琥珀酸合用利培酮抗精神疾病研究*

衣桂花 牟群芳 毛曉紅 岳 旺 逄淑濤 張繼國(guó)

(1.青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)心理學(xué)與精神病學(xué)教研室，山東 青島 266021； 2.泰山醫(yī)學(xué)院，山東 泰安 271016 )

琥珀酸(succinate)是“鎮(zhèn)驚息風(fēng)”、“抗癲狂”的經(jīng)典中藥琥珀的有效成分[1]，具有抗癲癇、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜和解熱等多種藥理效應(yīng)。琥珀酸是三羧酸循環(huán)的中間代謝產(chǎn)物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)與腦內(nèi)抑制性神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸(GABA)和?；撬嵋约芭d奮性神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸類似，是一種有多種生物作用的內(nèi)源性神經(jīng)調(diào)質(zhì)(modulator)[1]。點(diǎn)燃模型是目前研究神經(jīng)精神疾病的較為先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)手段，前面的研究已證實(shí)琥珀酸具有抗點(diǎn)燃、抗癲癇的作用[2]，人類的精神活動(dòng)與點(diǎn)燃現(xiàn)象有關(guān)[3]，為開(kāi)發(fā)其更多的藥用價(jià)值，本研究進(jìn)行了部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床觀察探討其抗精神分裂癥作用。

1 材料和方法

1.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1動(dòng)物 Wistar大鼠，♀，體重(180±10) g；昆明種小鼠，體重(18±2) g，♀♂兼用，由青島市藥品檢驗(yàn)所動(dòng)物中心提供。動(dòng)物均于實(shí)驗(yàn)前置實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)環(huán)境1周，自由進(jìn)食、飲水；室溫控制在(23±2) ℃，晝夜循環(huán)光照；小鼠實(shí)驗(yàn)前禁食10 h。實(shí)驗(yàn)時(shí)保持室內(nèi)安靜

1.1.2藥品 琥珀酸succinate(上海試劑一廠)，用前溶于生理鹽水，調(diào)節(jié)pH值至6.3。

1.1.3儀器 BENCHmark腦立體定位儀；SEN-3201電子刺激器；SS-102J隔離器(日本光電公司)；SMUP-PC生物信號(hào)處理系統(tǒng)(上海醫(yī)科大學(xué)生理教研室)；YSD-4型生理藥理多用儀(蚌埠無(wú)線電二廠)。

1.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1琥珀酸小鼠灌胃的急性毒性測(cè)定 小鼠40只，隨機(jī)分為5組，灌胃給藥，劑量分別為12.0，9.0，6.7，5.0，3.8 g·kg-1。觀察7 d，記錄各組死亡情況，應(yīng)用孫氏法計(jì)算LD50，并計(jì)算95%可信限。

1.2.2琥珀酸對(duì)大鼠杏仁核點(diǎn)燃的作用 按文獻(xiàn)方法[4]制備杏仁核電刺激點(diǎn)燃模型：用戊巴比妥鈉(40 mg·kg-1，ip)麻醉動(dòng)物，固定于腦立體定位儀上，沿正中皮膚切口1 cm，暴露顱骨及前囟，按照K?nig圖譜確定大鼠左右杏仁核，坐標(biāo)為前囟后3.0 mm，旁開(kāi)4.8 mm，硬腦膜下8.8 mm，將雙極電極插入。雙極電極由兩根直徑為0.25 mm的絕緣無(wú)銹鎳鉻絲扭成，尖端間距約0.25 mm，另一端分別焊接一微型插頭；將電極和微型插頭用牙托粉固定在顱骨表面。術(shù)后連續(xù)3 d每日青霉素鈉每只10萬(wàn)單位，ip，防止感染。

大鼠術(shù)后恢復(fù)2周，按文獻(xiàn)以恒定電流刺激左側(cè)杏仁核，每日1次。刺激參數(shù)為400 μA單相方波，波寬1 ms，頻率為60 Hz，持續(xù)時(shí)間1 s。用四道生物信號(hào)微機(jī)處理系統(tǒng)(SMUP-PC)測(cè)定并記錄動(dòng)物腦電(EEG)變化，記錄后放電時(shí)程(afterdischarge duration，ADD)和發(fā)作強(qiáng)度的Racine’s分級(jí)[4]。ADD是指刺激后杏仁核EEG波幅至少為刺激前的兩倍和頻率在1 Hz以上的放電持續(xù)時(shí)間；發(fā)作強(qiáng)度根據(jù)Racine’s法分為5級(jí)。連續(xù)3次出現(xiàn)V級(jí)發(fā)作反應(yīng)即為點(diǎn)燃大鼠(kindled rat)，用于下述實(shí)驗(yàn)。

將點(diǎn)燃大鼠灌胃給藥，給藥劑量為：0.1，0.4，0.8 g·kg-1，30 min后測(cè)定后放電時(shí)程和Racine’s分級(jí)并與給藥前比較。

1.3 臨床研究對(duì)象

2003年9月至2004年2月在青島市精神衛(wèi)生中心住院的患者，年齡18～60歲，符合CCMD-3精神分裂癥診斷標(biāo)準(zhǔn)，PANSS總分≥60分，PANSS興奮因子(包括興奮、敵意、不合作、沖動(dòng)控制障礙和幻覺(jué)行為5條目)分≥15分，且5條中至少有3條為中度及以上。排除患有重大軀體疾病或神經(jīng)系統(tǒng)疾病者以及妊娠期或哺乳期婦女。以符合上述標(biāo)準(zhǔn)的56例精神分裂癥患者為研究對(duì)象。

1.4 量表

陽(yáng)性和陰性綜合征量表 (PANSS)[7]，1997年張明園修訂版。30個(gè)基本項(xiàng)目，按7 級(jí)評(píng)分, 從1 (無(wú)癥狀) 到7 (極重度) , 依精神病理水平遞增排列。每級(jí)有具體的工作用評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)。

治療時(shí)出現(xiàn)的癥狀量表(TESS)[8]，國(guó)內(nèi)簡(jiǎn)稱“副反應(yīng)量表”，由美國(guó)NIMH 1973年編制。共33項(xiàng)，每項(xiàng)均需做出嚴(yán)重程度及采取的措施兩方面的評(píng)定。其中嚴(yán)重程度水平0～4級(jí)：0級(jí)：無(wú)該項(xiàng)癥狀，1級(jí)：極輕或可疑，2級(jí)：輕度，3級(jí)：中度，4級(jí)：重度。采取措施欄分0～6級(jí)：分別是不需任何處理，加強(qiáng)觀察，予以拮抗藥，改變劑量，改變劑量并予以拮抗藥，暫停治療，終止治療。

1.5 臨床研究方法

將上述56例入組的精神分裂癥患者隨機(jī)分為兩組。利培酮合并琥珀酸組(以下簡(jiǎn)稱研究組)28例，男性20例，女性18例，平均年齡為(32.23±14.60)歲，平均住院次數(shù)(1.45±0.72)次，平均病程(8.43±3.48)年；利培酮組(以下稱對(duì)照組)28例，男性21例，女性17例，平均年齡(33.72±16.71)歲，平均住院次數(shù)(1.33±0.65)次，平均病程(7.93±3.02)年。兩組間在年齡、住院次數(shù)及病程上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

治療組在1周內(nèi)將利培酮逐漸增量至1～3 mg·d-1，合并使用琥珀酸0.25～0.75 g，在后續(xù)治療中利培酮?jiǎng)┝烤S持在2～5 mg·d-1。對(duì)照組單獨(dú)使用利培酮治療，用法同治療組。觀察期間不合并使用其他抗精神病藥物、抗抑郁藥、抗躁狂藥、ECT，睡眠障礙者合并2 mg氯硝西泮，出現(xiàn)錐體外系反應(yīng)時(shí)合并使用安坦。分別于治療前和治療后8周末采用PANSS量表評(píng)定藥物療效，TESS量表評(píng)定藥物不良反應(yīng)的情況。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)資料均通過(guò)SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行處理。

2 結(jié) 果

2.1 琥珀酸小鼠灌胃的急性毒性測(cè)定

小鼠灌胃給藥后觀察7 d，記錄各組死亡情況，孫氏改良法計(jì)算其LD50值為7.52 g·kg-1，95%可信限為6.30～8.98 g·kg-1，毒性較低。

2.2 琥珀酸對(duì)大鼠杏仁核點(diǎn)燃的作用

如表1所示，0.1，0.4 g·kg-1劑量琥珀酸對(duì)大鼠杏仁核點(diǎn)燃沒(méi)有影響，0.8 g·kg-1劑量的琥珀酸可縮短點(diǎn)燃大鼠ADD，降低Racine’s分級(jí)。

表1 口服琥珀酸對(duì)大鼠杏仁核點(diǎn)燃的影響

2.3 研究組和對(duì)照組治療前、后PANSS總分、興奮因子分的比較

研究組和對(duì)照組治療前PANSS總分、興奮因子分經(jīng)t檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療8周末，兩組間PANSS總分、興奮因子分的變化均有顯著性差異(P﹤0.05)。詳見(jiàn)表2。

2.4 研究組與對(duì)照組治療中不良反應(yīng)比較

在急性興奮期內(nèi)，研究組不良反應(yīng)主要為震顫、靜坐不能、視物模糊和頭昏，程度多為輕至中度，而對(duì)照組不良反應(yīng)主要為肌強(qiáng)直、震顫、靜坐不能、口干、視物模糊、嗜睡和頭昏。兩組間不良反應(yīng)的發(fā)生率和嗜睡的發(fā)生率存在顯著性差異，其他各不良反應(yīng)發(fā)生率無(wú)顯著性差異。詳見(jiàn)表3。

表3 研究組與對(duì)照組治療中不良反應(yīng)比較

3 討 論

前期的研究已觀察到腸道外給予琥珀酸具有抗驚厥[5]及抑制大鼠化學(xué)性戊四唑點(diǎn)燃的作用[4]，本研究使用慢性癲癇電刺激點(diǎn)燃動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)的結(jié)果同樣也顯示出類似的結(jié)果。說(shuō)明琥珀酸能透過(guò)血腦屏障到達(dá)中樞并具有相應(yīng)的生物活性，有望起到對(duì)中樞功能的調(diào)節(jié)作用。劉艷霞、王蕾等[6]已觀察到琥珀酸可增加腦內(nèi)谷氨酸脫羧酶活性，升高腦內(nèi)GABA水平，增強(qiáng)GABA抑制系統(tǒng)功能，降低谷氨酸水平。

中藥琥珀含有3%～8%的琥珀酸。琥珀酸廣泛存在于海藻、地衣、真菌等中，因有貝類的鮮味又被稱為干貝素，加上毒性很小，琥珀酸鹽與谷氨酸鹽一樣被用作食品添加劑[9]。

精神分裂癥主要表現(xiàn)為高級(jí)精神活動(dòng)(如思維、行為等)的異常，而動(dòng)物缺乏高級(jí)精神活動(dòng)，因而精神分裂癥的動(dòng)物制藥模型是不理想的。人類的很多精神活動(dòng)和行為具有類似點(diǎn)燃的特點(diǎn)[3]，點(diǎn)燃模型是研究精神分裂癥的有用模型。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分發(fā)現(xiàn)琥珀酸具有抑制點(diǎn)燃的作用，說(shuō)明琥珀酸對(duì)大腦功能活動(dòng)具有調(diào)節(jié)作用，可能對(duì)精神分裂癥具有治療作用，其具體的作用機(jī)制有待于進(jìn)一步的研究證實(shí)。

臨床研究證實(shí)，琥珀酸與利培酮聯(lián)合用藥，PANSS總分和興奮因子分均較對(duì)照組降低更明顯，說(shuō)明琥珀酸對(duì)利培酮有增效作用；TESS評(píng)分不良反應(yīng)發(fā)生率顯著低于對(duì)照組，說(shuō)明琥珀酸有減少減輕利培酮副作用的功用。綜上，琥珀酸對(duì)利培酮治療精神分裂癥有明顯的減副增效作用。

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[6] 劉艷霞,王蕾,張健,等.琥珀酸對(duì)大鼠化學(xué)性點(diǎn)燃和電刺激性點(diǎn)燃的抑制作用[C].第七屆中國(guó)海洋湖沼藥物學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集,2001:165-170．

[7] 何燕玲,張明園.陽(yáng)性和陰性綜合征量表 (PANSS) 及其應(yīng)用[J].臨床精神醫(yī)學(xué)雜志,1997,7(6):353-355.

[8] 張明園.精神科評(píng)定量表手冊(cè)[M].長(zhǎng)沙:湖南科學(xué)技術(shù)出版社,1998:197-202．

[9] 凌關(guān)庭.食品添加劑手冊(cè)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2003:609.