乙二胺四乙酸二鉀抗凝劑致血小板假性降低4例分析

吳春香，馬 晉（四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院／四川省人民醫(yī)院城東病區(qū)檢驗(yàn)科，成都 610101）

全血細(xì)胞分析在臨床檢測(cè)中應(yīng)用廣泛。血小板計(jì)數(shù)成為臨床血栓、出血性疾病診療的重要依據(jù)，也是手術(shù)患者術(shù)前檢測(cè)的重要參數(shù)之一。國(guó)際血液標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（ISCH）推薦使用乙二胺四乙酸二鉀（EDTA－K2）抗凝血進(jìn)行全血細(xì)胞計(jì)數(shù)。然而，某些人群會(huì)發(fā)生EDTA依賴性假性血小板減少（PTCP），其發(fā)生率為0.07%～0.21%［1］，如發(fā)現(xiàn)血小板計(jì)數(shù)有誤，需進(jìn)行糾正。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 4例標(biāo)本均來(lái)自2010年11月至2011年8月本院門(mén)診住院患者。患者1為血液內(nèi)科輕度貧血患者；患者2為骨科手術(shù)患者，術(shù)前檢測(cè)發(fā)現(xiàn)血小板減少；患者3為體檢中心體檢者；患者4為血透中心透析患者。4例EDTA抗凝全血儀器檢測(cè)血小板均減少。

1.2 儀器與試劑 美國(guó)Beckman Coulter LH－750全自動(dòng)血液分析儀及進(jìn)口配套試劑；Sysmex KX－21血細(xì)胞分析儀及試劑；Olympus雙目顯微鏡；BD公司EDTA－K2真空抗凝管；草酸銨血小板稀釋液；瑞氏染液。

1.3 方法 首先，用Beckman Coulter LH－750全自動(dòng)血液分析儀篩檢出血小板減低且與臨床聯(lián)系患者無(wú)出血淤斑等癥狀的標(biāo)本。對(duì)標(biāo)本進(jìn)行涂片干燥瑞氏染色鏡檢。其次，用KX－21進(jìn)行全血標(biāo)本復(fù)檢。再次，取20μL EDTA抗凝全血標(biāo)本于380μL血小板稀釋液稀釋鏡檢。最后重新采集患者末梢血于KX－21檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

4例患者EDTA抗凝全血標(biāo)本LH－750分析儀檢測(cè)血小板降低。染色鏡檢、EDTA抗凝全血復(fù)檢、抗凝全血草酸銨處理鏡檢、患者末梢血復(fù)檢等結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 各種方法血小板檢測(cè)結(jié)果

EDTA抗凝全血于LH750檢測(cè)各主要參數(shù)結(jié)果與KX－21復(fù)檢以及重采患者末梢血復(fù)檢數(shù)據(jù)比較見(jiàn)表2。應(yīng)用配對(duì)設(shè)計(jì)均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，LH750全血血小板檢測(cè)結(jié)果與KX－21檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。LH750檢測(cè)血小板結(jié)果與末梢血復(fù)檢結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。KX－21檢測(cè)血小板結(jié)果與末梢血復(fù)檢結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 不同方法各參數(shù)處理結(jié)果

3 討 論

4例患者標(biāo)本中LH750檢測(cè)血小板數(shù)均減少，且血小板直方圖曲線不擬合，提示信息顯示：巨血小板，血小板凝塊?；颊邿o(wú)出血、淤點(diǎn)等臨床癥狀，瑞氏染色鏡檢見(jiàn)血小板有聚集，取少量EDTA抗凝血草酸銨處理鏡檢見(jiàn)仍有凝集，而無(wú)抗凝劑的患者末梢血檢測(cè)血小板正常。該4例患者考慮為EDTA抗凝致血小板假性聚集，即PTCP的可能。LH750檢測(cè)EDTA全血時(shí)因使用電阻抗原理檢測(cè)血小板，EDTA致血小板假性聚集后成血小板團(tuán)體積增大，大于儀器通常設(shè)定的血小板體積范圍2～30 f L，從而使血小板數(shù)量減少，故儀器提示巨血小板，血小板凝塊。末梢血因無(wú)EDTA未產(chǎn)生假性聚集，故血小板數(shù)量相對(duì)準(zhǔn)確。對(duì)于EDTA假性聚集產(chǎn)生的原因有學(xué)者報(bào)道可能與抗血小板抗體的自身抗體等有關(guān)，如IgG、Ig M及抗血小板抗體或抗心磷脂抗體等［2］。還有學(xué)者認(rèn)為與血小板表面存在某些隱匿性抗原有關(guān)。對(duì)EDTA依賴的血小板凝集報(bào)道越來(lái)越多，對(duì)于該現(xiàn)象的處置要求檢驗(yàn)者有高度責(zé)任感，以發(fā)現(xiàn)PTCP，進(jìn)一步可草酸銨稀釋計(jì)數(shù)或重采患者末梢血復(fù)檢，以糾正血小板檢測(cè)結(jié)果。

［1］Sakurai S，Shiojima I，Tanigawa T，et al.Aminoglycosides prevent and dissociate the aggregation of platelets in patients with EDTA－dependent pseudothrombocytopenia［J］.Br J Haematol，1997，99（4）：817－823.

［2］魯家才，王超.乙二胺四乙酸依賴性血小板聚集形成原因初探［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2004，13（11）：1467－1468.