絞股藍(lán)皂苷對(duì)高脂血癥大鼠脂代謝的影響

沈 楠，許文頻，李 敏，歐陽(yáng)瓊，馬 捷，駱涵之，李衛(wèi)東

絞股藍(lán)為葫蘆科植物絞股藍(lán)（Gynostemma pentaphyllum Makino）的多年生落葉草質(zhì)藤木。絞股藍(lán)皂苷（Five leaf Gynostemma Herb Saponin，F(xiàn)GHS）是從絞股藍(lán)中提取的有效成分群，具有降血脂、抗氧化等多種作用［1］。本研究旨在從絞股藍(lán)調(diào)節(jié)血脂代謝。糾正肝臟損傷，抑制脂質(zhì)過氧化三個(gè)方面系統(tǒng)的闡述其治療高脂血癥的機(jī)制，為其進(jìn)入臨床提供可靠的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 健康雄性SD大鼠，體重180g～200g，由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供。

1.2 藥物和試劑 三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL－C）、低密度脂蛋白（LDL－C）測(cè)定試劑盒系浙江東甌生物工程有限公司；絞股藍(lán)皂苷由安康北醫(yī)大制藥有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 高脂乳劑的配制 參照文獻(xiàn)方法制備高脂乳劑［2，3］，含10%膽固醇、20%豬油、2%膽酸鈉、1%丙硫氧嘧啶、20%吐溫80、20%丙二醇。

1.3.2 動(dòng)物模型的建立 按文獻(xiàn)方法［4］給予大鼠高脂乳劑10 mL／kg，同時(shí)正常對(duì)照組灌胃等量生理鹽水，連續(xù)用至第10天時(shí)，各組大鼠斷尾取血，測(cè)血清血脂。

1.3.3 分組及給藥方法 將模型動(dòng)物分為模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥［非諾貝特（力平之），20mg／kg］對(duì)照組、絞股藍(lán)皂苷20mg／kg、36 mg／kg、65mg／kg、117mg／kg和210mg／kg五個(gè)劑量組。連續(xù)灌胃給藥20d。給藥過程中，除正常對(duì)照組外，其余各組上午繼續(xù)給予高脂乳劑（10mL／kg）灌胃。

1.3.4 測(cè)定指標(biāo)及方法 末次給藥后禁食12h，摘眼球取血觀察。

1.3.4.1 血清生化 測(cè)定血清 TG、TC、LDL－C、HDL－C、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。

1.3.4.2 肝臟生化 在相同部位取肝臟制成10%勻漿，提取上清液，用酶法測(cè)定TG、TC、MDA、SOD含量。

1.3.4.3 組織學(xué)病檢 取0.5cm×0.5cm×1cm切塊，HE染色，做病理組織學(xué)觀察。

1.3.4.4 肝體重比 摘取動(dòng)物全肝，稱重，肝重／體重即為肝體重比。

2 結(jié) 果

2.1 絞股藍(lán)皂苷對(duì)高血脂大鼠血清ALT、AST水平的影響與模型組相比，給藥后絞股藍(lán)皂苷210mg／kg、117mg／kg劑量組對(duì)升高的ALT水平有抑制作用。與正常對(duì)照組比較，模型組大鼠AST水平升高不明顯。詳見表1。

表1 絞股藍(lán)皂苷對(duì)高血脂大鼠ALT、AST的影響（±s）

表1 絞股藍(lán)皂苷對(duì)高血脂大鼠ALT、AST的影響（±s）

組別 劑量 ALT U／L AST U／L－ 62.50±10.07 155.13±17.46模型組 － 125.50±25.812） 148.13±17.43力平之組 20mg／kg 79.00±15.551） 136.88±64.19絞股藍(lán)皂苷組210mg／kg 89.25±28.411） 139.75±25.82 117mg／kg 102.88±7.261） 130.75±19.17 65mg／kg 106.75±26.18 128.75±16.65 36mg／kg 110.38±29.19 136.75±14.71 20mg／kg 108.00±16.46 130.63±13.24與模型組比較，1）P＜0.05；與正常對(duì)照組比較，2）P＜0.05正常對(duì)照組

2.2 絞股藍(lán)皂苷對(duì)高血脂大鼠血清血脂水平的影響 與模型組比較，絞股藍(lán)皂苷210mg／kg、117mg／kg劑量組可使TC和LDL－C明顯降低（P＜0.05）。絞股藍(lán)皂苷210mg／kg、117mg／kg劑量組還有升高HDL－C趨勢(shì)（P＞0.05）。詳見表2。

表2 絞股藍(lán)皂苷對(duì)高血脂大鼠血清血脂水平的影響（±s）mmol／L

表2 絞股藍(lán)皂苷對(duì)高血脂大鼠血清血脂水平的影響（±s）mmol／L

TC TG HDL－C LDL－C正常對(duì)照組組別 劑量8.89±1.48 1.74±0.75 0.63±0.09 0.27±0.10模型組 － 14.70±1.382） 6.78±2.032） 0.46±0.15 1.15±0.132）力平之組 20mg／kg 8.90±1.081） 1.63±0.331） 0.59±0.20 0.76±0.141）絞股藍(lán)皂苷組 210mg／kg 7.62±1.361） 1.61±0.321） 0.65±0.17 0.64±0.111）117mg／kg 11.43±2.211） 1.90±0.681） 0.63±0.19 0.78±0.051）65mg／kg 12.49±4.75 1.70±0.201） 0.56±0.20 1.37±0.45 36mg／kg 13.16±3.73 1.86±1.00 0.50±0.16 1.30±0.75 20mg／kg 15.36±5.04 2.25±0.96 0.44±0.16 1.35±0.41與模型組比較，1）P＜0.05；與正常對(duì)照組比較，2）P＜0.05－

2.3 絞股藍(lán)總皂苷對(duì)高血脂模型大鼠血清MDA、SOD的影響

與模型組比較，絞股藍(lán)皂苷210mg／kg劑量組可使MDA血清含量降低（P＜0.05），絞股藍(lán)皂苷各劑量組則均可明顯升高SOD水平（P＜0.05）。詳見表3。

表3 絞股藍(lán)總皂苷對(duì)高血脂模型大鼠MDA、SOD的影響（±s）

表3 絞股藍(lán)總皂苷對(duì)高血脂模型大鼠MDA、SOD的影響（±s）

mL正常對(duì)照組組別 劑量 MDA nmol／mL SOD U／9.11±1.14 362.90±22.72模型組 － 10.57±2.132） 265.10±59.832）力平之組 20mg／kg 8.80±0.521） 318.20±35.741）絞股藍(lán)皂苷組210mg／kg 8.82±0.501） 316.09±46.441）117mg／kg 10.49±1.14 323.55±82.351）65mg／kg 11.97±1.57 317.91±35.191）36mg／kg 10.74±1.11 314.83±27.371）20mg／kg 11.56±2.08 345.35±37.651）與模型組比較，1）P＜0.05；與正常對(duì)照組比較，2）P＜0.05－

2.4 絞股藍(lán)皂苷對(duì)高血脂大鼠肝體重比的影響 與模型組相比，絞股藍(lán)皂苷各劑量組均可降低用藥組大鼠肝體重比（P＜0.05）。詳見表4。

表4 絞股藍(lán)皂苷對(duì)高血脂大鼠肝體重比的影響（±s）

表4 絞股藍(lán)皂苷對(duì)高血脂大鼠肝體重比的影響（±s）

組別 劑量 肝體重比（mg／g）正常對(duì)照組 － 32.46±1.66模型組 － 45.04±3.622）力平之組 20mg／kg 39.91±4.181）絞股藍(lán)皂苷組 210mg／kg 36.42±2.551）117mg／kg 37.86±3.321）65mg／kg 39.46±3.061）36mg／kg 37.98±3.581）20mg／kg 38.62±3.661）與模型組比較，1）P＜0.05；與正常對(duì)照組比較，2）P＜0.05

2.5 絞股藍(lán)皂苷對(duì)高血脂大鼠肝臟組織學(xué)的影響 與模型組相比，除低劑量組外，中高劑量組的絞股藍(lán)皂苷均可減輕大鼠肝脂肪病變程度，呈劑量相關(guān)。

3 討 論

近年來高脂血癥有年輕化的趨勢(shì)。高脂血癥容易導(dǎo)致脂肪肝［5－7］、動(dòng)脈粥樣硬化［8－12］等其他嚴(yán)重疾病。目前臨床應(yīng)用 的 降脂西藥主要有他汀類、煙酸類、貝特類、膽酸螯合劑類、多稀類等。但是上述藥物具有明顯的不良反應(yīng)，如橫紋肌溶解、體內(nèi)代謝障礙、胃腸道反應(yīng)等，嚴(yán)重的甚至導(dǎo)致肝腎功能的損傷［13］。因而在臨床應(yīng)用中它們是一把雙刃劍。而絞股藍(lán)皂苷作為一種中藥成分，經(jīng)許多動(dòng)物和臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí)，除了具備與主流治療高脂血癥藥物相似的降脂效果以外，無明顯毒性反應(yīng)［14］。

本研究發(fā)現(xiàn)，高劑量絞股藍(lán)皂苷能明顯下調(diào)血清TC和LDL－C含量；高、中劑量則可使血清中TG水平顯著降低。高脂血癥能夠引起肝臟氧化損傷，影響正常肝臟形態(tài)和功能。在本實(shí)驗(yàn)中，同時(shí)還觀察絞股藍(lán)皂苷在逆轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠肝臟損傷中的作用。發(fā)現(xiàn)絞股藍(lán)皂苷各劑量組均可降低大鼠肝體重比，明顯改善動(dòng)物模型大鼠肝臟脂肪變，糾正高脂血癥對(duì)肝臟的損害。但是，低劑量組藥效不如中、高劑量組，提示絞股藍(lán)皂苷的藥效存在一定的劑量相關(guān)性。目前臨床肝功能檢查的主要指標(biāo)是ALT和AST。當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)，上述酶釋放入血，含量將顯著增高。本實(shí)驗(yàn)測(cè)定ALT和AST的含量，評(píng)價(jià)絞股藍(lán)皂苷對(duì)抑制實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠肝臟損傷的作用。發(fā)現(xiàn)絞股藍(lán)皂苷高劑量組顯著降低了血清中ALT的含量，并存在明顯的量效關(guān)系。而因?yàn)楸靖咧Ｐ蛯?duì)AST影響不大，用藥后絞股藍(lán)皂苷對(duì)AST幾乎無明顯影響。

高脂血癥引起脂肪肝與脂質(zhì)過氧化損傷有著密切的關(guān)系。SOD是機(jī)體細(xì)胞中重要的抗氧化酶，是維持生物體自由基產(chǎn)生和過氧化物清除能力平衡的重要物質(zhì)。而MDA是氧自由基攻擊生物膜中的多聚不飽和脂肪酸而形成的脂質(zhì)過氧化物。當(dāng)血脂升高時(shí)，脂質(zhì)代謝紊亂，機(jī)體產(chǎn)生過多的氧自由基，SOD活性降低，MDA含量增加。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在血清中，絞股藍(lán)皂苷在各劑量組則均可明顯升高SOD水平，低劑量組可顯著下調(diào)MDA含量，絞股藍(lán)皂苷具有對(duì)抗脂質(zhì)過氧化的藥理作用。

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