柴黃顆粒對LPS誘導(dǎo)的雞發(fā)熱模型的影響

郭群 劉睿芬 畢鳳荷 張建輝 （天津市海納德動物藥業(yè)有限公司 天津300456）

柴黃顆粒對LPS誘導(dǎo)的雞發(fā)熱模型的影響

郭群 劉睿芬 畢鳳荷 張建輝 （天津市海納德動物藥業(yè)有限公司 天津300456）

柴胡、黃芩、葛根等是古方小柴胡湯的加減方。實驗通過觀察柴黃顆粒（CHKL）0.2 g/kg、0.6 g/kg、1.0 g/kg劑量對80 μg/kg LPS誘導(dǎo)雞發(fā)熱模型的影響，考察了它們的解熱作用和對LPS的耐受作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0.6g/kg、1.0g/kg劑量的CHKL對相同劑量的LPS誘導(dǎo)雞發(fā)熱均有顯著解熱作用；但不同劑量的CHKL在起效時間和作用效果上有所區(qū)別。

獸醫(yī)學(xué) 柴胡 黃芩 葛根 顆粒 LPS 解熱

隨著集約化養(yǎng)殖程度的增高，養(yǎng)殖密度增加，空氣流通不夠，或氣候突然變化等影響，雞群很容易大面積發(fā)病，尤其是季節(jié)交替時發(fā)病率更高，給養(yǎng)殖戶造成較大的經(jīng)濟損失。

家禽外感風(fēng)寒引起的發(fā)熱、寒顫、扎堆等癥狀，如不及時治療損失嚴重，尤其是雛雞死亡率比較高。在春冬、秋冬兩季交替過程中整體雞群發(fā)病表現(xiàn)為發(fā)熱、采食量降低、飲水量降低、精神沉郁、扎堆、寒顫等癥狀，隨著就出現(xiàn)甩頭、啰音、咳嗽喘氣等氣管、支氣管、氣囊、肺等感染，造成免疫力下降，引發(fā)整體雞群病毒和細菌的混合感染。目前治療主要以抗菌化學(xué)藥品為主，但復(fù)發(fā)率高。由于家禽消化道短，對中藥散劑的利用率較低，導(dǎo)致中藥的療效不突出。采用中藥提取物制備的制劑產(chǎn)品用于家禽的很少，如雙黃連口服液（國標(biāo)）、清解合劑（地標(biāo)升國標(biāo)）等，遠遠不能滿足養(yǎng)殖市場的需要。柴黃顆粒臨床用于禽外感風(fēng)寒所致的發(fā)熱重、惡寒輕、精神萎靡、寒顫和輕微腹瀉等，效果較好。經(jīng)市場調(diào)研具有較好的市場潛力和經(jīng)濟效益，在推動健康養(yǎng)殖和維護食品安全方面也具有積極的意義。

1 材料

1.1 試驗動物

海蘭褐蛋公雛，16日齡，體重平均125±10 g。

1.2 試劑

柴黃顆粒，天津生機集團股份有限公司研制；內(nèi)毒素（LPS標(biāo)準(zhǔn)品，編號：L2008-25mg；批號：028K2340），美國 sigma 公司生產(chǎn)。

2 方法

2.1 動物分組及造模

將 150只 16日齡試驗雞隨機分成高（1.0 g/kg）、中（0.6 g/kg）、低（0.2 g/kg）3個劑量組、健康對照組和模型組，每組30只試驗雞。對以上劑量組和模型組按80 μg/kg進行內(nèi)毒素腹腔注射，健康對照組按注射量注射滅菌后的生理鹽水；造模后120 min，給藥組按劑量灌服CHKL，健康對照組同劑量灌服生理鹽水；給藥5天停藥后，給中劑量組按80 μg/kg進行內(nèi)毒素腹腔注射。

2.2 檢測指標(biāo)

造模前2天，每天2次（上午9:00和下午14:00）測定各組實驗雞的基礎(chǔ)體溫（肛溫），統(tǒng)計基礎(chǔ)溫度，并做成曲線；造模后，分別在 30 min、120 min、240 min、360 min、480 min 時間測定肛溫，計算體溫變化值。

2.3 統(tǒng)計學(xué)方法

各組數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差表示，多組數(shù)據(jù)采用SPASS11.5統(tǒng)計分析軟件進行單因素方差分析，組間比較采用百分數(shù)資料差異顯著性檢驗。

3 結(jié)果

圖1 雞只基礎(chǔ)體溫曲線圖

試驗結(jié)果表明，各試驗組雞只基礎(chǔ)體溫?zé)o顯著性差異（P＞0.05）。

3.1 基礎(chǔ)體溫具體結(jié)果見表1和圖1

表1 雞只基礎(chǔ)體溫（n=30）

3.2 CHKL對80 μg/kg劑量的LPS誘導(dǎo)雞只發(fā)熱的影響

CHKL對80 μg/kg劑量的LPS誘導(dǎo)雞只發(fā)熱的影響結(jié)果見表2、表3和圖2。

表2 CHKL對雞只腹腔注射80 μg/kg LPS后不同時間T的表2 影響（n=30）

表3 CHKL對雞只腹腔注射80μg/kg LPS后不同給藥天數(shù)表2 T的影響（n=30）

圖2 CHKL對雞只腹腔注射80 μg/kg LPS后不同給藥天圖2 數(shù)T的影響（℃）

試驗結(jié)果表明：造模前，模型組、CHKL 3個劑量組、健康對照組體溫比較無顯著（P＞0.05）差異；造模后，模型組和CHKL 3個劑量組的體溫與健康對照組相比，有顯著性差異（P＜0.05）；給藥后30 min，CHKL 3個劑量組與模型組相比均有顯著差異（P＜0.05），CHKL中劑量組、低劑量組和高劑量組比較有顯著性差異（P＜0.05）；給藥后 120 min 至 120 h，CHKL低劑量組與中劑量組和高劑量組比較有顯著性差異（P＜0.05），CHKL中劑量組和高劑量組比較無顯著性差異（P＞0.05）。

3.3 第二次注射內(nèi)毒素對80 μg/kg劑量的LPS誘導(dǎo)雞只發(fā)3.3 熱的時間和強度的影響

給予服用5天CHKL中劑量組的雞只按80 μg/kg劑量第二次腹腔注射內(nèi)毒素，結(jié)果見表4和圖3。

表4 CHKL對雞只第二次腹腔注射80μg/kg LPS后不同時間T值的影響（n=30）

圖3 80 μg/kg LPS劑量第二次注射的溫度變化曲線圖

試驗結(jié)果表明：腹腔注射LPS 120 min后，健康對照組和CHKL劑量組體溫均有所升高，但給予5天后的CHKL劑量組體溫達到最高點的時間延長（4 h延至6 h），強度明顯較未灌服CHKL弱（42.54℃降至42.08℃）。表明服用CHKL雞只具有抑制內(nèi)毒素引起的體溫升高，延緩體溫上升時間的特性，說明CHKL具有抑制內(nèi)毒素致熱作用。

4 討論

4.1 發(fā)熱模型的選擇

由于LPS（內(nèi)毒素）誘導(dǎo)的發(fā)熱表現(xiàn)為雙相熱和三相熱，并伴有寒顫、精神萎靡和輕微腹瀉等癥狀，與臨床感染性炎癥所致的發(fā)熱相似，是經(jīng)典的炎性發(fā)熱模型，常用于篩選解熱藥物。關(guān)于雞采用LPS致熱篩選家禽用解熱藥物的篩選目前國內(nèi)報道較少，本處方產(chǎn)品主要由柴胡、黃芩、甘草等多味藥材組成，臨床用于家禽外感風(fēng)寒所致的發(fā)熱、寒顫、精神沉郁、輕微腹瀉等癥，通過該法初篩后用于臨床放大實驗具有指導(dǎo)意義。

4.2 給藥點的選擇

從以上結(jié)果可以看出注射內(nèi)毒素后，雞只體溫在1.5～4 h內(nèi)快速上升，4 h達最高點，然后緩慢下降，這時精神狀況未見明顯改善，12 h后體溫恢復(fù)正常。因此選擇給藥點非常關(guān)鍵，本實驗選擇2 h處給藥，旨在觀察體溫快速上升過程中藥物的解熱作用，結(jié)果表明CHKL確有顯著的解熱作用。

4.3 中藥的抗內(nèi)毒素作用

由于中藥的組分較多，報道其對內(nèi)毒素有作用的藥材不少，柴胡、黃芩、甘草等藥材均在其中。本實驗設(shè)計對CHKL中劑量組進行第二次腹腔注射相同劑量和濃度的內(nèi)毒素，結(jié)果雞只對內(nèi)毒素具有耐受性，體溫達最高點的時間延緩，強度減弱，表明CHKL具有一定的抗內(nèi)毒素作用，具體用于預(yù)防的劑量等技術(shù)參數(shù)有待于進一步研究。■

[1]唐曉峰，薛漫清，王暉，等.大鼠發(fā)熱模型及發(fā)熱機制的研究進展[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報，2009，25（3）：327-331.

[2]孫明瑜，謝鳴，高琳.小柴胡湯合煎液與分煎合液對不同劑量LPS誘導(dǎo)的大鼠發(fā)熱模型的影響 [J].上海中醫(yī)藥雜志，2003，37（10）：44-47.

[3]高琳，謝鳴，孫明瑜.柴苓合煎液對LPS誘導(dǎo)的大鼠發(fā)熱模型的影響[J]. 中國試驗方劑學(xué)雜志，2003，9（6）：22-25.

[4]陳雙萍，范泉，韓寧林，等.熱毒清口服液對內(nèi)毒素性發(fā)熱家兔體溫的影響[J].中醫(yī)藥臨床雜志，2006，18（3）：247.

2011-05-09