血細(xì)胞分析儀與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法檢測嗜酸性粒細(xì)胞的比較

陳佳利 鄭少麗 吳雪霞 張坤波

(廣東省饒平縣人民醫(yī)院 廣東饒平 515700)

手工法計(jì)數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞,操作繁瑣,費(fèi)時(shí),費(fèi)力,結(jié)果重復(fù)性差,已不能完全滿足臨床需要。血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀近年來在國內(nèi)各地各類醫(yī)院應(yīng)用越來越多,本文對五分類血細(xì)胞分析儀與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞進(jìn)行比較,以了解儀器對嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性,報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院住院及門診患者120例、空腹采靜脈血2mL,注入含EDTA·K2的真空管(由廣州陽普醫(yī)療科技股份有限公司提供)內(nèi),立即輕輕顛倒混勻(8～10次)。

1.2 儀器

中國邁瑞公司的BC5800;OLYMPUS CX21顯微鏡;美國雅培公司的CD3700;改良Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。

1.3 試劑

由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供CD3700試劑;BC5800為深圳邁瑞公司配套試劑,按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)的方法配制[1]嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液。

1.4 方法

1.4.1 準(zhǔn)確度測定 采集抗凝靜脈血標(biāo)本120例,先用CD3700和BC5800分別測定嗜酸性粒細(xì)胞絕對值,再用顯微鏡直接計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)由2名有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)技師進(jìn)行,每人每份樣本分別計(jì)數(shù)2次。

1.4.2 精密度測定 選擇高、中、低值嗜酸性粒細(xì)胞值不同的抗凝靜脈血標(biāo)本各1份,先分別用CD3700和BC5800將每份標(biāo)本重復(fù)計(jì)數(shù)10次;顯微鏡直接計(jì)數(shù)法嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)由2名檢驗(yàn)技師進(jìn)行,每人每份標(biāo)本重復(fù)計(jì)數(shù)10次,算出各自的CV。

表1 五分類血細(xì)胞分析儀與手工法測定不同值的嗜酸性粒細(xì)胞的結(jié)果比較(±s)

表1 五分類血細(xì)胞分析儀與手工法測定不同值的嗜酸性粒細(xì)胞的結(jié)果比較(±s)

方法 高值 中值 低值 平均CV(%)(×109/L) CV(%) (×109/L) CV(%) (×109/L) CV(%)CD3700 4.502±0.041 0.83 1.135±0.020 1.77 0.181±0.05 4.03 2.21 BC5800 4.332±0.042 0.96 1.112±0.022 1.95 0.186±0.03 3.91 2.27顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 4.649±0.316 6.79 1.098±0.092 8.72 0.189±0.02 10.58 8.71

1.5 統(tǒng)計(jì)

數(shù)據(jù)采用SPSS 11.03統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)以(s)表示,配對t檢驗(yàn),P＜0.05為有差異,P＜0.01為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 測定結(jié)果比較

精密度高、中、低值的3份標(biāo)本精密度測定結(jié)果表明CD3700和BC5800對嗜酸性粒細(xì)胞絕對值計(jì)數(shù)的精密度明顯高于手工計(jì)數(shù),見表1。

2.2 相關(guān)性

本組120例患者嗜酸性粒細(xì)胞結(jié)果CD3700、BC5800和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法檢測分別是0.66、0.61、0.74×109/L;S分別是0.63、0.73、0.77×109/L。差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);CD3700和BC5800的相關(guān)系數(shù)(r)為0.98,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01),表明這2臺儀器的相關(guān)性較好。

3 討論

血液嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)是某些傳染性疾病、寄生蟲病、過敏性疾病、大面積燒傷及血液病等疾病診斷、治療及預(yù)后觀察的一項(xiàng)重要指標(biāo)[2]。傳統(tǒng)的直接計(jì)數(shù)法操作費(fèi)時(shí)費(fèi)力,還受所用儀器的精密度與清潔度、稀釋液及樣本加樣量的準(zhǔn)確性、樣本放置時(shí)間以及操作人員的技術(shù)熟練程度等諸多因素的影響。CD3700五分類全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀是利用0°和10°散射光將白細(xì)胞以胞漿內(nèi)容物復(fù)雜性和細(xì)胞體積為X軸和Y軸繪制白細(xì)胞散點(diǎn)圖,同時(shí)利用90°消偏振光將嗜酸性粒細(xì)胞從WBC群中區(qū)分開來[3]。BC5800,采用半導(dǎo)體激光散射結(jié)合細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù),嗜酸性粒細(xì)胞特有的嗜酸性顆粒使它更易區(qū)別于其它白細(xì)胞;浮動(dòng)聚類分類技術(shù),提高散點(diǎn)圖邊界識別能力,使白細(xì)胞分類更準(zhǔn)確,而自定義復(fù)檢規(guī)則,提高儀器對異常樣本的篩查效率。使嗜酸性粒細(xì)胞檢測更加準(zhǔn)確。而本實(shí)驗(yàn)這2種方法檢測的嗜酸性粒細(xì)胞結(jié)果比[4]略低,可能與所檢查的對象有關(guān)。由此可見,CD3700和BC5800方法具有良好的相關(guān)性,CV值較小,且嗜酸性粒細(xì)胞絕對值較低,其原因?yàn)槿詣?dòng)進(jìn)樣方式,操作標(biāo)準(zhǔn)化,人為誤差得以減少。手工直接計(jì)數(shù)法CV值較大,其原因可能是儀器分析上萬個(gè)細(xì)胞與人工鏡檢計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞相比誤差較大,同時(shí)還受操作人員技術(shù)熟練程度的影響。五分類血細(xì)胞分析儀和顯微鏡直接計(jì)數(shù)測定的結(jié)果差異無顯著性,說明它們具有很高的準(zhǔn)確度。CD3700和BC5800這2臺儀器計(jì)數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞絕對值呈正相關(guān),與文獻(xiàn)報(bào)道相符[5]。

由此可見,嗜酸性粒細(xì)胞五分類血細(xì)胞分析儀CD3700和BC5800所得結(jié)果與手工法直接計(jì)數(shù)密切相關(guān),具有準(zhǔn)確性高,重復(fù)性好,操作簡單,檢測速度快,便于大批量檢測等優(yōu)點(diǎn)。在保證使用合格試劑和儀器性能穩(wěn)定的條件下,五分類血細(xì)胞分析儀較高的精密度和高準(zhǔn)確性是實(shí)驗(yàn)室測定嗜酸性粒細(xì)胞可靠理想的儀器,可取代手工法,滿足臨床需要,值得推廣。

[1] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版,南京：東南大學(xué)出版社,2006：136.

[2] 王波,賴明,熊元,等.CELL-DYN3700全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀嗜酸性粒細(xì)胞絕對值的評價(jià)[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2006,3(6)：143～144.

[3] 范華杰,凌勵(lì),周道銀.全自動(dòng)血液分析儀Sysmex X E -2100與Abbott CD-3700的比較分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2006,21(2)：164～166.

[4] 徐金花,林賽玲,張麗娟,等.血細(xì)胞分析儀與顯微鏡直接計(jì)數(shù)法測定嗜酸性粒細(xì)胞的比較[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2009,6(21)：1805～1806.

[5] 費(fèi)中海,李君安,唐中,等.BC5500計(jì)數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞絕對值的可信性分析[J].中國誤診學(xué)雜志,2008,28(10)：6854～6855.