不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果的評價分析

歐貴啟

(常寧市第二人民醫(yī)院 湖南常寧 421513)

當(dāng)前針對乙型肝炎病毒血清免疫學(xué)標(biāo)志物(HBV-M)的臨床檢測方法有很多,傳統(tǒng)臨床檢驗(yàn)主要使用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),隨著檢驗(yàn)科技的飛速發(fā)展,時間分辨熒光分析法(TRFIA)、電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)等檢測手段在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中亦越來越多地投入使用。本次研究采用ELISA、TRFIA和ECLIA3種檢測手段對乙型肝炎血清標(biāo)志物進(jìn)行檢測,旨在探討不同方法學(xué)檢測結(jié)果之間的一致性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年12月至2010年8月期間于我院就診及住院患者中,經(jīng)臨床確診的100例乙型肝炎病毒(HBV)感染患者的血清,其中男性59例,女性41例;年齡1～52歲;所選病例均符合慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn),另隨機(jī)選取50例正常體檢者的血清,對其檢查結(jié)果進(jìn)行比較分析。

1.2 方法

ECLIA檢測法選用羅氏E601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其標(biāo)準(zhǔn)配置試劑;ELISA檢測法采用上海科華ST-360全自動酶標(biāo)儀以及上?？迫A生物試劑盒;TRFIA檢測法選用上海新波Anytest時間分辨免疫熒光分析儀以及上海新波生物試劑盒。本組待檢血清樣本分別運(yùn)用ELISA、TRFIA、ECLIA3種方法進(jìn)行檢測,每次檢測均對結(jié)果進(jìn)行陰、陽性質(zhì)的質(zhì)控。檢測結(jié)果的判定以試劑說明書中規(guī)定的Cut-off值作為標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)用夾心法檢測時陽性為結(jié)果＞Cut-off值;應(yīng)用競爭法檢測時陽性為結(jié)果＜Cut-off值。

表1 ELISA法與ECLIA法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果對比

表2 TRFIA法與ECLIA法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果對比

1.3 檢測標(biāo)準(zhǔn)

不同檢測方法檢測結(jié)果的一致性程度用Kappa檢驗(yàn),Kappa系數(shù)＜0時為極差;0～0.19為微弱;0.20～0.39為弱,0.40～0.59為中度;0.60～0.79為高度;0.80～1.0為極強(qiáng)[1];

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

本組研究資料采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,且以P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

在檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物方面3種方法的結(jié)果具有高度以上的一致性(P<0.05)。其中使用ELISA法與ECLIA法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果對比,見表1;使用TRFIA法與ECLIA法檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果對比,見表2。

3 討論

據(jù)資料顯示,當(dāng)前我國乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的攜帶率約為10%左右,臨床針對乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物的檢測方法有很多,其中應(yīng)用最廣泛的ELISA法適用于定性檢測,TRFIA、ECLIA等適用于定量檢測,由于不同實(shí)驗(yàn)室在應(yīng)用這些方法時的溯源性以及采用的單位各不相同,因此結(jié)果相差較大,給患者的就診以及臨床醫(yī)生對報告結(jié)果的正確解讀造成了不便,基于此,不同方法學(xué)檢測結(jié)果之間的相關(guān)性評價就顯得十分必要。

本次研究所選用的3種檢測方法中,ECLIA法是當(dāng)前特異性和敏感性最好的檢測方法,故將其檢測結(jié)果與其他方法進(jìn)行比較,以評價不同方法學(xué)檢測結(jié)果之間的一致性。根據(jù)本次研究結(jié)果顯示,ELISA法和ECLIA法在HBeAg項(xiàng)目上顯示極強(qiáng)一致性,剩余4項(xiàng)均為高度一致性,顯示ELISA法在臨床應(yīng)用中檢測率良好[2],但HBsAg項(xiàng)目上有7例漏診,提示該法在敏感性方面尚有不足,在血站以及手術(shù)等對結(jié)果極為敏感的情況下不適合應(yīng)用此法,但是ELISA法試劑成本較低,因此適用于普通人群篩查或者經(jīng)濟(jì)狀況較差的患者。TRFIA法與ECLIA法檢測結(jié)果在HBsAg、HBeAg、抗HBe以及抗HBc這4個項(xiàng)目上具有極強(qiáng)的一致性,在抗HBs項(xiàng)目上具有高度一致性,這一結(jié)果亦與國內(nèi)文獻(xiàn)報道基本一致[3]。

綜上所述,酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、時間分辨熒光分析法(TRFIA)以及電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)3種方法在乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測結(jié)果方面有較高的一致性,有利于結(jié)果互認(rèn)。

[1]夏邦世.時間分辨免疫熒光技術(shù)檢測HBV血清標(biāo)志物臨床應(yīng)用評價[J].臨床醫(yī)學(xué),2006,33(3):6～7.

[2]周迎春,陳輝,關(guān)平,等.3種方法測定低濃度乙型肝炎病毒表面抗原效果評價[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2007,4(11):1070～1071.

[3]陳佑明,黃敬,熊符,等.時間分辨熒光免疫分析法和免疫放射分析法檢測HBsAg的對比分析[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2006,13(1):50～51.