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    冷藏對(duì)魚腥草品質(zhì)及酶活性變化的影響

    2011-11-18 05:50:02岳彩艷徐俐尹智華
    湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2011年16期
    關(guān)鍵詞:酶活性魚腥草品質(zhì)

    岳彩艷 徐俐 尹智華

    摘要:為研究冷藏條件下魚腥草(Houttuynia cordata Thunb.)保鮮效果,尋求簡(jiǎn)便、高效的保鮮方法,以新鮮魚腥草為試材,在溫度1~5 ℃、濕度75%~80%條件下,結(jié)合保鮮劑處理及包裝對(duì)魚腥草失重率、呼吸強(qiáng)度、總黃酮含量、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除率、甲基正壬酮含量、剪切力、過(guò)氧化物酶及多酚氧化酶活性進(jìn)行研究。結(jié)果表明,冷藏能很好地保持魚腥草品質(zhì),減少失重的發(fā)生,保持總黃酮、甲基正壬酮含量及DPPH清除率;同時(shí)降低了呼吸強(qiáng)度,抑制了過(guò)氧化物酶和多酚氧化酶活性的上升。其中0.004%(m/m,下同)赤霉素、0.2%(m/m,下同)檸檬酸、0.005%(m/m,下同)亞硫酸鈉結(jié)合低溫處理效果最好,貯藏70 d仍保持較好的色澤及口感。

    關(guān)鍵詞:魚腥草;品質(zhì);冷藏;酶活性

    中圖分類號(hào):S567文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0439-8114(2011)16-3371-03

    The Impact of Cold Storage on Quality and Enzyme Activity of Houttuynia cordata

    YUE Cai-yan,XU Li,YIN Zhi-hua

    (College of Life Science,Guizhou University,Guiyang 550025,China)

    Abstract: To finda convenient and efficient preservation method, fresh Houttuynia cordata was stored at 1~5 ℃ with a humidity of 75%~80% combined with preservative treatment and package. The weight loss rate, respiration intensity, total flavonoids content, DPPH clearance rate, methylundecanones content, shear force peroxidase (POD), and polyphenol oxidase (PPO) activity were studied. The results showed that cold storage could keep the quality of H. cordata well, decrease the weight loss rate, keep the content of flavonoids and methylundecanones and DPPH clearance rate. Meanwhile, the respitatory rate was decreased and the ascending of POD and PPO activity was depressed. Treatment of 0.004%(m/m) gibberellin, 0.2%(m/m) citric acid, 0.005%(m/m) sodium metabisulfite and cold storage had the best effect, the colour and taste of H. cordata remained well in 70 days.

    Key words: Houttuynia cordata Thunb.; quality; cold storage; enzyme activity

    魚腥草(Houttuynia cordata Thunb.)為三白草科蕺菜屬的多年生草本植物,魚腥草原產(chǎn)我國(guó),以長(zhǎng)江流域以南分布最廣,目前在云南、貴州、四川等地栽培較多[1]?,F(xiàn)代臨床研究證明,魚腥草主要有抗菌、抗病毒、消炎、鎮(zhèn)咳、抗過(guò)敏、利尿、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等[2]作用。按照《衛(wèi)生部關(guān)于進(jìn)一步規(guī)范保健食品原料管理的通知》,2002年魚腥草被國(guó)家衛(wèi)生部正式確定為“既是藥品,又是食品”的極具開發(fā)潛力的資源之一。

    魚腥草含有豐富的甲基正壬酮、癸酰乙醛等揮發(fā)性物質(zhì),還含有豐富的黃酮類、生物堿、有機(jī)酸、甾醇類等[2],是營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高的植物。然而魚腥草常溫下貯藏易褐變老化[3],很快失去商品價(jià)值。

    Lee[4]研究發(fā)現(xiàn)褐變與酚類物質(zhì)和多酚氧化酶的活性有一定的相關(guān)性,Chisari等[5]研究發(fā)現(xiàn)草莓褐變不僅與多酚氧化酶有關(guān),而且與過(guò)氧化物酶也有較大關(guān)系。就低溫貯藏對(duì)魚腥草品質(zhì)及酶活性的影響進(jìn)行研究,以期為魚腥草貯藏保鮮提供理論依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1材料

    魚腥草:于2010年1月10日采自貴陽(yáng)市花溪區(qū)湖潮鄉(xiāng)汪官村。試劑:檸檬酸(食品級(jí)),南通奧凱生物技術(shù)開發(fā)有限公司;赤霉素(分析純),上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司;二氧化氯(分析純),貴陽(yáng)科領(lǐng)化工有限公司;亞硫酸鈉(分析純),天津市協(xié)和昊鵬色譜科技有限公司;青鮮素(食品級(jí)),廣州市安心生物制品有限公司;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)標(biāo)準(zhǔn)品,Sigma公司。儀器與設(shè)備:UV-7502 PC紫外可見分光光度計(jì),上海欣茂儀器有限公司;TGL-20M臺(tái)式高速冷凍離心機(jī),長(zhǎng)沙邁佳森儀器設(shè)備有限公司;SJQJ-600實(shí)驗(yàn)冰箱,北京雙杰保鮮設(shè)備技術(shù)開發(fā)有限公司;TA-XT2質(zhì)構(gòu)分析儀,英國(guó)Stable Micro Systems公司。

    1.2方法

    1.2.1采后處理魚腥草采后及時(shí)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室,清洗干凈,選擇成熟度均一、無(wú)病蟲害、無(wú)機(jī)械損傷的魚腥草。按1 500 g/袋放入實(shí)驗(yàn)配置好的溶液中浸泡5 min,取出晾干后在冰箱中預(yù)冷12 h,然后用黑色聚乙烯塑料袋包裝,于冰箱(1~5 ℃)貯藏,每個(gè)處理3次重復(fù)。貯藏過(guò)程中按1.2.3定期測(cè)定各項(xiàng)生理指標(biāo),并觀察貯藏效果。

    1.2.2保鮮劑配制處理組A:不添加任何保鮮劑;處理組B:青鮮素0.1%+檸檬酸0.2%+二氧化氯0.002%;處理組C:赤霉素0.004%+檸檬酸0.2%+二氧化氯0.002%;處理組D:青鮮素0.1%+檸檬酸0.2%+亞硫酸鈉0.005%;處理組E:赤霉素0.004%+檸檬酸0.2%+亞硫酸鈉0.005%。各處理組各成分含量均為質(zhì)量分?jǐn)?shù),下同。

    1.2.3測(cè)定指標(biāo)與方法失重率:失重率=貯后魚腥草的重量/貯前魚腥草的重量×100%。呼吸強(qiáng)度的測(cè)定:采用靜止法[6]。過(guò)氧化物酶活性測(cè)定:采用愈創(chuàng)木酚比色法[6]。多酚氧化酶活性測(cè)定:采用鄰苯二酚比色法[6]??傸S酮含量的測(cè)定:采用鋁鹽比色法[7]。質(zhì)構(gòu)特性測(cè)定:用剪切力表示,越小越好。甲基正壬酮含量的測(cè)定:參照2005版中國(guó)藥典規(guī)定的方法,取干魚腥草25 g于500 mL燒瓶中,加水300 mL,搖勻混合后,連接揮發(fā)油測(cè)定器。自測(cè)定器上端加水使液體充滿刻度部分并溢入燒瓶時(shí)為止,再用移液管加入乙酸乙酯5 mL,連接回流冷凝管,加熱至沸騰,并保持微沸5 h,停止加熱,放置片刻,開啟測(cè)定器下端的活塞,將水緩緩放出至乙酸乙酯層上端到達(dá)0刻度線上面5 mm處為止,放置1 h以上,再開啟活塞使乙酸乙酯層流入到離心管中,加入0.5 g無(wú)水硫酸鈉,4 000 r/min離心5 min,然后轉(zhuǎn)移到刻度試管中定容到5 mL,氣相色譜儀測(cè)定。DPPH清除率的測(cè)定[8]:①DPPH溶液的配制。準(zhǔn)確稱取DPPH試劑25.7 mg,用無(wú)水乙醇溶解定容至100 mL,得濃度為257μg/mL的DPPH貯備液,于棕色瓶中冷藏備用。準(zhǔn)確吸?。保?mL DPPH貯備液,用無(wú)水乙醇定容至100mL,得濃度為25.7 μg/mL的DPPH待測(cè)液。②DPPH清除率的測(cè)定步驟。首先在10 mL具塞試管中依次加入4.0 mL 25.7 μg/mL的DPPH溶液和1.0 mL無(wú)水乙醇,混勻,30 min后以無(wú)水乙醇為參比,在517 nm處測(cè)吸光值,記為A0;然后在10 mL具塞試管中依次加入4.0 mL無(wú)水乙醇和1.0 mL待測(cè)樣液,混勻,30 min后以無(wú)水乙醇為參比,在517 nm處測(cè)吸光值,記為Ar;再在10mL具塞試管中依次加入4.0 mL 25.7 μg/mL的DPPH溶液和1.0 mL待測(cè)樣液,混勻,30 min后以無(wú)水乙醇為參比,在517 nm處測(cè)吸光值,記為As;最后計(jì)算DPPH清除率(Y)。Y=[1-(As-Ar)/A0]×100%。③樣液制備。準(zhǔn)確稱取魚腥草60 g,并按魚腥草和水質(zhì)量比1∶2加水打漿,準(zhǔn)確稱取6.00g勻漿于100 mL三角瓶中,加入80%(V/V,下同)的乙醇20 mL于60 ℃水浴中回流提?。?h,然后過(guò)濾。濾液收集于50 mL容量瓶中,用80%的乙醇定容并充分搖勻?yàn)榇郎y(cè)樣液。按②描述的步驟測(cè)定。亞硫酸鹽的測(cè)定:參照GB/T5009.34—2003第一法。

    1.2.4數(shù)據(jù)分析采用Excel軟件及統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS12.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

    2結(jié)果與分析

    2.1冷藏對(duì)魚腥草失重率的影響

    由圖1可知冷藏過(guò)程中魚腥草失重率呈上升趨勢(shì),整個(gè)冷藏過(guò)程中魚腥草失重較少,最高僅達(dá)到5.02%。統(tǒng)計(jì)分析表明,不同處理間魚腥草失重率差異不顯著(P=0.780),這可能是因?yàn)槔洳貙?duì)魚腥草失重有一定的抑制作用。但在前40 d,處理組E失重率較其他處理組低,可見赤霉素結(jié)合亞硫酸鈉處理對(duì)魚腥草貯藏過(guò)程中失重率有一定的影響。

    2.2冷藏對(duì)魚腥草呼吸強(qiáng)度的影響

    呼吸作用是有機(jī)體生命活動(dòng)的基本代謝過(guò)程,也是果蔬在采收后進(jìn)行的最重要的生理活動(dòng)之一。由圖2可知,冷藏過(guò)程中魚腥草呼吸強(qiáng)度呈先上升后下降的趨勢(shì),這可能是前期貯藏過(guò)程中溫度的劇烈變化使呼吸強(qiáng)度升高,10 d以后溫度相對(duì)穩(wěn)定,呼吸強(qiáng)度變化不明顯。統(tǒng)計(jì)分析表明,不同處理間魚腥草呼吸強(qiáng)度差異不顯著(P=0.203),這可能是因?yàn)槔洳厥刽~腥草呼吸強(qiáng)度得到了很好地抑制。但在整個(gè)貯藏過(guò)程中處理組E呼吸強(qiáng)度較其他處理組略低,這說(shuō)明赤霉素結(jié)合亞硫酸鈉能較好地抑制魚腥草呼吸強(qiáng)度的上升,這對(duì)于魚腥草貯藏是非常有利的。

    2.3冷藏對(duì)魚腥草總黃酮含量的影響

    由圖3可知,冷藏條件下魚腥草總黃酮含量先上升,到第40天達(dá)到高峰,然后緩慢下降。統(tǒng)計(jì)分析表明,不同處理間魚腥草總黃酮含量差異顯著(P=0.010),在整個(gè)貯藏過(guò)程中處理組E總黃酮含量一直高于其他組,而且總黃酮含量高峰推遲到第50天出現(xiàn),峰值比對(duì)照高出0.022 g/(100g)。這說(shuō)明赤霉素結(jié)合亞硫酸鈉能較好地保持魚腥草總黃酮含量,有利于貯藏結(jié)束后貨架期的延長(zhǎng);同時(shí)冷藏也較好地保持了魚腥草總黃酮含量,貯藏70 d后總黃酮含量整體比貯藏前高。

    2.4冷藏對(duì)魚腥草DPPH清除率的影響

    DPPH清除率的高低反應(yīng)了生物體內(nèi)抗氧化物質(zhì)含量的高低,它們之間呈正相關(guān)性[9]。由圖4可知,DPPH清除率隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)呈先上升后下降的趨勢(shì),在第40天達(dá)到高峰,峰值比處理組A的高出3.66%。統(tǒng)計(jì)分析表明,不同處理間魚腥草DPPH清除率差異極顯著(P﹤0.01)。在整個(gè)冷藏過(guò)程中處理組E清除率一直處于較高的水平。因此,突出地顯現(xiàn)赤霉素結(jié)合亞硫酸鈉對(duì)保持魚腥草中抗氧化物質(zhì)效果顯著,而且冷藏條件下各處理組DPPH清除率也都保持了較好的水平。

    2.5冷藏對(duì)魚腥草過(guò)氧化物酶活性的影響

    由圖5可知,過(guò)氧化物酶活性在前期較低,在第40天時(shí)到達(dá)活性高峰。統(tǒng)計(jì)分析表明,不同處理間過(guò)氧化物酶活性差異極顯著(P﹤0.01)。在整個(gè)冷藏過(guò)程中處理組E過(guò)氧化物酶活性一直低于其他處理組,說(shuō)明赤霉素結(jié)合亞硫酸鈉對(duì)魚腥草貯藏過(guò)程中抗逆境脅迫起到了一定的促進(jìn)作用,同時(shí)冷藏對(duì)整個(gè)貯藏過(guò)程魚腥草褐變老化都有一定的保護(hù)作用。

    2.6冷藏對(duì)魚腥草多酚氧化酶活性的影響

    由圖6可知,多酚氧化酶活性在整個(gè)貯藏過(guò)程中呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),在第50天達(dá)到活性高峰,但活性在整個(gè)貯藏過(guò)程中變化不大,這同李建芳等[10]的研究相似。統(tǒng)計(jì)分析表明,不同處理間多酚氧化酶活性差異不顯著(P=0.112)。在貯藏40 d之前處理組E多酚氧化酶活性較其他處理組低,但整個(gè)貯藏過(guò)程中多酚氧化酶活性變化較小。說(shuō)明赤霉素結(jié)合亞硫酸鈉在魚腥草貯藏過(guò)程中對(duì)抑制魚腥草組織褐變有一定的效果,但低溫對(duì)魚腥草活性影響較小。

    2.7冷藏對(duì)魚腥草質(zhì)構(gòu)特性的影響

    質(zhì)構(gòu)分析法(Texture profile analysis,TPA)是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新型儀器測(cè)試方法,其原理是利用力學(xué)測(cè)試方法來(lái)模擬人的兩次咀嚼動(dòng)作記錄力和時(shí)間的關(guān)系,從中找出與人的感官評(píng)價(jià)對(duì)應(yīng)的參數(shù)。徐志斌等[11]采用質(zhì)構(gòu)分析法對(duì)楊梅果實(shí)采摘后的品質(zhì)變化規(guī)律進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),硬度、凝聚性、回復(fù)性和咀嚼性之間具有較高的相關(guān)性和相同的變化趨勢(shì),可以采用其中任意一個(gè)參數(shù)來(lái)表征楊梅果實(shí)的品質(zhì)。因此,試驗(yàn)采用剪切力對(duì)魚腥草感官進(jìn)行了評(píng)價(jià)。由圖7可知,魚腥草在貯藏過(guò)程中剪切力在前期變化緩慢,在第40天時(shí)迅速升高,然后變化緩慢。統(tǒng)計(jì)分析表明,各處理間差異顯著(P=0.024),這可能與冷藏能較好地保持魚腥草的品質(zhì)有關(guān)。貯藏70 d后基本沒有腐爛,質(zhì)地鮮脆,具有較好的口感。

    2.8冷藏對(duì)魚腥草甲基正壬酮含量的影響

    由表1可知,甲基正壬酮含量貯藏后比貯藏前略高,這可能與魚腥草采收后有后熟現(xiàn)象有關(guān)。比較貯藏后各處理組甲基正壬酮含量可知,處理組E甲基正壬酮含量最高,達(dá)到了0.574 mg/g,比處理組A高了0.166 mg/g,而處理組D含量也相對(duì)較高。這說(shuō)明冷藏結(jié)合防腐劑亞硫酸鈉處理很好地保持了魚腥草甲基正壬酮含量,低溫對(duì)魚腥草甲基正壬酮含量的保持也有促進(jìn)作用。

    3討論

    冷藏可以極大地降低果實(shí)失重和腐爛的發(fā)生,顯著延長(zhǎng)果蔬的貯藏期,其中對(duì)酶活性也有較大的影響。據(jù)研究冷藏能明顯抑制黃藤筍貯藏過(guò)程中過(guò)氧化物酶和多酚氧化酶活性,延緩黃藤筍采后的酶促褐變及衰老過(guò)程,是一種有效的貯藏保鮮方法[12],該研究結(jié)果同其相一致。呼吸作用是植物性食品變質(zhì)的主要原因,謝培榮等[13]研究木洞楊梅采后生理與貯藏特性的影響,發(fā)現(xiàn)低溫貯藏明顯抑制果實(shí)貯藏過(guò)程中呼吸強(qiáng)度的增加。該研究通過(guò)冷藏抑制魚腥草呼吸強(qiáng)度較明顯。赤霉素是一種常用的植物生長(zhǎng)促進(jìn)劑,可延緩果實(shí)成熟,或使未成熟果實(shí)采收后在貯藏與運(yùn)輸期間延緩成熟;亞硫酸鈉是一種常用的保鮮劑,它在極小濃度下能大大抑制酶的活性,從而在很大程度上抑制酶促褐變[14]。研究表明,冷藏能很好地保持魚腥草品質(zhì),貯藏70 d基本無(wú)腐爛,口感鮮脆,失重較低,總黃酮、甲基正壬酮含量及DPPH清除率都處于較高的水平;同時(shí)降低了呼吸強(qiáng)度,抑制過(guò)氧化物酶和多酚氧化酶活性的上升。經(jīng)測(cè)定二氧化硫殘留量處理組D和E分別為0.374 mg/kg、1.406 mg/kg,在《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》允許的范圍內(nèi),其中0.004%赤霉素、0.2%檸檬酸、0.005%亞硫酸納結(jié)合低溫處理效果最好。

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