 的發(fā)展。在 ROCK1 基因敲除小鼠中，ROCK1 活性抑制可以減少細胞間黏附分子-1（ICAM-1）和血管細胞黏附分子-1（VCAM-1）的表達，從而減少血管損傷后新內膜的形成[33]。張曼等[34]的研究也證實了 Rho 激酶抑制劑法舒地爾可通過下調 ICAM-1、VCAM-1 以及 Rho 激酶 mRNA 的表達，抑制動脈粥樣硬化斑塊形成。

4 TGF-β/Smads 信號通路與 AS

轉化生長因子 β（transforming growth factor-β，TGF-β）是一組具有多種調節(jié)細胞功能作用的結構相似的轉化生長因子。在哺乳動物中，TGF-β 超家族有 3 種同分異構體：TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3，主要通過 Smad 家族蛋白進行信號傳遞。根據(jù)功能的不同 Smad 蛋白分為 3 種：①受體調節(jié)型，包括 Smad1、Smad2、Smad3、Smad5 和 Smad8；②公共型，包括 Smad4；③抑制型，包括 Smad6 和Smad7[35]。在信號轉導中，TGF-β 活化后首先與 TβR-II 結合，形成異源二聚體復合物，TβR-I 識別并結合該二聚體復合物。TβR-II 磷酸化 TβR-I 胞漿區(qū) GS 結構域的絲氨酸/蘇氨酸激活 TβR-I，R-Smads 蛋白被活化的 TβR-I 磷酸化后與 Co-Smad 結合成為轉錄復合物，轉入細胞核內，與DNA 上的 Smad 結合元件相結合，從而激活特定的靶基因[36]。

TGF-β/Smads 通路在 AS 的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用。TGF-β 控制的細胞增殖，細胞遷移，基質合成，傷口收縮，鈣化和免疫應答，均是動脈粥樣硬化過程中的重要過程。在 AS 早期，Smad3 高表達可以促進血管平滑肌細胞增生，內膜增生，參與 AS 的發(fā)生發(fā)展；在 AS 后期，TGF-β/Smads 通過促纖維化以及抗炎作用起到穩(wěn)定斑塊的作用[37]。TGF-β/Smads 通路還能夠抑制 MCP-1 的表達，從而抑制 MCP-1 介導的單核/巨噬細胞聚集以及趨化，防止內膜增生、內皮活化。其機制是 Smad3 與轉錄調節(jié)因子c-jun 結合，進而抑制活化蛋白 1（activator protein-1，AP-1）結合 DNA[38]。在野生型小鼠中，血管緊張素 II（angiotensin II，Ang II）通過 TGF-β 信號通路上調 Smad3，促使血管平滑肌細胞中膠原合成增多，從而引起血管纖維化；但是這種現(xiàn)象在 Smad3 基因敲除小鼠中并未出現(xiàn)[39]。

5 Toll 樣受體信號通路與 AS

Toll 樣受體（Toll-like receptor）是人們在研究果蠅胚胎發(fā)育過程中發(fā)現(xiàn)的 dToll 基因所編碼的一種跨膜受體蛋白，到目前為止 TLR 家族至少已包括了 12 個成員。其中TLR4 是介導內毒素/脂多糖（lipopo-lysaccharide，LPS）應答的最主要受體[40]。TLR 激活后信號途徑大致可分為MyD88 依賴途徑和非 MyD88 依賴途徑。其中 MyD88 是除 TLR3 外所有 TLRs 的銜接蛋白。MyD88 依賴途徑主要引起核因子 κB 易位進入細胞核內進而誘導免疫基因如單核細胞趨化蛋白、細胞黏附分子、白細胞介素等的轉錄；非 MyD88 依賴途徑主要激活干擾素調節(jié)因子 3（interferon regulated factor 3，IRF-3）并引起 I 型干擾素（type 1 interferons，IFNs）的轉錄[41]。

外源性配體 LPS 和內源性配體脂蛋白等均可通過TLR 刺激免疫細胞在內引起持續(xù)的慢性炎癥反應，促進AS 的形成。張代娟等[42]研究發(fā)現(xiàn)中藥成分青心酮可通過TLR4 途徑下調 LPS 活化的小鼠平滑肌細胞、內皮細胞、巨噬細胞 TLR4 mRNA 和蛋白的表達，在一定程度上減少AS 病灶的形成。單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）是單核細胞遷移到血管的重要細胞因子，與動脈粥樣硬化的發(fā)病機制相關。研究發(fā)現(xiàn)在野生型小鼠的骨髓源性巨噬細胞出現(xiàn)了MCP-1 的誘導，而在 TLR2 的基因敲除小鼠中則沒有[43]。用 ox-LDL、LPS 刺激 APOE 基因敲除小鼠腹腔巨噬細胞，可以誘導泡沫細胞的形成，細胞內 TLR4 的表達顯著升高[44]。這些基因敲除鼠研究結果均提示 TLR 在 AS 的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。

此外，越來越多的證據(jù)發(fā)現(xiàn) Wnt 信號通路在 AS 中參與涉及多個過程。Wnt 信號通路不僅調節(jié)血管內皮功能障礙和血管平滑肌細胞增殖、遷移，而且還具有調節(jié)炎癥、泡沫細胞的形成、病理血管生成和鈣化的能力，這些都是斑塊形成和穩(wěn)定的關鍵過程[45]。雖然 Wnt 信號通路在動脈粥樣硬化的系統(tǒng)分析尚未完成，但很明顯，對 Wnt 信號通路更深入地了解可能揭示血管疾病新的治療靶點。

6 結語

隨著時代的進步，科技的發(fā)展，生物技術在醫(yī)藥領域中發(fā)揮了越來越重要的作用。在國際上，斑馬魚模式生物由于其繁殖能力強、體外受精發(fā)育、胚胎透明、個體小、易養(yǎng)殖以及可以進行大規(guī)模的正向基因飽和突變與篩選等諸多特點，正逐漸被應用于多種疾?。ㄈ缟窠?jīng)退行性疾病、遺傳性心血管疾病、糖尿病等）的研究和小分子化合物的大規(guī)模新藥篩選[46]。此外，運用細胞及分子生物學手段構建含有編碼信號通路目的基因片段的重組質粒（質粒通路模型），進行大規(guī)模的新藥篩選，也成為近年來的研究熱點。大量研究發(fā)現(xiàn)許多中藥提取物、中藥單體成分、單味中藥和復方中藥對動脈粥樣硬化都有顯著療效[5,17,42]，但很多中藥的作用機制并不是很清楚；而靶向于細胞因子及細胞內信號轉導通路的抗 AS 治療方法直接針對疾病的本質，作用機制清晰。因此，將新興的生物技術應用于中藥研究，將有助于發(fā)現(xiàn)新的抗 AS 中藥成分，闡明中藥成分的作用機制，并促進中藥的現(xiàn)代化。對 AS 相關細胞信號通路的深入了解以及從細胞和分子水平開展前瞻性的基礎實驗研究，可望給 AS及中藥作用機制研究帶來突破性進展。

[1]Peng Y, Shao ZW, Ding SF.Cytokines and cytokine-related pathway in Atherosclerosis.Chin J Arterioseler, 2008, 16(2):161-164.(in Chinese)

彭毅, 邵紫韞, 丁世芳.動脈粥樣硬化中的細胞因子及細胞因子相關信號通路.中國動脈硬化雜志, 2008, 16(2):161-164.

[2]Li YJ, Yang Q, Weng XG, et al.The research development of inflammatory signal pathway of atherosclerosis.Chin Pharmacol Bull,2009, 25(7):857-860.(in Chinese)

李玉潔, 楊慶, 翁小剛, 等.動脈粥樣硬化炎癥信號轉導通路研究進展.中國藥理學通報, 2009, 25(7):857-860.

[3]Jin J, Liu GT.The advances of NF-κB.Foreign Med Sci Sect Pharm,2000, 27(3):133-137.(in Chinese)

金晶, 劉耕陶.NF-κB 的研究進展.國外醫(yī)學·藥學分冊, 2000,27(3):133-137.

[4]Hajra L, Evans AI, Chen M, et al.The NF-kappa B signal transduction pathway in aorticendothelial cells is primed for activation in regions predisposed to atherosclerotic lesion formation.Proc Natl Acad Sci U S A, 2000, 97(16):9052-9057.

[5]Wang CB, Gao DZ, Yin YH, et al.Effect of curcumine on NF-κB、VCAM-1 and VEGF expression of hyperlipemia rabbits.Chin Traditional Patent Med, 2007, 29(8):1127-1129.(in Chinese)

王春彬, 高大中, 殷躍輝, 等.姜黃素對高脂血癥兔主動脈NF-κB、VCAM-1、VEGF表達的影響.中成藥, 2007, 29(8):1127-1129.

[6]Shi L.Expression of NF-κB P65 inhibited by RNAi in LPS-activated Ana-1 murine mareophage affects inflammatory mediator secretion.Guangzhou: Southern Medical University, 2004.(in Chinese)

石榴.RNAi沉默NF-κB p65對小鼠巨噬細胞表達細胞因子的影響.廣州: 南方醫(yī)科大學, 2004.

[7]Bogachev O, Majdalawieh A, Pan XF.Adipocyte enhancer-binding protein 1 (AEBP1) (a novel macrophage proinflammatory mediator)overexpression promotes and ablation attenuates atherosclerosis in ApoE(-/-) and LDLR(-/-) mice.Mol Med, 2011, 17(9-10):1056-1064.

[8]Ghizzoni M, Haisma HJ, Maarsingh H, et al.Histone acetyl transferases are crucial regulators in NF-κB mediated inflammation.Drug Discovery Today, 2011, 16(11-12):504-511.

[9]Ma X, Becker Buscaglia LE, Barker JR, et al.MicroRNAs in NF-kappaB signaling.J Mol Cell Biol, 2011, 3(3):159-166.

[10]Cartier J, Marivin A, Berthelet J, et al.IAPs: a central element in the NF-κB activating signaling pathway.Med Sci (Paris), 2012, 28(1):69-75.

[11]Chang L, Karin M, Mammalian.MAP kinase signalling cascades.Nature, 2001, 410(6824):37-40.

[12]Chen JY, Wang C, Wang J, et al.The advanves of MAPK signaling pathwany.Chin Med Pharm, 2011, 1(8):32-34.(in Chinese)

陳建勇, 王聰, 王娟, 等.MAPK 信號通路研究進展.中國醫(yī)藥科學, 2011, 1(8):32-34.

[13]Guo J, Xu CQ.Increased expression of calcium-sensing receptor induce apoptosis in rat artherosclerosis myocardium by activition MAPK pathway.Sciencepaper Online, 2011, 6(3):231-236.(in Chinese)

郭津, 徐長慶.動脈硬化大鼠心肌鈣敏感受體表達增加通過激活MAPK 通路誘導細胞凋亡.中國科技論文在線, 2011, 6(3):231-236.

[14]Zhang M.Research on the regulating mechanism of the ERK signaling transduction pathway in vascular endothelial cells.China Prac Med, 2009, 4(25):250-252.(in Chinese)

張旻.血管內皮細胞的ERK 信號轉導通路調節(jié)機制研究.中國實用醫(yī)藥, 2009, 4(25):250-252.

[15]Glaros EN, Kim WS, Gamer B.Myriocin-mediated up-regulation of hepatocyte apoA-I synthesis is associated with ERK inhibition.Clin Sci (Lond), 2010, 118(12):727-736.

[16]Ricci R, Sumara G, Sumara I, et al.Requirement of JNK2 for scavenger receptor A-mediated foam cell formation in atherogenesis.Science, 2004, 306(5701):1558-1561.

[17]Huang SQ, Shen XY, Han L, et al.Effect of serum containing danggui buxue decoction on ox-LDL activating p38 MAPK of monocytes.Traditional Chin Drug Res Clin Pharmacol, 2010, 21(5):458-461.(in Chinese)

黃水清, 沈小燕, 韓凌, 等.當歸補血湯含藥血清對 ox-LDL激活單核細胞p38 MAPK的作用.中藥新藥與臨床藥理, 2010, 21(5):458-461.

[18]Adhikari N, Charles N, Lehmann U, et al.Transcription factor and kinase-mediated signaling in atherosclerosis and vascular injury.Curr Atheroscler Rep, 2006, 8(3):252-260.

[19]Wincewicz A, Sulkowska M, Rutkowsk iR, et al.STAT1 and STAT3 as intracellular regulators of vascular remodeling.Eur J Intern Med,2007, 18(4):267-271.

[20]He HY, Wu SS.The new advances of JAK/STAT signaling pathway.New Med, 2009, 40(12):827-830.(in Chinese)

賀宏英, 吳綏生.JAK/STAT信號轉導途徑研究新進展.新醫(yī)學,2009, 40(12):827-830.

[21]Manea A, Tanase LI, Raicu M, et al.JAK/STAT signaling pathway regulates Nox1 and Nox4-based NADPH oxidase in human aortic smooth muscle cells.Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2010, 30(1):105-112.

[22]Gharavi NM, Alva JA, Mouillesseaux KP, et al.Role of the JAK/STAT pathway in the regulation of interleukin-8 transcription by oxidized phospholipids in vitro and in atherosclerosis in vivo.J Biol Chem, 2007, 282(43):460-468.

[23]Hansson GK.Inflammation, atherosclerosis, and coronary artery disease.N Engl J Med, 2005, 352(16):1685-1695.

[24]Wei LX, Zhu JJ.The relationship between atherosclerosis and T cell activation with costimulatory molecules signaling.Med Inform,2010(2):438-439.(in Chinese)

韋柳霞, 朱繼金.T細胞活化及共刺激分子信號轉導與動脈粥樣硬化的關系.醫(yī)學信息, 2010(2):438-439.

[25]Gotsman I, Sharpe AH, Lichtman AH.T-cell costimmulation and conhibition in atherosclerosis.Circ Res, 2008, 103(11):1220-1231.

[26]Ciechanover A.The ubiquitin-proteasome proteolytic pathway.Cell,1994, 79(1):13-21.

[27]Ciechanover A, Schwartz AL.Ubiquitin-mediated degradation of cellular proteins in health and disease.Hepatology, 2002, 35(l):3-6.

[28]Libby P.Changing concepts of atherosclerosis.J Intern Med, 2000,247(3):349-358.

[29]Yamada T, Satoh S, Sueyoshi S, et al.Ubiquitin-positive foam cells are identified in the aortic and mitral valves with atherosclerotic involvement.J Atheroscler Thromb, 2009, 16(4):472-479.

[30]Tan CJ.The roles of ubiquitin-proteasome system in the pathogenesis of atherosclerosis.Shantou: Shantou University, 2007.(in Chinese)

譚春江.泛素蛋白酶體通路在動脈粥樣硬化中作用的研究.汕頭:汕頭大學, 2007.

[31]Wu X, Li HW, Li WP.Rho assoeiated kinase and cardiovascular disease.Chin J Cardiovascular Med, 2011, 16(5):393-395.(in Chinese)

武星, 李虹偉, 李衛(wèi)萍.Rho激酶與心血管疾病.中國心血管雜志,2011, 16(5):393-395.

[32]Dong JL, Li JX, Hong K.Progress of Rho-associated coiled-coil protein kinase in cardiovascluar diseases.Int J Pathol Clin Med, 2009,29(3):263-266.(in Chinese)

董家龍, 李菊香, 洪葵.Rho相關激酶Rock在心血管疾病中的研究進展.國際病理科學與臨床雜志, 2009, 29(3):263-266.

[33]Noma K, Rikitake Y, Oyama N, et al.ROCK1 mediates leukocyte recruitment and neointima formation following vascular injury.J Clin Invest, 2008, 118(5):1632-1644.

[34]Zhang M, Tong H, Liu TJ, et al.Effects of fasudil on atherosclerosis and Rho kinase in hypercholesterolemic diabetic rat model.Chin J Modern Med, 2010, 20(6):805-809.(in Chinese)

張曼, 佟浩, 劉鐵軍, 等.法舒地爾對大鼠動脈粥樣硬化及Rho激酶表達的影響.中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志, 2010, 20(6):805-809.

[35]Shi Y, Massagué J.Mechanisms of TGF-beta signaling from cellmembrane to the nucleus.Cell, 2003, 113(6):685-700.

[36]Zhao XY, Su JL, Zhang ZP, et al.Advances of the relationship between TGF-β/Smads signaling pathway and cardiovascular disease.J Ningxia Med Univ, 2010, 32(3):462-464.(in Chinese)

趙曉燕, 蘇金林, 張作鵬, 等.TGF-β/Smads信號通路與心血管疾病關系的研究進展.寧夏醫(yī)科大學學報, 2010, 32(3):462-464.

[37]Wang WD, Qi RM.Transforming growth factor-β/Smad3 signaling pathway in atherosclerosis.Chin J Arterioseler, 2011, 19(10):875-878.(in Chinese)

王文東, 齊若梅.轉化生長因子β/Smad3信號通路與動脈粥樣硬化.中國動脈硬化雜志, 2011, 19(10):875-878.

[38]Feinberg MW, Shimizu K, Lebedeva M, et al.Essential role for Smad3 in regulating MCP-1 expression and vascular inflammation.Circ Res, 2004, 94(5):601-608.

[39]Wang W, Huang XR, Canlas E, et al.Essential role of Smad3 in angiotensin II-induced vascular fibrosis.Circ Res, 2006, 98(8):1032-1039.

[40]Poltorak A, He X, Smirnova I, et al.Defective LPS signaling in C3H/HeJ and C57BL/10ScCr mice: mutations in Tlr4 gene.Science,1998, 282(5396):2085-2088.

[41]Geng XY, Chen YW, Qin MZ.The function of Toll-like receptor 4 in atherosclerosis.Chin J Arterioseler, 2008, 16(1):78-80.(in Chinese)

耿小勇, 陳一文, 秦明照.Toll樣受體4在動脈粥樣硬化中的作用研究進展.中國動脈硬化雜志, 2008, 16(1):78-80.

[42]Zhang DJ, Liu TM, Liu JY, et al.Effect of 3,4-dihydroxyacetophenone on atherogenesis in ApoE-deficient mice and the expression of TLR4 in three main cells of atherosclerosis plaque.Chin J Mod Appl Pharm,2010, 27(1):1-5.(in Chinese)

張代娟, 劉同美, 劉江月, 等.青心酮對載脂蛋白E缺陷小鼠主動脈粥樣硬化形成及斑塊中主要細胞的 TLR4表達的影響.中國現(xiàn)代應用藥學, 2010, 27(1):1-5.

[43]Park DW, Lee HK, Jeong TW, et al.The JAK2-Akt-glycogen synthase kinase-3β signaling pathway is involved in toll-like receptor 2-induced monocyte chemoattractant protein-1 regulation.Mol Med Report, 2012, 5(4):1063-1067.

[44]Liu MX, Zhang WG, Liu LT, et al.Effect of toll like receptor4 in foam cell formation and intervention study with Chinese medicine.Chin J Integrative Med Cardio-/Cerebrovasc Dis, 2009, 7(4):466-469.(in Chinese)

劉美霞, 張文高, 劉龍濤, 等.Toll樣受體4在泡沫細胞形成中的作用及中醫(yī)藥干預研究.中西醫(yī)結合心腦血管病雜志, 2009, 7(4):466-469.

[45]Tsaousi A, Mill C, George SJ.The Wnt pathways in vascular disease:lessons from vascular development.Curr Opin Lipidol, 2011, 22(5):350-357.

[46]Zon LI, Peterson RT.In vivo drug discovery in the Zebrafish.Nat Rev Drug Discov, 2005, 4(1):35-44.

10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.03.010

國家自然科學基金面上項目（81173594）；“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項（2009ZX09502-023）；中央高校基本科研業(yè)務費專項資金（SWJTU11ZT26）

610031 成都，西南交通大學生命科學與工程學院（盧瓊、譚睿、崔文婷）；100191，北京大學藥學院（蔡少青）

譚睿，Email：tanrui@swjtu.edu.cn

2012-03-06