血液標(biāo)本處置方式和時(shí)間對(duì)血糖濃度的影響及統(tǒng)計(jì)學(xué)問(wèn)題探討

牟衛(wèi)東（重慶市云陽(yáng)縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科 404500）

由于血液標(biāo)本離體后紅細(xì)胞對(duì)葡萄糖進(jìn)行酵解作用，導(dǎo)致血液標(biāo)本中血糖濃度降低，因此將血液標(biāo)本中紅細(xì)胞與血清進(jìn)行分離處置和放置時(shí)間是影響血糖濃度的重要因素［1-3］。大量研究重復(fù)該類研究實(shí)驗(yàn)，但由于作者對(duì)統(tǒng)計(jì)學(xué)知識(shí)的不熟悉，在統(tǒng)計(jì)學(xué)方法選擇上存在一些誤用，特別是在考察血液標(biāo)本放置不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)血糖濃度檢測(cè)的影響時(shí)均采用配對(duì)t檢驗(yàn)，直接導(dǎo)致犯同一類錯(cuò)誤的概率增大，即把本無(wú)差異兩個(gè)總體均數(shù)判為有差異，使結(jié)論的可信度降低［1-7］。為此，作者選擇3種常見(jiàn)的血液標(biāo)本離體后狀態(tài)，放置不同時(shí)間后進(jìn)行血糖濃度測(cè)量，以分析其對(duì)血糖濃度檢測(cè)的影響，重點(diǎn)在于給出了這類實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)正確的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 按照隨機(jī)抽樣原則選取臨床診斷無(wú)糖尿病的健康體檢人員30例，男17例，女13例，年齡31～52歲（平均43.8歲）。所有參與人員簽署了知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 血糖濃度檢測(cè)儀器為深圳邁瑞B(yǎng)S－800全自動(dòng)生化分析儀及配套校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，檢測(cè)試劑為葡萄糖測(cè)定試劑盒（葡萄糖氧化酶法），批號(hào)141512003，由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供。

1.2.2 方法 按照參考文獻(xiàn)［5］對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行處理，抽取清晨空腹靜脈血9 mL，不抗凝，分裝成6管，各1.5 mL，分別編號(hào)A、B、C、D、E、F管。血液標(biāo)本進(jìn)行以下處理：A管離心，分離血清；B管離心，不分離血清；C管、D管、E管、F管靜置于室溫中（27℃），檢測(cè)前離心。在距離采血時(shí)間1 h測(cè)A、B管；2 h測(cè) A、B、C管；4 h測(cè) A、B、D管；6 h測(cè) A、B、E管；8 h測(cè) A、B、F管。每份樣品平行測(cè)定2次，取均值記錄。按樣本處理方式進(jìn)行分類，A 管為第1組，B管為第2組，C、D、E、F為第3組。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用表示。不同處理方式下血液標(biāo)本不同時(shí)間點(diǎn)血糖值檢測(cè)結(jié)果間的均值比較采用方差分析；以A管第1小時(shí)測(cè)量值為對(duì)照組，各組不同時(shí)間點(diǎn)血糖值與對(duì)照組兩兩比較采用Dunnett－t檢驗(yàn)；作為比較，各組不同時(shí)間點(diǎn)血糖值與對(duì)照組比較還采用配對(duì)t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 血液標(biāo)本不同處理方式下放置不同時(shí)間對(duì)血糖測(cè)量值的影響 按處理方式的不同對(duì)血液標(biāo)本匹配為3個(gè)組，血液標(biāo)本的處理方式對(duì)血糖測(cè)量結(jié)果有顯著影響（F＝84.216，P＜0.01），同時(shí)標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)血糖結(jié)果也存在顯著影響（F＝14.621，P＜0.01），見(jiàn)表1。

表1 處理方式和放置時(shí)間對(duì)血糖測(cè)量結(jié)果方差分析

表2 不同處理方式的血液標(biāo)本放置不同時(shí)間血糖測(cè)定結(jié)果的比較（mmol／L

表2 不同處理方式的血液標(biāo)本放置不同時(shí)間血糖測(cè)定結(jié)果的比較（mmol／L

注：－表示無(wú)數(shù)據(jù)。采用配對(duì)t檢驗(yàn)與0 h相比，a P＜0.01；與0 h相比，b P＜0.05，c P＜0.01。

放置時(shí)間（h）第1組（離心，分離血清）第2組（離心，不分離血清）第3組（未離心，37℃水?。? 6.02±1.12 6.02±1.12 6.02±1.12 1 6.02±1.12 5.56±1.10a －2 5.93±1.10a 5.39±1.10a 5.12±1.10ab 4 5.87±1.12a 4.87±0.80ab 4.37±1.14ac 6 5.82±1.11a 4.89±1.04ac 3.43±1.20ac 8 5.66±1.07a 4.55±1.02ac 2.72±1.24ac F 0.457 7.062 38.487 P 0.767 ＜0.01 ＜0.01

2.2 血液標(biāo)本不同處理方式下放置不同時(shí)間血糖結(jié)果比較為進(jìn)一步了解標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)血糖值測(cè)量結(jié)果的影響，每組間進(jìn)行方差分析，后用Dunnett－t檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果顯示采用第1組處理方式處理血液標(biāo)本，血糖測(cè)定值在各時(shí)間點(diǎn)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F＝0.457，P＞0.05）；采用第2組和第3組處理方式，發(fā)現(xiàn)隨著放置時(shí)間的延長(zhǎng)，血糖測(cè)量值均逐漸降低，而第3組處理方式下血糖值下降更為顯著，如圖1所示；與對(duì)照組相比，第2組在第4小時(shí)時(shí)血糖值下降差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而第6、8小時(shí)血糖值顯著降低（P＜0.01）；第3組則在第2小時(shí)時(shí)血糖值降低差異就具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。各組放置不同時(shí)間后血糖值與0 h采用配對(duì)t檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)各時(shí)間點(diǎn)血糖值均顯著降低（P＜0.01）。

圖1 不同處理方式的血液標(biāo)本血糖值隨放置時(shí)間的變化曲線

3 討 論

血液標(biāo)本采集后，紅細(xì)胞仍然酵解葡萄糖，使標(biāo)本血糖濃度降低［8］。眾多研究顯示，標(biāo)本放置時(shí)間、保存溫度、血清分離、采用不同的抗凝劑均對(duì)血糖測(cè)量的穩(wěn)定性產(chǎn)生影響［1-2，4，7］。本實(shí) 驗(yàn)結(jié)果也顯示，血液標(biāo)本處理方式和放置時(shí)間對(duì)血糖濃度具有顯著影響，提示臨床醫(yī)生在分析血糖檢測(cè)結(jié)果時(shí)，要注意實(shí)驗(yàn)前因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。另一方面，臨床實(shí)驗(yàn)室在重視室內(nèi)質(zhì)量控制的時(shí)候，也要充分認(rèn)識(shí)實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制的重要性。這需要加強(qiáng)臨床醫(yī)生及臨床實(shí)驗(yàn)室對(duì)這一常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目充分認(rèn)識(shí)和溝，從而使血糖檢測(cè)更有助于相關(guān)疾病診療和檢測(cè)。

t檢驗(yàn)和方差分析均是對(duì)計(jì)量資料間均值比較的常用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，然而一些臨床醫(yī)務(wù)人員由于并不熟悉這兩種統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，在實(shí)際運(yùn)用中難免出現(xiàn)一些不妥甚至誤用現(xiàn)象。通過(guò)分析已發(fā)表血液標(biāo)本處理和放置時(shí)間對(duì)血糖濃度影響系列研究中的相關(guān)文章，最常見(jiàn)的錯(cuò)誤在于對(duì)多個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)的標(biāo)本血糖值均數(shù)進(jìn)行比較時(shí)，采用配對(duì)t檢驗(yàn)方法，這樣做使得增大了犯同一類錯(cuò)誤的概率α，即可能把本來(lái)無(wú)差異的兩個(gè)總體均數(shù)判為有差異，使結(jié)論的可信度降低。本文給出以一種正確的該類實(shí)驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，同時(shí)與文章報(bào)道的采用配對(duì)t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法相比，得出的結(jié)論截然不同，發(fā)現(xiàn)每組不同時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即采用配對(duì)t檢驗(yàn)增大了假陽(yáng)性概率。

通過(guò)糾正該類研究的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法發(fā)現(xiàn)，對(duì)血液標(biāo)本及時(shí)離心并分離血清血糖值在8 h內(nèi)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；離心但不分離血清將在第4小時(shí)血糖值濃度出現(xiàn)降低；不離心置于室外下的標(biāo)本則在第2小時(shí)血糖值濃度出現(xiàn)降低。因此，為保障血糖檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，在血液標(biāo)本不能及時(shí)送檢情況下，采血人員應(yīng)及時(shí)對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行血清分離操作。

［1］吳鑫，陳峰.室溫下血液標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)血糖測(cè)定結(jié)果的影響［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8（9）：1131－1132.

［2］譚國(guó)萍.血液標(biāo)本放置時(shí)間和抗凝劑對(duì)血糖檢測(cè)結(jié)果的影響［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志，2004，11（7）：1292－1293.

［3］夏歷，謝小兵.血糖測(cè)定中影響因素的探討［J］.湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2007，4（1）：33－35.

［4］沈紅五，陳宏梅，徐秀群，等.標(biāo)本放置時(shí)間與保存溫度對(duì)血糖血鉀結(jié)果的影響［J］.護(hù)理學(xué)雜志，2011，26（8）：61－63.

［5］魏成翠，劉阿玲，賈琳.血液標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)血糖檢測(cè)結(jié)果的影響［J］.中國(guó)誤診學(xué)雜志，2009，9（15）：3559－3560.

［6］任愛(ài)英.血液標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)血糖測(cè)定結(jié)果的影響［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7（1）：59－60.

［7］劉學(xué)政.血液標(biāo)本放置時(shí)間和處理方式對(duì)血糖濃度的影響［J］.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（3）：368－369.

［8］王正芳.糖尿病患者靜脈血液離體后不同時(shí)間血糖濃度的變化［J］.中國(guó)社區(qū)醫(yī)師：醫(yī)學(xué)專業(yè)，2011，30（13）：30.