• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      全自動(dòng)電泳分析系統(tǒng)在地中海貧血篩查中的應(yīng)用價(jià)值

      2012-01-14 11:07:00莫鳳明伍德榮何玉強(qiáng)
      關(guān)鍵詞:區(qū)帶電泳變性

      莫鳳明,伍德榮,何玉強(qiáng)

      (河池市人民醫(yī)院,廣西 河池547000)

      全自動(dòng)電泳分析系統(tǒng)在地中海貧血篩查中的應(yīng)用價(jià)值

      莫鳳明,伍德榮,何玉強(qiáng)

      (河池市人民醫(yī)院,廣西 河池547000)

      目的探討全自動(dòng)電泳分析系統(tǒng)在地中海貧血篩查中的應(yīng)用價(jià)值。方法對(duì)2080份疑似地貧患者標(biāo)本應(yīng)用法國公司HYDRASYS全自動(dòng)電泳分析系統(tǒng)進(jìn)行血紅蛋白電泳,檢測(cè)血紅蛋白(Hb)各組成分的含量,同時(shí)采用HbF堿變性試驗(yàn)對(duì)同一標(biāo)本進(jìn)行HbF含量測(cè)定,比較兩種方法的檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果在送檢2080例中篩出α地中海貧血表型陽性316例,陽性率15.2%;β地中海貧血表型陽性616例,陽性率29.6%。其它血紅蛋白病6例,陽性率0.3%,經(jīng)基因分析確診α地中海貧血291例,準(zhǔn)確度92.3%,β地中海貧血591例,準(zhǔn)確度95.9%。結(jié)論全自動(dòng)血紅蛋白電泳分析系統(tǒng)電泳區(qū)帶清晰,掃描定量準(zhǔn)確,可以定量檢測(cè)HbA,HbF,HbA2的含量,將地中海貧血進(jìn)行初步分類為α地中海貧血或β地中海貧血,準(zhǔn)確度高,有效地篩查出高危患者,為進(jìn)一步進(jìn)行基因診斷和遺傳咨詢提供基礎(chǔ)。

      全自動(dòng)電泳分析系統(tǒng);血紅蛋白電泳;地中海貧血;篩查

      地中海貧血廣泛分布在我國南方地區(qū),是廣東、廣西及海南等地發(fā)病率最高、被世界衛(wèi)生組織列為危害人類健康的6種常見病之一[1],目前地貧尚無確切有效的治療方法,重型α地貧多為死胎且孕婦易并發(fā)妊娠高血壓綜合征,重型β地中海貧血?jiǎng)t需要終身依賴輸血,中間型α、β地中海貧血患者多無勞動(dòng)能力或勞動(dòng)能力低下[2]。因此要廣泛開展地貧篩查,特別是孕婦,提高預(yù)防意識(shí),以便減少地貧兒的出生。為探討全自動(dòng)電泳分析系統(tǒng)在地中海貧血篩查中的應(yīng)用價(jià)值,現(xiàn)將測(cè)定分析報(bào)道如下。

      1 資料與方法

      1.1 資料 2010年6月至2011年5月來就診的疑似地貧患者 (紅細(xì)胞脆性<70%,MCV<80fL或家庭中有地貧攜帶者)共2080例,其中包括新生兒患者92例。

      1.2 儀器與試劑 儀器為法國Sebia公司HYDRASYS全自動(dòng)蛋白電泳系統(tǒng)及掃描儀,試劑用該公司生產(chǎn)的配套試劑。

      1.3 方法

      1.3.1 血紅蛋白電泳分析 抽取疑似患者靜脈血約2ml,真空采血管肝素鈉抗凝,制備血紅蛋白液,嚴(yán)格按照儀器和試劑盒說明書進(jìn)行點(diǎn)樣、電泳、染色、脫色、烘干,再通過自動(dòng)掃描儀系統(tǒng)掃描分析HB各組分含量,打印出圖譜。

      1.3.2 參考區(qū)間 正常參考值成人2.0%≤HbA2≤3.5%并且不出現(xiàn)異常血紅蛋白帶。 如HbA2≤2.0%,或出現(xiàn)異常血紅蛋白帶(HbH、HbBart’s)判斷為α地中海貧血表型陽性;如HbA2>3.5%或出現(xiàn)異常血紅蛋白帶(HbF>2.0%)判斷為β地中海貧血表型陽性。

      1.3.3 堿變性試驗(yàn)測(cè)定HbF含量 同時(shí)對(duì)每一分標(biāo)本進(jìn)行堿變性試驗(yàn)。

      1.3.4 對(duì)于電泳分析表型陽性者重抽血進(jìn)行地貧基因分析診斷。

      2 結(jié)果

      2.1 血紅蛋白電泳法2080例中,檢出HbA2<2.0%212例,檢出HbA2>3.5%420例,出現(xiàn)HbH帶44例,檢出HbBart’s帶60例,同時(shí)出現(xiàn)HbH帶和HbBart’s帶 36 例,檢出 HbF>2.0%196 例,HbG2例,HbE4例。按參考區(qū)間標(biāo)準(zhǔn)可判斷出:α地中海貧血表型陽性316例,陽性率為15.2%(316/2080),β地中海貧血表型陽性616例,陽性率29.6%(616/2080),見表 1。

      表1 2080例地中海貧血血紅蛋白電泳分析結(jié)果

      2.2 HbF堿變性試驗(yàn)結(jié)果 2080份標(biāo)本中有203例HbF>2.0%。

      2.3 全自動(dòng)電泳法測(cè)HbF量和HbF堿變性試驗(yàn)對(duì)照結(jié)果 全自動(dòng)電泳法有196例HbF>2.0%,HbF堿變性試驗(yàn)有203例HbF>2.0%,符合率達(dá)96.6%。 電泳中HbA2區(qū)帶清晰集中,如HbF增高大于2.0%時(shí)可在HbA2后出現(xiàn)HbF帶,如HbF小于2.0%時(shí)在HbA2后不出現(xiàn)HbF帶,無法定量。取10例代表性結(jié)果進(jìn)行比較,見表2。可見HbF掃描與堿變性試驗(yàn)結(jié)果基本相符。

      2.4 地貧基因分析結(jié)果 α地中海貧血表型陽性316例和β地中海貧血表型陽性616例重新抽血進(jìn)行地貧基因分析診斷,檢出地貧者888例,其中α-地中海貧血291例,包括標(biāo)準(zhǔn)型157例、靜止型72例、中間型(HbH 病)44例,HbBart’s胎兒水腫綜合征 2 例,HbBart’s+HbG 2 例,HbBart’s+HbE 4例;β地中海貧血591例,αβ復(fù)合型地中海貧血6例。

      2.5 紅蛋白電泳法和地貧基因分析法比較 以基因分析法為標(biāo)準(zhǔn),血紅蛋白電泳法檢測(cè)α地中海貧血準(zhǔn)確度為92.3%,β地中海貧血準(zhǔn)確度為95.9%。

      表2 10例 全自動(dòng)血紅蛋白電泳與HbF堿變性試驗(yàn)結(jié)果比較

      3 討論

      血紅蛋白是人體紅細(xì)胞的主要蛋白質(zhì),由血紅素和珠蛋白組成。珠蛋白肽鏈結(jié)構(gòu)異常和某些肽鏈合成不足常導(dǎo)致血紅蛋白疾病,前者稱異常血紅蛋白病,后者為地中海貧血。地中海貧血分為α地中海貧血和β地中海貧血,在α地中海貧血中,Bart’s水腫胎兒會(huì)早產(chǎn)夭折,標(biāo)準(zhǔn)型和靜止型患兒在出生3~6個(gè)月后HbBart’s區(qū)帶會(huì)消失,實(shí)際上在出生半年后用電泳法只有檢測(cè)出HbH病。HbH病表現(xiàn)為血紅蛋白電泳中出現(xiàn)HbH區(qū)帶或HbH和HbBart’s區(qū)帶,有些合并有HbCS區(qū)帶。β地中海貧主要表現(xiàn)為HbF、HbA2含量增高[3]。因血紅蛋白疾病可以沒有任何臨床癥狀,所以主要依賴于實(shí)驗(yàn)室檢查來診斷。血紅蛋白的分離和鑒定方法很多,國內(nèi)外普遍采用平均紅細(xì)胞參數(shù)(MCV、MCH、MCHC)、紅細(xì)胞脆性等方法進(jìn)行地貧篩查,但其敏感性和特異性較低,而且部分地貧患者(特別是α地中海貧血標(biāo)準(zhǔn)型)MCV和紅細(xì)胞脆性可以正常,易漏診和誤診,漏診率達(dá)13.23%[4]。目前,聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)等分子生物學(xué)技術(shù)主要用于明確診斷α、β地中海貧血,是地中海貧血檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn),但是分子生物學(xué)技術(shù)實(shí)驗(yàn)條件要求高,方法煩瑣,而且檢查費(fèi)用較高,所以不能被廣泛應(yīng)用,特別是基層醫(yī)療單位無法開展。全自動(dòng)電泳法其方法簡便,電泳瓊脂糖膠片易保存,區(qū)帶顏色不容易脫,區(qū)帶清晰,能夠定量檢測(cè)出HbA、HbF、HbA2含量,將地中海貧血進(jìn)行初步分類,同時(shí)還可以篩查出各種異常血紅蛋白,如HbH、HbE、HbG等,可見血紅蛋白電泳法是研究和分析異常血紅蛋白的有效方法,是診斷血紅蛋白分子病不可缺少的手段[5]。本研究分析2080例疑似地中海貧血者的血紅蛋白電泳結(jié)果,以基因分析法為診斷地中海貧血的金標(biāo)準(zhǔn),全自動(dòng)電泳分析統(tǒng)系篩查的α地中海貧血診斷準(zhǔn)確性為92.3%,而篩查β地中海貧血準(zhǔn)確度為95.9%,與文獻(xiàn)報(bào)道基本相同[6]。這些結(jié)果表明,血紅蛋白電泳法篩查地貧準(zhǔn)確度高,能有效地篩查出高?;颊撸貏e是HbH病和β地中海貧效果最理想,HbH病與基因方法完全符合,β地中海貧準(zhǔn)確度達(dá)95.9%。同時(shí)本次研究還檢出HbG 2例檢出HbE 4例,所以紅蛋白電泳法還可以篩查出異常血紅蛋白病。

      血紅蛋白電泳法因支持物的不同而分為濾紙電泳、醋酸纖維素薄膜電泳、瓊脂糖凝膠電泳、毛細(xì)管電泳、高效液相色譜法等。濾紙電泳應(yīng)用最早,但由于其區(qū)帶“拖尾”現(xiàn)象較重,吸附作用和電滲作用較強(qiáng),而且電泳時(shí)間長、速度慢、分辨率較低,已經(jīng)很少使用。醋酸纖維素薄膜電泳中由于HbA、HbF等電點(diǎn)接近,通常不能分開,而且影響因素較多,要完成好的電泳圖譜仍有一定的難度。毛細(xì)管電泳法及高效液相色譜法是近年來發(fā)展的分離方法,還不能廣泛和深入應(yīng)用。本研究使用的全自動(dòng)瓊脂糖凝膠電泳系統(tǒng)的瓊脂糖是由瓊脂分離純化而得,凝膠孔徑較大,對(duì)一般蛋白質(zhì)不起分子篩作用,最大優(yōu)點(diǎn)是幾乎不吸附蛋白質(zhì),因此電泳斑點(diǎn)幾乎無“拖尾”現(xiàn)象,其區(qū)帶掃描分辨率高,區(qū)帶整齊,重復(fù)性好,這與相關(guān)報(bào)道一致[7]。同時(shí)對(duì)HbF的分辨率也大有提高,高于一般的醋酸纖維薄膜電泳,對(duì)測(cè)HbF含量的準(zhǔn)確度高達(dá)96.6%,可以基本代替HbF堿變性實(shí)驗(yàn),使Hb分析更簡便、快捷[8]。在HbA2升高的病例中,其HbF堿變性實(shí)驗(yàn)測(cè)定的HbF含量稍高于(2.0%

      全自動(dòng)瓊脂糖凝膠電泳分析統(tǒng)系操作簡便快速,電泳、染色、脫色、烘干在1h內(nèi)即可完成,對(duì)HbA2的分辨清晰,區(qū)帶集中。而且其從點(diǎn)樣后到打印出檢驗(yàn)結(jié)果都是用計(jì)算機(jī)控制程序完成,代替了以往的手工操作,也避免了人工操作的某些技術(shù)及客觀條件的誤差。

      綜上所述,應(yīng)用全自動(dòng)瓊脂糖凝膠電泳分析統(tǒng)系進(jìn)行電泳分析,區(qū)帶清晰,掃描定量準(zhǔn)確,可以定量檢測(cè)HbA,HbF,HbA2的含量,將地中海貧血進(jìn)行初步分類為α地中海貧血或β地中海貧血,準(zhǔn)確度高,有效地篩查出高?;颊?,為進(jìn)一步進(jìn)行基因診斷和遺傳咨詢提供基礎(chǔ)。但是血紅蛋白電泳是一個(gè)介于篩查和確診的試驗(yàn),有些情況下還應(yīng)結(jié)合其他篩查方法及臨床表現(xiàn)才能作出診斷,有條件的單位應(yīng)開展基因診斷技術(shù),以減少地貧漏檢的可能。

      [1]梁華銘,黎金美.1826例育齡期婦女地中海貧血篩查結(jié)果分析[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2010,5(17):52-53.

      [2]李榮敏,羅建文,韋平宣,等.河池市孕婦產(chǎn)前地中海貧血篩查及基因診斷[J].廣西醫(yī)學(xué),2009,31(11):1603-1604.

      [3]蒙天生,莫鴻健.全自動(dòng)血紅蛋白電泳在診斷地中海貧血中的應(yīng)用[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2009,25(10):1694-1965.

      [4]朱學(xué)海,魏代奎.地中海貧血的基因診斷分析[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2008,3(13):126-127.

      [5]黃 凌.917例血紅蛋白電泳檢查結(jié)果分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2009,27(3):226-227.

      [6]周秀琴,童順桃,譚衛(wèi)荷,等.全自動(dòng)電泳分析系統(tǒng)篩查地中海貧血的臨床應(yīng)用價(jià)值探討[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2009,6(16):1352-1353.

      [7]林慶芳,邱 威.血紅蛋白電泳方法的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2010,16(6):922-924.

      [8]陳鳳平,李菊香,蘇運(yùn)欽,等.應(yīng)用全自動(dòng)電泳系統(tǒng)篩查地中海貧血和異常血紅蛋白病[J].暨南大學(xué)學(xué)報(bào),2010,31(6):603-604.

      R556.6+1,R446.11+2

      B

      1674-1129(2012)05-0472-03

      10.3969/j.issn.1674-1129.2012.05.020

      猜你喜歡
      區(qū)帶電泳變性
      晉州市大成變性淀粉有限公司
      中國造紙(2022年9期)2022-11-25 02:24:54
      輔助陽極在輕微型廂式車身電泳涂裝中的應(yīng)用
      運(yùn)用QC方法提高遼河油田重點(diǎn)區(qū)帶評(píng)價(jià)優(yōu)選質(zhì)量
      征兵“驚艷”
      塔里木盆地中央隆起帶良里塔格組預(yù)探階段有利區(qū)帶評(píng)價(jià)
      特種油氣藏(2018年6期)2019-01-11 02:51:16
      PPG第四屆電泳涂料研討會(huì)在長沙成功舉辦
      上海建材(2017年4期)2017-04-06 07:32:03
      當(dāng)變性女遇見變性男 一種奇妙的感覺產(chǎn)生了
      改良的Tricine-SDS-PAGE電泳檢測(cè)胸腺肽分子量
      變性淀粉在酸奶中的應(yīng)用
      西藏科技(2015年10期)2015-09-26 12:10:16
      紅河油田川口區(qū)帶長8油層組儲(chǔ)層隔夾層研究
      泰州市| 扎赉特旗| 屯门区| 泽州县| 英吉沙县| 闸北区| 新邵县| 保山市| 石台县| 故城县| 会同县| 子洲县| 成武县| 山西省| 抚顺县| 三穗县| 桑日县| 东光县| 余干县| 全南县| 广德县| 竹北市| 东城区| 淮北市| 长汀县| 闵行区| 石屏县| 资讯 | 呼伦贝尔市| 乐山市| 紫阳县| 剑阁县| 安宁市| 兴海县| 鲁山县| 集贤县| 措勤县| 镇雄县| 灵山县| 保德县| 萍乡市|