抑郁癥動(dòng)物模型研究進(jìn)展

周葉 都霞 潘建春

（溫州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)神經(jīng)生物學(xué)研究所，浙江 溫州 325035）

抑郁癥動(dòng)物模型研究進(jìn)展

周葉 都霞 潘建春

（溫州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)神經(jīng)生物學(xué)研究所，浙江 溫州 325035）

【摘要】抑郁癥是一種復(fù)雜的心境障礙性疾病，診斷主要是根據(jù)其癥狀，復(fù)雜、不同的生物學(xué)機(jī)制可能是其病因?qū)W基礎(chǔ)。動(dòng)物模型對(duì)實(shí)驗(yàn)神經(jīng)科學(xué)的最新研究進(jìn)展具有重要作用，其中包括人類(lèi)情緒障礙（例如抑郁癥和焦慮癥）的模型。在過(guò)去的幾十年，許多應(yīng)激和神經(jīng)生物化學(xué)模型作為研究抑郁癥的有效手段發(fā)展起來(lái)，為發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)奠定了基礎(chǔ)。本文綜述了目前認(rèn)為有效的動(dòng)物抑郁模型，是抗抑郁藥作用的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制研究和新藥研發(fā)的有力工具。

【關(guān)鍵詞】抑郁癥；模型，動(dòng)物；綜述

抑郁癥是一種常見(jiàn)的精神疾病，近1/5的人罹患不同程度的抑郁癥，其中重性抑郁是世界范圍十大高發(fā)病率和死亡率疾病之一[1]。抑郁癥的病因復(fù)雜，可由多種不同因素引發(fā)，如生物學(xué)、情緒和環(huán)境因素。其發(fā)病機(jī)制至今仍未被完全闡明，上世紀(jì)90年代較為主流的觀點(diǎn)認(rèn)為體內(nèi)去甲腎上腺素（NE）、5-羥色胺（5-HT）、多巴胺（DA）等單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)水平低下導(dǎo)致出現(xiàn)抑郁癥狀。目前臨床上使用的抗抑郁藥主要是通過(guò)提高單胺遞質(zhì)水平而發(fā)揮作用，因此大都存在臨床效應(yīng)滯后、療效不確切、毒副作用大等缺點(diǎn)。近年來(lái)，世界范圍內(nèi)的大批科研工作者致力于尋找治療抑郁癥的新靶點(diǎn)，越來(lái)越多能較好模擬抑郁患者各類(lèi)癥狀的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型出現(xiàn)。本文列舉了目前常用的抑郁癥動(dòng)物模型，其在人類(lèi)重性抑郁的治療和新藥發(fā)現(xiàn)中具有重要作用。

1 應(yīng)激模型

1.1 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)（FST）

FST是一種常用于藥物抗抑郁樣活性篩選的動(dòng)物模型，通過(guò)強(qiáng)迫動(dòng)物在不能逃脫的狹窄水缸游泳誘導(dǎo)抑郁狀態(tài)[2]。在最初的瘋狂逃脫嘗試后，動(dòng)物采取相對(duì)不動(dòng)的狀態(tài)，這種狀態(tài)被稱(chēng)為 “絕望”，假設(shè)動(dòng)物“已經(jīng)放棄逃脫的希望”[2-3]。強(qiáng)迫游泳是最常用的“行為絕望”實(shí)驗(yàn)，通過(guò)模擬抑郁癥患者的絕望行為來(lái)評(píng)價(jià)抗抑郁藥在嚙齒類(lèi)動(dòng)物的抑郁樣行為中的作用。

實(shí)驗(yàn)方法:測(cè)試前把動(dòng)物放于盛水玻璃缸中游泳15 min，要確保動(dòng)物不能逃脫。15 min后將動(dòng)物取出置于加熱的環(huán)境（32℃）中干燥15 min，再放回各自的籠子。24 h后再次將動(dòng)物分別放入水缸中，強(qiáng)迫游泳6 min。當(dāng)動(dòng)物停止掙扎漂浮在水中，只做必要的輕微動(dòng)作保持頭在水面上的時(shí)候，被認(rèn)為是不動(dòng)。記錄后4 min的不動(dòng)時(shí)間。在抑郁癥的藥理學(xué)和行為學(xué)的干預(yù)存在下不動(dòng)時(shí)間將會(huì)明顯減少。

FST操作簡(jiǎn)單，且急性和慢性給藥均有作用，因此被廣泛用于抗抑郁藥的初篩或?qū)ζ渌钟裟Ｐ蛣?dòng)物行為改變的評(píng)價(jià)。但也有人認(rèn)為動(dòng)物強(qiáng)迫游泳中表現(xiàn)出的不動(dòng)狀態(tài)可能是對(duì)應(yīng)激的一種適應(yīng)，或者是一種疲勞現(xiàn)象，并非等同于抑郁癥患者的絕望行為。再則，急性應(yīng)激過(guò)程能否產(chǎn)生抑郁狀態(tài)也值得懷疑，這與抑郁癥臨床發(fā)病過(guò)程不符。此外，雖然抗抑郁藥能劑量依賴(lài)地減少不動(dòng)時(shí)間，但不動(dòng)時(shí)間減少也可能是由中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮劑引起的。興奮劑和抗膽堿藥減少不動(dòng)時(shí)間可能是通過(guò)對(duì)活動(dòng)的非選擇性刺激而不是通過(guò)延遲不動(dòng)的發(fā)作。因此，也應(yīng)測(cè)試動(dòng)物的自發(fā)活動(dòng)以確定不動(dòng)時(shí)間的減少是由于抗抑郁作用而非改變自發(fā)活動(dòng)。

1.2 懸尾實(shí)驗(yàn)（TST）

TST建立在Steru等[4]的方法上，是一種不可逃脫的應(yīng)激狀態(tài)，廣泛用于新藥研發(fā)中來(lái)衡量抗抑郁樣活性。懸尾實(shí)驗(yàn)是最常用于誘導(dǎo)小鼠行為改變的模型，這種誘導(dǎo)的行為改變可以被抗抑郁藥治療逆轉(zhuǎn)。

實(shí)驗(yàn)方法:在距尾尖約1 cm處用膠布把小鼠懸于高50 cm的位置。小鼠被懸于高處會(huì)立刻出現(xiàn)逃生樣行為，之后轉(zhuǎn)變?yōu)楸粍?dòng)不動(dòng)。在最初的掙扎期后小鼠會(huì)適應(yīng)不動(dòng)狀態(tài)，類(lèi)似于絕望和精神抑郁的狀態(tài)。測(cè)試期為6 min，記錄后4 min的累計(jì)不動(dòng)時(shí)間。當(dāng)小鼠完全不動(dòng)時(shí)才被認(rèn)為是不動(dòng)的。

最近，大量小鼠的遺傳研究中使用TST來(lái)測(cè)定抗抑郁藥的作用或應(yīng)激反應(yīng)[5]?？挂钟羲幍募毙越o藥有效，使小鼠在更長(zhǎng)的一段時(shí)間里堅(jiān)持嘗試逃脫。與FST一樣，這與臨床治療在作用時(shí)程上不相吻合，因此也僅適用于抗抑郁藥的初篩。

1.3 獲得性無(wú)助

獲得性無(wú)助是心理學(xué)范疇的一個(gè)技術(shù)術(shù)語(yǔ)，指人或動(dòng)物在行為無(wú)助的狀態(tài)下，甚至是當(dāng)幫助其避免遭受不好或有害環(huán)境的機(jī)會(huì)恢復(fù)時(shí)，其行為始終表現(xiàn)消極，如當(dāng)遭受不可逃脫的電擊后給予逃避機(jī)會(huì)時(shí)某些實(shí)驗(yàn)動(dòng)物逃跑或避免電擊失敗，產(chǎn)生抑郁癥狀:煩躁不安、認(rèn)知能力下降、快感缺失、性欲下降、睡眠障礙等[6-7]。

無(wú)助相關(guān)的行為被視為抑郁癥病人的常見(jiàn)特征，故獲得性無(wú)助理論被用來(lái)建立一種抑郁癥模型。慢性給予三環(huán)類(lèi)、單胺氧化酶抑制劑、非典型抗抑郁藥或電休克處理，均可逆轉(zhuǎn)獲得性無(wú)助的行為反應(yīng)，而強(qiáng)安定藥、抗焦慮藥、精神興奮劑和鎮(zhèn)靜藥慢性處理后無(wú)逆轉(zhuǎn)作用。該模型對(duì)抗抑郁藥有較高的選擇性和特異性，藥理作用時(shí)程與臨床相吻合，動(dòng)物的行為表現(xiàn)頗似抑郁癥病人的某些特征，但與抑郁癥患者的病因不符，削弱了該模型的結(jié)構(gòu)效度。

實(shí)驗(yàn)方法:獲得性無(wú)助包括2個(gè)階段:①無(wú)助誘導(dǎo)（不可逃避的電擊預(yù)處理）:第1天，大鼠被單獨(dú)放于有不銹鋼格網(wǎng)的有機(jī)玻璃電擊箱，通過(guò)具有恒定電流的電擊裝置進(jìn)行60次隨機(jī)足底電擊（0.8 mA），每分鐘電擊15 s，共計(jì)1 h。對(duì)照組大鼠被置于相同箱子的網(wǎng)格上1 h，不施加不可控制的電擊。此階段后，動(dòng)物被放回原來(lái)的籠子。②條件逃避訓(xùn)練:為評(píng)價(jià)逃避缺陷，在第3天，即電擊后48 h，進(jìn)行穿梭箱逃避實(shí)驗(yàn)。通過(guò)光電照相系統(tǒng)，動(dòng)物每次穿過(guò)隔板后格網(wǎng)上的電就會(huì)斷開(kāi)。每只動(dòng)物單獨(dú)放入穿梭箱，適應(yīng)環(huán)境5 min。適應(yīng)后進(jìn)行30次電刺激實(shí)驗(yàn)，共計(jì)15 min，也就是每分鐘2次。在每次實(shí)驗(yàn)的前3 s中，施加光信號(hào)，之后進(jìn)行3 s的電擊（0.8 mA），再接著是24 s的測(cè)試期。

在連續(xù)3天 （第3、4、5 d）中進(jìn)行穿梭箱階段。在此階段動(dòng)物會(huì)出現(xiàn)以下兩種反應(yīng):①在光信號(hào)期動(dòng)物穿入另一個(gè)隔間，部分逃避或完全避免被電擊；②動(dòng)物被電擊，即逃避有害刺激失敗。記錄刺激存在時(shí)動(dòng)物的逃避失敗次數(shù)和刺激不存在時(shí)的穿越次數(shù)。

1.4 慢性不可預(yù)知性應(yīng)激（CUS）

臨床觀察提出應(yīng)激是情感性疾病發(fā)病的一種促成因素，尤其是重性抑郁[8]。抑郁癥的病理生理學(xué)和應(yīng)激的神經(jīng)生物學(xué)通過(guò)下丘腦-垂體-腎上腺（HPA）軸以及5-HT和NE相關(guān)的神經(jīng)元系統(tǒng)聯(lián)系在一起。CUS可誘導(dǎo)動(dòng)物行為缺陷及神經(jīng)系統(tǒng)和神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)異常，例如開(kāi)野實(shí)驗(yàn)中的活動(dòng)性降低，HPA系統(tǒng)失常及神經(jīng)可塑性和神經(jīng)發(fā)生改變，這些異常均能通過(guò)抗抑郁治療而得到改善。

實(shí)驗(yàn)方法:CUS中，大鼠隨機(jī)遭受由下列Molina等[9]和 Murua等[10]確定的應(yīng)激因子:高速震蕩（45 min）、冷水游泳 （12℃，5 min）、束縛（1.5 h）、夾尾（1 min）、禁水（24 h）、足底電擊（30 min，1 mA，持續(xù)1 s，平均1次/min）、冷水游泳（10℃，5 min）、禁食（24 h）、束縛（2 h）、高速震蕩（1 h）、夾尾（1 min）、禁水（24 h）、孤養(yǎng)（24 h）、足底電擊（45 min，1 mA，持續(xù)1 s，平均1次/min）、冷水游泳（8℃，5 min）、高速震蕩（1.5 h）、束縛（2.5 h）、夾尾（2 min）、足底電擊（1 h）、孤養(yǎng)（24 h）、禁食（24 h）。

在應(yīng)激前即開(kāi)始給予藥物治療，每天1次，在給藥后第21天，觀察應(yīng)激大鼠的行為學(xué)，處死大鼠，評(píng)價(jià)可能發(fā)生的神經(jīng)內(nèi)分泌改變 （包括體質(zhì)量，腎上腺質(zhì)量與體質(zhì)量的比率，腎上腺皮質(zhì)的厚度和血清皮質(zhì)酮濃度）以及測(cè)定神經(jīng)發(fā)生改變和海馬基因表達(dá)水平。

由于CUS是模擬抑郁癥的環(huán)境誘因，動(dòng)物的行為特征改變、血漿皮質(zhì)激素升高等均與內(nèi)源性抑郁癥狀相似，且大部分經(jīng)典的抗抑郁藥對(duì)其有效，因此CUS作為一種抑郁癥動(dòng)物模型具有較高的價(jià)值。

1.5 慢性溫和應(yīng)激（CMS）

CMS使嚙齒類(lèi)處于一系列溫和不可預(yù)知性應(yīng)激因素中，持續(xù)數(shù)周。CMS模擬抑郁癥的快感缺乏，也就是對(duì)愉快事件的反應(yīng)性缺失，這是抑郁癥的核心癥狀。其評(píng)價(jià)方法通常是通過(guò)蔗糖溶液（1%～2%）的消耗量或偏好的下降來(lái)監(jiān)測(cè)此過(guò)程的效果。地昔帕明、丙米嗪、馬普替林、嗎氯貝胺、氟西汀和西酞普蘭等慢性給藥可增加CMS動(dòng)物的糖水消耗量[11-13]。此外，研究表明 CMS誘導(dǎo)一系列持久的神經(jīng)化學(xué)、神經(jīng)免疫及神經(jīng)內(nèi)分泌改變，與人類(lèi)抑郁癥中觀察到的狀況類(lèi)似。因其病因?qū)W有效性、表觀有效性和預(yù)知有效性好，是臨床前抗抑郁藥研究中最有效的動(dòng)物模型之一。

實(shí)驗(yàn)方法:動(dòng)物被分為2組:應(yīng)激組和非應(yīng)激對(duì)照組。應(yīng)激組采用如下的應(yīng)激因素[12，14]連續(xù)處理4周:①禁食（18 h），之后是1 h的限制食物獲得（5小顆食物）；②配對(duì)居?。ò颜＞幼≌邠Q為入侵者，4 h）；③傾斜籠子（45°，16 h）；④通宵照明；⑤頻閃照明（100次/min，8 h）；⑥濕籠（100 g鋸末墊料上灑水200 mL，14 h）；⑦禁水（18 h），之后立即給空水瓶（1 h）；⑧白噪聲（約110 dB，2 h）；⑨通宵開(kāi)關(guān)燈；⑩孤養(yǎng)（14 h）；11○糖水偏好實(shí)驗(yàn)前禁食禁水（24 h）。確保4周中應(yīng)激因素順序保持隨機(jī)。

24 h禁食禁水后測(cè)定糖水消耗，每周1次。糖水放于標(biāo)準(zhǔn)飲水瓶中飲用1 h，實(shí)驗(yàn)前后分別稱(chēng)重水瓶得飲用量。應(yīng)激前1周測(cè)定糖水消耗的基值。應(yīng)激期間，每日應(yīng)激前1 h給予藥物治療或空白對(duì)照。在應(yīng)激期間進(jìn)行糖水消耗量測(cè)定，每周測(cè)定1次直至應(yīng)激和藥物治療結(jié)束。

1.6 慢性束縛應(yīng)激（CRS）

CRS是把嚙齒類(lèi)動(dòng)物置于通風(fēng)透明的束縛器中，該束縛器緊密貼合大鼠的身體，每天數(shù)小時(shí)，持續(xù)2～3周。結(jié)果使嚙齒類(lèi)動(dòng)物出現(xiàn)抑郁樣行為，抗抑郁藥治療可以逆轉(zhuǎn)[15]。慢性束縛應(yīng)激也誘導(dǎo)學(xué)習(xí)記憶損傷，腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3下調(diào)，神經(jīng)可塑性標(biāo)志物改變。

實(shí)驗(yàn)方法:CRS使用有機(jī)玻璃制作的嚙齒類(lèi)束縛器，于上午9:00至下午3:00間將動(dòng)物置于束縛器中，每日4～6 h，連續(xù)21 d。第22～24天，測(cè)試應(yīng)激大鼠的抑郁、焦慮和學(xué)習(xí)記憶損傷，例如穿梭箱、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、高架十字迷宮和Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)。之后處死大鼠，評(píng)價(jià)海馬或杏仁核神經(jīng)元的神經(jīng)化學(xué)和神經(jīng)可塑性（形態(tài)學(xué)）改變。

雖然在之前的研究中多次用到束縛應(yīng)激，但也有一些報(bào)道提出同一種應(yīng)激因子的多次應(yīng)用會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物對(duì)應(yīng)激的適應(yīng)[16]。因此作為一種動(dòng)物模型，其與臨床抑郁癥的相關(guān)性令人懷疑。

1.7 出生前應(yīng)激模型

越來(lái)越多的證據(jù)表明懷孕期間的母源應(yīng)激可能會(huì)與遺傳因素相互作用，導(dǎo)致子代的神經(jīng)生物學(xué)失常和抑郁樣行為[17]。出生前心理學(xué)應(yīng)激引起抑郁樣行為，改變HPA軸的反饋機(jī)制，破壞神經(jīng)可塑性。最近的一系列動(dòng)物實(shí)驗(yàn)描述了出生前應(yīng)激在子代發(fā)育中的作用。一般而言，出生前應(yīng)激模型具有很好的預(yù)測(cè)和表觀效度，因?yàn)槌錾皯?yīng)激引起的幾種神經(jīng)生物學(xué)和行為學(xué)損傷與抑郁癥病人的相似[18]。

實(shí)驗(yàn)方法:

一種方法是建立在機(jī)體應(yīng)激 （出生前束縛應(yīng)激）的基礎(chǔ)上。懷孕11 d的雌性大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和應(yīng)激組。應(yīng)激過(guò)程是把懷孕大鼠束縛在透明圓筒（直徑7.5 cm，長(zhǎng)19 cm）內(nèi)，置于明亮光線下45 min，每天3次直至分娩。

另一種方法是建立在心理學(xué)應(yīng)激的基礎(chǔ)上。通過(guò)讓其觀察透明墻后的大鼠被電擊的方法對(duì)處于懷孕最后3個(gè)月的大鼠進(jìn)行心理學(xué)應(yīng)激，而非任何機(jī)體應(yīng)激的方法。把懷孕大鼠放入有4個(gè)隔間（15×15 cm2）的交流箱中，4個(gè)隔間是用透明塑料板隔成的。每60 s隨機(jī)進(jìn)行1次1 s的足底電擊（0.3、0.4或0.5 mA）。懷孕大鼠被放入其中3個(gè)底部格網(wǎng)上有塑料板的隔間里，因此不會(huì)被電擊，而另外一只“主持”大鼠被放入沒(méi)有塑料板的第4個(gè)隔間。每天的9:00、12:00和14:00進(jìn)行3次為期60 min的應(yīng)激。這些應(yīng)激在懷孕的13～20 d進(jìn)行，每次均更換主持大鼠。每組的子代在出生后21 d斷奶，且在行為學(xué)測(cè)試前不進(jìn)行任何處理，行為學(xué)測(cè)試根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)在成年的不同月份進(jìn)行。

1.8 母子分離模型

母子分離（MS）是一種有效的自然應(yīng)激，是把母親從各自的籠子里移出3 h，在分離期，把子代養(yǎng)在不同的房間以阻止它們與母親通過(guò)超聲發(fā)聲法交流[19]。

實(shí)驗(yàn)方法:出生后（出生當(dāng)天設(shè)為第0天）第2天至第14天每天12:00至15:00點(diǎn)進(jìn)行分離，之后把母親移回原籠。第14天后，恢復(fù)正常飼養(yǎng)直至第21天斷奶。對(duì)照組動(dòng)物在此時(shí)期不進(jìn)行任何處理。在第60天，對(duì)動(dòng)物進(jìn)行分類(lèi)和行為學(xué)測(cè)試。

母子分離作為一種抑郁癥模型已被成功地用于很多動(dòng)物品系。此模型是在特定的時(shí)期，通常是出生后的2～3周里，將母親與其子代分離[20]。它能導(dǎo)致神經(jīng)元功能損傷和抑郁樣行為 （如活動(dòng)減少，身體卷曲及面部絕望表情等）增加。該模型制作較簡(jiǎn)單，可作為研究抑郁性障礙的孤獨(dú)、社會(huì)交往減少及異常的模型，但對(duì)其出現(xiàn)的癥狀分析較困難，運(yùn)用較少。

1.9 新奇事物誘導(dǎo)的食欲減退實(shí)驗(yàn)（NIH）

新奇事物誘導(dǎo)的NIH是把嚙齒類(lèi)動(dòng)物和食物一起放在一個(gè)新環(huán)境中，例如開(kāi)放場(chǎng)或不熟悉的籠子，評(píng)價(jià)新籠子中的進(jìn)食潛伏期和進(jìn)食量，并與在原籠子中的相應(yīng)參數(shù)對(duì)比。新環(huán)境的進(jìn)食抑制作用能測(cè)定焦慮相關(guān)的抑郁，這種抑郁對(duì)慢性抗抑郁藥治療敏感，是一個(gè)研究抗抑郁藥潛在神經(jīng)生物學(xué)作用的有前景的新模型。

實(shí)驗(yàn)方法:根據(jù)已有方案進(jìn)行新奇事物誘導(dǎo)的NIH[21]。訓(xùn)練包括每天訓(xùn)練動(dòng)物在原籠中飲用甜煉乳（甜煉乳∶水=1∶3），連續(xù)3 d，每天被給予甜煉乳1 h。第4天在原籠進(jìn)行測(cè)試，每5 min記錄1次飲用潛伏期和飲用體積，共記錄30 min。應(yīng)在弱光線條件下進(jìn)行原籠測(cè)試。在第5天進(jìn)行新籠測(cè)試，把動(dòng)物移出原籠，放入新的干凈籠子，給予甜煉乳。測(cè)定飲用潛伏期和飲用體積。比較原籠和新籠的飲用潛伏期和甜煉乳飲用量。

2 神經(jīng)生化模型

2.1 嗅球切除模型

雙側(cè)嗅球切除使實(shí)驗(yàn)大鼠在神經(jīng)化學(xué)、生理學(xué)和行為學(xué)等方面出現(xiàn)異常，同時(shí)這些改變與抑郁癥病人的某些癥狀類(lèi)似[22]，如逃避能力降低和血漿皮質(zhì)激素升高。這些癥狀可以通過(guò)慢性而非急性的抗抑郁藥物治療逆轉(zhuǎn)，與臨床抗抑郁治療的時(shí)程相似，因此可以把嗅球切除作為一種抑郁癥動(dòng)物模型，用于研究抑郁癥發(fā)病機(jī)制及抗抑郁藥的篩選。但單胺氧化酶抑制藥反苯環(huán)丙胺和非典型抗抑郁藥三唑酮對(duì)此模型無(wú)明顯影響。

實(shí)驗(yàn)方法:按照Nowak等描述的方法進(jìn)行大鼠雙側(cè)嗅球切除。首先暴露頭骨，然后在前鹵點(diǎn)前7 mm、正中線兩側(cè)2 mm處鉆7 mm深的孔。吸出嗅球，用止血棉壓在孔處止血，縫合頭皮。為避免動(dòng)物感染，手術(shù)后可肌內(nèi)注射普魯卡因青霉素。對(duì)假手術(shù)組動(dòng)物進(jìn)行相同的手術(shù)處理，但不切除嗅球。手術(shù)后動(dòng)物恢復(fù)5～7 d開(kāi)始給藥。

2.2 5-羥色氨酸（5-HTP）誘導(dǎo)的甩頭實(shí)驗(yàn)

5-HTP誘導(dǎo)的甩頭實(shí)驗(yàn)是一種藥物相互作用模型，與抗抑郁藥能逆轉(zhuǎn)5-HT的前體5-HTP引起的反應(yīng)有關(guān)[23-24]。5-HTP誘導(dǎo)的5-HT釋放能激活突觸后5-HT2A受體，使小鼠出現(xiàn)甩頭反應(yīng)。該模型不模擬抑郁癥狀，僅能用于研究藥物的抗抑郁樣作用中可能的5-HT能機(jī)制。

實(shí)驗(yàn)方法:在給予 5-HTP（120 mg/kg，ip）前1 h，小鼠灌胃給予藥物氟西?。?0 mg/kg）或雙蒸水。給藥后30 min把小鼠放入籠子，記錄20 min內(nèi)甩頭（頭部快速移動(dòng)而軀干基本不動(dòng)）的累積次數(shù)。

2.3 育亨賓毒性增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)

育亨賓能拮抗突觸前α2腎上腺素受體引起NE的過(guò)度釋放。育亨賓毒性增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，對(duì)抗抑郁藥具有特異的選擇性，所有用于治療的抗抑郁藥都有此種作用，少有例外[25]。此模型通常用于評(píng)價(jià)藥物的抗抑郁樣作用是否涉及NE能系統(tǒng)。

實(shí)驗(yàn)方法:在給予育亨賓（25 mg/kg，s.c.）前1 h，小鼠灌胃給予丙米嗪（30 mg/kg）或雙蒸水。在育亨賓注射后20 h的時(shí)間內(nèi)，記錄死亡小鼠的數(shù)量。

2.4 阿撲嗎啡誘導(dǎo)體溫過(guò)低的拮抗實(shí)驗(yàn)

阿撲嗎啡作用于NE能神經(jīng)末梢的突觸前D2受體，抑制NE的釋放。阿撲嗎啡激活中樞D2受體和少數(shù)D1受體，導(dǎo)致空間行為（例如探究）的特異性增加。抑制NE再攝取的抗抑郁藥，例如丙米嗪、阿莫沙平和維洛沙秦，能強(qiáng)烈拮抗高劑量阿撲嗎啡誘導(dǎo)的體溫過(guò)低[26]。因此該模型通常被用于評(píng)價(jià)抗抑郁藥的NE能作用。

實(shí)驗(yàn)方法:在給予阿撲嗎啡（16 mg/kg，sc）前30 min，小鼠灌胃給予丙米嗪（30 mg/kg）或雙蒸水。測(cè)量3次肛溫:①還沒(méi)有給予任何藥物時(shí)；②給藥后30 min阿撲嗎啡注射前，評(píng)價(jià)藥物對(duì)基礎(chǔ)體溫的作用；③阿撲嗎啡注射后30 min，評(píng)價(jià)藥物對(duì)阿撲嗎啡誘導(dǎo)的體溫過(guò)低作用。

高劑量的阿撲嗎啡可能激動(dòng)NE受體和多巴胺受體，因此其他DA受體拮抗藥也會(huì)拮抗阿撲嗎啡誘導(dǎo)的體溫過(guò)低。此外，該模型不模擬任何抑郁癥行為學(xué)癥狀，僅檢測(cè)藥物是否提高NE水平，而對(duì)研究和認(rèn)識(shí)抑郁癥的發(fā)病機(jī)制沒(méi)有幫助。故此模型可信性有限，需配合其他模型進(jìn)行藥物的篩選和評(píng)價(jià)。

2.5 利血平翻轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)

在大鼠或小鼠，囊泡單胺攝取阻斷藥利血平可引起上瞼下垂、運(yùn)動(dòng)不能和體溫過(guò)低，且能被抗抑郁藥治療逆轉(zhuǎn)。

實(shí)驗(yàn)方法:

逆轉(zhuǎn)利血平誘導(dǎo)的上瞼下垂:給予動(dòng)物利血平（2.5 mg/kg，sc），同時(shí)給予藥物或溶劑對(duì)照。注射后1 h測(cè)定上瞼下垂得分，等級(jí)從0（眼睛完全睜開(kāi)）到4（眼睛完全閉合）。

逆轉(zhuǎn)利血平誘導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)不能:動(dòng)物注射利血平（2.5 mg/kg，sc），同時(shí)給予藥物或溶劑對(duì)照。注射后1 h，把小鼠放在一個(gè)直徑為7.5 cm的圓內(nèi)測(cè)定其活動(dòng)性，記錄15 s后仍在圓內(nèi)的小鼠數(shù)量。

逆轉(zhuǎn)利血平誘導(dǎo)的體溫過(guò)低:動(dòng)物注射利血平（2.5 mg/kg，sc），同時(shí)給予藥物或溶劑對(duì)照。利血平注射后60、90、120、150和180 min時(shí)測(cè)定肛溫。把電子溫度計(jì)插入動(dòng)物肛門(mén)內(nèi)2 cm測(cè)定肛溫，當(dāng)溫度計(jì)溫度穩(wěn)定時(shí)記錄。

單胺氧化酶抑制劑和三環(huán)類(lèi)抗抑郁藥可以對(duì)抗利血平引起的動(dòng)物行為異常，但某些藥物如左旋多巴、苯丙胺和β受體拮抗藥等，同樣可以翻轉(zhuǎn)利血平的作用，產(chǎn)生假陽(yáng)性抗抑郁作用。該模型簡(jiǎn)便易行，但選擇性較差、可信度不高，目前僅用于抗抑郁藥的初篩。

3 展望

動(dòng)物模型研究對(duì)進(jìn)一步認(rèn)識(shí)人類(lèi)精神疾病起著至關(guān)重要的作用。各種抑郁癥動(dòng)物模型的病理生理機(jī)制各異，但每種模型只能模擬抑郁癥某一或某些方面的癥狀，因此研究中常要求多個(gè)模型聯(lián)合應(yīng)用。相信隨著新的更好的抑郁模型的建立，必將使抑郁癥的機(jī)制研究和臨床治療取得更大的進(jìn)展。

參考文獻(xiàn):

[1] Berton O，Nestler EJ.New approaches to antidepressant drug discovery:beyond monoamines[J].Neurosci，2006，7（2）:137-151.

[2] Porsolt RD，Bertin A，Jalfre M.Behavioral despair in mice:a primary screening test for antidepressant[J].Arch Int Pharmacodyn Ther，1977，229（2）:327-336.

[3] Porsolt RD，Bertin A，Jalfre M.Behavioural despair in rats and mice:strain differences and the effects of imipramine[J].Eur J Pharmacol，1978，51（3）:291-294.

[4] Steru L，Chermat R，Thierry B，et al.The tail suspension test:a new method for screening antidepressants in mice[J].Psychopharmacology，1985，85（3）:367-370.

[5] Bechtholt AJ，Hill TE，Lucki I.Anxiolytic effect of serotonin depletion in the novelty-induced hypophagia test[J].Psychopharmacology（Berl），2005，190（4）:531-540.

[6] Overmier JB，Seligman ME.Effects of inescapable shock upon subsequent escape and avoidance learning[J].J comp Physiol Psychol，1967，63（1）:28-33.

[7] Seligman ME，Maier SF.Failure to escapetraumatic shock[J].J Experimental Psychology，1967，74（1）:1-9.

[8] Bidzińska EJ.Stress factors in affective diseases[J].J Psychiatry.1984，144:161-166.

[9] Molina VA，Volosin M，Cancela L，et al.Effect of chronic variable stress on monoamine receptors:influence of imipramine administration[J].Pharmcol Biochem Behav，1990，35（2）:335-340.

[10] Murua VS，Gomez RA，Andrea ME，et al.Shuttle-box deficits induced by chronic variable stress:reversal by imipramine administration[J].Pharmacol Biochem Behav，1991，38（1）: 125-130.

[11] Forbes NF，Stewart CA，Matthews K，et al.Chronic mild stress and sucrose consumption:validity as a model of depression[J]. Physiol Behav，1996，60（6）:1481-1484.

[12] Willner P.Validity，reliability and utility of the chronic mild stress model of depression:a 10-year review and evaluation[J]. Psychopharmacology，1997，134（4）:319-329.

[13] Moreau JL，Jenck F，Martin JR，et al.Antidepressant treatment prevents chronic unpredictable mild stress-induced anhedonia as assessed by ventral tegmentum self-stimulation behavior in rats [J].Eur Neuropsychopharmacol，1992，2（1）:43-49.

[14] Gr?nli J，Murison R，F(xiàn)iske E，et al.Effects of chronic mild stress on sexual behavior，locomotor activity and consumption of sucrose and saccharine solutions[J].Physiol Behav，2005，84（4）:571-577.

[15] Veena J，Srikumar BN，Raju TR，et al.Exposure to enriched environment restores the survival and differentiation of new born cells in the hippocampus and ameliorates depressive symptoms in chronically stressed rats[J].Neurosci Lett，1994，455（3）: 178-182.

[16] Melia KR，Ryabinin AE，Schroeder R，et al.Induction and habituation of immediate early gene expression in rat brain by acute and repeated restraint stress[J].J Neurosci，1994，14（10）: 5929-5938.

[17] Abe H，Hidaka N，Kawagoe C，et al.Prenatal psychological stress causes higher emotionality，depression-like behavior，and elevated activity in the hypothalamo-pituitary-adrenal axis[J]. Neurosci Res，2007，59（2）:145-151.

[18] Maccari S，Darnaudery M，Morley-Fletcher S，et al.Prenatal stress and long-term consequences:implications of glucocorticoid hormones[J].Neurosci Biobehav Rev，2003，27（1-2）: 119-127.

[19] Hofer MA，Brunelli SA，Shair HN.Potentiation of isolation-induced vocalization by brief exposure of rat pups to maternal cues [J].Dev Psychobiol，1994，27（8）:503-517.

[20] Finamore TL，Port RL.Developmental stress disrupts habituation but spares prepulse inhibition in young rats[J].Physiol Behav，2000，69（4-5）:527-530.

[21] Cryan JF，Markou A，Lucki I.Assessing antidepressant activity in rodents:recent developments and future needs[J].Trends Pharmacol Sci，2002，23（5）:238-245.

[22] Jesberger JA，Richardson JS.Animal models of depression:parallels and correlates to severe depression in humans[J].Biol Psychiatry，1985，20（7）:764-784.

[23] Nagayama H，Hintgen JN，Aprison MH.Pre-and postsynaptic serotonergic manipulations in an animal of depression[J].Pharmacol Biochem Behav，1980，13（4）:575-579.

[24] Nagayama H，Hintgen JN，Aprison MH.Postsynaptic action by four antidepressive drugs in an animal model of depression[J]. Pharmacol Biochem Behav，1981，15（1）:125-130.

[25] Malick JB.Potentiation of yohimbine-induced lethality in mice: Predictor of antidepressant potential[J].Drug Dev Res，1983，3（4）:357-363.

[26] Xu Y，Wang ZC，You WT，et al.Antidepressant-like effect of trans-resveratrol:involvement of serotonin and noradrenaline system[J].Eur Neuropsychopharmacol，2010，20（6）:405-413.

潘建春，男，教授，碩士生導(dǎo)師。研究方向：神經(jīng)藥理。通訊作者E-mail：wenzhoupan2003@yahoo.com.cn

doi:10.3969/j.issn.1672-5433.2012.04.009

收稿日期：（2011-10-20）

作者簡(jiǎn)介：周葉，女，碩士在讀。研究方向：藥理學(xué)。E-mail：duxia3344@hotmail.com

The Research Progress of Animal Models for Depression

Zhou Ye，Du Xia，Pan Jianchun （Institute of Experimental Neurobiology of Wenzhou Medical College，Zhejiang Wenzhou 325035，China）

ABSTRACTDepression is a complex mood disorder and its diagnosis is mainly based on symptomatic criteria，and the heterogeneity of the disease suggests that multiple and different biological mechanism may underlie its etiology.Animal models have been proved importance to recent advances in experimental neuroscience，including modeling of human mood disorders such as depression and anxiety.Over the past few decades，a number of stress and neurobiochemical models have been developed as primary efficacy measures in depression trials，which have paved the way for the discovery of novel therapeutic targets.In this paper several currently available animal models were presented as powerful tools for both mechanistic studies on the neurobiology of the antidepressant response and for drug discovery.

KEY WORDSDepressive Disorder；Models，Animal；Review